高乙酰乙酸诱导中性粒细胞胞外诱捕网的形成

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是几年前才发现的一种重要的先天免疫防御机制,目前NETs的发生机制尚不清楚,但是当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织、引发自身免疫等疾病。本试验为了研究作为酮病奶牛高酮血症的主要成分之一的乙酰乙酸(ACAC)对NETs表达量的影响,体外添加不同浓度ACAC处理中性粒细胞,运用免疫荧光技术和激光共聚焦显微成像定性评价NETs的生成;采用PicoGreen~dsDNA染料定量检测细胞上清游离DNA和Western blot反映NETs生成量。结果显示,高ACAC组产生NETs的量显著高于对照组组(P0.05),表明高ACAC可以体外成功诱导中性粒细胞产生NETs。     

β-羟丁酸抑制脂多糖诱导奶牛中性粒细胞核因子-κB信号通路的激活

高酮血症造成奶牛中性粒细胞先天免疫机能受到抑制,本研究探讨β-羟丁酸(BHBA)是否抑制脂多糖(LPS)诱导的奶牛中性粒细胞核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活。分离健康奶牛中性粒细胞,采用LPS(100 ng/mL)和不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L)BHBA作用于中性粒细胞,收集细胞,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测中性粒细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和NF-κBp65 mRNA表达水平,Western blot检测NF-κBp65蛋白表达水平,比色法检测核因子-κB抑制物激酶β(IKKβ)激酶活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌量。结果表明：与对照组(不进行BHBA和LPS处理)相比较,LPS组(单独LPS处理)中IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κBp65 mRNA表达水平和NF-κBp65蛋白表达水平极显著增加(P <0.01),IKKβ激酶活性极显著增强(P<0.01),IL-1β和TNF-α的分泌...     

猪转移因子对犬中性粒细胞数量和活性的影响

按标准方法提取制备了猪的转移因子（transfer factor, TF）,用吞噬杀伤试验MTT法检测了供试杂种牧羊犬肌肉注射猪TF后外周血中性粒细胞吞噬杀伤活性的变化。试验摸索出MTT法测定犬外周血中性粒细胞吞噬杀伤大肠杆菌的最佳条件为：中性粒细胞浓度1.3×106个/ml、大肠杆菌浓度6×105个/ml 时,大肠杆菌和中性粒细胞混合培养2 h,加入MTT后继续培养4 h。体外试验结果表明,猪TF浓度在0.052～1.56 mg/ml范围内,能够明显促进中性粒细胞吞噬杀菌作用,当猪TF浓度为1.56 mg/ml时,对中性粒细胞杀菌活性的影响最大。体内试验结果表明,注射猪TF后第2 d,外周血中性粒细胞数量最高,中性粒细胞吞噬杀菌能力最强。     

奶牛血和乳中性粒细胞的形态与功能研究概述

中性粒细胞(PMN)是感染性奶牛乳腺炎的重要防御屏障。文章着重介绍了奶牛PMN在光学显微镜、透射电子显微镜和扫描电子显微镜下的形态特点,并叙述了PMN动力学和各类PMN的生长期、PMN生存期调节与发生奶牛乳腺炎之间的关系,最后提出奶牛PMN的研究方向。     

裙带菜膳食纤维对小鼠肠蠕动及血液流变学的影响

目的：研究裙带菜膳食纤维对小鼠的肠蠕动和血液流变的调节作用。方法：将60只小鼠分为正常对照组、水不溶性裙带菜膳食纤维低剂量组（5%）、高剂量组（10%），连续30d，取30只小鼠进行肠蠕支实验。另外，将30只小鼠统一摘除右眼取血，测定其血液流变学指标中的血细胞比容及全血高切、低切表现粘度。结果：裙带菜膳食纤维高剂量组小鼠的炭末推进百分率与正常对照组相比有明显的差异（P＜0.01）；裙带菜膳食纤维高剂量小鼠的血细胞比容、全血高切、低切表观粘度及红细胞聚集指数均明显低于对照组（P＜0.01或P＜0.05）。结论：裙带菜膳食纤维增强小鼠的肠蠕动并且可以降低血细胞比容及全血高切、低切表现粘度，可提高血液的流动性。     

NEFA对体外培养奶牛中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路的影响

分离培养奶牛中性粒细胞(PMN),添加不同浓度的非酯化脂肪酸(NFEA),作用浓度分别为0.125、0.25、0.5、1和2mmol/L。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性通路相关分子基因表达水平,采用ELISA检测炎性因子含量。结果显示,与对照组相比,Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子NF-κBp65的mRNA表达水平逐渐增加,且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P0.05,P0.01);炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量也随着NEFA作用浓度的增加而增加,并且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P0.05,P0.01)。这些结果表明高浓度NEFA(≥0.5mmol/L)可以激活中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路,显著增加IL-1β、IL-6和TNF-α的合成和释放,造成中性粒细胞的炎性损伤,进而影响奶牛免疫机能。     

猪转移因子对犬外周血中性粒细胞数量和杀菌活性的影响

无菌采犬外周血,肝素抗凝,制备不同浓度的粒细胞悬液,分别与不同浓度的大肠杆菌悬液共同培养,采用MTT法测定粒细胞的杀菌效果,确定粒细胞体外培养时杀伤细菌的最优化条件;把不同浓度的猪转移因子(Swine transfer factor,sTF)加入注射sTF前后不同时期分离的犬外周血中粒细胞与E.coli的培养系统中,测定粒细胞的杀菌能力。结果表明,当粒细胞浓度为1.3×106个/mL,E.coli浓度为6×105个/mL时,试验最能反映粒细胞的杀菌效果。当sTF浓度为1.56mg/mL时,对PMN杀菌活性的影响最大;在犬注射sTF后的第2d,中性粒细胞单独杀菌活性最好,并且此时外周血中性粒细胞的数量达到峰值。本研究结果表明,sTF不仅能够增强犬中性粒细胞的杀菌活性,还能增加犬外周血中性粒细胞的数量。     

成纤维上皮细胞炎症反应模型的建立

利用培养金黄色葡萄球菌培养基过滤液建立成纤维上皮细胞炎症反应模型,用于观察和研究炎症反应过程中细胞形态的变化。将培养金黄色葡萄球菌培养基除菌过滤冻干,用细胞培养基稀释,按照一定蛋白含量加到上皮细胞的培养基中,制作细胞炎症反应模型。结果显示,成纤维上皮细胞发生炎症反应,高浓度细菌滤过液的细胞形态发生变化,细胞边缘模糊不清,细胞出现空泡,随着培养时间的延长低浓度的大量大型细胞开始增加;在添加金黄色葡萄球菌培养基滤过液培养24h后利用^3H—TdR方法测定细胞增殖率,细胞增殖差异是显著的。结果表明,建立细胞炎症反应模型是可行的,并为以后炎症反应机理研究和抗炎性反应药物研究奠定了基础。     

谷物膳食纤维对高胆固醇饮食小鼠脂质代谢及肠道菌群的影响

本研究旨在探讨谷物膳食纤维(DF)对高胆固醇饮食小鼠的脂质代谢和肠道菌群的影响。选取C57BL/6J小鼠30只,并根据体重随机分为4组,分别饲喂基础饲粮(对照,CO组,n=8)、基础饲粮+5 g/kg DF(CO+DF组,n=8)、高脂高胆固醇饲粮(HF组,n=7)及高脂高胆固醇饲粮+5 g/kg DF(HF+DF组,n=7)。试验期8周,测定各组小鼠生长性能、血清和肝脏生化指标、粪便总胆固醇(TC)、短链脂肪酸(SCFA)、相关肝脏胆固醇和胆汁酸(BA)蛋白表达及肠道菌群。结果表明:1)CO+DF组的最终体重显著低于CO组(P<0.05),与HF组相比,CO组和HF+DF组的4周和最终体重均显著降低(P<0.05),肝脏和脂肪的重量显著减少(P<0.05)。且与HF组相比,DF+HF组摄食效率显著降低(P<0.05)。2)CO+DF组血清TC、甘油三酯(TG)含量及天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性以及肝脏TC和TG含量显著低于CO组(P<0.05),CO组和HF+DF组显著低于HF组(P<0.05),粪便TC含量仅在HF+DF组显著低于HF组(P<0.05)。3)DF对肝脏胆固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)、肝脏X受体α(LXRα)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)和微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达没有显著影响(P>0.05)。CO+DF组肝脏胆固醇7-羟化酶(Cyp7a1)的蛋白表达水平显着低于CO组(P<0.05),但HF组和HF+DF组之间没有显著差异(P>0.05)。4)HF+DF组的粪便总SCFA和丙酸盐含量显著高于HF组(P<0.05)。与相应的对照组相比,CO+DF组和HF+DF组的粪便丁酸盐含量显著增加(P<0.05)。5)在门水平上,DF组厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度减少,HF+DF组的拟杆菌门(Bacteroidetes)相对丰度高于HF组。梭状芽孢杆菌属ⅪⅤa(ClostridiumⅪⅤ)相对丰度在CO+DF组和HF+DF组显著增加(P<0.05)。此外,与其他组相比,仅HF+DF组中阿克曼菌属(Akkermansia)相对丰度显著增加(P<0.05)。由此可见,每千克饲粮添加5 g DF可降低饲喂含脂45%饲粮小鼠的体重和肝脏脂肪含量,降低血清TC、TG含量及AST和ALT活性以及肝脏TC和TG含量,降低胆固醇合成相关蛋白Cyp7a1的表达水平,提高总SCFA含量及肠道有益菌群和优势菌群相对丰度。     

日粮不同纤维水平和精粗比对绒山羊瘤胃内中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消失率的影响

选用18只、2.5岁、体重25kg左右的安装永久性瘤胃瘘管的内蒙古白绒山羊羯羊,用尼龙袋法测定了3个精粗比(30∶70、20∶80、10∶90)6个中性洗涤纤维(NDF)水平(49%、52%、59%、55%、62%和65%)日粮中的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维(ADF)2、4、6、8、12、24、48和72h的消失率。结果表明:NDF水平为52%时,绒山羊日粮中的NDF和ADF消失率较高。精粗比例为30∶70、20∶80和10∶90时,绒山羊日粮中的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消失率受影响不同,精粗比20∶80日粮组2～72hNDF和ADF消失率较高,其中2h和72h时NDF和ADF消失率明显高于30∶70和10∶90日粮组。由此可以得出,绒山羊配合饲料中纤维素水平为52%,精粗比例为20∶80较适宜。     

缺血-再灌注对家兔肾脏的病理性损伤及肾微循环内中性粒细胞和微血栓的变化

目的:探讨家兔肾脏缺血-再灌注损伤的病理学特征及中性粒细胞和微血栓在病变形成过程中的作用.方法:家兔全身麻醉,开腹后分离并夹闭左肾动脉造成左肾缺血,40 min后松开动脉夹,恢复左肾血液再灌注,维持1.5 h后处死动物,取出左肾,用逆流灌注法收集滞留在微循环中的中性粒细胞和微血栓并计数;肾组织常规石蜡切片,HE染色,镜...     

日粮中性洗涤纤维水平对生长公牛碳水化合物和蛋白质消化代谢的影响

采用拉丁方试验设计,选择6头12月龄的中国荷斯坦公牛,分别喂给6种不同NDF（中性洗涤纤维）水平的日粮,（NDF在日粮中的比例分别为：30．26％、32．49％、34．74％、36．94％、39．16％、41．39％）,以研究NDF对碳水化合物和蛋白质消化代谢的影响。试验表明,NDF水平对日粮ND和ADF（酸性洗涤纤维）的表现消化率有显著影响（P〈0．05）,日粮NDF和ADF的表现消率随日粮NDF水平的提高而升高,淀粉的消化率受日粮NDF水平的影响下大（P〉0．05）;NDF水平对日粮氮的利用率有明显影响（P〈0．05）,过高或过低均不利于氮的沉积;NDF对日粮能量的表现消化率有显著影响（P〈0．05）,日粮能量表现消化率随NDF水平的提高而下降。     

日粮中性洗涤纤维水平对生长公牛碳水化合物和蛋白质消化代谢的影响

采用拉丁方试验设计,选择6头12月龄的中国荷斯坦公牛,分别喂给6种不同NDF(中性洗涤纤维)水平的日粮,(NDF在日粮中的比例分别为:30.26%、32.49%、34.74%、36.94%、39.16%、41.39%),以研究NDF对碳水化合物和蛋白质消化代谢的影响。试验表明,NDF水平对日粮ND和ADF(酸性洗涤纤维)的表观消化率有显著影响(P<0.05),日粮NDF和ADF的表观消率随日粮NDF水平的提高而升高,淀粉的消化率受日粮NDF水平的影响下大(P>0.05);NDF水平对日粮氮的利用率有明显影响(P<0.05),过高或过低均不利于氮的沉积;NDF对日粮能量的表观消化率有显著影响(P<0.05),日粮能量表观消化率随NDF水平的提高而下降。     

粗饲料中中性洗涤纤维含量对奶牛消化和生产性能的影响

中性洗涤纤维（NDF）是对植物细胞壁或纤维成分的一种测量指标,主要包括纤维素、半纤维素和木质素等部分。NDF含量在奶牛日粮中占据非常重要的位置,奶牛日粮中含有一定量的NDF对奶牛的采食、咀嚼、瘤胃内环境以及奶牛的生产性能均存在一定的影响作用。     

短链脂肪酸对内皮细胞NLRP3、炎症体激活和新生内膜形成的不同作用:丁酸盐的抗氧化作用

短链脂肪酸(SCFAs)是肠道微生物代谢产物家族,具有促进内皮功能保护,从而发挥抗动脉粥样硬化作用。然而,介导SCFA这种保护作用的确切机制仍不清楚。本研究探讨了SCFAs(乙酸盐、丙酸盐和丁酸盐)对内皮细胞(ECs)中Nod样受体嘧啶结构域3(Nlrp3)炎症体活化和相关颈动脉新内膜形成的影响。在西方饮食(WD)喂养的部分结扎颈动脉(PLCA)小鼠模型上,我们发现丁酸能显著减少野生型小鼠颈动脉壁Nlrp3炎症体的形成和激活(ASC+/+),其作用与接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白基因(ASC-/-)基因缺失的作用相当。然而,醋酸和丙酸均能显著促进ASC+/+小鼠颈动脉Nlrp3炎性小体的形成和激活以及颈动脉新内膜的形成,但对ASC-/-小鼠无明显促进作用。在培养的内皮细胞(EOMA细胞)中,丁酸盐能显著抑制7-酮胆固醇(7-KET)或胆固醇晶体(CHC)诱导的Nlrp3炎性小体的形成和激活,而醋酸不能抑制7-Ket和CHC诱导的Nlrp3炎性小体的激活,但本身能激活Nlrp3炎性小体。从机制上讲,丁酸对Nlrp3炎症小体的抑制作用归因于阻断7-Ket或CHC刺激下产生O2·-的脂筏氧化还原信号平台。这些结果表明,SCFA对内皮Nlrp3炎性小体激活和相关的颈动脉新内膜形成有不同的影响。     

日粮蛋白质和中性洗涤纤维水平对幼龄反刍动物生长发育影响的研究进展

幼龄阶段是反刍动物生长中非常重要的阶段,这一时期的营养供应、生长发育状况和瘤胃发育程度决定了其成年后的生产性能和繁殖效率。由于幼龄阶段消化代谢系统发育不完善且具有极强的可塑性,此阶段日粮的营养水平,尤其是蛋白质和中性洗涤纤维（NDF）水平,在反刍动物发育过程中发挥着非常重要的作用。在生产实践中,营养供给不足或超量供给都会影响幼畜的生长发育及健康状况,这种情况甚至会伴随其一生。而幼龄反刍动物日粮中蛋白质和纤维水平对生长性能和胃肠道发育的调节具有决定性的作用。适量提高日粮中蛋白质水平,可提高幼龄反刍动物的生长发育程度,并由于饲料中瘤胃微生物可利用氮浓度的提高而提高了营养物质消化率和瘤胃的发育。在保证精饲料充足的情况下,提高日粮中NDF水平可提高幼龄反刍动物开食料的采食量,提高生长性能和促进瘤胃发育,同时也伴随着营养物质消化率的提高。但由于试验动物或原料来源不同,在相关试验中仍存在不同的试验结果。为此,作者针对日粮中不同蛋白质和NDF水平对幼龄反刍动物生长发育、营养物质消化率和瘤胃发育的影响,以及出现不同试验结果的原因进行总结和探讨,以期为解决幼龄反刍动物的饲养管理问题、提高其饲养效率提供理论依据。     

不溶性膳食纤维对母猪生产性能、繁殖性能、大肠微生物菌群和仔猪生长的影响

文章旨在研究在妊娠和泌乳母猪日粮中添加不溶性膳食纤维（ISF）对母猪生产性能、繁殖性能、大肠微生物菌群及仔猪生长性能的影响,以期为ISF在猪生产中应用提供理论依据。试验将64头长大二元杂交母猪随机分为4组,每组4个重复,每个重复4头母猪。第Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;第Ⅱ组饲喂添加1%ISF的基础日粮;第Ⅲ组饲喂添加3%ISF的基础日粮;第Ⅳ组饲喂添加5%ISF的基础日粮。试验期为配种至断奶结束。试验期间分别称量和测量母猪初始、妊娠107 d、分娩后和断奶后的体重和背膘厚,用于分析母猪体重和背膘厚的变化;记录母猪产子数、产活仔数、死胎数、畸形数、初生重、产程和断奶至发情的间隔时间,用于分析母猪繁殖性能;分别记录仔猪初生重、断奶重、初生窝重和断奶窝重,用于计算平均日增重和平均窝增重;分别于每天7:00和14:00观察母猪排便情况,根据粪便评分标准进行评分和记录;于母猪产后3 d采集粪便,用于分析大肠微生物。结果表明,与对照组相比,日粮添加3%和5%ISF均可显著降低母猪泌乳期失重和泌乳期背膘损失,提高初生窝均重,缩短产程和断奶至发情间隔（P <0.05）,显著降低母猪产前7 d粪便...     

饲粮中添加膳食纤维对肉鸡生长性能和肠道健康影响的Meta分析

本研究旨在通过Meta分析探讨饲粮中添加膳食纤维对肉鸡生长性能和肠道健康的影响。通过检索Web of Science、PubMed、中国知网、万方等数据库中2007—2022年关于膳食纤维对肉鸡生长性能和肠道形态影响的试验研究,共筛选到27篇文献,共计5 310羽肉鸡。采用Review Manager 5.3软件对肉鸡平均日增重（ADG）、终末体重（FBW）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）和回肠绒毛高度（VH）、隐窝深度（CD）、绒毛高度/隐窝深度（VH/CD）及肌胃相对重量（GRW）进行分析。结果表明：与对照组相比,饲粮中添加膳食纤维显著提高了肉鸡ADG[合并效应值（MD）=1.01,95%置信区间（95%CI）为0.29～1.72,P=0.006 00]、FBW(MD=45.05,95%CI为16.68～73.42,P=0.002 00)和回肠VH(MD=36.58,95%CI为14.22～58.94,P=0.001 00)及GRW(MD=0.16,95%CI为0.11～0.21,P<0.000 01);显著降低了肉鸡F/G(MD=-0.04,95%CI为-0.0...     

不同中性洗涤纤维来源开食料对湖羊羔羊生长性能和养分消化代谢的影响

本试验旨在分析湖羊羔羊采食两种不同中性洗涤纤维(neutral detergent fiber, NDF)来源开食料时生长性能和养分消化代谢的差异。采用对照试验设计,选择28只初生重相似(3.5±0.7 kg)的湖羊公羔,0～2日龄吮食母乳,3日龄羔羊与母羊分离,并开始饲喂代乳粉至28日龄断奶,7日龄(补饲前)按同质性原则将试验羔羊分为两个处理组,每个处理组14只,分别饲喂以苜蓿干草(alfalfa hay, AH)和甜菜粕(beet pulp, BP)为主要NDF来源的全混合饲粮。羔羊54日龄至60日龄进行消化代谢试验,70日龄时结束试验。结果表明,7～28日龄时AH组羔羊平均日增重以及养分和代谢能采食量均显著高于BP组(P <0.05),而29～70日龄时无显著差异(P> 0.05)。AH组羔羊对开食料干物质(dry matter, DM)、NDF和酸性洗涤纤维(acid detergent fiber, ADF)的表观消化率显著低于BP组(P <0.05)。表明本试验条件下,以苜蓿干草为NDF来源开食料能显著提高湖羊羔羊断奶前的生产性能及采食量,而以甜菜粕为ND...