中国野生葡萄染色体倍性研究

利用去壁低渗染色体计数法及流式细胞术法,首次系统地对中国野生葡萄18个种64个株系的染色体倍性进行了鉴定。结果表明,供试的中国野生葡萄全部为二倍体(2n=38)。同时也证明流式细胞仪不仅可以进行染色体倍性的鉴定,且制样简单、测定快速、结果可靠。     

辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定

为指导辣椒单倍体育种技术在实践中的应用,对辣椒8024花药培养再生植株的染色体倍性进行鉴定,以DNA流式细胞仪测定法的鉴定结果为依据,研究利用染色体压片计数法和花药培养再生植株形态及坐果情况鉴定辣椒花药培养再生植株倍性的可靠性。结果表明,花药培养再生植株是倍性水平不同的混倍群体,但各倍性植株所占的比例不同,DNA流式细胞仪测定法和染色体计数法的吻合度达93%,与坐果鉴定结果一致。鉴定结果可直接决定其结籽情况。     

非洲菊大孢子再生植株倍性的快速鉴定方法

以非洲菊大孢子再生植株群体为材料进行倍性鉴定,并以染色体计数法的鉴定结果为依据,研究利用DNA流式细胞仪测定法、气孔保卫细胞叶绿体计数法和形态学特征鉴定非洲菊大孢子再生植株倍性的可靠性。结果表明,非洲菊大孢子再生植株是倍性水平不同的混合群体,倍性分布为单倍体、二倍体和混倍体,但不同基因型各倍性植株所占比例不同;根尖染色体计数法直观、准确,但因非洲菊染色体小且数目较多而导致计数困难;DNA流式细胞仪鉴定法的准确率达95%以上,可用于再生植株群体倍性的快速鉴定;气孔保卫细胞叶绿体计数法的准确性还有待进一步探讨;植株形态鉴定法受培养条件及评定标准的影响较大,准确率偏低。     

植物细胞染色体倍性鉴定方法

综述了植物细胞染色体倍性鉴定的染色体计数法、流式细胞分析法、检测气孔大小及气孔保卫细胞叶绿体数目法等各种检测方法 ,并对其优缺点进行了评述     

瓜类遗传育种中的染色体倍性操作

综述了西瓜、甜瓜及黄瓜遗传育种中的单倍体和多倍体诱导、细胞学倍性鉴定、染色体加倍研究的进展,并对其在遗传育种中的应用作了简要介绍。     

小麦根尖染色体制片及植株倍性鉴定

[目的]探讨小麦根尖染色体制片的最佳技术参数,并对小麦远杂组培苗进行倍性鉴定。[方法]以品种郑麦9023为材料,通过种子催芽、种子根根尖压片试验对小麦根尖的染色体制片方法进行探讨,找出最适合的技术参数,用于小麦远杂组培苗的根尖染色体压片试验,并对其倍性进行鉴定。[结果]利用冰水混合物处理根尖可代替浓度0.1%秋水仙素的作用;根尖的酸解时间宜控制在9.5～10.0min;夏季染色时间宜在5 min以内,冬季染色时间宜在10～15 min。经染色体压片计数得到该小麦组培苗的染色体数为21条,鉴定其为小麦单倍体苗,可进行下一步育种。[结论]该研究对指导单倍体育种具有重要作用。     

甘蔗染色体遗传研究进展

[目的]了解甘蔗染色体遗传行为,为其野生种质开发利用提供参考.[方法]通过文献检索,综述了甘蔗属种间、甘蔗属与近缘属杂交后代染色体的遗传方式以及原位杂交(GISH)技术和寡核苷酸荧光原位杂交(oligo-FISH)技术在甘蔗上的应用.[结果]甘蔗染色体遗传方式能影响甘蔗育种效率;GISH技术是染色体鉴定的有效工具;ol...     

西瓜多倍体鉴定方法的研究

以3个西瓜品种的二倍体和同源四倍体为材料,研究了几种方法对西瓜倍性鉴定的可行性。结果表明,染色体计数法是最可靠的直接方法;流式细胞仪可用于西瓜的早期倍性鉴定;保卫细胞叶绿体数目与西瓜倍性密切相关,是有效的间接方法;二倍体和四倍体植株在生长势、花冠形态、果皮厚度及种子数量和厚度等方面有明显差异,也能初步确定西瓜倍性。     

流式细胞术在蔬菜倍性鉴定中的应用

倍性鉴定一直是蔬菜育种研究的重要内容之一,而流式细胞术(FCM)是一种快速准确鉴定蔬菜倍性的方法。综述了流式细胞术倍性鉴定的原理、操作步骤、优缺点及其在蔬菜作物上的应用进展。     

流式细胞术进行倍性分析的原理和方法

 倍性鉴定在遗传育种中具有十分重要的作用,倍性鉴定的方法一直是育种研究的重要内容之一。由于细胞核G1期的DNA含量反应一个细胞的倍性,因此常常用DNA 含量来估计细胞的倍性。流式细胞术(Flow Cytometry)是一种快速准确鉴定倍性的方法,其最突出的特点是测量快速,可在短时间内完成测定,而且操作简单。该方法包括完整核DNA 的提取和荧光染色,然后根据它们的相对荧光强度来分析DNA的含量。综述了流式细胞分析法在DNA倍性分析中的应用原理和方法,并阐述了流式细胞技术的优缺点。     

蓍状亚菊与菊属北京夏菊品种‘北金’杂交试验初报

通过人工杂交的方法得到了蓍状亚菊Ajania achilloides×夏菊‘北金’Chrysanthemum morifolium‘Beijin’的杂交种,并得到形态学及细胞学研究证明,形态学以舌状花的出现为主要标志,细胞学采用根尖压片结合流式细胞仪测定技术进行;该试验所得的杂交种在观赏性状上表现出一定的超亲优势,可以作为进一步育种的基础材料.     

单胚性二倍体为母本与异源四倍体杂交大规模创制柑橘三倍体

【目的】以单胚性的二倍体柑橘品种为母本与异源四倍体体细胞杂种杂交培育三倍体植株。【方法】选择亲本配置杂交组合进行人工授粉,授粉后70—100 d采幼果进行胚挽救,以流式细胞仪结合根尖染色体压片对再生植株进行倍性检测,最后进行SSR分子标记鉴定。【结果】2009—2012连续4年,以8个二倍体为母本、以4个异源四倍体体细胞杂种为父本,共配置14个倍性杂交组合,授粉花数3 347朵,坐果数678个,平均坐果率20.26%。实施胚挽救的果实数505个,培养种子12 357粒,经生芽、生根诱导培养共获得1 022个株系。通过对再生植株的倍性检测,共获得三倍体植株755个株系,四倍体19个株系。对华农红柚 × NH组合的三倍体、四倍体后代进行分子鉴定,表明三倍体和四倍体全部为双亲的有性杂种后代。【结论】本研究通过杂交获得的三倍体为我国无籽柑橘品种选育奠定了材料基础;同时获得的四倍体后代也为未来的柑橘三倍体育种提供了优良的亲本材料。     

采用四步削茧鉴蛹法减少家蚕原蚕后期死蛹发生

[目的]减少家蚕原蚕后期死蛹发生,提高家蚕一代杂交种生产的经济效益.[方法]以家蚕原种春蕾（中系品种）与镇珠（日系品种）为研究对象,以原蚕后期死蛹率、发蛾率和工效为考核指标,对比四步削茧鉴蛹法与常规削茧鉴蛹法在家蚕一代杂交种生产中的应用效果.[结果]采用四步削茧鉴蛹法处理的原蚕死蛹率（3.01％）较常规削茧鉴蛹法（14.13％）下降了11.12％（绝对值）,二者间存在极显著差异（P＜0.01）.在工效方面,两种削茧鉴蛹法操作的工效无显著差异,且越是蚕蛹发病率高的生产批次,应用四步削茧鉴蛹法的成效越明显.2011～2012年在山东广通蚕种集团公司的部分蚕种场推广应用,结果显示,山东广通蚕种集团公司蚕种场的原蚕后期死蛹率明显减少,发蛾率由应用前在70.00％～90.00％波动提高稳定在92.00％以上.[结论]在家蚕一代杂交种生产过程中,合理运用四步削茧鉴蛹法可极大减少病原物通过蛹体间接触的水平传播感染,有效减少死蛹发生,显著提高制种效益.     

黄籽沙逊与黄籽埃塞俄比亚芥种间杂种的鉴定

为了把黄籽沙逊的黄籽性状同埃塞俄比亚芥菜的优良特性相结合,在对黄籽沙逊和黄籽埃塞俄比亚芥菜种间远缘杂交的基础上,开展了对种间杂种的形态鉴定、染色体倍性检测、根尖染色体制片和分子标记鉴定研究。形态学鉴定结果表明,黄籽沙逊和埃塞俄比亚芥菜真杂种外观明显不同于其父母本,处于中间类型,更多偏向于父本黄籽埃塞俄比亚芥。总共对11株黄籽沙逊与黄籽埃塞俄比亚芥菜种间杂种后代的倍性进行了检测,流式细胞仪分析结果表明,阳性植株DNA相对含量(主峰位置125)明显小于对照黄籽埃塞俄比亚芥DNA相对含量(主峰位置200),大于亲本黄籽沙逊DNA相对含量(主峰位置75)。细胞学鉴定结果表明,真杂种植株染色体为27条,为黄籽沙逊(AA,2n=20)和黄籽埃塞俄比亚芥菜(BBCC,2n=34)的单倍体染色体相加之和。分子标记鉴定结果表明,真杂种既有父本也有母本的特异性条带。以上均证实了所获得种间杂种的真实性,其包含了双亲中的遗传信息。所获得的含有芸薹属A、B和C 3个亚基因组的种间杂种可作为育种的中间材料应用到甘蓝型油菜的遗传育种研究,具有重要的理论和实践意义。     

烟草花粉植株染色体倍性苗期快速鉴定

为了提高烟草单倍体育种中花粉苗的利用效率,采用气孔保卫细胞叶绿体计数法对花粉植株染色体倍数性鉴定进行了研究.结果表明:单倍体、二倍体、多倍体的叶绿体数平均值分别为11.559,20.458,35.056个,差异极显著;通过对叶片进行失水处理,解决了幼嫩叶片不易制片的问题,结合第3,5,8,13,17叶的叶绿体数分布,将鉴定时期提到了移栽前的第5叶,得出了每株只计数1个气孔叶绿体数的一种快速、准确的计数方法--叶绿体数倍性分界法.该方法准确率高达98.5%.     

流式细胞术在农业领域的应用

流式细胞术是一种能够对群体细胞进行单细胞水平的多个参数同时快速定量分析和分选的技术,其在农业领域的应用还有较大的发展空间。在动物研究中,流式细胞术的应用较为广泛,特别是在疫病检测、精子分选等方面。在植物研究中,由于细胞壁的存在,其应用一直受到限制。现有的研究主要包括倍型分析、DNA含量测定、染色体的鉴定和分选等。流式细胞术在微生物方面的研究起步相对较晚,在食品微生物中的应用仍然较为有限,而在病原微生物检测方面相对成熟。未来,流式细胞术与其他技术的结合将为农业领域的研究提供更为高效、便捷的工具、手段和平台。