Ghrelin对绵羊早期体外胚胎发育调节机制的初步研究

【目的】探讨Ghrelin对绵羊早期胚胎发育的调节机制。【方法】将绵羊体外受精早期胚胎在Ghrelin组(300,1 000,10 000ng/mL)、Ghrelin受体拮抗剂D-Lys3-GHRP-6组(10,200,400ng/mL)、D-Lys3-GHRP-6+Ghrelin组(D-Lys3-GHRP-6 400ng/mL,Ghrelin 300,1 000和2 000ng/mL)、空白对照(不加D-Lys3-GHRP-6和Ghrelin)4个组别的胚胎发育液中进行发育培养,采用荧光定量PCR技术分别对各处理不同发育阶段(2-细胞期、4-细胞期、8-细胞期和16-细胞期)绵羊早期胚胎中ERK1、ERK2、P90rsk、Bcl-2、Bax mRNA的表达情况进行检测。【结果】与空白对照组相比,在添加Ghrelin组ERK1、ERK2、P90rsk、Bcl-2基因mRNA的表达表现为显著性上调(P0.05),且这种上调作用可被D-Lys3-GHRP-6所拮抗;在添加Ghrelin组Bax基因mRNA的表达无显著性变化,但在D-Lys3-GHRP-6组Bax基因mRNA的表达表现为显著性上调(P0.05)。【结论】Ghrelin可级联激活MAPK信号通路,抑制促凋亡基因Bax的表达、促进抗凋亡基因Bcl-2的表达,进而促进绵羊早期胚胎的发育。     

蒙古绵羊早期胚胎心脏的组织发生

蒙古绵羊早期胚胎的血岛是心管及血管组织发生的原基。交配后１２－１３日龄，在胚盘两侧的胚内中胚层内，首先发生血岛，进而扩展到原肠及尿囊的脏层。在１６－１８日龄，前肠腹面的心管，由单管状变形成Ｕ了袢，进而扭转成Ｙ字形。因心管中段的收缩，出现心房，心室及动脉球三个膨大。２０－３０日龄，胚长４－１５ｍｍ，在房室管内，发生前后对称的心内膜垫，将房室管分隔成左及右房室口。     

蒙古绵羊早期胚胎动脉系统的组织发生

蒙古绵羊胚胎发育到１７ｄ１７ｈ第Ｉ对鳃弓动脉发生，到２１日龄第Ⅱ～Ⅳ对鳃弓动脉相继发生，其中第Ｉ，Ⅱ及Ⅴ对鳃弓动脉又退化，仅第Ⅲ，Ⅳ及Ⅵ对鳃弓动脉发育成永久性动脉。从２１－２４日龄，动脉干内的干嵴发生并吻合，因此动脉干被分隔成主动脉及肺动脉，在此同时，动脉球内的球也吻合分隔成两个通道与上述动脉相通。胚胎的肺芽开始发生于２０日龄，到２２日龄肺动脉已向肺芽分出分支，到２４日龄肺静脉已从肺芽伸入左心房，     

蒙古绵羊早期胚胎心脏的组织发生

蒙古绵羊早期胚胎的血岛是心管及血管组织发生的原基。交配后１２～１３日龄,在胚盘两侧的胚内中胚层内,首先发生血岛,进而扩展到原肠及尿囊的脏层。在１６～１８日龄,前肠腹面的心管,由单管状变形成Ｕ字袢,进而扭转成字形。因心管中段的收缩,出现心房、心室及动脉球三个膨大。２０～３０日龄,胚长４～１５ｍｍ,在房室管内,发生前后对称的心内膜垫,将房室管分隔成左及右房室口。由于心房内,第Ⅰ第Ⅱ房间隔发生,将心房分隔成左及右心房。再由于心室内室间隔的发生,将心室分隔成左及右心室。心管传导系统的窦房结,在１６～１８日龄,发生于静脉窦右侧心外膜下,此时心管的窦房部开始搏动。本文发现,在２１～２２日龄,胚长６～８ｍｍ时,静脉窦右侧心外膜下的窦房结细胞团散在。在房间隔壁内与心内膜垫相接处,房室结的细胞团群居。还发现,绵羊胚胎的心软骨原基,发生于３０日龄,胚长１５ｍｍ时,心软骨原基位于主动脉半月瓣外围水平上与肺动脉之间。     

冷冻保护剂种类和胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎移植受胎率的影响

对冷冻保护剂种类和胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎受胎率的影响进行了研究。结果表明:分别以乙二醇、甘油为冷冻保护剂冷冻保存绵羊囊胚,解冻后移植受胎率差异不显著,表明冷冻保护剂种类对绵羊冷冻胚胎移植受胎率未有明显影响;以乙二醇为冷冻保护剂,冷冻绵羊不同发育阶段的胚胎,囊胚、扩张囊胚解冻后移植受胎率均明显高于桑椹胚的,囊胚和扩张囊胚之间差异不显著,表明胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎移植受胎率有显著影响。     

蒙古绵羊早期胚胎动脉系统的组织发生

蒙古绵羊胚胎发育到１７ｄ１７ｈ 第Ⅰ对鳃弓动脉发生，到２１ 日龄第Ⅱ～Ⅵ对鳃弓动脉相继发生，其中第Ⅰ、Ⅱ及Ⅴ对鳃弓动脉又退化，仅第Ⅲ、Ⅳ及Ⅵ对鳃弓动脉发育成永久性动脉。从２１ ～２４ 日龄，动脉干内的干嵴发生并吻合，因此动脉干被分隔成主动脉及肺动脉。在此同时，动脉球内的球嵴也吻合分隔成两个通道与上述动脉相通。胚胎的肺芽开始发生于２０ 日龄，到２２ 日龄肺动脉已向肺芽发出分支，到２４ 日龄肺静脉已从肺芽伸入左心房。从１８ ～２０ 日龄，第Ⅲ对鳃弓动脉背段分化成颈内动脉，腹段分化成颈外动脉。从２０ ～２１ 日龄，锁骨下动脉从两侧对称的背主动脉发生，随着右侧背主动脉退化，右臂头动脉前移与左锁骨下动脉合并成臂头动脉总干。从１３ ～２４ 日龄，肠系膜前动脉、腹腔动脉和肠系膜后动脉相继发生。胚胎发育到２０ ～２４ 日龄，背主动脉后端中央发生中荐动脉，两侧分出脐动脉分布于尿囊，在脐动脉根部发出髂外动脉分布于后肢芽。     

p66Shc对绵羊早期胚胎发育的影响

[目的]探讨p66Shc对绵羊早期胚胎发育的影响.[方法]以受精后28 h为节点,将早期胚胎分为早卵裂胚胎和晚卵裂胚胎,观察不同时期卵裂胚胎的进一步发育情况,同时通过实时荧光定量PCR检测不同来源的4-8细胞阶段胚胎中p66Shc基因的表达水平;利用siRNA分子干扰技术将特异性siRNA分子通过显微注射到绵羊合子细胞质中,以敲减早期胚胎p66Shc基因;通过免疫荧光技术检测p66Shc基因对绵羊早期胚胎发育过程中活性氧(ROS)和氧化应激标记物(8-OHdG)表达的影响.[结果]早卵裂胚胎的囊胚发育率显著高于晚卵裂胚胎(P<0.05);晚卵裂胚胎中p66Shc mRNA表达水平显著高于早卵裂胚胎(P<0.05);将绵羊早期胚胎中的p66Shc基因敲减后,与对照组相比,其胚胎内p66Shc mRNA水平、p66Shc蛋白水平显著降低,ROS和8-OHdG水平显著低于对照组(P<0.05);基因敲减后桑椹胚发育率显著升高(P<0.05).[结论]低水平的p66shc可以提高绵羊早期胚胎对氧化应激的抵抗力,并进一步提高其发育能力.     

蒙古绵羊早期胚胎静脉系统的组织发生

蒙古绵羊胚胎发育到１７ｄ、１７ｈ,心房两侧有３对静脉原基发生,包括总主静脉,脐静脉及脐肠系膜静脉。胚胎发育到３０ｄ龄,左总主静脉右移分化成冠状静脉。右总主静脉则分化成前腔静脉。３０ｄ龄以后,左及右前主静脉间发生吻合,称左臂头静脉。左及右臂头静脉合并后汇总于前腔静脉。胚胎发育到２９ｄ龄,后主静脉前段及中段退化,后段分化成总髂静脉。脐肠系膜静脉发生于卵黄静脉。胚胎发育到２０～３０ｄ龄,在中肾的腹内侧发     

蒙古绵羊胚胎大肠黏膜上皮的组织发生

[目的]研究蒙古绵羊胚胎大肠黏膜上皮的组织发生。[方法]利用组织学常规方法。[结果]蒙古绵羊胚胎大肠黏膜上皮的发育经历了单层细胞到复层细胞再到单层细胞的过程;杯状细胞在37 mm胚初见;90 mm胚直肠腺开始发育,142 mm胚盲肠、结肠肠腺开始发育。[结论]蒙古绵羊胚胎大肠黏膜上皮经历了单层细胞到复层细胞再到单层细胞的发育过程。     

引进肉羊胚胎移植技术应用的研究

利用胚胎移植技术对引进优质肉羊品种进行快速繁育,是加速育种进程与迅速提高我国绵羊肉用品质的捷径。本次非繁殖季节胚胎移植平均每只供体羊冲出可用胚4.8枚,最高为21枚,鲜胚移植妊娠率86.67%,总体达国内领先水平。     

SCMC调控早期胚胎发育机制的研究进展

在卵母细胞中贮存的大量RNA和蛋白对于后续早期胚胎的发育起着至关重要的作用,尤其是母源效应因子复合体(Subcortical maternal complex),简称(SCMC).对SCMC的研究历程、结构与功能研究方向进行了综述,以期对有关母源效应复合体对于早期胚胎发育调控的研究领域提供借鉴.     

季节对山羊胚胎移植中卵巢及胚胎发育的影响

[目的]探究季节对山羊胚胎移植的影响。[方法]以波尔山羊与槐山羊、豫西白山羊的杂交后代为试验材料做胚胎移植试验,研究相同的处理方案、季节对卵巢及胚胎发育的影响。[结果]卵巢发育以繁殖季节为好,全部为良等级以上,其中好等级占66.7%,非繁殖季节没有好等级,只有良、一般等级;繁殖季节超排的卵泡基本都已排卵,达到84.2%以上,非繁殖季节超排的卵泡数量虽不少,但是排卵形成黄体的少,仅有33.3%;繁殖季节里冲出的胚胎发育到了桑椹胚至早期囊胚阶段,非繁殖季节冲出的胚胎发育到了8~16细胞期。[结论]山羊胚胎移植存在季节性因素的影响,相同的处理方案下,繁殖季节与非繁殖季节超排后卵巢发育存在差异,胚胎发育程度也存在差异。     

蒙古绵羊早期胚胎的消化及呼吸器官的发生

蒙古绵羊胚胎的原肠、消化及呼吸器官,内分泌腺的原基,发生在交配后的8～30d。胚胎发育到20～21d,胚长4～6mm;到22～23d,胚长7～9mm;到24～30d,胚长10～15mm。交配后8d12h,胚胎原肠呈球形,16d14h,原肠发育成管状,分前肠、中肠及后肠。胚长4～14mm,头侧5对鳃弓逐渐退化,口膜破裂与前肠相通,上下颌及舌已形成。感官及主要内分泌腺的原基也已发生。食道呈管状,胃芽由棱形变成椭圆形。分化出三室,背系膜中有脾芽发生。胚长4～5mm 时,前中后肠呈直管状,到6～9mm,肠襻似“V”字形;胚长10～15mm 时,“V”形肠襻以背系膜为中轴,顺时针旋转180°。胚胎发育到20d,前肠腹面的内胚层发生出1个肝憩室,到22d,肝芽内细胞索交织成网,其中形成静脉导管。到交配后30d,总胆管通向降肠起端。背胰芽发生于前肠背面的内胚层,腹胰芽发生于胆囊管后方的前肠腹面,腹胰芽从前肠右侧伸向背胰芽,合并为胰腺原基。从4mm 长胚胎开始,咽底面发生喉气管沟,进而形成喉气管芽,到胚长15mm,气管芽依次分支形成肺芽原基。     

葡萄糖溶液对斑马鱼胚胎发育的影响

[目的]探讨适当浓度葡萄糖对斑马鱼胚胎发育产生的影响。[方法]将斑马鱼早期胚胎分别培养于不同浓度的葡萄糖溶液中,观察环境对斑马鱼胚胎发育的影响。[结果]适当浓度的葡萄糖能明显加快斑马鱼胚胎的发育速度、缩短孵化时间,特别是1．5％葡萄糖能使孵化时间明显缩短,且孵化后的仔鱼发育状态良好。[结论]适当浓度的葡萄糖溶液能够明显促进斑马鱼胚胎的发育。     

豫西脂尾羊排卵规律及胚胎生长发育规律的研究

豫西脂尾羊以单侧卵巢排卵为主，单侧卵巢排卵母羊百分比为98．18％，其中左侧为34．35％，右侧为63．64％。右侧卵巢排卵母羊数极显著多于左侧卵巢排卵的母羊数（P＜0．01）。总排卵率及排单卵、双卵和三卵的百分率分别为110．91％、90．91％、7．27％和1．82％。其胚胎长度增长以胎儿中期生长速度最快，而体重增长自进入胎儿中期以后一直比较旺盛。研究结果表明，豫西脂尾羊产羔率低的直接原因是排卵率低，主要是排双卵和三卵的比例低。根据豫西脂尾羊排卵及胚胎生长发育特点，就如何提高其繁殖率问题提出了具体建议和措施。     

无角道塞特羊胚胎移植技术研究

(1)超排处理无角道塞特绵羊163只,育成羊(76只)只均回收胚胎5.53枚,可用胚3.91枚,经产母羊(87只)只均回收胚胎7.55枚,可用胚6.34枚。经产羊平均回收胚胎总数高于育成羊(P<0.05)。春季和秋季之间超排效果差异不明显。重复超排羊和非重复超排羊之间平均回收胚胎总数和可用胚胎数差异均不显著(P>0.05)。(2)共处理受体876只,春季和秋季受体的同期发情率分别为56.37%和89.02%,发情受体利用率分别为84.67%和88.77%。(3)移植受体545只,妊娠318只,产羔396只,受体移植妊娠率为58.35%,移植胚胎成羔率为57.47%,在移植受体中,小尾寒羊的妊娠率最高为61.2%,同羊和内蒙细毛羊分别为54.62%和56.58%,受体品种之间移植妊娠率差异不显著(P>0.05)。受体黄体数对移植妊娠率及胚胎成羔率有一定的影响。胚胎的发育阶段对移植妊娠率也有影响,移植囊胚受体妊娠率最高为64.76%,明显高于早期桑椹胚移植妊娠率42.86%(P<0.05)。胚胎成羔率从桑椹胚到囊胚差异不显著(P>0.05)。     

蒙古绵羊胚胎胃肌间神经丛的发生

[目的]研究绵羊胚胎胃肌间神经丛的发生。[方法]运用组织学方法,对蒙古绵羊5~550 mm胚胎胃肌间神经丛的发生进行研究。[结果]32 mm胚胎,可观察到胃肌间神经丛组成细胞与周围的间充质细胞相似;164 mm胚的胃肌间神经丛神经元细胞体与32 mm胚比较,增大了近1倍,分化更明显;发育到550 mm胚时,神经元显现出特有的形态。[结论]胚胎发育至550 mm时,神经元的形态已近成熟。