“千吨级甘蓝夜蛾核型多角体病毒制剂高技术产业化”项目启动

<正>1月6日,由中科院武汉病毒研究所提供核心技术的国家发改委绿色农用生物产品高技术产业化专项项目——"千吨级甘蓝夜蛾核型多角体病毒制剂高技术产业化"在江西省     

甘兰夜蛾核型多角体82—17病毒株对裸鼠感染性的研究

甘兰夜蛾核型多角体NPV82—17病毒株,经腹腔、静脉、口服感染裸鼠.被感染裸鼠9—37天的脏器经电镜观察,其肝、脾的枯否细胞和网状细胞的胞浆内都存有1至数个多角体.另将其脏器悬液回接靶昆虫棉铃虫,腹腔和静脉感染率为83—100%,口服感染率为7—77%.     

斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒的巢式PCR检测

旨在建立一种快速、可靠的斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒(Spodoptera litura Nucleopolyhedrovirus, SpltNPV)的分子检测方法,以克服目前常规PCR技术很难检测到斜纹夜蛾成虫带病毒的缺陷。以SpltNPV的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyltransferase,egt)基因为检测对象,基于该基因序列设计了巢式PCR引物,其中一对外侧引物egt-F/R和一对内侧引物egt1-F/R,并研究斜纹夜蛾成虫带毒的巢式PCR检测可靠性。结果表明：基于egt基因的巢式PCR方法可以特异性扩增SpltNPV的DNA,引物egt-F/R的扩增检测最低限为10-7μg/μL;且基于引物egt-F/R的两轮普通PCR无法检测出成虫带毒,而采用巢式PCR方法可有效扩增出目的egt片段,巢式PCR检测方法的灵敏度比两轮普通PCR检测方法提高2个数量级。因此,本研究成功建立了基于SpltNPV的egt基因的巢式PCR检测技术,该方法为斜纹夜蛾成虫带毒、传毒等流行病学研究提供了可靠的技术支撑。     

豆天蛾核型多角体病毒病的研究

从豆天蛾的幼虫中分离到一株核型多体病毒，其多角体的平面图象多为六边形和近圆形，直径０．６－２．０μｍ，病毒粒子杆状，两端圆滑，大小约５０ｎｍ×３２０ｎｍ．室内和田间试验表明，该株病毒对豆天蛾幼虫有比较强的致病力，对三龄幼虫的致死中浓度（ＬＣ５０）为１．４×１０＾４．８个多角体／ｍｌ，ｙ＝３．２４＋０．５４ｘ。田间防效效果可达７０％左右，与苏云金杆菌制剂或其他害虫病毒制剂混用，防治效果达９０×以上，     

山楂粉蝶核型多角体病毒研究

1984、1985年的试验结果,明确了温度、紫外光、日光及缓冲液pH值等几种物理因素对山楂粉蝶核型多角体病毒Acr NPV感染力的影响.Acr NPV分别在40℃冰箱中保存14个月、28个月和在果园树干上保留14个月的Acr NPV虫尸,对幼虫的感染力无明显变化.Acr NPV存32℃恒温处理后,其感染力随时间延长而逐渐下降.紫外光对Acr NPV杀伤力较大,当紫外光照射240分钟后,Acr NPV完全丧失了对幼虫的感染力.果园试验表明Acr NPV悬液喷在果树叶正面和背面时,对幼虫的感染力有差异.Acr NPV对幼虫的感染力和磷酸缓冲液的PH值有关,当pH值为3.5或10.5时,感病幼虫发病慢,当pH值为7.2时,幼虫发病快.     

落叶松尺蠖核型多角体病毒毒力的生物测定

落叶松尺蠖核型多角体病毒感染落叶松尺蠖幼虫死亡的回归直线方程为Y=1.9621+0.5056x,LD_(50)=10~(6.01);在一定时间内幼虫死亡率随感染日期的增加而提高;LT_(50)随感染浓度的增加而减少;EaNPV的毒力随着保存时间延长而逐渐降低,存放24个月的病毒较保存11月的病毒毒力降低36.5—58.5%;日光照射病毒被灭活的程度随阳光照射时间的增加而增加;存留在松树干上一年的EaNPV仍保留有一定的活性,与保存于冰箱中的病毒比较,其毒力降低63.2%;EaNPV致病死亡的2、3、4、5龄的落叶松尺蠖幼虫及蛹的多角体含量平均分别为每头虫0.966亿,2.675亿,5.335亿,6—15亿及1.766亿;用EaNPV1×10~7PIB/ml与1×10~8PIB/ml感染菜青虫、粘虫、玉米螟、棉大卷叶螟、杨枯叶蛾和柳毒蛾幼虫,均不引起幼虫发病.     

棉铃虫核型多角体和质型多角体在宿主昆虫继代后的毒力分析与比较

以３龄健康棉铃虫幼虫为供试昆虫，测定棉铃虫核型多角体和质型多角体在幼虫体内分别连续继代后的毒力变化。就质型多角体而言，不论是病毒的致死剂量（ＬＤ）还是致死时间（ＬＴ）均随着继代次数的增加而升高，继代１０次后的病毒致死活性平均丧失５９．３％，与未经继代的病毒相比．ＬＤ＿（５０）增加１０３倍，ＬＴ＿（５０）平均延长４．４３５ｄ；而核型多角体在继代过程中的毒力未见显著变化，提示核型多角体与质型多角体在宿主昆虫内连续继代的遗传学行为有可能不同。     

田间害虫的“王牌杀手”——甜菜夜蛾多角体病毒杀虫剂

<正>由中国科学院研制的科云牌"甜菜夜蛾多角体病毒杀虫剂(下称甜菜夜蛾)",用药后田间几乎"无活虫、无毒害、无抗性",为国内杀虫剂竖起了一面不倒的旗帜。甜菜夜蛾通过提高病毒含量,加快病毒升级,克服了生物农药死虫慢、抗性快的不足。凭着药效持久、杀虫彻底、长