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[目的]研究物理与化学因子对白芸豆凝集素生物学活性的影响,为白芸豆凝集素开发利用奠定理论基础和提供技术参考.[方法]白芸豆(Phaseolus vulgarisL)种子经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换和Sephadex G-100凝胶柱层析得到凝集素(PVL);然后以不同温度和pH梯度、不同金属离子、不同变性剂处理样品,通过倍比稀释法测定凝集素的生物学活性.[结果]白芸豆凝集素能使兔血红细胞发生凝集,在20~70℃红细胞凝集活性不受影响,当温度达到80℃时凝集素样品仅有25%凝血活性,85℃加热30 min凝血活性全部消失.用EDTA溶液处理后,白芸豆凝集素失去凝血活性,金属离子Mg2+和K+能恢复凝血活性,Mn2+能完全恢复凝血活性,Ba2+、Cu2+、Fe3+、Ca2+不能使凝血活性恢复.白芸豆凝集素在缓冲液pH低于4.0时凝血活性逐步降低,在pH 3.0时,活性仅有45%;在缓冲液pH高于7.2时活性逐步降低,pH 9.0时凝血活性仅有44%.3种变性剂变性试验中,脲能使凝集素凝血活性降低70%,盐酸胍能降低30%,SDS能降低18%.[结论]白芸豆凝集素具很强的热稳定性和广谱酸碱度适应能力;凝血活性依赖Mn2+等金属离子,且仅能被变性剂6 mol/L脲部分抑制.在实际应用中,可根据适宜条件控制其物理和化学因素,防止凝集素变性失活. 相似文献
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对同型巴蜗牛(Bradybaena similaris)蛋白腺提取液凝集活性进行测定,初步提取其凝集素并进行部分性质鉴定.结果表明:在同型巴蜗牛的蛋白腺中存在凝集素,具有血球凝集活性,能够凝集9种动物红细胞,其中,对家兔红细胞的凝集活性最高,可达2^8,不过,其对家兔红细胞的凝集活性明显依赖于Ca2+;在pH值为7.0~8.0的范围内其凝集活性较稳定,保持100%的凝集活力;温度为40℃持续作用10min后就失去活性;向同型巴蜗牛蛋白腺提取液加人45%的固体硫酸铵使凝集素沉淀,再用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对沉淀物进行抽提,抽提物的比活力提高了约2.56倍,总活力回收为20.00%. 相似文献
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刀豆凝集素提取分离条件的优化及其凝集活性 总被引:1,自引:0,他引:1
凝集素是一类多价的、非免疫来源的、对糖及其缀合物高度专一识别的蛋白质[1]。它们广泛存在于各种生物体中,并且在病毒、细菌、支原体、寄生虫的感染,在细胞与可溶性组分之间的寻靶作用,在受精作用,在癌细胞的转移、生长、分化等过程中,都起着重要作用[2,3]。豆科植物凝集素具 相似文献
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鳙鳃凝集素的稳定性及细胞凝集作用 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]为了探明鳙鳃凝集素在各种条件下的稳定性及其细胞凝集活性。[方法]测定经各种条件处理过的鳙鳃凝集素样品的血凝活性,评价其稳定性;通过镜检测定鳙鳃凝集素对微藻细胞及各种微生物细胞的凝集作用。[结果]琥珀酰化修饰、胰蛋白酶水解、SDS及β-巯基乙醇处理均使鳙鳃凝集素活性大大降低;在设定的处理浓度下,二甲基亚砜、NaC l及三氟乙酸对其活性没有影响;鳙鳃凝集素能专一地凝集雨生红球藻及哈维氏弧菌和鳗弧菌。[结论]鳙鳃凝集素稳定性受各种因素影响,能够选择性地凝集雨生红球藻及2株鱼类病原弧菌。 相似文献
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刀豆凝集素的血凝活性及其性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]为进一步研究刀豆凝集素提供依据。[方法]从豆科植物刀豆属(Canavalia)中Canavalia ensiformis(L.)DC的干燥成熟种子中提取刀豆凝集素(Concanavalin A,简称ConA),进行血凝活性测定,并对其部分性质作了初步研究。[结果]结果表明:采用胰蛋白酶修饰人血(A型)红细胞来检测ConA凝集活性时,发现其活性提高了8倍。ConA对人A、B、O、AB型及供血动物(兔,鸡,鸭,鸽,鲤、鲫鱼)的血红细胞都具有一定程度的凝集活性,无供体细胞专一性或血型专一性;D-葡萄糖和D-甘露糖是ConA的专一性结合糖。ConA是一种对热较稳定的凝集素,40℃以下时ConA很稳定,80℃以上保温20 min后,血凝活性完全丧失。在pH值范围5.8~8.3,ConA的凝集活性较高,在pH>11.9时,凝集活性完全丧失。变性剂脲浓度达到0.4 mol/L以上时,ConA的凝集活性可完全丧失。[结论]该研究对今后系统阐明其生物学作用,扩大应用范围具有重要意义。 相似文献
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应用免疫琼脂扩散法检测温度、pH、反复冻融、保护剂等理化因素对GST-mTSST-1融合蛋白免疫活性的影响,结果表明,在4℃30 d、20℃72 h、37℃72 h条件下,GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性不受影响,但该蛋白不耐高温,60℃5 min完全失活,耐碱不耐酸,对反复冻融有较好的稳定性,50 mg/mL蔗糖保护剂有利于提高该蛋白的免疫稳定性,为GST-mTSST-1融合蛋白规模化生产工艺的设计奠定了基础. 相似文献
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对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果表明:三疣梭子蟹血清凝集素对鲫鱼、中华鳖、草鱼、鸡和人类A、B、O型血细胞没有凝集作用,但是对小鼠、兔的血细胞表现出较强的凝集活性,其中对小鼠血细胞的血凝活性达到210,对兔血细胞的血凝活性达到28;盐度对其凝集活性有较大影响,Na Cl浓度在0.6 mol/L以上时基本失活;凝集素活性最适p H值为6.0~7.4;血清凝集素对Ca2+、Mg2+离子有明显的依赖性,EDTA可以明显抑制其凝集活性;糖抑制结果表明,血清凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺及N-乙酰甘露糖胺特异性抑制;对血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区;聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,主要蛋白条带在72~95 ku。 相似文献
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对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血清凝集素的凝集特性进行了研究.结果表明:三疣梭子蟹血清凝集素对鲫鱼、中华鳖、草鱼、鸡和人类A、B、0型血细胞没有凝集作用,但是对小鼠、兔的血细胞表现出较强的凝集活性,其中对小鼠血细胞的血凝活性达到210,对兔血细胞的血凝活性达到28;盐度对其凝集活性有较大影响,NaCl浓度在0.6 mol/L以上时基本失活;凝集素活性最适pH值为6.0~7.4;血清凝集素对Ca2+、Mg2+离子有明显的依赖性,EDTA可以明显抑制其凝集活性;糖抑制结果表明,血清凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺及N-乙酰甘露糖胺特异性抑制;对血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区;聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,主要蛋白条带在72~95 ku. 相似文献
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报道了以改进的布氏菌全血平板凝集抗原与标准布氏菌试管凝集试验和玻板凝集试验对照,对10只自然感染布病阳性绵羊在集中舍饲的条件下,经17个月凝集素滴度的检测,证明全血抗原的特异性、敏感性及阳性检出率均优于对照方法。 相似文献
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为了研究海芋凝集素AML对豆蚜(Aphis craccivora Koch)的作用机理,分别用AML处理豆蚜离体蛋白酶、淀粉酶,以及将AML添加到人工营养液饲喂豆蚜的方法来研究AML对蚜虫体内蛋白酶活性、淀粉酶活性、蛋白含量的影响。结果表明,无论在离体和在体的条件下,AML均能明显抑制豆蚜蛋白酶、淀粉酶活性,并且经AML处理后豆蚜体内蛋白含量也明显降低。这些结果说明AML可能通过与昆虫消化道内的各种消化酶结合并抑制其活性,进而导致试虫营养不良成为弱质昆虫,容易继发各种病症而死亡,这或许是AML对豆蚜致毒的机理之一。 相似文献
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为了解外源刀豆凝集素对菲律宾蛤仔免疫因子的影响,开展了不同浓度刀豆凝集素对菲律宾蛤仔血细胞吞噬活性、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响研究。结果表明,投喂刀豆凝集素后第1、3、4、6、7天,菲律宾蛤仔吞噬细胞活性显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂5μg/L刀豆凝集素后第4、6、7天,菲律宾蛤仔溶菌酶含量显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂刀豆凝集素后第1~7天,菲律宾蛤仔碱性磷酸酶活性显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂5μg/L刀豆凝集素后第3、7天,菲律宾蛤仔的超氧化物歧化酶活性显著高于对照普通养殖(P0.05)。刀豆凝集素在第2~5天对菲律宾蛤仔免疫力具有很大的促进作用,3μg/L刀豆凝集素效果最佳,第7天后投喂5μg/L刀豆凝集素效果最佳。 相似文献
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采用多因素正交试验研究了不同破碎度以及温度、时间、pH值 3因素对红茶浸提率的影响。结果表明 :破碎度大小与茶叶浸提率呈正相关 ;在相同破碎度条件下 ,温度、时间、pH值对红茶浸提率影响程度依次为 :温度 >pH值 >时间 ,最优组合为温度80℃ ,pH值 1,时间 15min。 相似文献
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不同地区马铃薯凝集素含量与活性的测定分析 总被引:1,自引:0,他引:1
植物凝集素是一个超级蛋白质家族,能凝集细胞.不同植物凝集素含量和活性均不相同,即使同一品种植物由于所生长的地区环境不同,其含量和活性也各不相同.本试验对两个不同地区的白瓤马铃薯就此两方面进行了初步研究.结果发现.东北马铃薯的凝集素含量和活性远大于山东马铃薯. 相似文献
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血细胞分析仪测定血小板的影响因素分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:分析血细胞分析仪测定血小板的影响因素.为临床提供可靠的诊治依据。方法:按照BC3000全自动血液分析仪的血小板计数原理及血小板直方图,把干扰的标本分成3组,A组:在血小板直方图上。后蜂翘起始处在25fl以外的标本;B组:后蜂翘起始处在20~25fl之间的标本;C组:后峰翘起始处在20fl之内的标本。每组检测30份标本,分别行血细胞分析仪及显微镜计数血小板.对两法结果作配对t检验。同时对正常与异常血小板直方图的血小板聚集及大血小板的例数、血细胞分析仪及镜检计数血小板的结果作比较。结果:B、C两组血细胞分析仪计数血小板的结果均比显微镜直接计数血小板的结果偏高(P〈0.05~0.01);异常血小板直方图的血小板聚集以及大血小板的例数均明显高于正常图形者.其血细胞分析仪计数血小板明显则偏低(P〈0.01)。结论:小红细胞数量、血小板凝集及大血小板等均可影响血细胞分析仪对血小板的计数;对血小板计数与直方图不符的标本.应行手工计数或重新采血检测.以使血小板计数结果可靠.为临床诊断治疗提供有参考意义的数据。 相似文献
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种子活力是种子在田间快速均匀地发芽和出苗的潜在能力,是种子质量最本质的反映。影响种子活力的外界因素很多,笔者根据有关资料,结合自己的研究就外界理化因素对种子萌发及活力的影响归纳、综述如下。1物理因素对种子萌发及活力的影响影响种子发芽及活力的外界物理因... 相似文献