旋毛虫基因重组抗原对小鼠的免疫保护试验

分别用５μｇ和１５μｇ的旋毛虫基因重组抗原对小鼠进行腹腔注射免疫，结果于免疫后第４周小鼠体内的抗体效价明显上升，至第７周达到高峰，当每只鼠用９０条旋毛虫肌幼虫口服攻击后，抗体效价稍有下降，但到攻虫后的第５周基本回升至攻击前水平。     

猪免疫旋毛虫抗原和感染后的抗体应答

为了明确猪在免疫旋毛虫抗原和感染旋毛虫肌幼虫后的抗体应答反应,应用 ELISA 法,肌幼虫凝胶层析纯化抗原、新生幼虫和成虫可溶性抗原,对用肌幼虫可溶性抗原、肌幼虫 ES 抗原、成虫可溶性抗原、成虫 ES 抗原、灭活新生幼虫抗原制备的免疫原免疫后猪血清抗体以及攻击感染后的猪血清抗体进行了检测。用肌幼虫纯化抗原检测时,感染猪在感染后7d 抗体即出现变化,第14～21d 时上升较快,第28d 达最高值,抗体可持续6个月以上;各免疫组在第1次免疫后抗体滴度有不同程度升高,第2次免疫后上升较快,其中肌幼虫可溶性抗原及其 ES 抗原免疫组抗体应答较其它几种抗原免疫组强。用成虫可溶性抗原检     

猪旋毛虫的检验与处理

旋毛虫病是由旋毛虫寄生而引起的重要的人兽共患病。在自然条件下动物可感染本病。人主要是摄食生的或没煮熟的含有旋毛虫包囊的肉类而感染本病，严重的可以致死。旋毛虫是永久性寄生虫，同一动物既是终宿主又是中间宿主。２０多年前国内外很多地区、城市曾有发生，个别地...     

哈尔滨地区猪、狗旋毛虫低温耐受性研究

对自然感染的猪、狗旋毛虫肉进行室内和室外冷冻实验。结果表明,狗旋毛虫较耐低温,-32±0.5℃,6～8天失去对小鼠的感染力;-22±1℃,6～9个月,-15±1℃,9个月仍有感染力。冬天室外自然冷冻不能使狗旋毛虫灭活。猪旋毛虫不耐低温,-32±0.5℃,26～36h;-22±1℃,4天;-15±1℃,9天即失去对小鼠的感染力。冬天室外自然冷冻可使猪旋毛虫灭活。     

猪旋毛虫与猪囊虫的防治

一、切断源头1.改变饲养方式。据调查,放牧饲养的地区发病率较高,而圈养的地区发病率较低。因此改善猪的饲养环境卫生,经常保持猪舍清洁,禁止猪与人的大便接触,将传统的放养方式改为圈养(特别是山区),做到圈与人厕分离,才能有效控制猪旋毛虫和猪囊虫的发病率。2.生熟肉分离。虽     

用数学预测方法研究旋毛虫成虫寄生寿命

传统的旋毛虫实验方法主要是通过接种肌旋毛虫蚴包囊给大量小鼠,定期解剖检获肠旋毛虫成虫计数来测算旋毛虫成虫在宿主体内的存活时间(即寄生寿命)及动态消长情况。这种研究方法费时、工作量大,也不经济.现采用数学方法较成功地预测旋毛虫成虫寄生寿命,收到事半功倍的效果.传统实验方法:人工感染肌旋毛虫540条给实验小鼠(总数60只),定期剖杀,用玻片刮取小肠的粘膜     

旋毛虫排泄-分泌抗原的制备及在免疫学诊断中的应用研究

目的:将排泄-分泌抗原用于Dot-ELISA免疫学诊断试验,检测其抗原特异性和敏感性。方法经培养24h、48h、72 h排泄-分泌抗原ES1、ES2、ES3,对38头份猪旋毛虫病阳性猪血清、98头猪旋毛虫阴性血清、26头猪囊虫阳性血清、35头猪蛔虫阳性血清和21头猪细颈囊尾蚴阳性血清进行了Dt-ELISA免疫学方法检测并于粗抗原进行比较。结果排泄-分泌抗原的特异性为ES1(99.44%)、ES2(96.11%)、ES3(92.77%),敏感性ES1(97.36%)、ES2(92.11%)、ES3(84.21%)。结论排泄-分泌抗原ES1(培养24小时)抗原特异性强,敏感性高,重复性好,用于旋毛虫病的免疫诊断有重要作用。     

用猪囊尾蚴分段抗原对猪囊虫病生前的快速诊断

本试验采用硫酸铵分段沉淀法,将猪囊尾蚴的蛋白质分离为:粗抗原、p25、p25—55、p55—80、s80等五种抗原、采用平板凝集、试管凝集、琼脂扩散等方法,分别进行试验和分析,其结果以p25—55抗原效果为佳,对猪囊尾蚴病的生前诊断具有实用价值。     

哈尔滨地区猪、犬旋毛虫同工酶电泳比较的研究

通过对猪、犬旋毛虫同工酶酶谱的研究发现，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）不能区别猪、犬被毛虫，而葡萄糖磷酸异构酶（ＧＰＩ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、苹果酸酶（ＭＥ）和磷酸葡萄糖转位酶（ＰＧＭ）可将猪、犬旋毛虫区分开来．猪、犬旋毛虫之间同工酶相似系数（Ｃ．Ｓ．）为２６．１％．试验结果揭示，哈尔滨地区的猪旋毛虫相当于旋毛形线虫（Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ），而犬旋毛虫相当于本地毛形线虫（试泽）（Ｔ．ｎａｔｉｖａ）．     

旋毛虫28S rRNA基因片段的克隆及其在分类学上的应用

为了探讨所采集旋毛虫的分类,利用PCR方法克隆了猪旋毛虫黑龙江隔离种核糖体28S rRNA序列的基因片段.序列分析结果表明,猪旋毛虫黑龙江隔离种与旋毛形线虫(Trichinella spiralis,T1)的进化关系较近,确定为旋毛形线虫(Trichinella spiralis).结果与传统的分类结果基本一致,为传统...     

旋毛虫肌幼虫强反应原性抗原基因的筛选及生物学特性分析

应用感染旋毛虫60 d猪血清为抗体探针,对旋毛虫肌幼虫cDNA文库进行免疫筛选,获得旋毛虫肌幼虫期强反应原性抗原基因,利用生物学信息网站(NCBI、BLAST等)及其相关软件(DNA star等)对获得的基因进行序列分析。结果表明:筛选约2.5×105个重组噬菌体,获得13个阳性克隆,有6个克隆为同一个基因,编码蛋白与染色体结构维持蛋白(SMC蛋白,structural maintenance of chromosome proteins)同源性为48.1%,在免疫筛选中均有较强的反应信号;有3个克隆为同一个已知基因(AAF63473),编码蛋白与丝氨酸蛋白酶抑制因子(Serine protease inhibitor)同源性为99%,在免疫筛选中反应信号次之;还有2个为同一个基因,与旋毛虫线粒体(Mitochondrion ofTrichinella spiralis)DNA有较高的同源性(同源性为87.7%),编码核糖体大亚基RNA,其他2个为未曾报道过的新基因,编码不同的未知蛋白,这4个克隆在免疫筛选过程中反应信号相对较弱。得到的2个强反应原性的旋毛虫肌幼虫cDNA分子,其中相对信号最强cDNA分子编码SMC蛋白,另一个编码丝氨酸蛋白酶抑制因子,二者有望用于旋毛虫病的诊断候选抗原基因。     

旋毛虫肌幼虫总RNA提取方法研究初报

【研究目的】探索高质量的旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫总RNA提取方法;【方法】利用Trizol试剂采用三种方法提取旋毛虫肌幼虫总RNA。(1)液氮预冷的研钵中研磨新鲜虫体至样品快融化时,加入适量的Trizol,继续研磨至液状后转移到离心管中;(2)A将新分离的虫体放到-20℃预冷的研钵中,在研磨过程中不断地添加液氮以保持虫体冷冻,之后对冷冻状的样品粉末继续操作;B把液氮冻存的新鲜旋毛虫肌幼虫取出,放到-20℃预冷的研钵中重复A的操作;(3)新鲜虫体放入匀浆器中,加适量Trizol,在冰水混合物中研磨20分钟。虫体破碎后按Trizol说明书继续抽提。最后通过凝胶电泳和紫外吸收光度值检测。【结果】用液氮和Trizol结合的方法,使用新鲜样品提取旋毛虫肌幼虫总RNA,在纯度和得率上都较为理想;【结论】使用新鲜的样品,且液氮与裂解液结合,是获得高质量RNA的可行方法。     

旋毛虫T626-55基因减毒沙门氏菌疫苗的构建及其在小鼠体内表达

采用PCR方法扩增旋毛虫强反应原性基因T626-55,与真核表达载体pcDNA3.1相连,构建携带编码旋毛虫T626-55基因真核表达质粒的沙门氏菌,将构建好的重组质粒T626-55-pcDNA3.1通过电穿孔转化入沙门菌中.小鼠口服免疫该重组沙门菌,5d后通过反转录PCR (RT- PCR)和间接免疫荧光(IFA)检...     

不同猪瘟疫苗对仔猪的免疫效果

选择24头断奶仔猪,随机分成4组,每组6头,其中1组猪瘟细胞苗(A苗)按5和10 mL的剂量进行注射,其他3组猪瘟脾淋苗(依次为B、C、D苗)均按1和2 mL的剂量进行注射。在免疫15 d后,分别采血、分离血清、按照猪瘟正向间接血凝试剂盒使用说明方法检测猪瘟抗体水平。检测结果显示,A苗、B苗、C苗、D苗检出的平均抗体水平与未注射之前的平均抗体水平之比分别为1∶51、1∶91、1∶114、1∶161。统计分析表明,猪瘟脾淋苗免疫效果最好,而猪瘟细胞苗和脾淋苗两者抗体水平差异不显著,但总体上使用4种疫苗免疫15 d后都能使仔猪获得良好的保护力。     

间歇光照对肉仔鸡免疫器官和部分免疫指标的影响

[目的]探讨间歇光照对肉鸡免疫机能的影响。[方法]选取1日龄健康的240羽AA＋肉仔鸡,随机分为对照组（C）、光照1组（L1）和光照2组（L2）,于7～30 d期间对3个试验组分别采取24L∶0D、22L∶2D和20L∶4D的间歇光照措施,30 d后均恢复为连续光照,并于14、21、28、35、42 d观测各试验组肉仔鸡血液中免疫参数的变化,于14、28、35、42 d测定各组的免疫器官指数。[结果]在14～42 d观测期间,间歇光照L1和L2组可提高肉仔鸡的总蛋白和白蛋白水平及脾脏和法氏囊指数,但仅L2组的白蛋白于21和35 d极显著高于C组（P〈0.01）,其余各指标值与C组间均无显著差异（P〉0.05）。L1和L2组的球蛋白值和ND效价与C组间均无显著差异（P〉0.05）。[结论]采用22L∶2D和20L∶4D的间歇光照措施对肉仔鸡的免疫功能具有一定的促进作用。     

有机锗对雏鸡免疫器官发育的影响

本试验通过对给父母代蛋鸡饲喂在定剂量Ｇｅ－１３２,获取富锗种蛋并孵化出雏鸡,取１８０只富锗雏鸡和１３５只普通雏鸡随机分成４组和２组,采取饲料中添加Ｇｅ－１３２和ＭＤ疫苗接种处理。     

黄芪多糖油乳佐剂新城疫灭活苗对鸡免疫功能的影响

将黄芪多糖(APS)添加到鸡新城疫油乳剂疫苗中作为免疫佐剂,分别用盐酸左旋咪唑、黄芪多糖粉剂、黄芪多糖针剂和黄芪多糖免疫佐剂等与鸡新城疫油乳剂疫苗同时使用,探讨黄芪多糖免疫佐剂对鸡免疫功能的影响。结果表明,免疫佐剂均提高了疫苗的免疫力,其中,与疫苗混合后作为免疫佐剂使用的黄芪多糖可明显促进抗体产生,提高脾和法氏囊指数以及E-玫瑰花环形成率。     

免疫增强药物对三黄鸡生产性能及免疫效果的影响

[目的]比较多种免疫增强药物对三黄鸡雏鸡的生长效能及免疫效果的影响,为临床用药提供参考。[方法]选取2400只1日龄健康三黄鸡雏鸡,随机分为4组。除对照组外,其余各组免疫前后5d分别用黄芪多糖、优乐舒和多康饮水。用血凝抑制试验（HI）测鸡血清新城疫和禽流感抗体效价,并对全群称重,记录采食情况。试验结束时每组随机抽取6只鸡,空腹称重后,放血致死,取出脾、法氏囊和胸腺称重,计算免疫器官指数。[结果]各组生产指标无显著差异。黄芪多糖组分别与优乐舒组和对照组的法氏囊指数差异极显著（P〈0.01）;各组胸腺指数无明显差异;多康组分别与黄芪多糖组和对照组的脾脏指数差异显著（P〈0.05）。ND抗体效价：7d时,黄芪多糖组与对照组抗体滴度差异极显著（P〈0.01）,35d时,差异显著（P〈0.05）;28d时,优乐舒组与对照组抗体滴度差异显著（P〈0.05）。H9抗体效价在28d时,多康组分别与黄芪多糖组、对照组抗体滴度差异显著（P〈0.05）。H5抗体效价在28d时,黄芪多糖组与对照组抗体滴度差异显著（P〈0.05）。[结论]3种免疫增强药物可明显促进肉鸡生长性能、免疫器官发育和维持抗体水平。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒对猪免疫力的影响研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)对全世界养猪业而言是一种致命的病毒性疾病。它是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重的临床疾病,并且保持终身隐性感染的能力。PRRS也使我国养猪业遭受了巨大的损失,近年来尤其是高致病蓝耳病毒的出现,已严重影响我国生猪养殖业的健康发展。对猪繁殖与呼吸综合征的免疫作用机制及防制措施进行了综述,旨在为其今后的防制提供新的思路与方案。