双黄连口服液联合青霉素G对金黄色葡萄球菌的体外抗菌作用研究

用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)介绍的方法,分别测得双黄连口服液和青霉素G对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC);使用棋盘联合药敏试验法,以部分抑菌浓度(Fractional inhibitory concentration,FIC)指数为指标,观察双黄连口服液和青霉素G联用对金黄色葡萄球菌的抗菌作用.结果表明,双黄连口服液对金黄色葡萄球菌的MIC是46.88 mg/mL(稀释度1:32);青霉素G对金黄色葡萄球菌的MIC是0.25 U/mL;双黄连口服液和青霉素G联用对金黄色葡萄球菌的FIC指数是0.125.双黄连口服液联用青霉素G对金黄色葡萄球菌联合药敏结果呈协同作用.     

迷迭香精油对金葡菌感染小鼠的干预作用

【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪分析血常规指标,组织固定制备石蜡切片,显微镜观察组织病变,细菌定殖检测。【结果】迷迭香精油组大肠杆菌、金葡菌和链球菌抑菌圈分别为(12.4±2.4)、(12.6±1.2)、(11.5±0.5)mm,茶树精油有抑菌圈出现,薰衣草精油组无抑菌圈。模型组小鼠金葡菌感染后反应明显增强、采食减少、体重明显减轻,肺指数升高,肺细菌定殖率高,白介素-6 (IL-6)和炎性细胞数量明显增加;肉眼观察到小鼠肺脏肿胀充血、色泽暗红,肺叶上均有大小不等的出血斑,肺组织有硬肿块,肺门淋巴结肿大;镜检发现肺脏结构改变明显,肺泡间隙有炎性细胞聚集和浸润,组织实变明显,肺泡壁增厚,肺泡组织结构完整性破坏,肺泡腔内可见出血。与模型组比较,迷迭香组小鼠反应温和,采食和体重增加,肺脏指数降低和细菌定植率下降,后期IL-6和炎性细胞数量明显减少;小鼠肺组织充血减轻,肺泡间隙炎性细胞浸润减少,肺泡结构完整性逐步恢复,接近对照组小鼠。【结论】迷迭香精油体外具有良好的抗菌作用,体内缓解金葡菌引起的肺炎炎症症状。     

茶树精油抗沙门氏菌活性研究

【目的】研究茶树精油对沙门氏菌的生长、碱性磷酸酶含量、胞外蛋白含量、电导率、生物膜形成、鞭毛动力等的影响,初步探讨其抑菌机理。【方法】分别检测茶树精油和多种抗生素对沙门氏菌最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）及茶树精油对沙门氏菌最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。检测不同质量浓度茶树精油对沙门氏菌生长曲线、碱性磷酸酶活性和胞外蛋白质量浓度、电导率、生物膜、鞭毛动力的影响。【结果】茶树精油对沙门氏菌的MIC和MBC均为10 540 μg/mL。2 635,5 270,10 540 μg/mL茶树精油对沙门氏菌的生长均有抑制作用,且随着茶树精油质量浓度的增加,其对沙门氏菌的抑制作用增强,沙门氏菌的碱性磷酸酶活性和胞外蛋白质量浓度增加,电导率增强,生物膜形成受到抑制,鞭毛动力下降。【结论】茶树精油通过影响沙门氏菌的生长、碱性磷酸酶活性和胞外蛋白质量浓度、电导率、生物膜形成、鞭毛动力而发挥抑菌作用。     

金黄色葡萄球菌诱发小鼠实验性乳腺炎研究

为建立小鼠乳腺炎模型,本试验选用35只泌乳期BALB/C雌鼠随机分成7组,其中6组于产后8~10 d分别用灭菌生理盐水和不同浓度的金黄色葡萄球菌悬液50μL经乳头管注入到小鼠的第4对(腹部)乳腺内,观察小鼠体温、组织病理学、间质宽度、腺泡壁厚度的变化以及乳腺组织中CFU、TNF-α和IFN-γ含量变化。结果表明:试验组小鼠体温呈现先下降后上升的趋势,以T3组明显;组织病理学显示乳腺上皮脱落,腺泡腔内大量炎性细胞浸润,以嗜中性粒细胞为主,腺泡内空泡减少,间隔增宽,炎症明显。而随着金黄色葡萄球菌用量的加大,乳腺组织的炎症程度加剧。T3组间质宽度高于其他组。与对照组相比,T3组小鼠乳腺组织中腺泡壁厚度、CFU、TNF-α及IFN-γ含量极显著升高(P<0.01)。结果表明金黄色葡萄球菌诱发小鼠试验性乳腺炎模型与炎症的免疫病理过程和炎性反应一致,可用作病理模型使用。     

乌桕根皮醇提物对金黄色葡萄球菌耐药菌株的抗菌活性

目的:金黄色葡萄球菌的耐药性严重制约了感染者的治愈效果,从中草药中发现新抗菌药物具有重要的实际价值。方法:通过对乌桕根皮60%和95%乙醇提物各萃取部位的对耐药金黄色葡萄球菌抑制活性研究。结果:乙酸乙酯部位和正丁醇部位对耐药金黄色葡萄球菌具有抑制活性。样品浓度为1mg/ml时,抑菌直径在4～5mm之间。结论:显示了乌桕根皮的研究价值。     

赪桐提取物抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机理

[目的]揭示赪桐提取物(Extracts from Clerodendrum japonicum,EFC)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌机理,为临床抗病原菌感染药及植物杀菌剂的研发提供理论依据.[方法]采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌对EFC的敏感性,明确EFC的抗菌活性;通过试剂盒、流式细胞仪及扫描电镜等测定EFC作用后金黄色葡萄球菌细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环、可溶性蛋白、胞内活性氧(ROS)水平、细胞凋亡及形态结构的变化,研究EFC的抗菌机理.[结果]EFC对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌3种供试细菌均具有抗菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强,其抑菌圈(IZ)、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为19.04 mm、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL.经EFC作用10h后,金黄色葡萄球菌的乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子(K+)及碱性磷酸酶(AKP)外泄分别显著增加72.0%、43.0%和78.0%(P<0.05,下同),琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性分别显著下降80.0%和36.4%.金黄色葡萄球菌经EFC作用24 h后,与对照组相比,5MIC(2.50 mg/mL)、10MIC(5.00 mg/mL)和20MIC(10.00 mg/mL)组的胞外蛋白含量分别上升28.6%、41.8%和61.5%,胞内蛋白含量分别下降40.9%、61.3%和82.5%,胞内ROS水平分别增加9.1%、33.5%和51.0%,细胞凋亡率分别增加24.0%、50.6%和72.8%.经EFC作用24 h后,扫描电镜下的菌体形态结构不规则、萎缩、畸形.[结论]EFC通过破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜的完整性及通透性,影响蛋白合成,导致TCA循环减慢而发挥抑菌作用.     

金黄色葡萄球菌诱发小鼠乳腺炎模型的建立

为了给研究乳腺的免疫学、病理学、药动学、药效学和临床治疗等提供实验平台,试验从患有隐性型或临床型乳腺炎的奶牛奶样中分离出金黄色葡萄球菌并将其制成102cfu/50μL、103cfu/50μL、104cfu/50μL的细菌悬液,通过乳头管注射接种小鼠乳腺组织,人工诱发BALB/c小鼠乳腺炎。结果显示,乳腺接种103cfu/50μL金黄色葡萄球菌的母鼠于攻菌后24h全部发生乳腺炎,乳腺内细菌数较多,乳腺组织出现病变但不太严重,且未出现母鼠死亡情况,成功建立了乳腺炎模型。     

鸡金黄色葡萄球菌对21种常用抗菌药物的敏感性研究

鸡金黄色葡萄球菌是鸡病的重要传染源之一,且随着抗生素的长期过量使用,葡萄球菌的耐药性不断被强化,耐药菌株增多,对抗生素的敏感性降低.通过药敏纸片扩散法检测鸡金黄色葡萄球菌对21种常用抗菌药物的敏感性,结果表明:对该菌株极敏的有头孢氨苄、先锋霉素V和硫酸新霉素3种,高敏的有青霉素G、林可霉素、恩诺沙星、强力霉素和痢特灵5种,对其他13种抗生素表现为中低敏或耐药.     

氨苄西林与阿莫西林对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的体外抗菌后效应

采用菌落计数法分别测定了氨苄西林和阿莫西林在 0 5、 1、 2、 4倍于各菌最小抑菌浓度 (MIC)时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌标准株及其临床分离株的体外抗生素后效应 (PAE)。结果显示 ,氨苄西林和阿莫西林在 0 5、 1、 2、 4倍MIC时对金黄色葡萄球菌C2 61 1 2 及临床分离株均具有一定的PAE ,且PAE与浓度在一定范围内 (0 5～ 4倍MIC)呈剂量依赖性 ,当药物浓度达 4倍MIC时 ,PAE明显延长 (P <0 0 5 ) ;但两药对金黄色葡萄球菌C2 61 1 2 及临床分离株的PAE值仅在4倍MIC时差异显著 (P <0 0 5 )。在相同浓度下 ,两药对大肠杆菌ATCC2 5 92 2和临床分离株的PAE很小甚至没有。提示 :在临床设计给药方案时 ,对金黄色葡萄球菌敏感株引起的感染 ,除了考虑药代动力学和MIC指标外 ,还应考虑PAE因素 ,可适当延长给药间隔时间 ;而对PAE无意义的大肠杆菌敏感株引起的感染 ,宜持续给药或缩短给药间隔时间     

甘草甜素对金黄色葡萄球菌诱发小鼠实验性乳腺炎的影响

【目的】探讨甘草甜素对金葡菌所致小鼠乳腺炎控制效果;【方法】30只BALB/C雌孕鼠随机分成正常对照组(Con,n=10)、阳性对照组(P,n=10)和试验组(T,n=10)。阳性对照组和试验组母鼠于产后8～10d经乳头管注入50μl 7.0×102CFU细菌悬液,生理盐水组注入50μl灭菌生理盐水。30只母鼠于接菌-12h、0h、12h、36h腹腔注射甘草甜素88mg/kg或生理盐水0.2ml。接菌后66h处死小鼠,取乳腺组织固定,进行组织学观察;【结果】观察显示P组的小鼠乳腺组织破坏得最为严重。P组小鼠乳腺组织间质宽度与正常对照组相比极显著增加(p<0.01),T组小鼠乳腺组织间质宽度极显著高于正常对照组(p<0.01),与P组相比极显著减少(p<0.01);与正常对照组相比,P组小鼠乳腺组织中TNF-α、INF-γ含量极显著升高(p<0.01),T组小鼠乳腺组织中TNF-α、INF-γ含量与P组相比极显著降低(p<0.01)。【结论】结果表明,甘草甜素不仅减少乳腺内的细菌数,降低对组织的损伤,而且减轻乳腺炎症变化及全身反应,对乳腺具有一定的保护作用。     

MSL抗菌肽对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的损伤作用研究

通过MSL抗菌肽(MSL)对细菌细胞膜的损伤作用研究,确定该抗菌肽的作用靶点。在1×108个/m L的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌悬液中,分别加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育,分别于0min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、120min、180min、240min离心收集上清液,检测各时间点蛋白浓度,分析蛋白浓度变化规律;分别在对数生长期的金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌悬液中加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育60min后,利用透射电镜观察分析细菌结构的变化。结果,MSL与2种细菌接触后均可引发胞液外流;透射电镜观察发现,MSL可造成绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜破损,胞浆内电子密度降低,染色质聚集,严重者细胞崩解结构不清,说明MSL对G+和G-细菌细胞膜均可造成损伤,证明细菌细胞膜是MSL作用的靶点之一。     

毛兰素缓解金黄色葡萄球菌腹膜炎的作用机制

采用微量肉汤稀释法、荧光共振能量转移试验和分子对接技术,分别探究毛兰素对金黄色葡萄球菌的体外抑制作用、对分选酶A(Srt A)的抑制作用及其作用的分子机制;通过构建小鼠腹膜炎模型,评价毛兰素对金葡菌腹膜炎的缓解作用。结果表明:毛兰素对金葡菌的体外最小抑菌质量浓度为512μg/m L,最小杀菌质量浓度大于1024μg/m L;毛兰素对SrtA活性有明显抑制作用,IC50为(20.91±2.31)μg/m L;毛兰素以紧凑的构象结合至SrtA的活性中心,与SrtA形成稳定的复合物来影响SrtA的生物活性;毛兰素对金葡菌引起的腹膜炎有良好的缓解作用,可减轻金葡菌所导致的小鼠脓肿症状。     

大蒜素对金黄色葡萄球菌抑菌作用的研究

[目的]研究不同种类,不同处理方法蒜液抑菌效果及大蒜素最低抑菌浓度和对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响,为进一步利用大蒜素资源提供理论依据。[方法]用大蒜提取蒜液为材料,定硫法测定其中蒜素含量,研究大蒜素对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。[结果]大蒜液中含有的大蒜素对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,经过机械破碎或挤压得到的蒜液抑菌效果比蒸煮后蒜液好,紫蒜抑菌效果优于白蒜,蒜素的最低抑菌浓度为32 mg/ml。细菌生长曲线表明,对数生长期的金黄色葡萄球菌对大蒜素敏感,而稳定期的菌体抑制作用较弱。[结论]大蒜素在体外对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌作用。     

牛源金黄色葡萄球菌α溶血素单链抗体对小鼠乳腺的保护作用

为探究治疗奶牛乳腺炎的抗生素替代性生物制剂,研究将前期获得的特异性针对金黄色葡萄球菌毒力因子α溶血素的单链抗体scFvZZ107,在小鼠感染金黄色葡萄球菌乳腺炎模型中验证其保护作用。结果显示,3种不同剂量(5、10、15 μg)单链抗体处理组乳腺组织内细菌数量分别为25.42±1.3、3.33±0.53和4.8±0.78 lgcfu/mg,IL-1α的含量分别为49±7.91、31.37±2.26和57.34±4.48 pg/mL,IL-1β含量分别为40.91±7.39、47.81±4.78和39.2±2.28 pg/mL,IL-8的含量分别为48.64±1.86、41.65±3.07和45.74±1.56 pg/mL,与生理盐水处理组相比,单链抗体中、高剂量处理组乳腺内金黄色葡萄球菌检出量显著减少(P<0.05),且IL-1α、IL-1β与IL-8的含量均显著降低(P<0.05)。通过观察小鼠乳腺组织HE和TUNEL染色情况,与生理盐水处理组相比,scFv中、高剂量处理组乳腺组织更加完整,凋亡细胞的数量也更少,表明scFvZZ107对小鼠乳腺具有良好的保护作用。     

重组家蝇抗菌肽Des-HF在酵母中的表达及对金黄色葡萄球菌的抗菌活性

参考家蝇防御素抗菌肽基因序列(AY260152) 设计4条引物,用降落PCR方法获得家蝇防御素抗菌肽成熟肽基因.将基因克隆人酵母表达载体pPICZα-A,构建分泌型重组酵母表达载体pPIC-Des-HF,转化Pichia pastoris受体菌SMD1168,在醇氧化酶(AOX) 启动子调控下,相对分子质量约5 000的重组抗菌肽Des-HF获得表达.抗菌试验结果表明,该表达产物对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性.以小鼠为试验模型研究重组抗菌肽对金黄色葡萄球菌的体内抗菌活性,试验结果表明,240μg重组Des-HF可分别保护小鼠免受10倍最小致死浓度的金黄色葡萄球菌(ATCC26003) 和Cowan I的攻击.     

柠檬草精油抗菌性研究

采用上海地区种植的柠檬草(Cymbopogoncitratus),提取其精油对4种致病菌进行了定性的和定量的抗菌性研究,这4种致病菌是消毒上所针对的主要菌种。定性试验采用贴片法测定了柠檬草精油的抗菌圈直径;定量试验则采用试管培养法对柠檬草精油的最低抑菌浓度(MIC)进行了测定。结果表明:柠檬草精油对所测定的4种致病菌均有很好的抗性,其中对于金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus(G-)的抑制性最强,最低的抑制浓度是0.05μL·mL-1;其次为枯草芽孢杆菌Bacil-lussubtilis(G+)0.1μL·mL-1,而对于大肠杆菌Escherichiacoli(G-)和白色念珠菌Candidaalbicans最低抑制浓度为0.2μL·mL-1。     

石墨材料对黑曲霉和金黄色葡萄球菌生长的不同作用

向PDA培养基中加入膨胀石墨观察黑曲霉的生长,向牛肉膏蛋白胨培养基中加入膨胀石墨观察金黄色葡萄球菌的生长。结果发现:不加膨胀石墨的PDA培养基中黑曲霉菌落直径小于加入膨胀石墨的培养基中黑曲霉菌落直径。不加膨胀石墨的牛肉膏蛋白胨培养基中金黄色葡萄球菌落直径大于加入膨胀石墨的培养基中金黄色葡萄球菌落直径。证实在PDA培养基中膨胀石墨对黑曲霉生长有促进作用,而在牛肉膏蛋白胨培养基中膨胀石墨的加入对金黄色葡萄球菌的生长有抑制作用。     

大蒜汁对金黄色葡萄球菌抑菌效果的研究

金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜共患病致病菌,严重危害着人和动物的健康。为研究大蒜对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,分别测定不同浓度及不同温度处理过的大蒜汁对该菌的抑菌圈大小,结果表明大蒜汁的抑菌效果随着浓度的增大而增加,并随着温度的升高大蒜汁的抑菌效果逐渐减弱,并在常温下(20℃处理过)大蒜汁抑菌效果最好。