秘鲁番茄高效再生体系的研究

以秘鲁番茄的叶片和茎段为外植体,研究不同外植体种类、激素配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导、分化和不定芽生根的影响,以期建立秘鲁番茄组织培养高效再生体系。结果表明:秘鲁番茄的叶片较茎段更适宜愈伤组织诱导与分化,以叶片为外植体时,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达100.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达92.4%。以茎段为外植体时,最佳诱导愈伤培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达95.8%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达86.5%。不定芽最适宜的生根培养基为MS+1.0 mg/L NAA,生根率达100.0%。采用草炭土+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

野生紫斑百合多倍体诱导研究

【目的】对野生紫斑百合丛生芽进行多倍体诱导,以期获得多倍体新种质。【方法】以野外采集的野生紫斑百合为材料,以秋水仙素为诱变剂,分别采用浸泡法和混培法处理野生紫斑百合试管苗不定芽,比较分析不同处理方式、不同质量浓度及不同处理时间的秋水仙素对野生紫斑百合的诱变效果,并通过形态、气孔和细胞学观测鉴定变异植株。【结果】用浸泡法进行多倍体诱导,秋水仙素的最佳浓度为0.3%,最佳处理时间为12 h,变异率达到10.0%;用秋水仙素混培法进行染色体加倍的最佳浓度为0.7%,诱变率达到46.67%。通过鉴定,初步筛选出了野生紫斑百合的四倍体植株。【结论】秋水仙素的浸泡法和混培法均可诱导获得野生紫斑百合的多倍体,但以混培法诱导效果较好。     

宽叶缬草的离体培养及不定芽发生

以盆栽宽叶缬草野生苗为材料,切取其嫩叶、叶柄、地下幼嫩根状茎和不定根作为外植体,探讨不同消毒方式及不同生长调节剂组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响.结果表明,嫩叶和叶柄外植体的消毒方式以70%酒精浸泡30s,再用0.1%升汞浸泡6min效果较好;地下部外植体因受污染比较严重,消毒困难,死亡率为100%.叶片和叶柄均能诱导出愈伤组织,且产生具香味的毛状根.适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2mg/L+6-BA0.5mg/L,以叶为外植体的诱导率较高,可达80%.愈伤组织在供试培养基中分化困难,最高分化率仅为25%,培养基为MS+6-BA4mg/L+NAA0.5mg/L.以具芽点分化的愈伤组织为材料进行石蜡切片,显微观察显示,不定芽的发生起源于愈伤组织表皮细胞的分裂,属于外起源.     

阔叶缬草的离体培养及不定芽发生

为建立阔叶缬草离体培养体系并探讨不定芽形态建成的细胞学基础，以盆栽的野生苗为材料，切取其嫩叶、叶柄、地下幼嫩根状茎和不定根作为外植体，探讨不同消毒方式的影响及不同生长调节剂组合对愈伤组织诱导、和不定芽分化的影响；将具芽点分化的愈伤组织进行石蜡切片，并观察不定芽发生的显微结构。结果表明：1、地上部外植体的消毒方式为70%酒精浸泡30 s后0.1%升汞浸泡6 min效果较好；地下部分因受污染比较严重，消毒困难，死亡率为100%。2、地上部分的叶片和叶柄均能诱导出愈伤组织，且产生具香味的毛状根。适宜的愈伤组织诱导培养基为 MS 2,4-D 2mg/L 6-BA 0.5 mg/ L，其中以叶为外植体诱导率较高，可达80%，但愈伤组织在供试培养基中分化困难，最高分化率仅为25%，培养基为 MS 6-BA 4 mg/L NAA 0.5 mg/L；3.不定芽的发生起源于愈伤组织表皮细胞的分裂，属于外起源。     

重瓣东方百合Double surprise离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Double surprise的组培快繁技术,以其花瓣为初级外植体,以初级外植体诱导形成的无菌苗鳞片和叶片作为次级外植体,分别探讨了外植体诱导、不定芽增殖、组培苗生根以及炼苗移栽的较优条件。结果表明:花瓣诱导不定芽的较优培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,诱导率可达86.67%,诱导系数为2.73;MS+TDZ2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1为诱导无菌苗鳞片和叶片直接产生不定芽的较优培养基,不定芽诱导率分别为88.89%和91.11%,诱导系数分别为6.67和5.67;MS+PIC1.0mg·L-1+TDZ0.5mg·L-1为无菌苗鳞片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为90.00%和3.27;MS+PIC 1.0 mg·L-1+TDZ 0.1 mg·L-1为无菌苗叶片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为93.33%和3.70;较优的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1;不定芽生根的较优培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1;草炭∶蛭石∶珍珠岩(体积比)=1∶1∶1的混合基质为Double surprise较优移栽基质,成活率可达88%。     

秋水仙素浸泡法对黑果腺肋花楸多倍体的诱导及初步鉴定

以黑果腺肋花楸组培苗茎尖、叶片和继代愈伤组织为材料,探索秋水仙素不同浓度和不同处理时间对不同外植体诱导的愈伤组织的存活率、再生芽数、增殖系数和多倍体发生的影响;并对秋水仙素处理后不同外植体诱导产生的再生植株,经3次继代培养后生长30d的植株的染色体倍性进行镜检。结果表明:不同外植体的存活率和出芽率随秋水仙素浓度的增高和处理时间延长而降低;其中,黑果腺肋花楸愈伤组织的存活率高于茎尖和叶片。经秋水仙素处理后,3种外植体均能诱导多倍体发生;处理浓度和时间的增加有利于提高染色体加倍率,但外植体的死亡率随之增加。当愈伤组织在秋水仙素浓度为2 000mg/L,处理24h时,叶片愈伤组织增殖系数为2.4,存活率为52%。以植株矮化和茎秆粗壮为依据筛选的再生植株中鉴定出47株假定多倍体,但大多为混倍体(嵌合体)。叶片诱导的愈伤组织,经1 500mg/L秋水仙素浸泡处理24h后,诱导再生的生根植株中获得1株整株均一加倍的四倍体植株。     

萱草离体快繁技术试验研究

海盐县在萱草等宿根花卉的产业化开发中,用茎尖等器官作为外植体进行快繁,效果较好。在接种2~3周即可产生愈伤组织,3~4周后便形成不定芽。芽的诱导以6-BA浓度4 mg/L为最佳;增殖培养以MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L为好,其生长速度较快且苗较健壮;而根的诱导则以1/2 MS IAA 0.5 mg/L相对理想。幼苗移栽保持90%以上的湿度,注意通风,移栽成活率可达95%。     

长白落叶松愈伤组织诱导与不定芽分化

以长白落叶松成熟胚作为外植体进行消毒和不定芽诱导。研究结果表明:将去皮种子用流水冲洗3d,用70%酒精消毒1min,转入1%的次氯酸钠消毒50min后,再将剥出的胚放入0.5%的次氯酸钠中浸泡2s为最佳消毒方法;在光照条件下(约1600lx),BM培养基中填加1.0mg/LBA,愈伤组织与不定芽的诱导效果最好,愈伤组织诱导率达到100%,不定芽分化率为73.8%;在BM培养基中加入1%活性碳对不定芽有伸长作用。     

外植体预处理对胡桃楸成熟胚不定芽的诱导

以胡桃楸成熟胚为外植体,研究了外植体消毒及培养预处理(低温、暗培养)对胡桃楸不定芽诱导的影响。结果表明:外植体消毒处理中以紫外线直射5 min+0.1%HgCl_28 min处理效果好于其他处理,染菌率为13.45%,褐化率为22.78%。培养预处理中暗培养随着时间延长愈伤组织诱导率增加。低温处理是随着时间延长呈现抛物线形式,先升后降,低温14 d的愈伤组织诱导率最高,为42.71%。经过预处理后,在低温处理14 d的不定芽诱导率最高,为42.8%。随着种子贮存年限的延长,胡桃楸发芽率、愈伤组织诱导率、不定芽诱导率越低。     

甜叶菊愈伤组织诱导及不定芽的形成

通过建立甜叶菊愈伤组织培养体系,以甜叶菊种子萌发出的无菌苗为材料,以茎尖、叶片及茎段为外植体,采用正交试验设计,筛选适合愈伤组织诱导的最佳培养基.结果表明,3种外植体均能成功的诱导出愈伤组织,其中以叶片的诱导效果最佳,为诱导愈伤的最佳外植体;NAA浓度和GA3浓度对愈伤组织诱导的影响较大,最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+6- BA 2.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+ GA3 3.0 mg/L.试验的9种培养方案中,有7种培养方案有不定芽的产生,以茎尖为外植体的培养方案的不定芽诱导率最高,均达到65％以上.叶片诱导出的愈伤长势较好,但难以继续分化,茎尖形成不定芽数量最多,但不定芽长势不佳,不适合进行进一步培养.     

小盐芥下胚轴再生体系的建立

以小盐芥下胚轴为外植体,研究了不同激素与不同浓度组合对愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明,MS 6-BA 2,4-D组合能诱导出愈伤,诱导率为100%。MS 6-BA NAA组合既能诱导出愈伤又能分化不定芽,愈伤诱导率为100%,激素不同浓度不定芽分化率不同,最佳分化培养基为MS 2.5mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA,不定芽分化率为43%。生根培养基为1/2MS,生根率为74%。     

萱草花茎离体培养与快速繁殖

以17个萱草品种为试材,研究了基因型和激素对萱草花茎再生植株的影响.结果表明:不同激素种类及质量浓度对‘金娃娃’初代培养、继代培养和生根培养影响差异显著,最适初代培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.10 mg·L-1,花茎分枝处以上部分作为外植体愈伤组织诱导率和不定芽分化率分别为84.4％和92.1％;最适继代培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+IBA1.0 mg·L-1;最适生根培养基为1/2MS+IBA 3.0 mg·L-1.17种基因型萱草间愈伤组织诱导、不定芽分化和增殖能力存在显著差异.     

粉和平月季植株再生体系建立研究

以试管苗的幼嫩小叶为外植体,探讨了粉和平月季通过诱导愈伤组织建立植株再生体系的方法。结果表明:2,4-D能有效诱导无菌小叶产生愈伤组织,经5.0mg/L的2,4-D光下诱导愈伤20d后,愈伤组织诱导率最高可达91.11%,且其愈伤质量最优。将生长良好的愈伤组织转至TDZ浓度为0.5～2.0mg/L的MS培养基中发现,暗培养8～16d均能诱导愈伤组织产生不定芽,但暗培养时间超过16d愈伤组织容易褐化死亡。在含1.2mg/LTDZ的MS培养基上暗培养14d后其不定芽诱导率可达30%。将生长良好的不定芽转入壮苗培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L中培养25d左右,组培苗芽枝叶粗壮,生长旺盛;将长至2～3cm长的健壮小苗转入生根培养基,生根率最高仅为8%。     

萱草多倍体诱导及其鉴定

以萱草愈伤组织为试材进行了同源多倍体的诱导和鉴定研究。结果表明,采用浸泡法(用0.100%秋水仙素培养8 h)和混培法(用0.005%秋水仙素培养15 h)均可获得多倍体高诱导率,并成功地获得了四倍体萱草植株;用流式细胞仪进行萱草倍性鉴定,与根尖染色体鉴定结果一致;与二倍体萱草相比,四倍体植株矮小,茎基部较粗壮,叶片较宽,叶边呈不规则卷曲、褶皱,叶片气孔密度小,生长较缓慢,其染色体数(2n=4x=44)为二倍体植株的2倍(2n=2x=22)。结果建立了高效的萱草多倍体诱导体系。     

红阳猕猴桃快速繁殖体系的建立

以红阳猕猴桃(ACtinidia chinensis cv.Hongyang)茎段作为外植体进行愈伤组织诱导、不定芽分化和生根培养,建立高技的猕猴桃快速繁殖途径.结果表明,茎段极易产生愈伤组织,在MS+0.8 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA培养基中,愈伤组织诱导所需时间短、出愈率高,不定芽的出芽率高、生长健壮;以1/2 MS为基本培齐基,添加0.5 mg/L IBA对不定芽生根较为有利,生根率达到93.33％.     

唐菖蒲花茎愈伤植株再生途径的优化

研究了外植体不同生长阶段、激素种类和浓度对2个唐菖蒲品种愈伤组织诱导及不定芽再生的影响。结果表明,以Rose Supreme 5叶期和Advanced Red 7叶期的花茎为外植体较好,2个品种直接诱导愈伤组织及不定芽再生的最佳培养基为MS BA 2 mg/L IBA 0.4 mg/L,愈伤诱导率分别达到80.50%和87.78%,愈伤全部再生不定芽,平均再生芽数分别为14.2和13.0,培养周期仅为45 d左右。在生根培养基MS IBA0.5 mg/L上生根率分别达86.67%和92.44%,单苗根数为16.1和22.1,根势好,结球率均达90%以上。     

火龙果茎段组织培养快繁技术研究

以火龙果的幼嫩茎段为外植体进行组培快繁研究,结果表明,火龙果不同长度的茎段均能产生愈伤组织,茎上的不定芽大部分可以启动生长,其中,以3 cm长的幼嫩茎段诱导效果最佳,愈伤组织诱导率为100%;不定芽诱导培养基以MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.1 mg/L效果最好,诱导率可达75%;当6-BA质量浓度为8 mg/L和NAA质量浓度为0.05 mg/L时,不定芽的繁殖系数最高,当6-BA质量浓度为1 mg/L和NAA质量浓度为0.2 mg/L时,虽然不定芽的繁殖系数低,但其不定芽生长较快、苗壮,可以依生产的需要交替使用这2种培养基;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA2.0 mg/L。     

桃遗传转化再生体系的建立与优化

以桃不同胚龄胚为外植体,建立桃遗传转化再生体系.结果表明:花后50 d的胚均能诱导出愈伤组织,并可分化出不定芽.胚愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA0.25 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L的效果最好,平均诱导率可达99.8%.将胚愈伤组织接种在培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L上,愈伤组织转变为致密型,不定芽分化率为37.5%.将不定芽用100 mg/LIBA浸蘸其基部转移到不含激素的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率为82.0%.花后75d的成熟胚不定芽的直接诱导率达到96.1%.     

黄和平月季植株再生体系建立研究

以试管苗的幼嫩小叶为外植体,探讨了黄和平月季通过愈伤组织建立植株再生体系的方法.结果表明:2,4-D能有效诱导无菌小叶产生愈伤组织,经5.0 mg/L 2,4-D光下诱导20 d后,愈伤组织诱导率最高可达93.33%,且其愈伤质量优.将生长良好的愈伤组织转至TDZ 0.5～2.0 mg/L的MS培养基上,发现黑暗培养8～16 d均能诱导愈伤组织产生不定芽,但暗培养时间为16 d时,愈伤组织容易褐化死亡.在含1.2 mg/L TDZ的MS培养基上黑暗培养12 d后其不定芽诱导率可达87.33%,而光下培养时愈伤组织有生根现象,未能产生不定芽.