内蒙古白绒山羊小肠可吸收氨基酸目标模式和消化率的研究

本文为内蒙古白绒山羊氨基酸利用和蛋白质周转规律研究项目的基础部分,主要是为进一步研究小肠可吸收氨基酸模式对绒山羊小肠氨基酸的消化、组织吸收和利用及确立绒山羊小肠理想氨基酸模式提供基础数据。试验1对体重25～30kg的2周岁内蒙古白绒山羊半同胞羯羊的肌肉、绒毛纤维和微生物蛋白的氨基酸组成进行了分析和评价。研究发现山羊绒和山羊毛纤维中各种氨基酸的组成和肌肉组织明显不同。绒毛纤维的生长需要更多的含硫氨基酸,而肌肉生长需要较多的赖氨酸和组氨酸。山羊绒和粗毛在氨基酸的需要上也存在着一定的差异。瘤胃微生物蛋白的氨基酸组成不平衡。为此根据绒山羊的生产特点,按不同比例对肌肉与羊绒的氨基酸模式进行加权,获得4种小肠可吸收氨基酸目标模式,分别为M(肌肉、M90+C绒毛10、M80+C20和M70+C30,以期在肌肉和绒毛两种模式之间寻求出一种保持绒毛纤维生产和肌肉生长平衡的相对理想的氨基酸模式。试验2选用12只体况良好、体重25～30kg,的2周岁内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,安装永久性瘤胃瘘管、十二指肠近端瘘管和回肠末端瘘管进行试验。测定了基础日粮条件下绒山羊消化道不同部位氨基酸流通量与消化率。结果表明,在基础日粮条件下,氨基酸的平均消化率为76%左右,含硫氨基酸Met十Cys的十二指肠流     

小肠可吸收氨基酸模式对内蒙古白绒山羊组织蛋白质周转的影响

选用9只体况良好,体重25～30 kg的2周岁内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,安装永久性十二指肠近端瘘管和两侧颈静脉血插管进行试验,试验采用随机区组试验设计,3个试验处理为在基础日粮条件下的3种十二指肠氨基酸灌注模式,分别为M、M90 C10和M80 C20.本试验采用稳定性同位素d5-Phe大剂量一次灌注法,测定不同组织的蛋白质合成率(FSR).结果表明,小肠可吸收氨基酸模式对皮肤蛋白质的FSR有显著影响.其中,M90 C10组和M80 C20组皮肤蛋白质的FSR极显著高于M组(P＜0.01).小肠可吸收氨基酸模式对空肠、肝脏和肌肉组织的FSR无显著影响(P＞0.05).同时表明小肠可吸收氨基酸模式对氨基酸在外周组织,尤其是皮肤和肌肉组织间的分配具有显著影响(P＜0.05).     

内蒙古白绒山羊小肠可吸收氨基酸模式对MDV和PDV组织游离氨基酸代谢影响的研究

选用3只体况良好,体重25～30kg的2周岁内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,安装永久性十二指肠近端瘘管以及门静脉、肠系膜静脉、颈动脉、颈静脉慢性血插管进行试验。采用3×3拉丁方试验设计,3个试验处理的十二指肠氨基酸灌注模式分别为M、M90+C10、M80+C20。结果表明,小肠可吸收氨基酸模式对MDV和PDV组织SAA的净流量具有显著影响,其中Met随着绒毛模式所占比例的增加而显著提高(P<0105)。MDV组织Cys的净流量显著高于其小肠消失量。绒山羊胃肠道组织摄取了大量的BCAA。因此,在调整绒山羊小肠氨基酸模式时应注意BCAA,尤其是Leu的补充。小肠可吸收氨基酸模式对绒山羊体内氨基酸代谢的利用有显著影响,绒山羊小肠内理想的氨基酸模式应界于M90+C10和M80+C20之间。     

敖汉细毛羊小肠氨基酸流量和消化率的研究

选取9只安装有永久性瘤胃、近端十二指肠、回肠末端瘘管,体重35～45kg的1.5周岁敖汉细毛羊半同胞羯羊进行试验,测定了基础日粮条件下敖汉细毛羊消化道不同部位氨基酸流通量与消化率。结果表明,基础日粮条件下,敖汉细毛羊十二指肠含硫氨基酸流量较小,仅为36.20mmol/d,且十二指肠氨基酸不平衡,影响氨基酸的利用率,限制生产性能的发挥。     

在氨基酸平衡日粮内不同代谢葡萄糖水平对绒山羊小肠氨基酸表观消化率的影响

选用9只体况良好,体重23～25kg的2岁安装有永久性瘤胃瘘管、十二指肠瘘管和回肠瘘管的内蒙古白绒山羊半同胞羯羊进行试验,试验采用随机区组设计,3个组试验羊灌注相同水平氨基酸、不同水平的葡萄糖,使进入绒山羊十二指肠的各种氨基酸(日粮氨基酸+灌注氨基酸)达到M 85+C15(即85%的肌肉和15%的绒毛氨基酸模式)的理想氨基酸模式,1、2、3组的代谢葡萄糖水平分别为35.56、55.56和70.56g/d。结果表明;本试验条件下,随代谢葡萄糖水平的提高,NEAA及EAA中Lys、ArgI、lu、Val、Phe的表观消化率降低,2、3组明显低于1组(P<0.05);2、3组之间差异不显著(P>0.05)。     

玉米—豆粕型日粮条件下白绒山羊十二指肠氨基酸流通量、消化率及平衡性的研究

试验采用体内法,实测内蒙古白绒山羊小肠氨基酸表观消化率,并对氨基酸平衡性进行评定,结果表明:玉米—豆粕型日粮条件下,小肠总氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸的表观消化率分别为:68.41%,68.68%和68.11%。在所有氨基酸中,赖氨酸的消化率最高74.77%,半胱氨酸的最低52.72%;小肠可吸收氨基酸平衡指数为0.69,要达到M85+C15的平衡模式,需要补充蛋氨酸、精氨酸、组氨酸、苏氨酸、丝氨酸和色氨酸。     

移动尼龙袋法测定蛋白质饲料过瘤胃氨基酸的小肠消化率

试验测定了不同蛋白质饲料氨基酸的瘤胃降解率和瘤胃非降解残渣氨基酸的小肠消化率,旨在为建立饲料氨基酸小肠消化率数据库提供参考依据,以期指导日粮的配制。试验选用3头装有瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物,采用瘤胃尼龙袋法和小肠尼龙袋法分别测定豆粕、葵花粕、芝麻粕、菜籽粕和棉粕的氨基酸含量、氨基酸的瘤胃降解率和小肠消化率。结果表明,不同的饲料过瘤胃氨基酸小肠消化率是不同的。同种饲料不同过瘤胃氨基酸的小肠消化率也不同。     

移动尼龙袋法测定能量饲料过瘤胃氨基酸的小肠消化率

试验测定了不同能量饲料过瘤胃氨基酸小肠消化率,旨在为建立饲料氨基酸小肠消化率数据库提供参考依据,以期指导日粮的配制。试验选用3头装有瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物,采用移动尼龙袋法分别测定米糠饼、米糠粕、大麦、麦麸和玉米麸质饲料过瘤胃氨基酸的小肠消化率。结果表明不同能量饲料过瘤胃氨基酸小肠消化率是不同的。同种能量饲料不同过瘤胃氨基酸的小肠消化率也不同。     

复合异位酸对山羊小肠氨基酸流通量和表观消化率的影响

试验研究了日粮添加复合异位酸对山羊小肠氨基酸流通量和表观消化率的影响。采用3×3拉丁方试验设计,选用3头安装有永久性瘤胃瘘管、十二指肠近端瘘管和回肠远端瘘管、平均体重为(25.4±0.75)kg的健康麻城黑山羊为试验动物。I组为空白对照,饲喂基础日粮。II组、III组分别饲喂含0.3%和0.6%复合异位酸(钠盐形式)的试验日粮。采用Co-EDTA标记法测定小肠氨基酸流通量和表观消化率。结果显示:III组缬氨酸和异亮氨酸十二指肠流通量极显著高于对照组(P0.01),亮氨酸和必需氨基酸显著高于对照组(P0.05);缬氨酸和丙氨酸的小肠表观消化率显著高于对照组(P0.05)。II组缬氨酸和异亮氨酸十二指肠流通量显著高于对照组(P0.05)。III组异亮氨酸十二指肠流通量显著高于II组(P0.05)。     

用十二指肠灌注法研究蛋氨酸和赖氨酸在泌乳奶牛限制性氨基酸中的顺序

选用装有瘘管的试验动物4头,采用4×4拉丁方试验设计。日粮精粗比为30∶70,在十二指肠分别连续灌注赖氨酸、蛋氨酸、赖氨酸和蛋氨酸的混合物及10种必需氨基酸,通过对尿素氮、血浆氨基酸浓度变化的分析,研究赖氨酸、蛋氨酸的限制性顺序。试验结果表明,在此日粮水平下,蛋氨酸为第一限制性氨基酸,赖氨酸为第二限制性氨基酸。     

细毛羊黑素皮质激素受体1(MC1R)基因与毛色表型的研究

为了研究黑素皮质激素受体1(MC1R)基因与黑色素生成的关系及该基因突变导致毛色发生改变的机理,研究采用RT-PCR和PCR等技术克隆得到了白色东北细毛羊MC1R基因长1 093 bp的cDNA片段,编码364个氨基酸,其中包括70个氨基酸信号肽和294个氨基酸的成熟肽,具有7个跨膜结构域。结果表明:细毛羊cDNA与绵羊、牛、马、人、小鼠、犬等同源性均大于91%,氨基酸序列与其他动物的同源性高于89%;除绵羊外与其他动物相比有5处发生突变,且这5处突变均位于MC1R蛋白跨膜结构区;而细毛羊和绵羊之间只有1处发生突变,由K→M,同源性达98.97%。说明细毛羊与绵羊的亲缘关系最近。     

添加剂对紫花苜蓿青贮品质及小肠可吸收氨基酸的影响

为研究添加复合乳酸菌和葡萄籽单宁对紫花苜蓿(Medicago sativa L.)青贮品质及小肠可吸收氨基酸的影响，选用凋萎后二茬现蕾期紫花苜蓿为材料，设置对照(CK)，葡萄籽单宁(G)、复合乳酸菌(戊糖乳杆菌+戊糖片球菌+乳酸片球菌，L)和复合乳酸菌+葡萄籽单宁(LG)组，青贮60 d后测定其品质，并采用体外三步法测定其小肠可吸收氨基酸含量。结果表明：与CK组相比，G和LG组青贮饲料乳酸、乙酸、丁酸、总挥发性脂肪酸和氨态氮含量均显著降低(P<0.05)；L和G组粗蛋白含量显著提高(P<0.05)。与其他三组相比，G组青贮饲料的Ile，Leu，Lys，His，Arg，Tyr和总氨基酸含量显著提高，菌体蛋白以及小肠可吸收Ile，Lys，His，Arg，Ser和总氨基酸含量显著提高(P<0.05)。因此，添加葡萄籽单宁对紫花苜蓿青贮品质有一定改善作用，明显提高青贮饲料中Lys，His和Arg以及总氨基酸的小肠可吸收量。     

山谷型藏羊与青海半细毛羊和青海藏羊的肌肉营养成分测定比较

为研究推广优良品种优势,更好地服务于选种、选育和羊肉生产性能推广应用,选取山谷型藏羊与青海半细毛羊和青海藏羊3个品种、不同年龄的羯羊,开展肌肉营养成分分析和氨基酸含量测定,结果表明：山谷型藏羊主要营养指标和检测数据为：粗蛋白含量为21.00%,粗脂肪3.15%,胆固醇0.3650(mg/g),挥发性盐基氮0.1190(mg/g),矿物质总量6 785(mg/g),能量为4.74(kJ/g),氨基酸总量比青海半细毛羊高16.08%,比青海藏羊高5.06%。结论是挥发性盐基酸的含量可反映了羊肉的新鲜程度,在0.15 mg/g以内均为新鲜,说明本次分析检测的羊肉具有高能量、高蛋白、低脂肪、低胆固醇和氨基酸含量丰富的食品,是符合无公害食品。     

新疆4种绵羊羊毛氨基酸含量测定

为了研究遗传及环境对羊毛生产性状的影响,利用高效液相色谱法测定了新疆地区和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊、中国美利奴羊4个绵羊品种羊毛中的17种氨基酸含量,探索不同品种绵羊间和同一品种不同品系绵羊间羊毛氨基酸含量的差异。结果表明,和田羊羊毛的氨基酸总含量显著高于多浪羊羊毛,差异显著(P＜0.05);其他品种间氨基酸总量差异不显著。多浪羊羊毛中的Asp、Ser、Glu、Arg、Thr、Ala、Pro、Val、Lys、Ile、Leu、Phe等氨基酸含量均低于其他品种;卡拉库尔羊羊毛只有Cys含量高于其他品种,Ser、Gly、Thr、Pro、Tyr等氨基酸含量均低于其他品种。各品种羊毛的螺旋比值(促螺旋氨基酸含量/阻螺旋氨基酸含量),中国美利奴为0.90,卡拉库尔羊为0.79,和田羊为0.77,多浪羊为0.75。结果表明,和田羊氨基酸总含量高于其他品种,中国美利奴螺旋比值高于其他品种,卡拉库尔羊Cys含量高于其他品种。     

饲粮能量和蛋白质水平对滩羊小肠中小肽和氨基酸转运载体mRNA表达量的影响

本试验旨在研究饲粮能量和蛋白质水平对滩羊小肠中小肽和氨基酸转运载体mRNA表达量的影响。选取112只健康、体重相近的滩羊,随机分成4组,每组4个重复,每个重复7只羊。标准水平的饲粮能量和蛋白质水平参考《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004),各组试验滩羊分别饲喂不同能量和蛋白质水平饲粮:0.84×标准水平(Ⅰ组)、0.96×标准水平(Ⅱ组)、1.08×标准水平(Ⅲ组)和1.20×标准水平(Ⅳ组)。试验根据羊体重分2个阶段:29~35 kg和36~40 kg。于每个阶段末,每个重复屠宰1只试验羊,取其小肠组织样,运用实时荧光定量PCR技术,研究小肽转运载体1(Pep T1)、y+型氨基酸转运载体1(CAT1)、兴奋性氨基酸转运载体3(EAAT3)mRNA表达量的变化。结果表明:1)在29~35 kg阶段末,小肠中Pep T1 mRNA的表达量随着饲粮能量和蛋白质水平的提高呈先下降再上升的趋势,Ⅱ组显著低于其他3组(P0.05);Ⅳ组小肠中CAT1 mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05);Ⅲ组小肠中EAAT3mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05)。2)在36~40 kg阶段末,Ⅱ组小肠中Pep T1mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05);Ⅱ组小肠中CAT1 mRNA的表达量显著高于Ⅲ组(P0.05);小肠中EAAT3 mRNA的表达量随着饲粮能量和蛋白质水平的提高呈上升趋势,Ⅲ组和Ⅳ组小肠中EAAT3 mRNA的表达量显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P0.05)。由此可见,饲粮能量和蛋白质水平会影响滩羊小肠中Pep T1、CAT1、EAAT3 mRNA的表达量,使机体对小肽和氨基酸的吸收利用率随之改变,以适应滩羊的生长发育。     

Site and extent of digestion and amino acid flow to the small intestine in beef cattle consuming limited amounts of forage

Eight Angus x Gelbvieh heifers (445 +/- 74.5 kg) fitted with ruminal and duodenal cannulas were used in a 4 x 4 Latin square double double-crossover designed experiment to assess the effect of restricted forage intake on site and extent of digestion and flow of essential AA amino acids to the small intestine. Heifers were fed chopped (2.54 cm) bromegrass hay (9.2% CP, 64% NDF on an OM basis) at one of four percentages of maintenance (30, 60, 90, and 120%). Experimental periods were 21 d in length, with 17 d of adaptation followed by 4 d of intensive sample collection, after which maintenance requirements and subsequent level of intake were adjusted for BW change. True ruminal OM, NDF, and N digestion (g/d) decreased linearly (P < 0.001) with decreasing forage intake. When expressed as a percentage of OM intake, true ruminal OM and N digestibility were not affected (P = 0.23 to 0.87), whereas ruminal NDF digestibility tended to increase (P = 0.09) as forage intake decreased. Total and microbial essential amino acid flow to the duodenum decreased linearly (P = 0.001) from 496.1 to 132.1 g/d and 329.1 to 96.0 g/d, as intake decreased from 120 to 30% of maintenance intake, respectively. Although the profile of individual essential amino acids in duodenal digesta (P = 0.001 to 0.07) and isolated ruminal microbes differed (P = 0.001 to 0.09) across treatment, the greatest difference noted for total and microbial essential amino acid profile was only 0.3 percentage units. Because total and microbial flow of essential amino acids to the small intestine decreased as OM intake decreased, but true ruminal degradability of individual essential amino acids (P = 0.17 to 0.99) and digesta essential amino acid profile were comparable across treatments, total essential amino acid supply to the small intestine was predicted using OM intake as the independent variable. The resulting simple linear regression equation was: total essential amino acid flow = (0.055 x OM intake) + 1.546 (r2 = 0.91). The model developed in this experiment accounted for more of the variation in the data set than the current beef cattle NRC model, which under-predicted total flow of essential amino acids to the duodenum. The prediction equation developed herein can be used to estimate the supply of essential amino acids reaching the small intestine when formulating supplements to compensate for potential amino acid deficiencies resulting from restricted forage intake.     

过瘤胃保护性精氨酸和大豆油对细毛羊肌内脂肪和脂肪酸组成的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同水平的过瘤胃保护性精氨酸（ｒｕｍｅｎ ｐｒｏｔｅｃｔｅｄａｒｇｉｎｉｎｅ，ＲＰ Ａｒｇ）和大豆油对细毛羊肌内脂肪和脂肪酸组成的影响。试验选用健康、体重相近的 １５只细毛羊，随机分为５组，对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂在基础饲粮中添加１．５ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ、２．０ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ、１．５ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ＋３％大豆油和 ２．０ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ＋３％大豆油的饲粮。预试期为５ｄ，正试期为 ４５ｄ。试验结束后每组选 ２只羊进行屠宰，取背最长肌样用于测定肉质指标和脂肪酸组成。结果表明：试验组肌肉 ｐＨ、系水率和熟肉率与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５），而肌内脂肪含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）；试验组肌肉多不饱和脂肪酸含量与对照组相比显著提高（Ｐ＜０．０５）；添加 ＲＰ Ａｒｇ和大豆油有提高肌肉过氧化物酶体增生物激活受体 γ（ＰＰＡＲγ）、脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）ｍＲＮＡ表达量，降低激素敏感性甘油三酯脂肪酶（ＨＳＬ）ｍＲＮＡ表达量的趋势。综合指标，以 １．５ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ组与 １．５ｇ／ｄＲＰ Ａｒｇ＋３％大豆油组添加效果较好。     

3个不同品种羊Ⅰ型内根鞘角蛋白基因的差异表达

探讨了敖汉细毛羊、小尾寒羊和莱芜黑山羊3个不同品种毛囊生长期与毛囊发育有关的特异基因表达模式。采用基因表达谱芯片技术对上述3个品种羊毛生长期颈部、腹股沟部的Ⅰ型内根鞘角蛋白基因表达进行检测,通过实时定量PCR技术对差异基因进行验证。结果：Ⅰ型内根鞘角蛋白基因家族KRT25、KRT26、KRT27和KRT28在颈部的表达量无品种间显著变化（差异倍数小于2）;而在腹股沟部的表达量在品种间差异极显著（差异倍数大于2,P〈0.01）。实时定量PCR所得结果与基因芯片结果基本吻合。结果表明：Ⅰ型内根鞘角蛋白基因家族在不同品种羊中的表达量与特异部位毛囊分布密度有着重要的关系。     

Protein digestability and amino acid absorption in various segments of the digestive tract of pigs. 1. Methods of animal experimentation, protein content and amino acid patterns of the digesta in the small intestine and in feces after feeding different feeds]

Re-entrance cannulae were applied by way of operations at the end of the small intestine of a larger number of growing pigs. After a post-operative phase these animals were fed with various rations (N-free diet, fattening feed for pigs, rations with dried skim milk resp. wheat gluten + lysine and wheat + wheat gluten + lysine). During the main experiment periods the ileum digesta (24 hour-periods of collecting) and the feces were quantitatively registered. The protein and amino acid content ascertained in the feed rations, the digesta and feces samples are reported, comparatively evaluated and discussed. The amount of amino acids (in mg per kg intake of dry matter) contained in the ileum digesta after N-free feeding were statistically calculated with regard to differences occuring between the animals and days. For most amino acids a significant decrease in the ileum digesta could be detected during the course of the N-free feeding period. Moreover, the amount of amino acids in the ileum digesta was compared with the metabolic fecal amino acids, from which conclusions could be drawn concerning the disappearance rate of the individual amino acids in large intestine.