锌肥不同用量及用法对玉米生物学性状、产量和效益的影响

为探索高海拔区玉米上锌肥的适宜用量和用法,于2022年5～10月在施甸县太平镇进行锌肥田间效应试验,试验设不施锌肥(ck)、基施锌肥15 kg/hm₂^{、基施锌肥30 kg/hm}₂^{、基施锌肥45 kg/hm}₂^{、喷施锌肥1次、喷施锌肥2次、基施锌肥30 kg/hm}₂^{+喷施锌肥1次},共七个处理;通过试验：基施锌肥15～45 kg/hm₂^{的处理较对照平均}增加玉米株高2.05%、穗位高7.13%、穗粒数8.23%、秸秆产量5.57%及籽粒产量4.72%;叶面喷施锌肥1～2次的处理较对照平均增玉米株高3.53%**、穗位高11.52%、穗粒数6.63%、秸秆产量3.16%及籽粒产量5.26%;基施锌肥30 kg/hm₂^{+叶面喷施1次的处理对照}增加玉米株高4.62%**、穗位高12.35%、穗粒数14.97%**、秸秆产量8.42%及籽粒产量6.54%。结果表明：在氮磷钾肥合理配施的基础上,增施锌肥能增加玉米株高、穗位高、穗粒数、产量及效益,一定范围内增幅随锌肥用量增加而增加,锌肥叶面喷施效果优于作基肥效果,基肥与叶面喷施相结合效果最佳。锌肥推荐用量用法：ZnSO₄.7H₂O 45 kg/hm₂^{作基肥或ZnSO}₄.7H₂O 30 kg/hm₂^{作基肥+0.1%ZnSO}₄.7H₂O溶液于大喇叭口期叶面喷施。     

兔轮状病毒性腹泻的流行病学和病原学研究

 1990～1991年,作者对云南一些兔场的幼兔腹泻进行了流行病学调查、病原学和血清学检验,成功地从腹泻死亡幼兔肠内容物中分离出2株兔轮状病毒,经形态学、生物学、血清学、核酸分析以及本动物回归等方面的鉴定,确定为A群血清3型轮状病毒.据此确立了幼兔轮状病毒性腹泻在我国的存在.     

马铃薯不同栽培密度的效应分析

通过在盐池县干旱半干旱、中低肥力条件下30000株/hm_²、37500株/hm_²、45000株/hm_²、52500株/hm_²、60000株/hm_²、67500株/hm_²6个马铃薯栽培密度的田间试验观测,分析了不同密度的生长发育状况、产量水平与经济效果的差异,种植密度30000株/hm_²,无论是农艺性状、生物产量,还是经济效益,均好于其他几个处理,初步认为当地马铃薯栽培密度以30000株/hm_²～37500株/hm_²为宜,     

粪肠球菌益生特性的体外评价

通过体外法研究粪肠球菌的生长特点、耐酸性、耐胆盐性和抑菌性等，以评价其益生效果。结果表明：①粪肠球菌在培养2 h后进入对数期，8 h到达稳定期；② 经pH 2、3、4的人工胃液处理3 h后，粪肠球菌极显著降低至2.71×10⁵、1.03×10⁷和5.65×10⁷CFU/mL（P<0.01）；③粪肠球菌经含质量分数为0.2%和0.3%的胆盐溶液处理3 h后，极显著降低至1.46×10⁶和1.37×10⁶ CFU/mL（P<0.01）；④粪肠球菌对大肠杆菌O₁和O₇₈均在混合培养至10 h时表现极显著的抑制作用（P<0.01）。可见，粪肠球菌生长繁殖速度快，能耐受胃肠道环境，对大肠杆菌O₁ 和O₇₈有一定的抑制作用，适合作为微生态制剂的生产菌种。     

永生化猪视网膜色素上皮细胞的建立及初步应用

【目的】建立永生化猪视网膜色素上皮细胞系,为病毒学研究提供一种新的细胞材料。【方法】合成猪腺病毒3型E1基因,将其克隆至真核表达质粒pCI-neo中,构建E1基因真核表达质粒pCI-neo-E1,进行PCR和测序鉴定。提取pCI-neo-E1质粒,转染原代猪视网膜色素上皮细胞,用新霉素G418筛选猪永生化视网膜色素上皮细胞系（RPECs）。检测RPECs的角蛋白18和19,通过细胞计数测定其生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,并对其进行染色体核型分析。分别将猪流行性腹泻病毒（PEDV）CV77毒株、猪圆环病毒2型（PCV2）DBN-SX07株和猪伪狂犬病毒（PRV）Bartha-K61株接种RPECs,同时将PEDV CV77毒株接种绿猴肾细胞（Vero细胞）,将PCV2 DBN-SX07株接种猪肾细胞（PK15细胞）,将PRV Bartha-K61株接种仓鼠肾成纤维细胞（BHK细胞）,观察细胞病变效应（CPE）,并采用间接免疫荧光法测定病毒的滴度。【结果】PCR和测序结果显示,真核表达质粒pCI-neo-E1构建成功。将pCI-neo-E1转染原代猪视网膜色素上皮细胞,经G418筛选得到永生化细胞株,该细胞株表达角蛋白18和19,传代50代仍保持上皮样细胞形态,增殖活性良好,细胞周期及染色体核型特征与正常的二倍体细胞一致。PEDV CV77毒株感染猪RPECs 24 h后,CPE明显,滴度为10^5.25TCID₅₀/mL,低于其在Vero细胞中的滴度（10^8.125 TCID₅₀/mL）。PCV2 DBN-SX07毒株感染猪RPECs后可产生明显CPE,病毒滴度为10^6.125TCID₅₀/mL,略高于其在PK15细胞上的滴度（10^6.0TCID₅₀/mL）。PRV Bartha-K61毒株感染猪RPECs后,CPE明显,病毒滴度为10^8.75 TCID₅₀/mL,略低于其在BHK上的滴度（10^8.875 TCID₅₀/mL）。【结论】成功构建了永生化猪视网膜细胞系,可用于猪源病毒的培养,尤其是培养PCV2可产生明显CPE,易于观察,为后续开展疫苗工艺的提升提供了一种新的细胞材料。     

克欧森.农药导航对除草剂防除水直播稻田抗性稗草增效作用研究

为明确农药助剂克欧森.农药导航对氰氟草酯、噁唑酰草胺防除水直播稻田抗性稗草的增效作用及对水稻的安全性,开展了田间药效试验。结果表明,克欧森.农药导航对40%氰氟草酯乳油、10%噁唑酰草胺乳油防除水直播稻田抗性稗草有明显增效作用,提高防除抗性稗草的速效性和持效性,对水稻安全。在水直播稻田稗草3～4叶期茎叶喷雾施药,40%氰氟草酯乳油2250ml/hm₂^{+克欧森.农药导航1}50ml/hm₂^药后7d对稗草防除效果提高6.38个百分点,药后21d对稗草防除效果提高15.26个百分点;10%噁唑酰草胺乳油1500ml/hm₂^{+克欧森.农药导航1}50ml/hm₂^药后7d对稗草防除效果提高6.63个百分点,药后21d对稗草株防效、鲜重防效均达99%以上。     

猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析

【目的】 分离得到猪圆环病毒2型（PCV-2）陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID₅₀),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】 从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、间接免疫荧光试验及电镜观察,对分离病毒进行鉴定;用免疫过氧化物酶细胞单层试验（IPMA）,测定分离毒株的TCID₅₀,并对其全基因组序列进行测定与分析。【结果】 分离得到1株猪圆环病毒2型毒株,分离株在PK15细胞上的TCID₅₀为10^-4.75。全基因组序列同源性比对发现,分离株与一加拿大分离株（DQ200735）同源性最高（99.4%）。【结论】 从陕西杨凌分离得到了1个猪圆环病毒2型分离株。     

双氟.氟氯酯WG防除冬小麦田阔叶杂草试验示范

本文针对鲁北地区小麦抗性阔叶杂草,引进新型除草剂20%双氟.氟氯酯WG(锐超麦)+助剂(5毫升/667m₂⁺¹⁵毫升/667m₂⁾(处理1),以 10%苯磺隆可湿性粉剂+72% 2,4-滴丁酯(20毫升/667m₂⁺⁸⁰毫升/667m₂⁾(处理2),3%双氟.唑草酮悬乳剂50毫升/667m₂^(处理3)作对照药剂在冬前进行了试验示范。药后120天处理1、2、3对荠菜株防效分别是98.75%、96.25%、95.00%,荠菜鲜重防效分别是99.99%、99.80%、99.15%;处理1、2、3对播娘蒿株防效分别是100%、93.33%、93.33%,鲜重防效分别是100%、99.98%、99.98%;处理1、2、3杂草总体株防效分别是98.90%、95.79%、94.74%;杂草总体鲜重防效分别是99.99%、99.86%、99.39%。对主要阔叶杂草荠菜、播娘蒿无论株防效、鲜重防效和杂草总体防效均以处理1,即20%双氟.氟氯酯WG(锐超麦)+助剂(5毫升/667m₂⁺¹⁵毫升/667m₂⁾最高,且对小麦生长安全,可以大面积推广。     

天然草场立体复合栽培的综合效益评价

3年的试验结果表明,沙打旺与苜蓿免耕补播立体复合种植,降水利用率提高11.3%～19.7%,活动积温利用率提高13.5%～31.1%,田间CO₂补给量提高274×10^_-6,生物产量(干草)达1897.5kg/hm^₂,植被覆盖度达58.3%,分别高于对照22.8%和17.6%,产值2846.25元/hm^₂,经济纯收入1946.25元/hm^₂, 经济产投比3.16:1,分别高于对照22.8%,29.5%、41.1%和51.2%,草场等级也由3等7级提高到2等4级,表现出良好的生态、经济与社会效益。     

河套灌区玉米不同种植密度对田间耗水及产值的影响

为探究充分利用河套灌区水资源和提高玉米产值的有效途径,在河套灌区以‘陕单609’玉米为试验材料,以当地常规种植密度6.0×10⁴株/hm²为对照(CK),监测种植密度提高至7.5×10⁴(D₁)、9.0×10⁴(D₂)和10.5×10⁴(D₃)株/hm²对土壤水分、灌水量、田间耗水量、玉米产量及产值等的影响。结果表明:玉米生长期的土壤水分随种植密度的提高而降低,D₁、D₂和D₃的灌水量较常规种植密度分别增加3.81%、9.72%和13.90%,田间耗水量分别增加5.23%、10.71%和15.42%;秸秆生物量分别增加21.97%、41.34%和39.40%,籽粒产量分别增加12.54%、18.47% 和-0.86%;水分生产率分别提高6.93%、7.01%和-14.11%,水分利用效率分别提高11.00%、16.39%和1.74%;生产成本分别增加2.17%、4.35%和6.52%,总产值分别提高13.27%、20.47%和2.67%,净产值分别提高21.46%、32.12%和-0.12%。综上,河套灌区‘陕单609’种植密度提高至9.0×10⁴株/hm²时,可充分利用水资源,提高玉米产量,获取较大的经济效益。     

猫卡氏肺孢子虫肺炎模型的建立及病原体观察

 住家附近诱捕到14只家鼠,经皮下注射醋酸可的松8周,建立卡氏肺孢子虫肺炎,取家鼠肺组织制成接种物。1～8号实验猫于接种前皮下注射醋酸可的松8d,然后肺内接种1.3×105卡氏肺孢子虫包囊;9～16号实验猫则直接肺内接种2.6×10⁵卡氏肺孢子虫包囊。接种后,注射醋酸可的松的1～8号实验猫出现严重的临床症状;病理变化呈典型的卡氏肺孢子虫肺炎。9～16号实验猫为亚临床症状;肺脏呈轻微肿胀。实验结果表明实验猫免疫力低下时,接种外源性卡氏肺孢子虫包囊可导致典型的卡氏肺孢子虫肺炎;健康猫接种外源性卡氏肺孢子虫包囊则为隐性感染。并对肺脏等组织内的虫体进行详细的形态观察。     

微黄青霉ZF1及其代谢产物对禾谷镰孢的抑菌活性

【目的】对前期从土壤中筛选获得的1株具有生防效果的微黄青霉（Penicillium minioluteum）ZF1,进一步分析其对禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的抑菌效果,以及其培养滤液与化学药剂混配的抑菌能力和对玉米叶片、籽粒的侵染能力,明确该生防菌的开发利用价值,为防治禾谷镰孢引起的玉米茎腐病和穗腐病提供依据。【方法】采用菌丝生长速率法测定微黄青霉ZF1对禾谷镰孢的抑菌能力,微黄青霉ZF1培养滤液对禾谷镰孢的抑菌作用;通过玻璃纸法测定微黄青霉ZF1次生代谢产物对禾谷镰孢菌落生长的影响;比较咯菌腈、微黄青霉ZF1菌株培养滤液及咯菌腈和培养滤液混配3个处理对禾谷镰孢菌丝生长的抑制作用;分别在5叶期和乳熟期检测微黄青霉ZF1对玉米叶片和籽粒的侵染能力。【结果】微黄青霉ZF1能够明显抑制禾谷镰孢生长,抑制作用达到81.33%,抑菌面积为16.21 cm²;去玻璃纸PDA培养基上,ZF1菌株次生代谢产物对禾谷镰孢生长的抑制作用达到55.46%;菌株培养滤液稀释10、20、50和100倍后对禾谷镰孢菌抑制作用分别为81.04%、64.46%、22.67%和1.12%,但微黄青霉培养滤液对禾谷镰孢菌丝形态影响不明显;咯菌腈和微黄青霉菌培养滤液复配后对禾谷镰孢的抑制作用比二者单独使用有所增强,咯菌腈抑制禾谷镰孢菌丝生长的EC₅₀和EC₉₅值分别为0.0162和0.5287 μg·mL^-1;10%微黄青霉菌培养滤液和0.5 μg·mL^-1咯菌腈对禾谷镰孢的抑制率分别为86.45%和95.13%,二者复配后降低了对禾谷镰孢菌丝生长的EC₅₀和EC₉₅值,延长了作用时间,EC₅₀和EC₉₅值分别为0.0023和0.4011 μg·mL^-1,培养4 d后咯菌腈抑菌作用丧失,而0.5 μg·mL^-1咯菌腈与10%微黄青霉菌培养滤液复配后较0.5 μg·mL^-1咯菌腈单独作用时间延长了10 d。接种微黄青霉至玉米叶片和受伤的玉米籽粒,仅在叶片表面和伤口处产生微寄生霉层。【结论】微黄青霉ZF1菌株及其培养滤液对禾谷镰孢均有明显的抑制作用,咯菌腈和培养滤液复配对禾谷镰孢的抑制作用优于单独使用咯菌腈的处理。研究结果可为微黄青霉菌的开发应用提供依据,为禾谷镰孢茎腐病和穗腐病的防治开辟新途径。     

十个粳稻品种对稻瘟病抗性和抗性遗传分析

 10个粳稻品种,在3～4叶期和抽德初期于温室内,用7个稻瘟病菌生理小种即ZA₁,ZB₁₃,ZC₁₃,ZD₁,ZE₁,ZF₁和ZG₁进行人工接种,结果表明:苗叶瘟和穗瘟的抗性85.70%反应一致,呈正相关。10个品种与广谱感病品种丽江新团黑谷的杂交组合,根据F₁,F₂,B₁F₁分析结果:F₁95%抗性呈显性、不完全显性和隐性各占2%;该10个品种对多个测试小种的抗性,多受两对或1对显性基因控制,少数受1对隐性基因或3对显性基因控制。基因分析表明:这10个抗源品种至少各含有两对不尽相同的抗瘟性基因,在抗瘟性遗传上属不同抗源。根据6个杂交组合的正、反交分析结果,稻瘟病抗性属细胞核遗传,但也有的受细胞质作用影响。     

高致病性FAdV-4传代中的毒力和Fiber2基因的比对分析

为筛选禽腺病毒疫苗株和制备亚单位疫苗提供科学依据,探明高致病性禽腺病毒C亚型4血清型（FAdV-4）毒株在传代中的毒力变化以及不同感染方式对雏鸡死亡率的影响,首先制备2 ~ 15代的高致病性FAdV-4尿囊液,用LMH细胞检测第2、4、8和15代尿囊液的半数细胞感染量（TCID₅₀）;其次选取的4个代次尿囊液分别通过黏膜（点眼）和颈背部皮下途径接种SPF雏鸡,观察动物的死亡率;最后应用PCR方法扩增主要结构蛋白Fiber2基因序列并进行比对分析。结果表明：所有制备的2 ~ 15代FAdV-4毒株均在5 ~ 7 d内致鸡胚死亡（100%）,4个代次毒株的TCID₅₀为10^6.5±0.2/0.1 mL,不同代次毒株间的毒力差异不显著（P＞0.05）;选取的4个代次毒株经颈背部皮下接种雏鸡的死亡率为100%,死亡雏鸡出现典型的心包积液综合征。而经黏膜接种的雏鸡死亡率呈下降趋势,分别为80%、50%、30%和30%;不同代次毒株Fiber2基因序列没有发生变化。总之,不同代次毒株通过皮下接种后对雏鸡的致病力没有差异,但黏膜接种的死亡率则逐代下降,而主要结构蛋白Fiber2基因则没有出现碱基变异。     

山羊B组轮状病毒KB－63株动物感染实验

以山羊Ｂ组轮状病毒ＫＢ－６３株（本室分离鉴定）口服接种剥夺初乳的新生山羊羔、绵羊羔、犊牛以及仔猪。该毒株可在接种后１２～１７ｈ内引起山羊羔、绵羊羔，以及犊牛发生急性腹泻，并排出大量病毒，其核酸电泳图型及组抗原检测也与原接种病毒一致。当该毒株接种剥夺初乳仔猪时，不能引起仔猪腹泻也不排出病毒     

依主梨树茎尖离体培养

 本文报道利用依主梨树茎尖、侧芽进行离体培养的实验过程.春、秋季取成年依主梨树一年生枝条的顶芽或侧芽作实验材料,其中秋季芽先用赤霉素打破休眠,经剥离、消毒后接种于诱导生长和分化的培养基上,生长约一个月后转入增殖培养基,40天后将增殖后伸长的芽条用于生根,其余小芽则继续增殖;生根的梨苗则进行移栽.通过实验,MS/2(大量元素)+MS(微量元素)+铁盐+有机成分(简称培养基A),附加6-BA 2mg/L、NAA 0.2mg/L、GA₃ 1～3mg/L适于芽生长和分化;而附加6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L、QA₃ 2mg/L是优良增殖培养基;附加IBA 10mg/L处理8天的二步生根法较好;生根的试管苗已移栽定植成活.     

水稻穗颈瘟流行程度预测

 分析涪陵地区稻瘟病流行的有关历史资料表明,6月中下旬雨日数和中下旬平均气温与穗颈瘟流行期间的主要气象因子及穗颈瘟流行程度密切相关.6月中下旬雨日数少和6月中下旬旬平均气温的上升值大,利于穗颈瘟流行.由此以"八五"研究的有关结论为基础,建立了穗颈瘟流行程度(病情指数)的回归预测模型:Y₁=0.9201X₁-0.3715L+2.2873△T+2.554;Y₂=49.0519-25.9425L^0.1995-0.3856L+2.2873△T;Y₃=71.9959-30.823L^0.1995-3.9157L+2.2873△T对1991～1995年的历史回测结果,平均误差1.23,最大误差3.08.1996年应用结果,误差1.68.可提前10～20d预报感病品种穗颈瘟流行程度.     

无毒性产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价

【目的】获得产气荚膜梭菌ε毒素（ETX）的无毒重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。【方法】对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因按照大肠杆菌偏爱密码子进行优化设计。同时,将第106位的组氨酸和第199位的苯丙氨酸分别突变为脯氨酸和谷氨酸,经人工合成,获得基因片段GETX_m2。将GETX_m2克隆至原核表达载体pET30a-(＋)后,将pET30a-GETX_m2转化至BL21（DE3）感受态细胞中,在15℃和37℃两种条件下分别用IPTG诱导16 h和4 h,超声破碎后收集上清和沉淀,采用SDS-PAGE和Western blot方法检测重组蛋白的表达情况及其可溶性。利用Ni-IDA亲和层析方法对可溶性表达的重组蛋白进行纯化,从而获得重组蛋白rETX_m2。利用Western blot方法,检测rETX_m2与D型产气荚膜梭菌ETX抗血清的反应性。将rETX_m2用细胞维持液稀释至100及10 μg·mL^-1,检测其对犬肾细胞系（MDCK细胞）的毒力。分别用胰酶活化前和活化后的rETX_m2,以0.0625、0.625和6.25 mg·kg^-1 3个剂量尾静脉注射,检测rETX_m2对小鼠的毒力。随后,将rETX_m2与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,取4只健康家兔,皮下免疫2次（间隔两周）,100 μg/只。同时,Montanide ISA 201佐剂与PBS混合液免疫组作为对照组。分别在一免后14 d以及二免后21 d,采血,分离血清,按照《中华人民共和国兽药典》（2015年版）规定的方法检测血清对D型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价。同时,在二免后21 d,对家兔经耳缘静脉注射1个家兔MLD的D型产气荚膜梭菌毒素,检测rETX_m2对家兔的免疫保护效果。【结果】 在15℃和37℃条件,rETX_m2在BL21（DE3）菌体中均以可溶性和包涵体两种形式表达,综合考虑重组蛋白的表达量、可溶性及诱导时间,选择纯化在37℃条件下诱导获得的可溶性rETX_m2。灰度扫描结果显示,在37℃诱导条件下,rETX_m2可溶表达比例达30%;Western blot检测结果表明,D型产气荚膜梭菌毒素抗血清能够特异性的识别rETX_m2,出现特异性反应条带。MDCK细胞毒性实验显示,在rETX_m2浓度为100 μg·mL^-1的细胞培养基中孵育24 h后,细胞未出现细胞病变,而2 000倍稀释的D型产气荚膜梭菌天然毒素细胞培养基孵育组的细胞出现了明显的细胞病变;小鼠安全试验显示,尾静脉注射6.25 mg·kg^-1剂量的rETX_m2,对小鼠无致死性;血清中和试验结果显示,rETX_m2免疫组每毫升的一免兔抗血清可中和450-750个小鼠MLD,每毫升的二免兔抗血清可中和2 500-4 000个小鼠MLD的D型产气荚膜梭菌毒素,而对照组的兔抗血清对D型产气荚膜梭菌毒素无中和作用;用1个家兔MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。【结论】产气荚膜梭菌rETX_m2毒力基本丧失,但保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。     

芫荽花叶病病原病毒鉴定

 从芫荽(Coriandrum Sativum L.)花叶病株上分离到一病毒分离物(CMV-Co),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus Persicea)均能传毒。人工摩擦接种可侵染5科21种植物,在黄瓜、心叶烟等植物上引起系统花叶;在苋色藜、昆诺阿藜、豇豆等接种叶片上引起局部枯斑。此病毒的钝化温度为55～60℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外存活期2～3天。部分提纯的病毒最大紫外吸收为258nm,最小吸收为238nm,表现为典型的核蛋白吸收,A260/A280=1.26.SDS-不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒其外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25500道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,CMV-Co与黄瓜花叶病毒有明显的血清学反应:用1.5%醋酸双氧铀负染,电镜观察病毒粒子球形(正二十面体),直径为28～30nm.根据上述特征,CMV-Co是黄瓜花叶病毒的一个株系。