凡纳滨对虾生长性状遗传参数的估计

采用平衡巢式设计方法和人工授精技术,每个雄体配3个雌体,构建了18个父系半同胞家系和54个母系全同胞家系.分别测定了每个母系生长到5月龄60个全同胞个体的体质量、全长、体长、头胸甲长、头胸甲宽、头胸甲高、第一腹节背高、第三腹节背高和第一腹节背宽9个生长性状,应用数量遗传学原理,采用方差和协方差分析的方法,估算了5月龄凡纳滨对虾生长性状的遗传力及各性状间的遗传相关及表型相关.结果表明,利用父系半同胞组内相关法估计的遗传力是凡纳滨对虾各生长性状遗传力的无偏估计值.其中,体质量、全长、体长、头胸甲长、头胸甲宽、头胸甲高、第一腹节背高、第三腹节背高和第一腹节背宽狭义遗传力的估计值分别为0.460、0.392、0.303、0.234、0.251、0.330、0.282、0.321和0.356,属于中高等遗传力范围,显示出较高的选择育种潜力.基于父系半同胞遗传协方差组分及表型协方差分别估计的各性状间的遗传相关及表型相关表明,各个性状间均表现出高的正相关,其中遗传相关在0.750 ～0.976,体质量—全长的遗传相关为最大(0.976),全长—第三腹节背高的遗传相关为最小(0.750),表型相关为0.507～0.947,体质量—全长为最大(0.947),第一腹节背高—头胸甲高为最小(0.507).经t检验,各性状间遗传相关及表型相关均达到极显著水平,表明以任意一个生长性状为参数进行选育,均可达到改良凡纳滨对虾生长情况的效果.     

凡纳滨对虾群体杂交与自交 F1低溶氧与高氨氮耐受性比较

利用6个遗传背景不同的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)群体,通过群体间自交与杂交建立了8个交配组合。对不同交配组合F1,在幼虾和成虾阶段,进行低溶氧与高氨氮48 h胁迫试验,比较不同交配组合群体在不同生长阶段的高氨氮与低溶氧耐受性。结果显示,低溶氧胁迫,YH♀×ZX♂、SS♀×SS♂、HD♀×YH♂交配组合幼虾存活率分别为76.23%、74.61%、74.38%,显著高于其他交配组合存活率(P0.05),成虾的存活率分别为83.08%、65.57%、71.12%,可作为耐低溶氧优良品系选育的候选材料;高氨氮胁迫,YH♀×KN♂、HD♀×YH♂、YH♀×ZK♂交配组合幼虾存活率分别为97.71%、86.43%、80.01%,显著高于其他交配组合(P0.05),成虾存活率分别为85.53%、74.18%、69.23%,可作为耐高氨氮优良品系选育的候选材料;HD♀×YH♂交配组合低溶氧与氨氮耐受性均较好,但不同交配组合低溶氧与氨氮耐受性间相关性检验不显著(P0.05)。研究发现,亲本中雌虾来源为YH,子代低溶氧耐受性优良,推断抗低溶氧性状为母系主导遗传;对虾低溶氧的耐受性随着生长发育的进行而降低,高氨氮耐受性随着生长发育的进行而增强;各交配组合高氨氮和低溶氧耐受性,在幼虾阶段和成虾阶段均呈极显著相关(P0.01),表明凡纳滨对虾低溶氧与高氨氮耐受性适宜在幼虾阶段进行遗传评估。     

凡纳滨对虾幼虾耐高温性状的遗传力评估

为探明高温对凡纳滨对虾幼虾遗传变异的影响,自2018年由国外引进的4个凡纳滨对虾种群(EGDB、PRMA、API、SIS)构建的育种群中随机选取40个全同胞家系,每个家系随机取100尾个体,分成2份放入指定的试验桶中,共计4000尾仔虾,采用水浴加热法,对试验桶进行升温并记录其相应的存活时间及温度,用单性状动物模型对其耐高温性状进行遗传参数的评估。结果显示：凡纳滨对虾仔虾各家系的耐热性为782.64～2074.33℃?h,表明凡纳滨对虾仔虾家系间的耐热性存在显著性差异;家系间耐热性值的变异系数为10%～68%;当水温由28℃升至40℃时,各家系的累计存活率为58%～99%;利用单性状动物模型结合系谱信息,获得凡纳滨对虾幼虾耐高温性状的遗传力估计值0.22±0.05,属于中等遗传力。试验结果表明,凡纳滨对虾幼虾耐高温性状具有较高的遗传变异水平,遗传改良的潜力较大。本试验结果可为凡纳滨对虾夏季高温养殖和耐高温品系的选育提供数据参考。     

凡纳滨对虾不同世代生长性状的变异

对从美国进口的选育凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)海南群体(进口亲虾繁育的第1世代,G1)、山东和饶平群体(G2)、湛江2和湛江3群体(G3)、湛江1和上海群体(G4)共7个养殖群体4个世代1150个个体的生长性状体长和体重进行了分析。7个群体的平均体长(范围)分别为14.76(13.25~15.99)、8.46(6.28~10.48)、9.24(4.28~10.70)、7.75(5.13~9.36)、11.38(8.13~14.12)、5.25(3.47~6.83)和7.14(4.14~9.00),变异系数分别为0.04、0.08、0.08、0.09、0.12、0.14、0.14,平均体重(范围)分别为33.41(24.33~39.74)、5.19(1.80~9.68)、6.95(3.18~11.34)、4.62(1.52~9.87)、15.03(6.00~26.96)、1.47(0.48~3.42)、3.29(0.49~6.20),变异系数分别为0.10、0.23、0.21、0.27、0.32、0.39、0.36。体长和体重的变异系数随着繁育世代的增加而增加,其中体重的变异系数每繁殖1代增加10%,其第1代的变异系数与美国选育的亲本群体相同。体长、体重相关与回归分析表明,体长与体重相关极显著(P<0.01),体长和体重的回归方程为W=0.01L2.93。表明随着繁育世代的增加,生长性状逐代分化。     

凡纳滨对虾高氨氮和低溶氧抗逆性状的杂交配合力分析

该研究利用3 个凡纳滨对虾( Litopenaeus vannamei) 引进群体, 采用完全双列杂交交配设计, 建立9 个自繁和杂交组合F1 代, 比较幼虾对高氨氮和低溶解氧的耐受性, 分析各交配组合杂种优势, 采用线性模型均数加权二乘分析法估算凡纳滨对虾高氨氮和低溶氧抗逆性状的配合力, 评估亲本及子代的耐受性能。结果表明, 9 个群体对氨氮( NH3-N) 和溶解氧( DO) 胁迫的耐受性均存在显著差异, 杂交子代耐高氨氮和耐低溶氧性状的中亲优势和超亲优势范围分别为14.09 42.57 和1.860～26.18、52.48～31.39 和54.34～24.66; 杂交后代耐受性的表现受到父本、母本一般配合力以及杂交组合特殊配合力共同影响, 美国夏威夷SIS 群体( UH) 耐高氨氮和低溶氧性状的一般配合力较高, 分别为0. 44 2 和0. 89 9; 特殊配合力分析表明, 美国迈阿密SIS 群体( UM) 和美国夏威夷SIS群体的杂交组合( UMUH) 为强优势组合, 存在较强的抗逆非加性效应, 杂交优势明显, 可为进一步家系选育提供候选材料。     

凡纳滨对虾遗传多样性的SSR分析

通过对5个SSR位点的聚合酶链式反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染色检测,探究凡纳滨对虾群体的遗传多样性.结果表明,供试的凡纳滨对虾群体在5个SSR位点上有2～4个等位基因,平均等位基因数3个,平均杂合度0.5755,平均多态信息量0.4864,平均有效等位基因数2.5053.全群基因纯合度0～0.8,平均0.3917.显示该凡纳滨对虾群体的遗传多样性水平处于中度多态.     

Ca2 浓度对凡纳滨对虾稚虾生长的影响

研究了Ca2 浓度对凡纳滨对虾稚虾生长的影响。实验保持盐度15和其它离子的浓度基本恒定,共设计了5个Ca2 浓度梯度,分别为60(R1)、180(R2)、750(R3)、3750(R4)和7500 mg·L-1(R5)。经过35 d的养殖实验,结果表明:(1)不同Ca2 浓度的人工海水对凡纳滨对虾的存活率影响显著,R1组虾的存活率最低,为81.25%,显著低于R2、R3和R4的存活率;(2)5个Ca2 浓度下凡纳滨对虾生长速度不同,其特定生长率(SGRd)的大小顺序为:R3>R2>R1>R4>R5,其中R3的特定生长率(SGRd)显著高于其它4组,而R5的特定生长率(SGRd)显著低于其它4组;(3)各个处理组虾的摄食率(FId)与特定生长率(SGRd)的趋势相反,表现为R5 >R4>R2>R1>R3,其中R5的摄食率显著高于R2、R1和R3的摄食率;(4)不同Ca2 浓度对对虾的食物转化率(FCE)影响显著。Ca2 浓度最大的R5组虾的食物转化率显著低于其它各组,而R3组虾的食物转化率显著高于其它各组;(5)各组虾的生长能、呼吸能和排泄能占摄食能的比例受不同Ca2 浓度的影响显著。本实验的结果表明,Ca2 浓度是通过影响凡纳滨对虾摄食和代谢率实现对其生长能积累影响的。在对虾养殖生产中, 适当提高养殖水体的Ca2 浓度,可提高养殖效果。     

氨氮胁迫前后凡纳滨对虾组织中抗氧化酶和脂质过氧化产物的分布

为了弄清抗氧化酶、脂质过氧化产物在凡纳滨对虾体内分布特点，以及离子氨氮胁迫后这些指标在该对虾体内的变化情况，选择了南方有代表性的凡纳滨对虾（6．322±0．221g），分别测定了氨氮胁迫前后体内抗氧化酶SOD、CAT、GSH—Px和GSH、MDA的分布特点，丰富和发展了对虾的自由基和抗氧化防御理论，为外源抗氧化剂在对虾饵料中应用打下了基础。试验结果表明，肝胰腺和血清是凡纳滨对虾对氨氮造成胁迫的敏感组织，各项抗氧化酶、总抗氧化能力、组织GSH含量以及MDA含量可作为衡量凡纳滨对虾氧化应激状态的指标。     

凡纳滨对虾全同胞家系的建立及生长比较

全同胞家系是遗传分析的重要材料。采用自然交配法建立了62个凡纳滨对虾第一代全同胞家系,对其中17个家系进行了比较研究。结果表明,各家系的孵化率、出苗率与雌性亲本的大小相关性不显著。17个家系中有7个家系显示生长优势,其大小顺序依次是A02＞A11＞A01＞A17＞A06＞A08＞A16;7个家系在40周内的生长速度较17个家系的平均值高23.2%。在所有家系中,A01、A02、A11等3个家系的体重显著大于其它家系（P＜0.05）,其平均生长速度较所有家系平均生长速度分别快25.5%、31.6%和31.0%。这3个家系的整齐度良好,在养殖中期的个体变异系数分别为11.58%、9.95%和8.48%,后期均小于5%,显示出优良的经济性状,为进一步选择培育凡纳滨对虾的快速生长新品系奠定了基础。     

微生态制剂对凡纳滨对虾促生长作用试验

将微生态制剂菌株J-10添加到饲料中投喂凡纳滨对虾,结果表明,微生态制剂可在一定程度上促进对虾的生长。最适添加量为质量分数0.15%~0.2%,过量添加反而会使对虾生长减慢。     

Ammonia tolerance of Litopenaeus vannamei (Boone) larvae

The tolerance of Litopenaeus vannamei larvae to increasing concentrations of total ammonia nitrogen (TAN) using a short‐term static renewal method at 26°C, 34 g L^?1 salinity and pH 8.5 was assessed. The median lethal concentration (24 h LC₅₀) for TAN in zoea (1‐2‐3), mysis (1‐2‐3) and postlarvae 1 were, respectively, 4.2‐9.9‐16.0; 19.0‐17.3‐17.5 and 13.2 mg L^?1TAN (0.6‐1.5‐2.4; 2.8‐2.5‐2.6 and 1.9 mg L^?1 NH₃‐N). The LC₅₀ values obtained in this study suggest that zoeal and post‐larval stages are more sensitive to 24 h ammonia exposure than the mysis stage of L. vannamei larvae. On the basis of the ammonia toxicity level (24 h LC₅₀) at zoea 1, we recommend that this level does not exceed 0.42 mg L^?1 TAN – equivalent to 0.06 mg L^?1 NH₃‐N – to reduce ammonia toxicity during the rearing of L. vannamei larvae.     

Effects of dietary chitosan on growth,survival and stress tolerance of postlarval shrimp,Litopenaeus vannamei

The effect of chitosan, a polymer of glucosamine obtained by the deacetylation of chitin, on growth, survival and stress tolerance was studied in postlarval Litopenaeus vannamei. An experiment was performed with postlarval shrimp (mean initial wet weight 1.2 mg) fed five isoenergic and isonitrogenous diets containing five supplemented levels of chitosan (0, 0.5, 1, 2 and 4 g kg^?1 diet, respectively). The five compound diets (C0, C0.5, C1, C2 and C4) sustained shrimp growth throughout the experiment. Growth performance (final body weights; weight gain; SGR: specific growth rate) in shrimp fed diet C2 was significantly higher than that in shrimp fed diets C0, C0.5 and C1 (P < 0.05), diet C4 treatment provided intermediate growth result. The survival in shrimp fed diet C1 was significantly higher than that in shrimp fed C0 diet (P < 0.05), other diets treatments gave the intermediate survival results. No significant differences were found in growth and survival between diet C2 and C4 treatments. After 9 days of a stress tolerance test, survival in shrimp fed diets C1, C2 and C4 was significantly higher than that in shrimp fed diets C0 and C0.5. We concluded from this experiment that the incorporation of a moderate dietary chitosan was beneficial to the development of postlarval L. vannamei. Considering the effect of chitosan on both growth and survival of postlarval L. vannamei, second‐degree polynomial regression of SGR and survival indicated optimum supplement of dietary chitosan at 2.67 and 2.13 g kg^?1, respectively, so the level of chitosan supplemented in the diet should be between 2.13 and 2.67 g kg^?1.     

氨氮胁迫下白斑综合征病毒对凡纳滨对虾的致病性

为了评价养殖水环境中氨氮(NH_4-N)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的危害性,开展了NH_4-N胁迫对凡纳滨对虾感染白斑综合征病毒(WSSV)后的死亡率、WSSV增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响的实验。在NH_4-N胁迫质量浓度为15.6 mg·L-1,分别注射2×105和2×106个WSSV粒子,结果显示,NH_4-N胁迫下注射2×105个WSSV粒子的凡纳滨对虾第144小时死亡率达到53.3%,显著高于无胁迫组(40.0%)。对虾鳃组织WSSV荧光定量PCR检测结果显示,NH_4-N胁迫下凡纳滨对虾鳃组织内WSSV的增殖加快。此外,免疫相关酶活性结果显示,NH_4-N浓度突变会促使对虾血清中酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性短暂升高后持续降低。由此可见,NH_4-N胁迫会加快WSSV在患病凡纳滨对虾体内的增殖,导致更高死亡率,这可能是因为胁迫造成了对虾免疫相关酶活性降低和抗病原感染能力下降。     

氨氮和亚硝基氮共同胁迫对凡纳滨对虾感染WSSV的影响

为了评价养殖水环境中氨氮和亚硝基氮对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的危害性,开展了氨氮和亚硝基氮共同胁迫对凡纳滨对虾感染WSSV后的死亡率、WSSV在患病对虾体内增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响的研究。实验设置氨氮(NH+4)和亚硝基氮(NO-2)的共同胁迫浓度均为20 mg·L-1,分别注射10-4和10-5稀释度的WSSV提取液。结果显示,胁迫下感染10-4WSSV的凡纳滨对虾144 h死亡率达到100%,显著高于无胁迫组(76.67%),相同实验条件下高浓度病毒感染组死亡率高于低浓度组。对虾鳃组织WSSV荧光定量PCR检测结果显示,氨氮和亚硝基氮共同胁迫下凡纳滨对虾体内WSSV的增殖加快,感染48 h后胁迫组病毒量是无胁迫组的1.6倍,72 h时病毒量达到无胁迫组的2.0~3.7倍。此外,免疫相关酶活性结果显示,氨氮和亚硝基氮浓度突变会促使对虾血清中酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性先短暂升高然后降低。由此可见,氨氮和亚硝基氮共同胁迫会加快WSSV在患病凡纳滨对虾体内的增殖,导致更高死亡率,这可能是因为胁迫造成了对虾免疫相关酶活性的降低和抗病原感染能力下降所致。     

Effect of dietary protein level on growth, survival and ammonia efflux rate of Litopenaeus vannamei (Boone) raised in a zero water exchange culture system

Litopenaeus vannamei postlarvae (1.96±0.07 g) were reared in a zero water exchange system for 25 days at 28°C. They were fed four commercial diets containing 25%, 30%, 35% or 40% crude protein in three replicate aquaria per dietary treatment. Total ammonia, nitrite, nitrate and pH were monitored weekly and total ammonia levels were additionally measured every 3 days using the flow injection analysis method. Total ammonia efflux rates were measured at days 0, 14 and 21, and survival and growth rates were recorded at the end of the experiment. No significant differences between water quality parameters such as temperature, salinity, dissolved oxygen and pH were found. Nitrite concentration remained low in all dietary treatments up to the second week increasing considerably from day 14 onwards suggesting the initiation of the nitrification process. Water total ammonia of all experimental groups exhibited a gradual increase up to day 13; however, following this time ammonia levels of all experimental groups decreased, probably due to either the action of bacterial nitrification or ammonia‐N uptake by the animals. High ammonia efflux rates were recorded at day 14, especially after the first hour of immersion in the 25% protein group, but no significant changes occurred in any experimental group after 3 h. No significant differences in weight gain, final weight or survival of shrimp were observed under these experimental conditions. The importance of zero water exchange systems and their effects on the nitrogen metabolism of crustaceans are discussed.     

日本囊对虾耐热性状及其与凡纳滨对虾、脊尾白虾的比较

为构建日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)耐高温性状的评价体系,全面了解日本囊对虾的耐热性状,本研究首先采用耐热性(upper thermal tolerance,UTT)作为评定指标,开展不同规格日本囊对虾耐热性状的分析;进一步结合临界温度法(critical thermal methodology,CTM)将日本囊对虾与脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)进行了耐热性状的种间比较。结果显示:(1)不同大小的日本囊对虾个体之间耐热性(UTT)存在差异,其体重与耐热性之间呈负相关,相关系数为-0.142(P0.05),特别是日本囊对虾仔虾(0.01 g)耐热性显著高于较大规格(1~5 g)的日本囊对虾(P0.05);(2)受高温刺激,3种虾表现出不同的应激行为,凡纳滨对虾的开始死亡温度与死亡高峰温度最高,日本囊对虾次之,脊尾白虾最低;(3)3种虾的耐热性状存在明显差异,凡纳滨对虾的平均UTT值最高,日本囊对虾次之,脊尾白虾的最低(P0.01);(4)凡纳滨对虾的临界高温(critical thermal maximum,CTMax)最高,日本囊对虾次之,脊尾白虾最低(P0.05),即与UTT的比较结果一致。本研究为日本囊对虾耐高温品系选育提供了基础科学依据。     

凡纳滨对虾高位池养殖氮、磷收支研究及养殖效果分析

对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）高位池养殖氮（N）和磷（P）收支情况进行系统研究,比较分析不同放养季节、虾苗品系以及是否进行分段养殖引起养殖效果的差异。结果显示,饲料是最主要的N和P输入源,分别占池塘N和P总输入的91.76%~93.68%和94.55%~96.97%。收获对虾输出N和P分别占总输入的29.46%~40.46%和12.64%~17.41%,随养殖废水排出的N和P分别占24.63%~54.52%和23.03%~59.02%,沉积在池塘底部的N和P分别占14.10%~44.59%和27.59%~62.25%。放养季节和虾苗品系对养殖效果有显著影响。夏季组（ZS）对虾平均生长速度达到0.175g.d-1,分别比秋季组（ZF）和冬季普通组（ZW）高73.0%和139.3%。ZW成活率77.70%~87.75%,显著高于ZS和ZF。与相同养殖季节放养一代苗的ZW相比,放养本地苗的冬季组（BW）养殖成活率62.10%~72.30%,单位面积产量8821~9878kg.hm-2,均显著较低。采用分段养殖的冬季标粗组（ZWb）养成池塘单造使用周期缩短56.13%。     

Nutrient values of dietary ascorbic acid (l-ascorbyl-2-polyphosphate) on growth, survival and stress tolerance of larval shrimp, Litopenaeus vannamei

l -ascorbyl-2-polyphosphate (ApP) was used as a vitamin C source to investigate the ascorbic acid (AsA) requirements on growth performance and stress resistance of the larval white shrimp, Litopenaeus vannamei . Five isoenergetic and isonitrogenous fish meal-fish protein hydrolysate-based diets with five levels of ApP, AsA equivalent to 91.8, 188, 271, 360 and 436 mg kg⁻¹ diet were fed to triplicate groups of L. vannamei (mean initial wet weight 1 mg) for 32 days. The diet with AsA 91.8 mg kg⁻¹ showed high cumulative mortality after 10 days of feeding. After the 32-day trial, the shrimp that fed the diet had significantly lower survival and weight gain (WG, %) than those that fed 188, 271, 360 and 436 mg AsA kg⁻¹ diets. Specific growth rate (SGR, % day⁻¹) and final body wet weight (FBW, mg) showed the same pattern as WG (%). There were no significant differences in growth performance (FBW, WG and SGR) among the groups that fed 188, 271, 360 and 436 mg kg⁻¹ of AsA at the termination of feeding trial. Broken-line regression analysis on WG indicated that 191 mg AsA kg⁻¹ in the diet was the optimum for larval L. vannamei . On the contrary, dietary level of more than 360 mg AsA kg⁻¹ was needed to ensure high resistance to stressful conditions such as low dissolved oxygen stressors.