重金属离子对凡纳滨对虾的致病机理研究

研究了重金属离子Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋对凡纳滨对虾血清ＳＯＤ、ＣＡＴ活性的影响。结果表明,低、中等浓度的Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋均对凡纳滨对虾血清ＳＯＤ活性表现为较强的诱导作用。在一定的时间和较高浓度下,Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋均对凡纳滨对虾血清ＳＯＤ、ＣＡＴ活性表现出显著抑制作用,具有一定的时间、剂量效应关系。在较低的Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋浓度下,ＳＯＤ、ＣＡＴ活性明显高于对照,且随着各处理浓度的增加和时间的延长（７２ｈ）,Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋对血清ＳＯＤ、ＣＡＴ活性表现出更加明显的抑制作用,即在低剂量、短时间内会导致酶活性提高;而在高剂量或长时间作用下,对虾ＳＯＤ、ＣＡＴ活性表现为抑制作用,且表现出２种金属离子对血清ＳＯＤ、ＣＡＴ活性的抑制作用比单一的金属离子抑制作用更加显著,显示出Ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｃｒ３＋复合污染具有明显协同作用。金属离子的胁迫下使ＳＯＤ、ＣＡＴ的活性比例失调,使对虾的生理代谢紊乱,加速对虾的衰老和死亡。     

草鱼出血病细胞培养灭活疫苗旋转瓶法大规模生产工艺↑（*）

Ｃａｒｅｌ氏瓶静置培养草鱼ＣＩＫ细胞,细胞２～３ｄ内长成单层,细胞单层均匀而稳定;旋转瓶培养,细胞７ｄ左右长成单层,细胞单层面积大,病毒培养产量高。２种方式所培养病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。０．１％福尔马林４℃条件下灭活病毒材料１７ｄ制备疫苗,疫苗性能稳定,安全性好。疫苗效力检验结果表明,注射免疫１０ｄ和浸泡免疫１０ｄ后,免疫鱼体内血清中和抗体效价分别为１０７．９±１１．０（３）和６８．５±９．９（３）,免疫保护力分别为（７７．１±８．９）％（３）和（７３．９±８．３）％（３）,与对照组相比差异显著。本研究建立了草鱼细胞培养灭活疫苗大规模生产工艺流程,进行了较大规模的疫苗生产和生产性免疫试验,免疫草鱼成活率平均达到８５％以上。     

淡水鱼类急性中毒死亡的判断

淡水鱼类急性中毒死亡的判断ＤＩＡＧＮＯＳＩＳＦＯＲＦＲＥＳＨＷＡＴＥＲＦＩＳＨＫＩＬＬＳＣＡＵＳＥＤＢＹＡＣＵＴＥＰＯＩＳＯＮＩＮＧ曹立业李应仁（中国水产科学研究院，北京１０００３９）ＣａｏＬｉｙｅＬｉＹｉｎｇｒｅｎ（ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆ...     

应用间接荧光抗体技术研究水中嗜水气单胞菌的数量与鱼类出血性败血病的关系

应用间接荧光抗体技术（ＩＦＡＴ），并结合嗜水气单胞菌（Ａｈ）地区优势血清型，对鱼类出血性败血病的致病菌Ａｈ进行水中数量的测定。ＭＭ感染试验和对生产鱼塘调查的结果表明，水中Ａｈ菌量与疾病呈正相关，致病浓度又随鱼体健康低下、水中氨氮偏高、溶氧偏低等多种因子的影响而下降。本试验方法快速简便，检测对象为水体，非常适用于预测疾病的发展趋势。     

卤虫对几种抗菌药物的摄入与排出Ⅱ水不溶性药物的摄入与排出

本文研究了卤虫（Ａｒｔｅｍｉａｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｅｔｉｃａ）对下述３种药物的摄入与排出：磺胺嘧啶（ＳＤ）、土霉素（ＯＴＣ）及无味红霉素（ＥＲＹ－Ｅｓ）。当摄取药物１小时（药物用海水配制成混悬液）时，卤虫（幼体或成体）消化道充满了白色的药物颗粒；经测定此时初孵无节幼体内药物含量为１７μｇ／１０只，成体内为２０３μｇ／只（体长６５ｍｍ）及３６２μｇ／只（体长９２ｍｍ）。药物颗粒大小、摄取时间及卤虫体长对药物摄入量有明显影响。但卤虫对３种药物的摄取量无明显差异。当将载药卤虫放入海水中３小时时，仅有５０％的药物被排出。     

培养基更换后草鱼出血病灭活疫苗的免疫效果

使用廉价培养基ＣＡＳ在ＣＩＫ细胞系上增殖草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ—８５４株），所制备的灭活疫苗性能稳定，安全性好。用该疫苗免疫草鱼，饲养１０天后，其血清中和抗体水平测定结果表明，注射组为１０７．９±１１．０（３），浸泡组为６８．５±９．９（３），与对照组［２０．２３±４．５（３）］相比，Ｐ值分别为Ｐ＜０．００１和０．００１＜Ｐ＜０．０１，差异极显著。     

自行往返远控潜吸式清淤机的发明与研究

自行往返远控潜吸式清淤机的发明与研究朱永兴（上海水产大学，２０００９０）关键词清淤机械，分类，行走，潜吸，远控ＩＮＶＥＮＴＩＯＮＡＮＤＳＴＵＤＩＥＳＯＮＡＵＴＯＭＡＴＩＣＤＩＳＴＡＮＴ－ＣＯＮＴＲＯＬＵＮＤＥＲＷＡＴＥＲ－ＣＯＬＬＥＣＴＩＮＧＭＡＣＨ...     

咪唑类离子液体处理对草鱼CYP3A和PXR基因表达的影响

细胞色素Ｐ４５０是一类含有亚铁血红素的超家族单加氧酶,参与许多外源物质（包括药物、环境化合物等）和内源性物质（如激素）的代谢转化。ＣＹＰ３Ａ是Ｉ相解毒酶系Ｐ４５０家族中的重要成员,在肝脏对外源毒物解毒和内源激素的代谢过程中发挥重要作用。为探讨草鱼（Ctenopharygodon idellus）肝脏ＣＹＰ３Ａ在溴化１-辛基３-甲基咪唑离子液体（［Ｃ８ｍｉｍ］Br）的解毒过程作用以及鱼体对［Ｃ８ｍｉｍ］Br的解毒是否通过ＰＸＲ-ＣＹＰ３Ａ转录调控途径作用,通过预试验获取［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼的急性毒性效应,选取２２ｍｇ／Ｌ（１／１０ＬＣ５０）和１０９ｍｇ／Ｌ（１／２ＬＣ５０）浓度组［Ｃ８ｍｉｍ］Br对草鱼染毒２４ｈ,荧光定量ＰＣＲ检测ＣＹＰ３Ａ和ＰＸＲ的表达情况。结果表明,草鱼肝脏ＣＹＰ３Ａ水平与对照组相比极显著上升（Ｐ＜００１）,ＰＸＲ基因表达量与对照组相比也极显著升高（Ｐ＜０．０１）,ＣＹＰ３Ａ与ＰＸＲ基因表达水平呈现出一定的相关性;推测在草鱼体内ＰＸＲ可能就是［Ｃ８ｍｉｍ］Ｂｒ作用于ＣＹＰ３Ａ的受体。     

羊栖菜多糖对高血脂模型大鼠血脂的影响

以实验性高血脂模型大鼠为实验对象,设置３个羊栖菜多糖（ＳＦＰＳ）剂量组（０．３、０．６、１．２ｇ／ｋｇ．ｄ）和阳性,空白对照组,观察其调血脂效果。结果表明,羊栖菜多糖各剂量组均具有显著抑制高脂模型大鼠血中总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）和低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）的增长,降低其含量,升高高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）含量的作用。３个剂量组均好于调血脂药物肌醇烟酸酯阳性对照组;与空白对照组     

黄鳝高产养殖措施

黄鳝是我国的一种重要经济鱼类,也是目前正大力推广养殖的名优水产品之一。近１０年来,我们一直在从事黄鳝养殖方面的研究工作,探索出了一套成熟的黄鳝规模化高产养殖技术,并在湖北省推广养殖１０００公顷以上,养殖单产平均可达２～３ｋｍ／ｍ２,最高可达 ６～８ ｋｍ／ｍ２,养殖纯效益平均可达２０～３０元／ｍ２。现将主要技术措施总结如下：１鳝池修建１．１地点选择 （１）水源充足,排灌方便;（２）水源水质好,无污染;（３）避风向阳,冬暖夏凉;（４）便于修建安全保护设施,能有效防盗、防投毒等。１．２修建方法１．２．…     

中华鳖爱德华菌病病原菌的分离鉴定及致病因子研究

采用API 20E系列生化鉴定及16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析方法,对从患病中华鳖(Trionyx sinen-sis)肝脏中分离到的一株细菌TL5m进行了鉴定,并通过人工感染试验,对该菌株进行了毒力检测;此外分别提取该TL5m株的主要致病因子外膜蛋白、脂多糖和胞外产物,对中华鳖进行毒力和免疫保护率试验。结果显示:菌株TL5m的API 20E鉴定编码为4544000,99.9%为迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda);其16SrDNA序列和gyrB基因序列(GenBank登录号分别:EF121756和GU563803)与迟钝爱德华氏菌的同源性最高(分别为94%和98%);菌株TL5m对中华鳖的半数致死量LD50为2.45×106 CFU/ind。药敏感结果显示菌株对磷霉素、菌必治、头孢孟多、头孢噻吩、壮观霉素高度敏感。外膜蛋白攻毒剂量60μg/ind和脂多糖攻毒剂量400μg/ind时,对中华鳖的致死率都为33.3%,胞外产物对中华鳖的LD50为31.73μg/ind;全菌灭活苗、胞外产物、外膜蛋白和脂多糖的免疫保护率分别为75%、62.5%、25%和87.5%。结果表明,发病中华鳖的病原菌为迟钝爱德华氏菌,其分泌的胞外产物对中华鳖具有较高毒力;提取的脂多糖对中华鳖遭受迟钝爱德华氏菌攻击具有较高免疫保护率。     

Lidocaine hydrochloride—sodium bicarbonate as an anesthetic for soft-shelled turtle Pelodiscus sinensis

ABSTRACT:   Attempts were made to understand how the different sizes (mean body weight of 4.1 ± 0.8 g for small and 182.6 ± 23.7 g for large) of the soft-shelled turtle Pelodiscus sinensis are affected by different temperature (25°C or 30°C), and different concentrations (700, 1000 and 1300 p.p.m.) of anesthetic lidocaine hydrochloride–sodium bicarbonate. The soft-shelled turtles were fed to satiation once daily. Three-way anova design (size × temperature × concentration of lidocaine hydrochloride) with duplicate was used. Twenty each of large and small soft-shelled turtles were distributed into six 30-L tanks. Exposure time of the soft-shelled turtle was affected by all factors (temperature, concentration and size). Exposure time of the soft-shelled turtle for anesthetizing decreased with increase in temperature and in concentration of lidocaine hydrochloride, and decrease in size. Recovery time for the soft-shelled turtle was also affected by all factors. Recovery time of the soft-shelled turtle increased with increase in temperature, concentration of lidocaine hydrochloride, and size. According to these results, lidocaine hydrochloride (1000 p.p.m.)–sodium bicarbonate seemed an effective anesthetic for sedating and handling the soft-shelled turtle. However, when an anesthetic is recommended for wide use, especially on commercially important edible organisms, the time organism takes to metabolize and excrete anesthetic chemicals from its body to a safe level must be given to allow fitness for human consumption.     

人工育鳖的池槽及养殖

The pond and relative technique for the artificial cultivating soft-shelled turtle in Guanzhou city is described in this paper. The technical measurement for the polyculture of fish and amyda sinesis is not only the feasible way to get more benefit from soft-shelled turtle culture, but also the direction to develop further soft-shelled turtle culture.     

利用正交实验法对中华鳖免疫增强剂的初步研究

利用L9（3^4）正交表,通过正交实验设计初步研究了免疫多糖、低聚异麦芽糖和茶花粉等3种免疫增强剂对中华鳖免疫功能的影响。实验结果表明：以存活率为考察指标,影响程度排序为低聚异麦芽糖〉免疫多糖〉茶花粉,低聚异麦芽糖最适水平为0.3%;免疫多糖最适添加水平为0.1%或0.3%,两水平间无显著差异;不同水平的茶花粉对中华鳖存活率影响均不显著。以脾脏指数为考察指标,影响程度排序为低聚异麦芽糖〉茶花粉〉免疫多糖,但3种免疫增强剂的影响程度不显著;同样,以溶菌酶为考察指标,影响程度排序为茶花粉〉免疫多糖〉低聚异麦芽糖,但3种免疫增强剂的影响程度不显著。因此低聚异麦芽糖和免疫多糖比较适合用作中华鳖的免疫增强剂。     

中华鳖IRF4基因克隆及免疫功能研究

干扰素调节因子IRF4基因仅表达于免疫相关细胞,在先天性免疫和特异性免疫中发挥重要作用。本研究根据中华鳖高通量测序预测的IRF4基因序列(GenBank登录号:XM_014581444),设计特异性引物扩增片段验证其编码区;通过荧光定量检测IRF4基因在健康中华鳖中组织表达情况以及脂多糖、聚肌胞苷酸诱导后在外周血淋巴细胞中的表达情况;构建真核表达载体p3xflag-IRF4,检测过表达IRF4基因后细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,以及对干扰素启动子、NF-κB启动子的活性。试验结果显示,IRF4基因编码区和GenBank中序列完全相同,其推测的氨基酸序列含有1个DNA结合结构域和1个IRF相关结构域;荧光定量结果分析显示,IRF4基因表达于所检测的组织和器官,其中在血液、肝、脾中表达较高,脂多糖和聚肌胞苷酸均能诱导外周血淋巴细胞中IRF4基因的表达;过表达IRF4基因后降低细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,过表达IRF4基因能显著诱导干扰素启动子活性,抑制NF-κB启动子活性。上述结果为更深入研究中华鳖IRF4参与机体免疫应答提供基础。     

中华鳖稚鳖继饥饿后的补偿生长研究

对中华鳖(Pelodiscus sinesis)稚鳖(平均体重4.47g)进行了6种饥饿处理:饥饿0(C)、3(T1)、6(T2)、9(T3)、12(T4)和15d(T5),然后饱食处理,实验持续28d。结果显示T1组与C组试验末体质量差异不显著,而显著高于其它饥饿处理组;摄食期的摄食率随饥饿处理时间延长而显著增加;T1组饵料系数与C组相近;T1组特定生长率最高,各组特定生长率差异不显著。表明:经过饥饿3d后恢复摄食的稚鳖可达到完全补偿,且补偿生长效应主要通过提高摄食率实现的。     

鳖的规模繁殖试验报告

从亲鳖的选育、雌雄的配比、温度、湿度及水化因子进行人工控制,对鳖进行规模人工繁殖试验,获得每只雌鳖产卵45只以上,受精率90%以上,孵化率87%以上,稚鳖成活率99%以上的结果.     

利用卵黄监测鳖群中病原菌感染

用从病鳖体内分离的四种病原菌制备诊断抗原, 采用微量凝集试验检测104 份卵黄样品中抗菌卵黄抗体。结果共检出86 份阳性样品, 其中以气单胞菌卵黄抗体阳性样品最多, 阳性检出率为50-96 % 且抗体水平较高, 可达1∶32 。变形杆菌卵黄抗体和不动杆菌卵黄抗体的阳性检出率分别为22-12 % 和9-62 % 。表明鳖场鳖群中有气单胞菌、变形杆菌和不动杆菌感染, 但以气单胞菌感染的范围及强度最高。     

甲鱼爆发性传染病病原体分离及抗血清制备

从患病甲鱼的肝脏中分离到9株细菌,其中7株为温和气单胞菌,2株为豚鼠气单胞菌。两种菌JA—1和JA—2对鲫鱼的半数致死量(LD_(50))各为4.3×10~5和5.5×10~7,在两种菌培养的上清液中均有一种具有溶血活性的毒素。研究表明:甲鱼的爆发性传染病是由温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌引起,用两种菌为菌种做成菌苗,结合免疫增效剂免疫家兔制得血清,效价可达1:512,治愈率达100％。     

光合细菌FP04的筛选及对中华鳖养殖水质和生产效益的影响

从入海排污口污泥中筛选到一株有较强净化养殖水质能力的光合细菌,初步鉴定其为红螺菌,命名为FP04。实验室试验表明,FP04能有效降低养殖污水的CODcr含量。在中华鳖的养殖水体中加入不同浓度的FP04,结果与对照组比较,FP04可显著降低养殖水体中的氨氮和化学需氧量,并可减少甲鱼病害发生,提高甲鱼养殖成活率和增重率,其中以养殖水体中FP04浓度为9×104CFU/mL的效果最好,成活率和增重率分别提高14%和31%。