大豆胚尖不定芽诱导影响因子的研究

以大豆胚尖为外植体,研究基因型、浸种时间和诱导时间对胚尖不定芽诱导的影响。结果表明,7个基因型大豆不定芽诱导率变化在35.0%~83.3%之间,黑农48适合于大豆胚尖不定芽再生系统;合丰35成熟种子诱导不定芽产生以浸种48h效果最好;黑农48诱导96h时不定芽诱导率达100%,诱导96h和84h大豆胚尖可形成较多的不定芽。     

大豆不同基因型胚尖不定芽的诱导及对抗生素的敏感性

以大豆胚尖为外植体,在MS+3.0mg/L6BA上培养诱导8个基因型产生不定芽,筛选适合于胚尖再生系统的大豆基因型。同时,测定吉林40在诱导胚尖不定芽时对卡那霉素和头孢霉素的耐受性。结果表明,在8个大豆基因型中,2个基因型的不定芽诱导率大于90%,综合考虑不定芽诱导率和芽数两个性状,吉林40和黑农37适合于大豆胚尖不定芽再生系统。在培养基中加入卡那霉素或头孢霉素时,随着抗生素浓度的增加,胚尖不定芽诱导率急剧下降。经方差分析,卡那霉素和头孢霉素对大豆胚尖不定芽诱导率和芽数均有明显的抑制作用。在培养基内加入200mg/L卡那霉素或300mg/L头孢霉素时,胚尖不定芽诱导率和芽数显著地低于对照。在胚尖再生系统遗传转化中,建议以200mg/L卡那霉素作为抗性筛选浓度,使用头孢霉素作为脱菌剂时,浓度低于300mg/L不会降低大豆胚尖不定芽的诱导率和芽数。     

草铵膦对大豆胚尖不定芽形成的影响

本文以大豆黑农37、吉育91和淮豆4号3种基因型的胚尖为外植体,研究草铵膦7种浓度对大豆不同基因型胚尖不定芽形成的影响。结果表明,大豆3种基因型表现出对草铵膦的耐性不同。吉育91耐性较强,淮豆4号耐性较差。依大豆基因型的不同,草铵膦浓度在0.6mg/L或1.2mg/L时抑制大豆胚尖不定芽形成。本研究为以Bar基因作为选择标记的大豆胚尖遗传转化奠定了基础。     

黑农51子叶节和胚尖再生体系的建立及优化

为建立一个高效的大豆再生体系用于大豆的遗传转化,选用黑农51的子叶节和胚尖作为外植体,建立了黑农51的子叶节和胚尖再生体系,并研究了6-BA和IBA对大豆再生的影响。结果表明,黑农51子叶节最适芽诱导培养基为MSB5+1.0 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA,最适生根培养基为MSB5+1.0 mg/L IBA;胚尖最适芽诱导培养基为MSB5+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,最适生根培养基为MSB5+2.0 mg/L IBA。黑农51子叶节再生体系的出芽率、出芽数、芽伸长数和生根率四个指标均高于胚尖再生体系,更适合作为遗传转化的受体材料。     

农杆菌介导大豆不同外植体遗传转化研究

以MYB转录因子GmPHR1为目的基因,冀豆12、冀豆16和绥农14为转化受体,比较农杆菌介导大豆不同外植体的遗传转化技术,为大豆转基因育种提供技术支撑。结果表明,以茎尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率最高,且对基因型的依赖性最小,但由于对抗生素的敏感性较差,因而存在一定程度的假阳性;其次,以胚尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率较高,对基因型的依赖性较小,同时对抗生素的敏感性较强,因而是一种较为理想的转化系统。而子叶节、下胚轴转化系统则表现出不定芽诱导率、植株再生率和转化效率均较低,且存在较强的基因型依赖性等不足。同时,利用上述4种转化系统,获得了3个供试大豆品种的转基因T1植株。     

农杆菌介导大豆胚尖转化体系的研究

以大豆"黑农37"胚尖为外植体,利用农杆菌介导法将抗除草剂基因EPSPS转入大豆,并对转化各培养阶段6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)浓度进行了优化。结果表明:在预培养和共培养培养基中加入较高浓度6-BA有利于抗性芽的诱导;1mg/L6-BA和0.2mg/L吲哚丁酸(IBA)配合使用有利于抗性芽的伸长且提高了抗性芽的再生率;将抗性芽添加在1mg/L IBA的培养基中培养7d后转入不加任何激素的培养基中生根快且移栽后成活率高。PCR结果初步证明将EPSPS基因转入到大豆中。     

大豆子叶节植株再生体系的优化及转EPSPS基因的研究

为提高农杆菌介导转化大豆子叶节再生体系的遗传转化效率,优化了激素水平、基因型、抗生素及筛选压力等影响植株再生的多个因素,并用EPSPS基因转化大豆子叶节。结果表明,不定芽诱导培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)浓度为1.6mg/L时,不定芽诱导率最高,黑农37和合丰35的不定芽诱导率较吉育91高,吲哚丁酸(IBA)诱导生根的适宜浓度为0.5~1.0mg/L。头孢霉素的最适抑菌浓度为500mg/L,草甘膦有效筛选压力为8mg/L,并获得转EPSPS基因的抗性植株。     

黑赤松成熟胚诱导不定芽的研究

以黑赤松成熟胚为外植体进行不定芽诱导分化技术的研究,以此建立黑赤松的再生体系。探讨了基本培养基、激素配比、不同摆放方式、外植体不同取材时间、培养基不同无机盐浓度及不定芽继代增殖等问题。结果表明：成熟胚不定芽诱导以WPM培养基最好,不定芽的平均增值倍数达到3.01;WPM中加入6-BA2~3mg.L-1+NAA0.01~0.05mg.L-1时不定芽的诱导率达76%,平均增值倍数可达3.55;垂直摆放有利于不定芽的分化;外植体预培养21~28d、3/4WPM无机盐浓度诱导效果佳;不定芽继代增值的最佳培养基为：3/4WPM+6-BA 0.5mg.L-1 + NAA 0.02mg.L-1。     

杉木子叶和下胚轴的器官发生与体胚发生

以杉木实生苗的子叶和下胚轴为起始外植体,研究了基本培养基、6-BA、TDZ、苗龄等因素对器官发生和体胚发生的影响.研究结果表明：基本培养基、6-BA、TDZ及苗龄对子叶和下胚轴不定芽发生和体胚发生均产生显著影响.DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.003mg/L＋NAA 0.1mg/L是子叶和下胚轴诱导不定芽发生及下胚轴诱导体胚发生的最佳培养基;DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.002mg/L＋NAA 0.1mg/L对子叶诱导体胚最有效;不定芽在DCR基本培养基中可有效伸长;1/4MS＋IBA 0.2mg/L＋NAA 0.1mg/L可有效诱导不定芽生根.     

基因型对大豆子叶节系统再生和转化的影响

以大豆子叶节为材料，分别以丛生芽分化率和子叶节区GUS阳性率为指标确定不同大豆基因型对外植体丛生芽诱导的影响及对农杆菌的易感性，探讨基因型对大豆子叶节系统再生和转化的影响。试验结果表明，大豆基因型对子叶节丛生芽诱导及对农杆菌的易感性均有较大影响。筛选出11个丛生芽分化率在70％以上的大豆基因型，筛选出最易感的大豆品种为黑农35，其次为绥农14和合丰35。     

NaCl、单Na+、Cl-胁迫对不同番茄幼苗光合特性的影响

为探讨番茄耐性品种的生理机制,以醋栗番茄、辽园多丽、红宝石和辽园红玛瑙4种不同基因型番茄为试材,比较研究了50,100,150 mmol/L的NaCl及等渗150 mmol/L单Cl-、单Na+溶液胁迫,对番茄苗期相对生长量、盐害指数、叶绿素含量、光合作用的影响.结果表明:随着盐浓度增加,4种番茄幼苗的地上部相对干鲜质量、相对株高、相对叶片数、光合色素含量、叶片净光合速率、气孔导度、蒸腾速率逐渐降低,盐害指数逐渐升高;通过各项指标鉴定醋栗番茄、辽园红玛瑙耐盐性大于辽园多丽、红宝石;等渗的NaCl及其单离子Na+、Cl-胁迫,Cl-离子伤害最小,Na+离子对番茄的毒害比Cl-离子敏感;4种番茄在50 mmol/L NaCl胁迫下光合速率降低的主要原因是气孔因素限制,其他高盐浓度胁迫则为非气孔因素限制.     

几种樱桃番茄种子萌发期的耐盐性研究

用皿内培养法，研究了NaCl胁迫下几种樱桃番茄的种子萌发和幼苗生长特性，以期为樱桃番茄的耐盐栽培奠定基础。结果表明：（1）随着NaCl浓度的增大，种子萌发的整齐度下降，萌发率明显降低，发芽受损率明显增加，出苗率明显降低；（2）随着NaCl浓度的增大，幼苗生长受到的胁迫越明显，不同材料间差异较大，黄珍珠最敏感，台湾圣女次之，樱桃红受到的影响最小；（3）随着NaCl浓度的增大，发芽指数和活力指数都明显下降，不同材料间差异较大。发芽指数和活力指数的变化均表现为，黄珍珠>台湾圣女>樱桃红。     

NaCl胁迫对高粱幼苗生理生化特性的影响

以河农16高粱的3叶期幼苗为材料,在不同浓度的NaC l溶液中胁迫处理,分别在处理1h、2h、3h和4h后取幼苗,研究不同NaC l浓度和不同胁迫时间对高粱幼苗渗透调节物质(可溶性蛋白、脯氨酸含量、可溶性糖含量)和抗氧化保护酶系统活性(POD、SOD、CAT)的影响。结果表明,在一定范围内,随NaC l浓度的升高和胁迫时间的延长,河农16幼苗的渗透调节物质含量增加,超过最大耐受范围后含量下降。抗氧化保护酶系活性变化与渗透调节物质变化相似,呈现先升后降的趋势。河农16幼苗在NaC l胁迫下,渗透调节物质和抗氧化酶系统对NaC l溶液的有效调节浓度为0.9%。     

NaCl处理对番茄幼苗生长和有机渗透物含量的影响及其相关性研究

试验以离体番茄幼苗为材料,研究了不同浓度NaCl处理对其生长、生根、含水量、根冠比以及脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量的影响.结果表明:番茄幼苗的株高、增殖倍数、根长以及根数均随NaCl浓度的增加而下降,首先表现出抑制的是根长,其次为生根数;随着NaCl浓度的增加,幼苗含水量先增加后减少;脯氨酸、可溶性糖含量持续显著增加;而根冠比和可溶性蛋白随NaCl浓度增加而下降.相关分析表明,NaCl处理后,番茄幼苗中可溶性糖含量与株高、增殖倍数、生根数间呈负相关(p≤1%),脯氨酸含量与株高、增殖倍数、根长、生根数间呈负相关(P≤1%);可溶性蛋白与株高、根长间呈正相关(p≤1%),各生长指标间呈正相关(p≤1%).     

NaCl胁迫对莴苣幼苗生长和光合性能的影响

研究不同浓度(50,100,150,200 mmol/L)NaCI胁迫对莴苣幼苗生长和叶片光合特性的影响,结果表明,在盐胁迫下,植株株高和根长生长都受到明显的抑制;叶片中叶绿素(Chl)含量随着处理浓度的增加和时间的延长呈现下降的趋势,但是50 mmoL/L NaCl处理中Chl含量却有所增加,盐胁迫对叶绿素a(Chla)的影响大于叶绿素b(Chlb).在盐胁迫下净光合速率(Pn)呈下降趋势,气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)的变化趋势与Pn相一致;50 mmol/L NaCl处理中,随着处理时间的延长,G8和胞间CO2浓度(Ci)呈相同的变化趋势,此时Pn的下降主要是气孔限制,而在100～200mmol/L NaCI处理中,随着处理时间的延长,Gs和Ci呈相反的变化趋势,此时Pn的下降主要是非气孔限制.     

NaCl胁迫对两优培九幼苗离子含量的影响

3种浓度的NaCl胁迫杂交水稻两优培九幼苗4d后，根和地上部分的相对含水量明显下降。功能叶片中的游离脯氨酸和可溶性总糖含量以及幼苗根、茎、叶中的Na＋含量、Na＋／K＋、Na＋／Ca^2＋和Na＋／Mg^2＋与对照相比，随着盐处理浓度的增大而增大，K＋、Ca^2＋和Mg^2＋的含量则相反。试验结果表明，在盐胁迫下两优培九幼苗主要利用产生游离脯氨酸和可溶性糖等有机渗透调节物质来维持地上部分的渗透平衡；从离子平衡角度发现，两优培九幼苗在根部通过避Na＋机制来保持较高的Na＋／K＋以减轻盐胁迫对地上部分的伤害，在茎和功能叶片中则通过保持细胞中较高的K＋水平以减轻盐胁迫的伤害。     

钾、钠对水稻种子萌发抑制作用的比较

用不同浓度的NaCl、KCl和二者的混合盐(摩尔比NaCl:KCL=1:1)处理水稻种子.测定其萌发率、芽生长率、首次萌发时间、萌发速率(GR)等指标.结果表明,低盐下萌发率与对照相差不大,但萌发延迟,芽生长受到抑制.当浓度大于240mmol/L时.萌发率才随盐度增加明显下降.比较3种处理,NaCl和NaCl+KCl对芽生长的抑制程度相差不大,都明显低于KCl,低盐下3种处理萌发率没有差异.只有当盐度大于240mmol/L,相同盐度下,萌发率才随着K浓度的增加而下降.这些数据都表明,高盐度下,钾对水稻种子萌发和种子生长的抑制作用大于钠.     

NaCl、光和温度胁迫对龙眼胚性愈伤组织GPX酶活性的影响

以龙眼胚性细胞系LC2为材料,初步研究了在NaCl、光和温度胁迫下龙眼胚性愈伤组织ＧPX酶活性的变化规律。试验结果表明：（1）与对照相比,在盐胁迫下短期内ＧPX酶活性增加,随胁迫时间的延长,低盐胁迫下ＧPX酶活性先上升后下降,而高盐胁迫下ＧPX酶活性则呈下降趋势;（2）白光、绿光处理下,随光强的不断加强,GPX活性均呈先上升后下降趋势,且在同样光强下,白光处理的GPX活性均高于绿光;（3）龙眼EC的GPX活性在低温（高温）处理下,与对照相比,随温度不断降低（升高）,GPX活性呈先升高后降低趋势。以上结果均表明,在一定逆境胁迫下,细胞内GPX可以起到应答外界刺激的作用,且活性呈规律表达,是植物在逆境胁迫下防御ROS伤害的主要标志之一。     

盐胁迫下棉花体内Na+的积累、分配及耐盐机制研究

NaCl胁迫下,棉花体内以阳离子Na 为主要毒害因子,耐盐性不同的棉花根、茎、叶内Na 积累量存在显著差异,Na 含量吸收和累积最多的部位是:不耐盐材料的根、耐盐材料的根和叶、强耐盐的叶。不同耐盐性的材料从外界吸收的Na 总量就全植株来讲大致相同,只是在体内各器官的分布存在差异;低浓度NaCl(0.2%)下,不耐盐、耐盐材料的全植株Na 量分别上升1.9倍和2.9倍;高浓度NaCl(0.4%)下,不耐盐、耐盐、强耐盐材料分别比对照上升3.6倍、5.2倍和5.3倍。尽管棉花萌发阶段几乎不吸盐,但成株期是吸盐的,且吸盐量提高很多倍,这说明棉花对盐分的吸收具有发育阶段性,同时也反映出棉花耐盐的阶段性。总之认为棉花的耐盐机理与小麦、大麦等作物不同,具特殊性。     

拟南芥rd29A基因启动子克隆及其在马铃薯抗胁迫转基因中的应用

从拟南芥（Arabidopsis thaliana）基因组中用PCR技术分离了rd29A基因上游824 bp的调控序列,序列分析表明该片段与已报道的rd29A启动子有99.39%的同源性,包括缺水诱导表达元件DRE、ABA作用元件ABRE等顺式作用元件。将此片段与GUS基因连接构建了植物表达载体pBIrd,用农杆菌介导法获得了转基因马铃薯植株。对转基因植株进行G