Evaluating effective Trichoderma isolates for biocontrol of Rhizoctonia solani causing root rot of Vigna unguiculata

The highly diverse genus Trichoderma has provided many formulations that are alternatives to the chemical pesticides in agriculture. The present study was undertaken to investigate the biocontrol potential of eight Trichoderma species, T. atrobrunneum, T. guizhouense, T. paratroviride, T. pyramidale, T. rufobrunneum, T. simmonsii, T. thermophilum and T. viridulum, against the phytopathogenic fungus Rhizoctonia solani. Trichoderma isolates were first evaluated in vitro by dual culture tests for their antagonism, mycoparasitic ability and antifungal activity against R. solani. Their growth promoting potential was further assessed in relation to phosphate solubilization, indole acetic acid and siderophore production. Five of the isolates were selected and evaluated for their abilities to prompt plant growth and to control R. solani infecting Vigna unguiculata(cowpea) seedlings in vivo. Two most effective isolates, T. guizhouense 9185 and T. simmonsii 8702, significantly(P0.05) reduced the disease severity incidences(36.6 and 45.0%, respectively) and promoted plant growth, which have good prospects for application.     

钩状木霉在辣椒根际定殖动态及其对辣椒疫病的生物防治

木霉菌（Trichoderma spp.）是自然界广泛分布的一类重要生防真菌资源。生防菌在宿主根际及其组织中定殖能力的强弱是评价其生防潜力的重要指标。选择钩状木霉（Trichoderma hamatum）真菌、辣椒及其重要土传病害菌辣椒疫霉（Phytophthora capsici）三者互作体系,通过绿色荧光蛋白标记的钩状木霉菌株灌根接种辣椒植株,通过平板拮抗试验和温室盆栽试验,检测钩状木霉菌在辣椒植株及根际的定殖情况,及其对辣椒疫病的生物防治效果。结果表明,钩状木霉菌在辣椒根、茎和叶等组织中和辣椒根际土壤中均能够定殖。在辣椒根际土壤中,钩状木霉菌呈动态变化的定殖过程。灌根接种1～25 d,钩状木霉菌定殖量呈缓慢增长,在第33 d,达到最高值(700×107 conidia·g-1),然后逐渐下降,呈现先增加后减少的动态变化过程。钩状木霉菌在辣椒根际和植株的定殖过程中,对辣椒疫病具有生物防治作用,防治效果达到5333％。综上,钩状木霉菌能够成为辣椒根际微生态中的有益微生物,可以有效预防辣椒疫病的发生,研究为辣椒疫病的生物防治提供了理论依据和有效途径。     

Antagnism of three strains of Trichoderma spp. against mycelial growth of Rhizoctonia salani

Three strains of Trichoderma spp. TV112, TX003, TY009 obtained from previous experiments could inhibit the sclerotial formation of two strains of Rhizoctonia salani AG1 (-1A) isolated from the rice paddies in Hanzhou of China. However, it is unclear if there are the antagonism and mycoparasitism of the Trichoderma strains tested against the mycelial growth of R. solani . The objective of this research was to evaluate the ability of the Trichoderma strains to inhibit the mycelial…     

黄绿木霉T1010防治辣椒根腐病茄镰孢

为研究黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)T1010对辣椒根腐病菌茄镰孢(Fusarium solani) F5的作用,明确菌株T1010防治辣椒根腐病的生防机制。对峙培养法测定T1010对F5的拮抗作用,显微观察拮抗形态,盆栽及日光温室试验测定T1010对F5的抑菌效果。结果表明：T1010生长速度快,2.99天菌丝长满培养皿,F5 11.41天满皿,T1010竞争作用抑制F5生长,抑菌率为83.28%;T1010生长于F5菌落上并产孢,覆盖率为95.67%。盆栽试验T1010+F5处理组,土壤中T1010群体数量为6.285×105 cfu/g,F5为0,辣椒根、茎内无T1010和F5;F5处理组,土壤中F5种群数量为6.385×104 cfu/g,辣椒根、茎内有大量F5。T1010+F5处理组辣椒出苗率高、发病率低、辣椒株高、根长分别是F5处理组的1.81、4.38倍;日光温室小区试验,与多菌灵处理组比较,土壤撒播T1010制剂的辣椒感病指数大大降低（只有2.61）,辣椒侧根数大幅度提高,是多菌灵处理的1.75倍,产量提高了24.61%。黄绿木霉T1010拥有多种生防作用,150 kg/hm2在日光温室防治辣椒根腐病应用效果显著,可在生产上推广。     

哈茨木霉T_2菌株耐药性的测定及其对几种病原菌的抑制作用研究

[目的]为提高木霉菌的生物防治效果。[方法]研究了哈茨木霉T2菌株对3种病原真菌(齐整小核菌、立枯丝核菌和香蕉枯萎病菌)的抑制作用,分析其对7种杀菌剂的耐药性,并探讨了哈茨木霉T2菌株与杀菌剂联用对立枯丝核菌和齐整小核菌的抑制作用。[结果]哈茨木霉T2菌株对病原真菌的抑制随处理时间的延长而增强。处理后120 h其对齐整小核菌、立枯丝核菌、香蕉枯萎病菌的抑制率最高,分别为63.10%、65.64%和33.84%。哈茨木霉T2菌株对多菌灵的耐药性最强,EC50为4 345.32 mg/L。在浓度为800 mg/L时多菌灵对哈茨木霉T2菌株的抑制率为13.73%,当浓度在50 mg/L以下时抑菌率几乎为0。哈茨木霉T2菌株对代森锰锌、露星较敏感。[结论]哈茨木霉T2菌株与甲霜灵联用,能明显抑制齐整小核菌、立枯丝核菌的生长。     

用木霉培养物防治温床蕃茄苗猝倒病

用玻璃纸对峙法测定了57株从西南四省区获得的木霉对蕃茄倒病原菌(Pythium sp.)拮抗作用。结果表明:有37株对 Pythium sp 有明显拮抗作用,占测定菌株的64.9%,其中又以 Trichoderma aureoviride、T.citrinoviride 和哈茨小霉(T.harzianum)居多。木霉对 Pythium sp 的拮抗作用主要表现为菌丝消解和断裂,与木霉对 Rhizoctonia solani 的拮抗现象明显不同。用一株对Pythium sp 有较强拮抗作用的哈茨木霉制成麦麸砂子培养物,防治温床育苗的蕃茄苗猝倒病获得满意的防效,与化学农药敌克松和五氯硝基苯的防效相当,甚至略优。酿热物温床有利于木霉的生长和营养物竞争作用,因此用木霉防治早春蔬菜温床育苗中猝倒病是很有希望的。     

5个木霉菌株的抑菌谱及部分生物学特性

 5个木霉菌株在对峙培养中对水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、棉花枯萎病菌、油菜菌核病菌等18种植物病原真菌和7株土壤习居镰刀菌都有明显抑制效果。哈茨木霉菌株Th-B的抑菌效果显著高于绿色木霉菌株LTR-2和其他3个菌株,哈茨木霉菌株Th-A和Th-B的产孢能力高于其他菌株,Th-B对辣椒灰霉病的预防效果达65.20%.     

竹荪球腐烂致病真菌种类鉴定与药剂筛选

对采集于贵州省水城县、清镇市等地竹荪种植基地的腐烂竹荪球进行病原菌分离、培养、鉴定,分离到4种致病真菌:茄病镰刀菌[Fusarium Solani(M art.)Sacc.]、绿色木霉(Trichoderma viridePers.)、匍枝根霉(Rhizopus stoloniferL ind)、拟青霉(Paecilomyces variotiBain.)。用70%甲基托布津、50%多菌灵、施宝功、抑唑霉、70%敌克松等5种杀菌剂对以上4种病菌进行室内抑菌试验,施宝功500倍液对以上4种病菌的抑制率分别为71.3%,67.4%,58.7%和73.2%,甲基托布津500倍液对以上4种病菌的抑制率分别为68.4%,64.5%,60.7%,63.6%。多菌灵、抑唑霉、敌克松的防治效果不明显。     

黄瓜茎基腐病菌拮抗真菌的分离和筛选

[目的]分离和筛选黄瓜茎基腐病菌的拮抗真菌。[方法]从病田土壤采集21个土壤标本,分离得到5种对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌有拮抗作用的拮抗菌,并进行温室盆栽防病试验。[结果]经鉴定,5种拮抗菌分属于长枝木霉、橘绿木霉、康氏木霉、哈慈木霉和绿色木霉,对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌的生长都有强烈的抑制作用。在人工接种条件下,5种拮抗菌对立枯丝核菌引起的茎基腐病的防效在60%以上,对瓜果腐霉引起的茎基腐病的防治效果差些。[结论]该研究筛选出的5种拮抗菌对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌引起的黄瓜茎基腐病均有一定的防效。     

麦冬、丹参、川芎根腐病的发生及生物防治研究

调查表明,麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病的一般发病株率为15.2%~67.5%,重病地高达80%以上。通过采取染病植株进行室内分离、纯化鉴定,3种中药材根腐病的病原,属尖孢镰刀菌及腐皮镰刀菌。利用筛选出的哈茨木霉T23生物制剂,对麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病防治试验,结果以每公顷施用7.5 kg的剂量最佳,防治效果分别为74.5%、71.2%及70.9%,显著优于多菌灵粉剂农药处理,产量比对照增产14.2%~24.5%。大面积防治示范,防病增产效果一致。     

绿木霉菌株TY009防治纹枯病等水稻主要真菌病害的潜力

【目的】研究绿木霉(Trichoderma virens)菌株TY009对水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病菌作用效果,以及其代谢产物胶霉毒素在不同温度和pH条件下的活性稳定性,评价菌株TY009防治水稻纹枯病和其它水稻主要真菌病害的生防潜力。【方法】用色谱法从绿木霉菌株TY009培养液中分离、纯化出胶霉毒素;采用对峙培养方法测定菌株TY009对水稻纹枯病菌的拮抗作用;采用常规抑制方法测定其代谢产物胶霉毒素对水稻纹枯病菌菌丝生长、菌核萌发的抑制作用,以及对稻瘟病菌孢子萌发、附着胞形成和稻曲病菌孢子萌发和次生孢子形成的影响;在不同温度、pH条件下测定胶霉毒素生物活性的变化。【结果】菌株TY009对水稻纹枯病菌有显著的拮抗作用。150 μg•mL-1胶霉毒素完全抑制水稻纹枯病菌的菌丝生长;160 μg•mL-1胶霉毒素处理菌核4 h后,完全抑制了水稻纹枯病菌菌核的萌发;50和10 μg•mL-1胶霉毒素分别完全抑制稻瘟病菌分生孢子萌发和附着胞的形成;1.0 μg•mL-1胶霉毒素完全抑制稻曲病菌分生孢子萌发和次生孢子的形成。胶霉毒素在100℃处理 60 min后,其对水稻纹枯病菌菌丝的生物活性没有改变;在pH值大于6.0时,0.5 μg•mL-1胶霉毒素对稻曲病分生孢子没有明显的生物活性,但低的pH孢子悬浮液中,胶霉毒素显著抑制分生孢子萌发和次生孢子的形成。【结论】绿木霉(T. virens)菌株TY009拥有多种生防机制,是一个潜在的、有效的生防菌株,具有应用防治水稻纹枯病并兼防稻瘟病和稻曲病的潜力。     

哈茨木霉(Trichoerma harzianum)T23生防菌筛选及防治中药材根腐病的研究

研究表明,引起麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病的主要病原种群是尖孢镰刀菌及腐皮镰刀菌．为了有效防治中药材根腐病,保护环境,提高品质和产量,通过不同生态区的土样采集,采取病原菌诱饵法及稀释平扳法分离菌株,经筛选、纯化得到抑菌拮抗效果达80％以上的哈茨木霉生防菌T23;不同剂量试验结果表明,施用哈茨木霉T23生物制剂7．5kg／hm^2效果最佳,田间防治麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病效果达70％以上,显著优于50％多菌灵粉剂,比对照增产14．2％～24．5％．大面积防治中药材根腐病的防病增产效果与田间小区试验的一致．     

木霉菌对五种植物病原真菌的重寄生作用

研究了哈茨木霉（Trichoderma harzianum)T88菌株和深绿木霉（T.atroviride）T95菌株对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、杨树料皮病菌（Valsa sordida）、杨树水泡溃疡病菌（Botryosphaeria ribis）、苹果树腐烂病菌（V.ceratosperma）、贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型（B.berengeriana f.sp.piricola）的重寄生作用。对峙培养的结果可观察到，多数情况下，接种后2d内木霉与病原菌接触，随后覆盖或侵入病菌菌落，抑制其生长。光学显微镜和扫描电镜观察结果表明，木霉对不同的植物病原真菌重寄生作用方法不同。可观察到木霉菌缠绕病原菌的菌丝，或沿着病原菌的菌丝平行或波浪式生长，或产生铯状分枝、吸器或附着胞吸附于病原菌的菌丝上，或穿透病原菌的菌丝，最终使病原菌的菌丝细胞原生质浓缩，菌丝断裂等现象。     

利用木霉防治丹参根腐病的研究

丹参根腐病是由腐皮镰刀菌侵染引起的一种土传病害,近年来在四川的田间发病株率平均为10%～30%,严重影响到丹参的产量和品质。采集不同生态环境的丹参根际土样进行分离,获得对腐皮镰刀菌有明显拮抗作用的哈茨木霉T23、桔绿木霉T56等一批菌株。田间试验表明,T23、T56对丹参根腐病的防效分别为52 3%和55 7%,与多菌灵的防效相当。     

Trichoderma harzianum抗生菌株F060同敌克松联合防治杉苗猝倒病

经病苗组织分离培养确定,杉苗猝倒病的病原菌,Rhizoctonia solani占59.7％、Fusarium spp.占38.9％、Pythium spp.占1.4％。在室内通过Trichoderma harzianum(Fo60)对敌克松(Dexon)耐药性测定表明,Fo60对敌克松有极大耐性;经田间小区试验表明,同对照相比,每平方米施敌克松4克三天后再施Fo60菌粉50克,只施菌粉50克和只施敌克松4克处理,三种病原菌引起的杉苗猝倒病分别减少71.1％、53.4％、43.8％;由R.solani导致的杉苗猝倒病分别减少99.5％、92.2％和43.8％。其中均以敌克松同Fo60菌粉联合防治最好。     

Are mycoparasitism and chitinase production species or isolate dependent in Trichoderma ?

The relationship between taxonomic status of Trichoderma spp., chitinase production in solid substrate fermentation (SSF) on four media and mycoparasitism in dual culture (confrontation assay)against four plant pathogenic fungi was studied. Seventy five Trichoderma isolates belonging to 35species have been screened. The plant pathogenic fungi used in confrontation assay were Botrytis cinerea , Fusarium oxysporum f. sp. dianthi , Rhizoctonia solani and Sclerotinia sclerotiorum . The SSF media contained wheat bran, crude chitin (from crab shells, SIGMA) and salt solutions. The best performing isolates in mycoparasitism tests were Trichoderma flavofuscum, T. harzianum, T.inhamatum, T. koningii and T. strigosum. Some isolates exhibiting good mycoparasitism produced chitinase in SSF only at low or medium level. In contrary there were isolates with excellent extracellular chitinase production but their biocontrol potential did not belong to the leading group.Statistical methods have been used to evaluate the data.……     

拟康氏木霉对蔬菜病原真菌的拮抗作用及对番茄灰霉病的防效的初步研究

通过对峙培养,测试了拟康氏木霉对灰葡萄孢霉、尖孢镰刀菌、番茄叶霉病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫霉、辣椒炭疽菌的拮抗作用。对峙培养5d时对以上病原菌的抑制率分别为73％、62％、86％、77％、68％、91％。拮抗机制主要为竞争和抗生等。离体防治试验表明,拟康氏木霉孢子悬液对番茄灰霉病的防效显著,其浓度为106、107、108cfu／ml时,在离体茎段和叶盘上的防效分别为29．8％、53．8％、62．5％和59．1％、66．1％、70．3％;而在盆栽试验和大棚试验中的防效分别为48．3％、64．6％、68．3％和37．7％、46．2％、60．6％。浓度为107、108cfu／ml时防效在各试验中均达到甚至高于甲基托布津的防效。     

木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用

为了明确木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用和拮抗机制,采用平板对峙培养试验和木霉菌T-115D发酵液对马铃薯早疫病菌生长的抑制试验,研究木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,木霉菌能迅速占领大部分空间,抑制马铃薯早疫病菌的生长,显微镜观察发现,木霉菌菌丝可缠绕和寄生早疫病菌菌丝;木霉菌发酵液对马铃薯早疫病菌菌丝生长有较强抑制作用,在木霉菌T-115D发酵液稀释3倍后对菌丝生长的抑制率为90.4%,发酵原液对马铃薯早疫病菌孢子萌发的抑制率为100%,说明木霉菌T-115D对马铃薯早疫病菌具有明显的拮抗作用,其拮抗机制包括抑制菌丝生长和孢子萌发、营养空间竞争和寄生作用。     

高产抗生素木霉菌株的选育及初步研究

为选育高产抗生素木霉菌株,利用在培养基中加入高浓度木霉菌代谢产物作为选择压力,通过紫外线诱变,以立枯丝核菌作为指示菌,结合平板对峙法、发酵产物平板活性测定法,筛选高产抗生素木霉菌株.经初筛、复筛共得到6株对立枯丝核菌具有较强抑制作用的突变株,进一步对突变株的发酵液进行活性测定,选育出了两株遗传稳定的高产抗生素木霉突变株TD103-UV-4和TD103-UV-13,生长速度分别是出发菌株的1.86倍和1.95倍,发酵产物抑菌活性明显提高.其中菌株TD103-UV-4发酵液对立枯丝核菌的抑制率在80%以上,并且对灰葡萄孢菌等植物病原菌有较强的抑制作用,产抗生素能力比出发菌株提高了47.1%.     

木霉菌与内生细菌防治甜瓜枯萎病的协同增效作用研究

[目的]探讨木霉菌与内生细菌防治甜瓜枯萎病的协同增效作用。[方法]在离体和活体条件下,研究了木霉菌T23和Ta22分别与内生细菌B6和B20-006复合使用对甜瓜枯萎病的防治效果。[结果]内生细菌B6和B20-006不论是与木霉菌T23复合处理还是与Ta22复合处理的防治效果均高于4个生防菌单独处理,其中B6+T23和B20-006+Ta22 2个复合处理的相对防效分别高达82.2%和81.0%。[结论]应用内生细菌与木霉菌复合防治甜瓜枯萎病有明显的协同作用。