28种植物提取物对松材线虫的毒杀作用

测定了采自广东、湖南、云南和新疆的骆驼蓬等15科28种植物提取物对松材线虫的生物活性。骆驼蓬、黄文江鱼藤、紫花山毛豆、厚果鸡血藤、雷公藤、了哥王、博落回等7种植物甲醇索氏提取物杀线虫活性强烈,以1000μg／mL处理后72h,校正死亡率均在88％以上。乙醇是骆驼蓬杀线虫活性成分较合适的提取溶剂。浸渍法测定结果表明,骆驼蓬种子乙醇提取物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物对松材线虫毒杀活性顺序强弱依次为：正丁醇〉氯仿〉水〉石油醚萃取物,其中正丁醇萃取物处理后24h和48h,LC50分别为33．98μg／mL和10．18μg／mL。松枝水培试验结果表明,骆驼蓬种子正丁醇萃取物能明显延缓松材线虫引致的松树萎蔫病的发展,以250μg／mL处理后12d病情指数仅0．17,显著低于“清水＋虫”处理的病情指数0．75。     

松树—松材线虫互作中寄主生理生化响应研究进展

松材线虫病是由松材线虫引起的松树毁灭性死亡病害,对我国森林资源及生态环境造成严重破坏和威胁。几十年来,国内外学者针对松材线虫病展开了广泛而深入的研究,其中寄主松树受松材线虫感染后体内生理生化响应是研究热点。本文针对松树—松材线虫互作中寄主体内生理生化响应的研究进行综述。     

松材线虫效应因子基因筛选及Bx-Hh-grl功能研究

[目的]通过对松材线虫效应因子基因的克隆和功能研究,揭示Bx-Hh-grl对松材线虫致病性的作用,为防治松材线虫提供理论依据.[方法]用松材线虫Bx1022株系接种黑松,20 d后提取线虫总RNA进行转录组测序,将该转录组设为松材线虫植食阶段转录组.提取由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)培养的Bx1022的...     

拟松材线虫侵染对云南松几种生理生化物质的影响

为研究拟松材线虫侵染对寄主内部生理生化物质代谢的影响,测定并比较了健康的云南松以及感染拟松材线虫后发病未死亡和死亡的云南松树干样品中水分、可溶性糖、脂类、酚类,粗蛋白5种生理生化物质的含量。结果表明：拟松材线虫侵染可导致寄主水分、脂类物质含量下降,可溶性糖、酚类物质含量先升后降,对粗蛋白含量无明显影响。     

松材线虫和拟松材线虫的PCR快速检测

利用PCR技术对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus与拟松材线虫B．mucronatus的rDNA的ITS1区和5．8S区核甘酸序列扩增．根据松材线虫与拟松材线虫的ITS1序列区别,分别设计出松材线虫和拟松材线虫的特异性引物,实现了单条活的或FG(φ为4％的甲醛)固定的松材线虫和拟松材线虫的快速检测．     

四川松材线虫与拟松材线虫的PCR-RFLP鉴别

应用PCR-RFLP技术对来自四川省8个地方的枯死松树样品中的伞滑刃属线虫(Bursaphelenchus)群体进行了分子鉴定。结果显示来自邻水、雅安的枯死松树样本中含有松材线虫(B.xylophilus),而来自大竹和遂宁的枯死松树样本中含有拟松材线虫(B.mucronatus)。其他伞滑刃属线虫包括莱鲁尔夫伞滑刃线虫(B.rainulf)、霍夫曼伞滑刃线虫(B.hofumanni)、泰国伞滑刃线虫(B.thailandae)、变异伞滑刃线虫(B.aberrans)。本研究中选用的4种限制性内切酶(DraⅠ、SalⅠ、HhaⅠ、AluⅠ)除SalⅠ外均可对所鉴定的这6种伞滑刃属线虫产生特异性的酶切位点,从而可均有效地鉴别出松材线虫、拟松材线虫和其他4种伞滑刃属线虫,其结果可为今后这几种伞滑刃属线虫的分子鉴定提供一定的参照。     

骆驼蓬总生物碱对斜纹夜蛾的拒食活性及生理效应

采用酸水总生物碱提取法对骆驼蓬种子乙醇提取物进行初步分离，得到粗品总生物碱。将总生物碱进行柱层析，分离获得16种馏分，4号和8号可析出结晶。生物测定结果表明，以4、12和14号3个馏分的杀虫活性最高，3个馏分1000μg／mL对斜纹夜蛾4龄幼虫24h的拒食率分别为96．04％、92．07％、100．00％；48h的拒食率分别为98．82％、96.05％、98．08％。3种高活性馏分500μg／mL对斜纹夜蛾4龄幼虫的作用机理研究表明，12号和14号馏分能显著减少血淋巴蛋白质含量，药物处理的试虫体内总糖含量明显下降。     

万寿菊提取物对松材线虫的毒杀作用

用乙醇提取万寿菊Tagetes erecta的不同部位的粗提物,然后用浸泡生测的方法测定对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的生物活性。结果表明,万寿菊的根、茎、花的乙醇粗提物对松材线虫的活性较强,0.010 g·L^－1质量浓度以上处理72 h后发现,校正死亡率都能达到60%以上,其中万寿菊根的乙醇粗提物的活性最强,校正死亡率超过90%。万寿菊的各部分粗提物的得率都达到5%以上,这为利用植物提取物来毒杀松材线虫提供了初步的理论依据。图1表1参13     

宁波松木中松材线虫与拟松材线虫混生现象的报道

在对宁波地区松木中携带的伞滑刃属线虫种类进行调查时,多次发现了松材线虫与拟松材线虫混生的现象,并进行了分子生物学方法的确认。     

松材线虫侵染对日本落叶松生理指标的影响

通过测定光合色素含量、渗透调节物质、苯丙氨酸解氨酶和抗氧化酶系统的动态变化,从生理生化角度探究日本落叶松对松材线虫侵染的响应规律。以3年生日本落叶松盆栽苗为实验材料,采用人工皮接法接入2000条松材线虫,于接种后第0、5、10、20、30天时收集并测定针叶内叶绿素含量、可溶性蛋白含量、抗氧化酶[超氧化物歧化酶 （SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）]活性和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性等指标。结果表明：日本落叶松接种点上部和下部均检测到大量松材线虫,且下部线虫数极显著高于上部（P<0.01）。叶绿素a、b含量均在第10天时出现明显下降,随后开始上升,与对照组无显著差异。可溶性蛋白含量在接种10 d后开始逐渐上升,且显著高于对照组（P<0.05）。接种松材线虫后,SOD活性显著上升,各时间点均极显著高于对照组（P<0.01）;CAT活性先小幅下降,后逐渐升高,于30 d时极显著高于对照组（P<0.01）;POD活性表现为先降低后升高,且5 d后迅速升高,各时间点都显著高于对照组（P<0.05）。PAL活性呈现先升高后降低的变化规律,接种后10、20 d活性都显著高于对照组（P<0.05）。日本落叶松被松材线虫侵染后,叶绿素含量、可溶性蛋白含量、抗氧化酶和PAL活性变化与其抗病性存在密切关系,研究结果可以为日本落叶松对松材线虫抗性品系筛选和抗病机理提供参考。     

黄皮种子中杀松材线虫成分分离及活性测定

采用药液浸渍法测定了黄皮Clausena lansium不同部位甲醇提取物对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的生物活性,在活性跟踪的基础上,通过萃取、柱层析、薄层制备、重结晶、核磁共振等方法对其有效成分进行了分离和结构鉴定.结果表明,黄皮不同部位甲醇提取物中种子提取物对松材线虫的毒杀活性最高,在1 mg/mL水溶液中处理72 h的校正死亡率为100%.各萃取相中石油醚相的活性最高,从石油醚相中分离、纯化获得一黄色晶体,经核磁共振检测分析为Lansiumamide B(N-甲基-N-顺-苯乙烯-肉桂酰胺).该化合物处理松材线虫24、48、72 h的LC50值分别为8.38、6.36、5.38 mg/L,表明该化合物是黄皮种子中主要杀松材线虫活性成分.     

骆驼蓬等植物提取物杀虫活性研究

以采自新疆的植物骆驼蓬，黄花蒿，艾蒿和采自云南恶性杂草紫茎泽兰为植物材料，研究其提取物对萝卜蚜，菜粉蝶，斜纹夜蛾的生物活性，结果表明，骆驼蓬甲醇提取物10000μg/mL处理后24和48h，萝卜蚜校正死亡率分别为93.07%和96.36%，处理后24h；对菜粉蝶5龄幼虫和斜纹夜蛾3龄幼虫的非选择性拒食率分别为90.81%和72.13%，均高于其他3种植物甲醇提取物，盆栽试验表明，骆驼蓬甲醇提取物对萝卜蚜防治效果良好。以10000μg/mL。喷施处理后24和48h，防效可达71.34%和89.82%。     

几种松树挥发物对松材线虫行为的影响

通过室内生测的方法,研究了几种主要的松树挥发物对松材线虫行为的影响.结果表明,α-异松油烯、β-水芹烯、β-蒎烯抑制松材线虫繁殖,其中α-异松油烯、β-水芹烯抑制力较强,β-蒎烯抑制力较弱,而β-月桂烯、反式-石竹烯、莰烯、异长叶烯和α-蒎烯对线虫繁殖没有影响.β-水芹烯和莰烯具有杀松材线虫活性,β-蒎烯和β-月桂烯增强松材线虫活力,而异长叶烯、α-蒎烯、反式-石竹烯对线虫存活没有影响.β-蒎烯、反式-石竹烯、异长叶烯、莰烯对松材线虫具引诱作用,其中β-蒎烯引诱力最强,反式-石竹烯次之,异长叶烯、莰烯引诱力最弱,而α-蒎烯、β-水芹烯、α-异松油烯和β-月桂烯对线虫无引诱作用.并对几种挥发物在松树抗松材线虫病中的作用进行了讨论.     

鱼藤酮及六种哒唑、咪唑类医用驱虫剂对松材线虫的作用

松材线虫是一种毁灭性的松林病害,发现有效的松材线虫杀虫剂是一项长期而艰巨的任务。测定了鱼藤酮及六种哒唑、咪唑类驱虫药对松材线虫的作用,发现鱼藤酮对松材线虫的杀灭效果远强于以乙酰胆碱酯酶为主要靶标的克线磷,鱼藤酮及阿苯哒唑、甲苯哒唑、氟苯哒唑、噢吩哒唑、磷酸左旋咪唑、盐酸左旋咪唑处理松材线虫120 h后的LC50分别为1.86μg/mL,2.11μg/mL,9.77μg/mL,5.38μg/mL,6.66μg/mL,1.14μg/mL和1.40μg/mL,其中线粒体呼吸链抑制剂鱼藤酮及呼吸代谢抑制剂阿苯哒唑、磷酸左旋咪唑、盐酸左旋咪唑对松材线虫表现出了出色的杀灭效果,松材线虫的呼吸代谢系统是松材线虫的敏感靶标。     

松材线虫传播机理的研究进展

松材线虫Bursaphelenchus xylophilus主要靠媒介昆虫松墨天牛Monochamus alternatus传播,并通过天牛造成的伤口侵入松树,因此,掌握松材线虫的传播机制,有助于了解线虫病的发生机理和发生规律。综述了松材线虫与其媒介昆虫关系研究的最新进展。     

银杏叶和银杏外种皮提取液对松材线虫的毒杀作用

[目的]寻找高效低毒和低残留的植物源杀线剂。[方法]以甲醇、乙醇、丙酮和蒸馏水4种溶剂对银杏外种皮进行粗提,以甲醇、乙醇、乙醚和石油醚4种分析纯有机溶剂对银杏鲜叶进行粗提,都以蒸馏水作为对照,采用浓度稀释法测定不同溶剂提取物在24、48和72 h对松材线虫的抑制作用。[结果]银杏外种皮和银杏叶不同溶剂提取液对松材线虫都有抑制作用,外种皮提取液在200 mg/ml时,蒸馏水在第2天死亡率达到100%,丙酮提取液中的线虫死亡率也达到100%;外种皮提取液在20 mg/ml时,蒸馏水和乙醇提取液的死亡率达到84.9%。[结论]银杏外种皮提取液对松材线虫具有很好的抑制作用。     

松材线虫RAPD规范化反应体系的构建

 针对随机扩增DNA多态性(RAPD)低重复性的特点,在研究松材线虫遗传多样性的过程中,对可能影响RAPD扩增结果的PCR仪型号,模板DNA,Mg²⁺,TaqDNA聚合酶引物及dNTP浓度等因素进行了实验探索,以获得最佳反应条件,构建稳定的松材线虫RAPD扩增反应体系,结果发现上述影响因子在相当大的范围内对RAPD扩增结果的影响有限,进而对在不同实验室间的RAPD结果缺乏重复性和可比性的原因进行了讨论,认为模板DNA的污染是造成这一现象的重要原因,并在此基础上提出了相应的规范化操作建议.     

松褐天牛成虫携带松材线虫的数量

研究表明,从松褐天牛羽化开始到结束,有８０％以上的天牛携逞松材线虫。每头天牛携带量平均在３５００条左右。６月份天牛羽化高峰。它所携带的松材线虫数量最多。雌成虫携逞量比雄成虫携带量多。感染松材线虫病病木１ｇ木材内的松材线虫数量约是１头松褐天牛所携带数量的４倍。１ｇ病木木材含松材线虫数平均２４６０２条。１头天牛携带５３５２条。松褐天牛小个体携带的松材线虫数比大个体的多。树干上羽化出的天牛携带松材线虫数多于树枝上羽化出的天牛携带量。