组织中铜沉着的快速显示法

铜的显示在慢性肝脏疾病的诊断中不失为一种有效的特异性较高的方法,在兽医临床上常用于慢性铜中毒的肝组织活检,人医上用来检查原发性胆汁性肝硬化、肝豆状核变性。在多数病理情况下,尽管组织细胞内有铜的堆积,但用普通苏木精-曙红染色法难以显示,甚至根本无法确诊,罗丹宁法、地衣红法以及 Mallory 和 Parker 氏苏木素     

病鸡血清中鸡传染性贫血病病毒DNA的PCR扩增及抗体的ELISA检测

根据鸡传染性贫血病病毒（ＣＡＶ）的基因结构，设计并合成一对限制扩增长度为０．６８ｋｂ的ＰＣＲ引物．直接对临床可疑病鸡的血清进行靶ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增．在不同地区的３批样品中，有２批扩增出一二分子量接近０．７ｋｂ的单一特异性ＤＮＡ片段．用限制酶ＢｇｌⅡ消化ＰＣＲ产物．可获得分子量分别为０．３３ｋｂ和０．３５ｋｂ两个ＤＮＡ片段，其酶切位点与靶ＤＮＡ的相吻合．将ＰＣＲ扩增为阳性的病料接种６日龄ＳＰＦ鸡胚，并取其１８日龄胚肝和由接种鸡肛孵出的雏鸡的血清重新进行ＰＣＲ扩增，结果均为阳性，而同期对照胚肝及雏鸡血清为阴性．此外还用胚胎时接种过病料的雏鸡肝、脾和胸腺等组织抽提液作抗原，建立了检测ＣＡＶ血清抗体的ＥＬＩＳＡ方法．研究结果提示，用ＰＣＲ直接对病鸡血清中ＣＡＶＤＮＡ的扩增以及ＣＡＶ抗体的ＥＬＩＳＡ检测是快速和特异的．它为鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）的流行病学调查、实验室诊断、ＣＡＶ毒株的分离和鉴定提供了必要的检测手段．     

绵羊日粮中铜和钼对美狗舌草毒性的影响

美狗舌草(Senecio jacobaea)是一种有毒植物,含有吡咯兹啶(Pyrrolizidine)生物碱(PA),在太平洋西北部,引起大批牲畜中毒。牛和马对PA毒性易感性甚高,而绵羊和山羊对PA则有较强的抵抗力。尽管绵羊对PA的直接肝毒作用有抵抗力,但在澳大利亚遇见过,当绵羊采食含PA的植物如天芥菜(Heliotropium europeum)后,能导致超量的铜蓄积于肝内,接着出现致命的溶血危象。因此,本研究的目的是对绵羊喂美狗舌草和补充日粮铜后,测定是否有超量铜在肝内蓄积引起铜中毒。另外,检测在减少肝铜浓度时,铝可能产生的影响。     

家畜铜中毒研究进展

铜中毒是由于家畜摄食铜过多,或因肝细胞损伤,铜在肝脏等组织中大量蓄积,而突然释放进入血液循环所引起的一种重金属中毒性疾病。在生产中,家畜铜中毒屡见发生。文章归纳了铜中毒的发病特点和发病原因;总结了铜中毒的3 种发病机理,铜中毒的保护机制,铜与氧自由基的产生机制,铜毒理;论述了铜中毒的诊断依据、诊断指标和诊断方法;提出了铜中毒的综合性预防措施、治疗原则和治疗药物。为铜中毒病的诊断和防治提供了理论参考。     

伊氏锥虫微环DNA的PCR扩增

伊氏锥虫是动物伊氏锥虫的病原体，属动基体目原虫，动基体ＤＮＡ（ＫｉｎｅｔｏｐｌａｓｔＤＮＡ简称ｋＤＮＡ）是该目原虫所特有的一种非染色体ＤＮＡ。因此，对ｋＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增可用于鉴定和检测伊氏锥虫。本文以５－ＣＡＡＣＧＣＡＡＡＧＡＧＴＣＡＧＴ－３’，５’－ＡＣＧＴＧＴＴＴＴＧＴＧＴＡＴＧＧＴ－３’为引物，对从伊氏锥虫直接抽提的总ＤＮＡ，ｋＤＮＡ以及ｋＤＮＡ基因重组子，经ＰＣＲ扩增后，在含有０．５μ     

PCR和斑点杂交检测鸡传染性贫血病毒

通过聚合酶链反应（ｐｃＲ）扩增鸡传染性贫血病毒（ｃＡＶ）ＤＮＡ特定片段，将此ｐｃＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记后作为探针进行斑点杂交，以此检测ＣＡＶ并作流行病学调查。对从江苏省不同地市随机采集的２月龄左右不同疾病的病鸡ＤＮＡ样品进行检测，在被检的５２个不同鸡群来源的病料中，有３６个鸡群来源的病料ＤＮＡ显示ＣＡＶ阳性（群阳性率为６９．２％）；备组织中ＣＡＶＤＮＡ含量有所差异，依次为胸腺＞脾、骨髓、肝＞肾、法氏囊、脑。用ＰＣＲ检测得到的阳性鸡的组织病料感染ＳＰＦ鸡，在感染后第２４天检查，出现贫血症状。初步调查表明，在江苏一些地区ＣＡＶ感染已相当普遍，但它与发病的关系还有待于进一步研究。     

中国伊氏锥虫kDNA小环的克隆及kDNA探针的建立

本研究以质粒ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）为载体，对我国北方和南方疫区伊氏锥虫动基体株的ｋＤＮＡ小环进行了克隆，并以其中之ｐＴＫ０１１－Ｃ＿１为探针对不同地理区的动基体株和无动基体株的不同ＤＮＡ进行杂交，结果表明，我国北、南两大疫区动基体株的ｋＤＮＡ小环大小均约为１ｋｂ，且均属Ａ型，ｐＴＫ０１１·Ｃ＿１只与动基体株的ｋＤＮＡ及ｔＤＮＡ杂交，不与其ｎＤＮＡ杂交，也不与无动基体株的任何ＤＮＡ及黄牛白细胞ＤＮＡ杂交。说明具有特异性，可以用于诊断。ｔＤＮＡ的杂交信号与ｋＤＮＡ相当，诊断中可以代替ｋＮＤＡ作为检测对象。     

雏禽铜中毒机理研究进展

雏禽铜中毒是雏禽摄入过量的铜而发生的以组织器官受损、免疫功能低下、肝功能异常和贫血为主要特征的中毒性疾病。本文归纳总结了雏禽铜中毒的毒理机制。为雏禽铜中毒的诊断和研究提供了理论参考。     

应用醋酸锌治疗犬的铜中毒

醋酸锌用来治疗两种犬的铜中毒。每种犬有２只治疗２年，另一只治疗一年。每天２００ｍｇ锌能达到治疗铜中毒的目的，使血浆锌浓度升高一倍，达到２００μｇ／ｄｌ并抑制口服铜的吸收。每天剂量后来降到５０－１００ｍｇ，以防止血浆锌浓度过分升高。初步临床效果良好。３只犬在给锌开始时有轻度的中度的肝病，肝铜浓度也高，２年后肝活组织检查，发现肝炎减轻，肝铜浓度降低。另一只没有活动性肝炎的犬，在两年时间肝铜浓度也降低了     

日粮缺锌对猪血液生理生化指标及组织锌,铜含量的影响

用Ｃａ∶Ｚｎ为６０∶１、３３０∶１和５１６∶１的３种日粮分别饲喂３组仔猪１２０ｄ，对试验猪的临床症状和部分血液生理生化指标的变化进行了动态观察，并测定了试验猪１２种组织的锌、铜含量。结果表明，血液白细胞数和血清碱性磷酸酶，试验Ｂ组（Ｃａ∶Ｚｎ为５１６∶１）与对照组（Ｃａ∶Ｚｎ为６０∶１）之间有显著差异（Ｐ＜０．０５）；试验Ａ、Ｂ组猪（Ｃａ∶Ｚｎ为３３０∶１和５１６∶１）被毛锌含量、肝锌含量和肝铜锌比极显著低于对照组（Ｐ＜０．０１）。这些指标对于仔猪缺锌的早期诊断具有重要的诊断价值。     

猪铜中毒的诊治及其注意事项

1 中毒机理 急性铜中毒是由于猪短期内摄人过量铜盐（多为可溶性硫酸铜），由于大量铜盐具有凝固蛋白和腐蚀作用，从而导致胃肠黏膜出现凝固性坏死。严重者表现为出血性坏死性胃肠炎。慢性铜中毒是由于猪长期摄取少量铜而引起，是铜中毒常见的形式，但是中毒症状是急性的，是由于肝脏中的铜突然释入血流所致。当肝铜蓄积到一定程度后，便释放大量铜进入血液，血铜浓度迅速提高并进人红细胞和排人尿液。     

应用PCR检测人工感染鸡体内鸡传染性贫血病毒的动态分布

应用聚合酶链反应技术检测人工感染１２周龄ＳＰＦ鸡体内鸡传染性贫血病毒的动态分布结果,感染后第２周可从外周血液白细胞中检出ＣＡＶ－ＤＮＡ,在第３周时达到最高峰,然后逐渐下降,第６周时检出率仅为６．３％,第７周以后均未能从血液白细胞中检测到ＣＡＶ－ＤＮＡ;人工感染后第２－１２周均能从骨髓,胸腺,脾,肾,肝和腔上囊等组织检出ＣＡＶ－ＤＮＡ,其中以骨髓和胸腺的检出率最高,其次脾,肾和肝,腔上囊最低,从１２     

牦牛双稠吡咯啶生物碱中毒的确诊

牦牛双稠吡咯啶生物碱中毒的确诊ＷｉｎｔｅｒＨｅｔａｌ首例牦牛双稠吡咯啶生物碱（ＰＡ）中毒的诊断在不丹王国进行，该中毒病在不丹一些地区相当严重。该病诊断最初是基于病理学检查，以后通过对甲醛固定的肝组织进行硫合吡咯代谢物的化学检验而被证实。在不丹考察期间...     

PCR检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤儿病毒（ＣＥＬＯＶ）、鸡病毒性关节炎病毒（ＶＡＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）和鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的扩增结果均为阴性。可检测ＥＤＳ－７６病毒ＤＮＡ为０．３×１０－４ｐｇ。结果表明该方法特异且敏感。此外，将常规的三温式ＰＣＲ的操作规程改为双温式，反应体积由常规５０～１００μＬ改为２０μＬ，使其更加快速、简便、经济     

实验性雏鸡铜中毒的病理学研究

选用1日龄艾维菌肉鸡180只随机分为3组，分别以对照日粮（Cu 11．97mg／kg）、铜中毒Ⅰ组日粮（Cu 650mg／kg）和铜中毒Ⅱ组日粮（Cu 850mg／kg）饲喂6周，以实验病理学方法系统研究了铜中毒对雏鸡组织器官和某些血液指标的影响。2个铜中毒组在试验的第2、3周先后出现临床症状；铜中毒Ⅱ组雏鸡的发病率和死亡率高于铜中毒Ⅰ组。病理形态学观察，2个铜中毒组的病变基本一致，表现为肌胃角质层增厚、龟裂，肠绒毛裸露断裂，伴有坏死；肝细胞脂肪变性；肾小管上皮细胞变性，坏死脱落；淋巴免疫器官体积缩小、重量减轻、淋巴细胞数量减少。2个铜中毒组雏鸡血清谷草转氨酶（AST）活性显著升高，红细胞数量、血红蛋白含量显著降低（P〈0．05或P〈0．01）。表明，雏鸡在生长发育的2～6周对高剂量铜较为敏感，毒性损坏的靶器官是肝、肾、胃肠道和淋巴免疫器官，铜中毒导致雏鸡组织器官受损、功能障碍及免疫功能低下，最终导致发病、死亡。     

用ELISA诊断山羊副结核病的评价

一种检测牛血清中副结核分枝杆菌（Ｍ．Ｐ）抗体的商品化快速吸附ＥＬＩＳＡ经改良后用于检测山羊血清中Ｍ．Ｐ抗体，使用来自副结核病群中的１６３只山羊，评价诊断的敏感性。采集血和粪样，而且应用商品试验盒，通过测定分枝杆菌插入序列ＩＳ９００ＤＮＡ来估计粪便中Ｍ．Ｐ的排出情况。诊断的特异性是通过１０群临床上认为无副结核病的１２３只山羊的血样来评估的。感染羊群中的１６３只山羊中有３５只（２１％）检出了ＩＳ９００ＤＮＡ。在３５只ＩＳ９００ＤＮＡ阳性山羊中有１９只检出了Ｍ．Ｐ血清抗体，敏感性为５４％，感染群中１２８只ＩＳ９００ＤＮＡ阴性山羊１８只检出血情抗体。临床上认为无副结核病羊群中的１２３只山羊的Ｍ．Ｐ血清抗体检测结果为阴性。     

猪五种常见潜在有毒物质中毒症的诊疗

猪如果饮用被绿藻或蓝藻高度污染的水,将会发生急性中毒,并出现高死亡率。猪砷中毒主要因误食含砷毒剂而引起中毒。煤焦油主要用于消毒剂和防腐剂,可能会被猪摄入而中毒。猪铜中毒主要因猪摄入过量铜制剂而中毒。注射过量的右旋糖酐铁也可引起猪中毒。现对以上五种中毒症的症状、诊断和治疗进行了阐述。     

猪生殖与呼吸综合征病毒ORF6片段的cDNA克隆及鉴定

根据已发表的ＰＲＲＳＶ基因组序列，设计并合成了１对特异扩增ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２株的ＯＲＦ６的基因的引物，以ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２基因组为模板，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出５８６ｂｐ的ｃＤＮＡ产物。将该ｃＤＮＡ片段经Ｔ－Ａ连接插入ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体中，用重组质粒转化大肠埃希氏菌ＪＭ１０９，获得重组质粒转化菌。对重南粒ＤＮＡ进行ＰＣＲ及酶切鉴定，证明插入的ＤＮＡ片段与ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段大小相     

DNA免疫防制鸡传染性支气管炎的探索研究

ＯＲＦ完整的ＩＢＶ类Ｍ４１株Ｓ１基因ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＣＩ ＣＭＶ启动子下游我隆位点，构成ｐＣＩＳ１用于１周龄ＳＰＦ雏鸡的ＤＮＡ免疫试验。试验鸡生疏腿部肌肉注射ｐＣＩＳ１ＤＮＡ１００ｇ，２周后加强免疫一次。二次免疫２周后，代感染ＩＢＶ Ｈ５２株。结果，ＩＢＶ人工感染后第４天气管－泄殖腔棉拭子鸡胚病毒分离阳性者，免疫试验组为１／６，而对照组为６／６，鸡胚病毒中和试验显示，二次免疫后临感染前及     

PCR检测感染鸡沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌

用ＰＣＲ技术检测鸡感染沙门氏菌ＤＮＡ并与常规细菌分离培养作比较。从感染鸡沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的鸡组织中提取ＤＮＡ。所用的一对引物是ＩｎｖＡ中的定向序列合成的，细菌分离自样品的顶培养物。用ＰＣＲ技术从感染鸡组织ＤＮＡ中扩增了２８４ｂＰ的一个片段，与预期的结果一致。用ＰＣＲ方法不仅可检测出细菌分离阳性鸡组织中的ＤＮＡ，而且可以检出细菌分离阴性鸡组织中的ＤＮＡ，从２０个感染鸡沙门氏菌２１ｈ后的样品中