柔嫩艾美耳球虫感染剂量对雏鸡临床病变指标的影响

本试验应用1.0×103、1.0×104和5.0×1043个不同剂量的柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,进行人工感染发病。对雏鸡感染后不同时间的盲肠病变、血便和卵囊排放量以及死亡率进行了观察。结果表明不同剂量的柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡盲肠病变、卵囊排放量、血便以及死亡率均有不同程度的影响,上述指标多随着感染剂量的加大而变大,但卵囊排放量当感染剂量增加到5.0×104时反而降低。血便和死亡率各组均以感染后第6d最为严重,卵囊排放量以感染后第7d最多。     

不同剂量柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡部分血液指标的影响

用1.0×103、1.0×104和5.0×1043个不同剂量的柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,进行雏鸡人工感染试验。对感染后不同时间的血液红细胞总数、白细胞总数、血红蛋白含量进行了测定。结果表明不同剂量的柔嫩艾美耳球虫感染,可引起感染雏鸡红细胞总数、血红蛋白含量降低(P<0.05,P<0.01);白细胞总数升高(P<0.05,P<0.01)。随着感染量的加大,变化幅度也变大,上述各项变化均以感染后的第5天时最为明显。     

斯氏艾美耳球虫的致病性及病理学研究

用纯种斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊人工感染25只断奶幼兔,进行致病性和病理学研究。试验兔分为1个不感染对照组和4个感染组,各感染组每只幼兔分别口服感染2.0×103、1.0×104、5.0×104、2.5×105个孢子化卵囊。与对照组相比,接种2.0×103个和1.0×104个孢子化卵囊的两个感染组的平均病变记分、肝重指数、血清转氨酶活性有显著差异(P<0.05);接种5.0×104个和2.5×105个孢子化卵囊的两个感染组上述指标有极显著差异(P<0.01)。表明斯氏艾美耳球虫对幼兔具有很强的致病性,能导致严重的肝球虫病。     

柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡血清NO及红细胞免疫功能的影响

为探讨柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染剂量与雏鸡血清NO及红细胞免疫功能的相关性,本试验应用1.0×103个/羽、1.0×104个/羽和5.0×104个/羽3个不同剂量的柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,进行人工感染发病。对雏鸡感染后不同时间的血清NO含量和红细胞C3b受体花环形成率及红细胞免疫复合物(IC)花环形成率进行了测定。结果表明不同剂量的柔嫩艾美耳球虫感染,可引起被感染雏鸡血清一氧化氮(NO)含量的升高(P<0.05或P<0.01),红细胞C3b受体花环率降低(P<0.05或P<0.01),IC花环率升高(P<0.05或P<0.01),但它们的变化与感染剂量均无明显相关性(P>0.05)。     

斯氏艾美耳球虫阿拉尔株致病性和免疫原性分析

对分离自阿拉尔的1株斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai)进行了致病性与免疫原性分析。试验共分5组,4个试验组每只兔分别口服感染1.0×103,5.0×103,5.0×104和1.5×105个孢子化卵囊;感染后14 d对1.0×103和5.0×103剂量组的剩余兔以2.5×105个孢子化卵囊攻毒,用0～5分肝脏平均病变记分、肝重指数和每克粪便的平均虫卵数(OPG)测定致病性及其免疫原性。结果显示:低剂量感染可引起轻微病变,5.0×104个孢子化卵囊感染即可表现出明显的致病作用,但免疫原性试验表明其免疫原性较弱。     

雏鸡对C．baileyi感染的年龄免疫研究

本文以１．２５×１０７Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊的剂量人工经口感染３～７５日龄雏鸡，通过Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊排出规律和临床发病情况的观察，研究了雏鸡对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ感染的年龄免疫现象。结果表明，３～７５日龄雏鸡均能感染Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ；３～１０日龄雏鸡易感性高，感染后排出印囊的量大，排出印囊的时间长，持续到感染后第２０天；２０日龄以上的雏鸡随着年龄的增长，感染后排出卵囊的量逐渐减少，排出印囊的时间缩短，仅持续到感染后第１５天。５０日龄以下的雏鸡感染后排出卵囊的量明显地高于５０日龄以上的雏鸡，５０～７５日龄的雏鸡易感性很低，排出卵囊的量趋于恒定地极少量排出。从而揭示随着雏鸡年龄增长免疫系统发育逐步完善，感染后排出印囊的量逐渐减少、排出卵囊的时间缩短、对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ的易感性逐渐降低的规律。首次实验证实Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ作为一种原发性病原主要侵害５０日龄以下的雏鸡，尤其是１０日龄以内的雏鸡易感性最高，发病和死亡主要见于１０日龄以内感染的雏鸡。     

6种鸡艾美耳球虫兰州株的致病性研究

在试验条件下,测定了鸡艾美耳球虫兰州株的毒力,为进行鸡球虫病疫苗免疫和药物防治效果评价试验等研究提供攻虫剂量的选择依据.试验设空白对照组(NC)、不同剂量感染组1组～8组,共9个组,每组20R鸡.结果显示:(1)NC组、第1组～第7组(第8组全部死亡)相对增重率依次为100%、77.23%、77.02%、76.42%、72.86%、63.91%、67.19%和42.06%,其中NC组相对增重率极显著高于所有感染组(p<0.01);第1组和第2组显著高于第5组和第6组(p<0.05),极显著高于第7组间(p<0.01);第7组极显著低于其他试验组(p<0.01).(2)空白对照组、第1组～第7组各组料肉比依次为2.01、2.21、2.24、2.29、2.33、2.78、2.94和4.06,呈现出剂量依赖关系,其中第7组极显著高于其他各组(p<0.01);第6组和第5组显著大于NC组和第1组～第5组(p<0.05).(3)攻虫后第8 d,每组剖检5只鸡,各肠段平均病变记分各组依次为0、1.79、2.33、2.54、2.63、2.5、2.67和2.8.(4)感染后排卵囊高峰期间,各组平均每克粪便中卵囊数(OPG)值分别为0、3.05×104、2.35 X 104、32.20×104、62.23×104、60.45×104、103.51×104和150.11×104(第8组除外).(5)各组死亡率依次为0、5.0%、5.0%、15%、25%、40.0%、45.0%、95%和100%.结果表明:本试验所选用虫株均具有较强的毒力,每只鸡感染6个虫种每个虫种1×104个孢子化卵囊时,感染鸡生长严重受阻;感染剂量为6个虫种每个虫种2×105/只时,半数感染鸡死亡;6个虫种每个虫种3×105/只的感染剂量可导致全部感染鸡死亡,因此.攻虫试验时选择6个虫种每个虫种1×104/只～1×105/只的剂量为宜.     

不同感染剂量对毒害艾美耳球虫繁殖力的影响

为研究不同感染剂量对毒害艾美耳球虫繁殖力的影响,设4个感染剂量组:500、2 500、5 000和10 000个孢子化卵囊/鸡,每组5只23日龄雏鸡,经鸡嗉囊接种卵囊。感染后鸡粪便中出现卵囊起至第16天,每天用麦克马斯特氏法对各组粪便中卵囊进行计数;在感染后第16天扑杀鸡,取盲肠进行卵囊计数。结果显示,各试验组鸡均无发生死亡,但10 000个卵囊感染组的临床症状最为严重;感染后144 h粪便中查见卵囊,500、2 500和5 000个卵囊感染组均出现2个排卵囊峰值,10 000个卵囊感染组只出现1个峰值,在第7～13天产出的卵囊量均占总产量的94.74%以上;每鸡粪便中排出的卵囊数随感染剂量的增加而增多,但单个卵囊的产量随感染剂量的增加而减少;感染后第16天盲肠中卵囊数不到总卵囊量的1%。结论:在疫苗生产或增殖传代时,感染剂量可选择10 000个卵囊/鸡,在感染后第7～13天收集粪便中卵囊。     

四种兔艾美耳球虫卵囊产量的比较

分别用4种兔艾美耳球虫经口接种45日龄无球虫感染兔,接种剂量为1×104个卵囊/兔。感染后4d～20d,以麦克马斯特氏法计数每天排出的卵囊。结果表明,肠艾美耳球虫排卵量最多,为365.76×106个,中型艾美耳球虫为317.26×106个、黄艾美耳球虫为304.36×106个,大型艾美耳球虫排卵量最少,为200.12×106个。大型艾美耳球虫在感染后第6.5天有卵囊排出,第10.5天达到高峰(66.50×106个/只),占总量的33.23%;肠艾美耳球虫在感染后第9天有卵囊排出,第13天达到高峰(138.40×106个/只),占总量的37.83%;黄艾美耳球虫在感染后第9天有卵囊排出,第11天达到高峰(102.80×106个/只),占总量的33.78%;中型艾美耳球虫在感染后第4.5天有卵囊排出,第6.5天达到高峰(167.8×106个/只),占总量的52.89%。     

接种不同数量柔嫩艾美耳球虫卵囊对雏鸡的致病作用

以15日龄罗曼蛋雏为对象,研究接种不同剂量柔嫩艾美球耳虫(E.tenella)卵囊对雏鸡的致病作用。试验共设4个组,其中3个球虫卵囊感染组和1个非感染对照组,球虫感染组鸡只分别接种E.tenella孢子化卵囊1×104、5×104、8×104个/只。结果显示,感染1×104、5×104、8×104个/只组的平均血便记分分别为0.750、1.825、2.500,致死率分别为10%、30%、60%,盲肠病变值分别为13.0、22.0、28.0,平均增重率分别为75%、56%、49%。试验表明,E.tenella卵囊具有很强的感染性,致病作用与其数量有关。     

接种不同剂量E.tenella对雏鸡血清抗氧化酶的影响

同一日龄雏鸡接种不同剂量的柔嫩艾美尔球虫,研究接种不同剂量柔嫩艾美尔球虫对雏鸡血清抗氧化酶的影响。将60只健康鸡随机分为6组(n=10),分别接种0、0.5×104、1×104、2×104、4×104和8×104个孢子化卵囊。接种后7 d颈静脉采血,分离血清,测定血清脂质过氧化物(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明雏鸡感染不同剂量的柔嫩艾美尔球虫后,按接种剂量从低到高,血清中MDA含量先降低后升高变化差异极显著(P0.01);血清SOD活性先升高后降低,差异极显著(P0.01);血清GSH-PX活性先升高后降低,差异极显著(P0.01);血清CAT活性较对照组极显著性降低(P0.01)。不同剂量柔嫩艾美尔球虫感染对雏鸡血清MDA含量和SOD、GSH-PX、CAT活性有一定的影响。     

11株巨型艾美耳球虫繁殖力的比较研究

用巨型艾美耳球虫扬州株、南通株、连云港株、苏州株、凤阳株、青岛株、福州株、龙岩株、广州株、上海株和美国株孢子化卵囊100个/只或10 000 个/只,经嗉囔接种7 日龄或21 日龄无球虫黄羽肉公雏,以麦克马斯特法对感染后第6 天至第14 天间每天24 h排出的卵囊计数并进行统计分析。结果表明,各虫株的排卵囊量有差异,100个/只卵囊感染7日龄雏鸡时,广州株和凤阳株排卵囊量最多,上海株和苏州株排卵囊量最少;100个/只卵囊感染21 日龄雏鸡时,扬州株排卵囊量最多,上海株排卵囊量最少;10 000 个/只卵囊感染21 日龄雏鸡时,苏州株排卵囊量最多,连云港株和扬州株的排卵囊量最少;排卵囊量随着感染剂量的增加或鸡日龄的增大而增多;在同一感染剂量时,福州株和连云港株增加最多,上海株和苏州株增加最少;在同一感染鸡日龄时,苏州株和上海株增加最多,南通株和扬州株增加最少;各虫株的排卵囊规律极相似,在感染后第7 天排卵囊量达峰值,第8 天、第9 天排出的卵囊量显著减少,第10天排出的卵囊量仅占总量的2%,第14天接近于0%;第6天至第8天排出的卵囊量占总量的87%~99%。     

微小隐孢子虫感染绵羊模型的建立

为建立稳定、可靠的微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)感染绵羊模型,将4只2日龄绵羊分成2组,分别经口接种1×106个(低剂量组)和1×107个(高剂量组)的C.parvum卵囊,观察绵羊每日精神状况,并采集粪便样品,提取DNA,用基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR方法进行检测,计算每日排卵囊数量。结果表明,两组羔羊均从第4天开始出现精神沉郁、食欲下降及严重的腹泻症状,镜检发现有大量的C.parvum卵囊排出,其中高剂量组的2只羔羊在感染后的第10天死亡。TaqMan实时荧光定量PCR检测结果显示,两组羔羊均从第1天开始有少量的卵囊排出,从第5天开始增多。其中低剂量组的1#羔羊第9天达到高峰,2#羔羊第7天达到高峰,随后排卵囊量开始下降,2只羔羊直到实验结束的第36天仍有卵囊排出,并且首次发现羔羊感染C.parvum后出现3个排卵囊高峰期。高剂量组的2只羔羊均在第6天达到高峰,其中3#羔羊第7天仍然有大量卵囊排出,4#羔羊第7天和第8天仍有大量卵囊排出,随后开始下降;高剂量组羔羊高峰期排卵囊数量明显高于低剂量组羔羊高峰期排卵囊数量。对死亡羔羊进行的肠道组织学观察,发现虫体寄生部位肠黏膜层出现大面积实质细胞脱落,局部可见肠腺数量减少,被增生的结缔组织取代。提取死亡羔羊肠道内容物和粪便DNA,进行套式PCR扩增,经测序鉴定,证实为C.parvum感染,与羔羊接种的虫种一致。上述结果表明,接种1×106个C.parvum卵囊,绵羊出现明显的临床症状,并伴有大量的卵囊排出,可以作为C.parvum的感染模型;而接种1×107个C.parvum卵囊,绵羊会发生死亡,但是能够排出更多的卵囊,适合进行隐孢子虫的繁殖试验。为进一步利用该模型研究C.parvum的致病机理、疫苗和药物筛选奠定了良好的基础。     

鸡柔嫩艾美耳球虫YL株多次传代后的致病性研究

为研究多次传代后的鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)YL株的致病性,分别以不同剂量的36代次柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊感染7日龄雏鸡,通过临床症状、死亡率、血便程度、潜隐期、盲肠病变、平均增重及每克粪便卵囊数(OPG)对其致病性进行评价.结果显示,不同剂量孢子化卵囊感染雏鸡均在感染后3d～4d出现血便,球...     

NO对接种Eimeria acervulina雏鸡体液免疫水平的影响

用1日龄黄羽肉鸡研究了一氧化氮(NO)对接种Eimeria acervulina雏鸡体液免疫水平的影响.试验设3个对照组(免疫对照组、感染对照组、空白对照组)和3个试验组(L-精氮酸组、L-氨基胍组、NG亚硝基-L-精氦酸甲基酯组),每组8只鸡.免疫程序为,7日龄时初免,接种卵囊3×103个/只;14日龄时二免,接种卵囊5×103个/只;21日龄时三免,接种卵囊1×104个/只;28日龄时四免,接种卵囊3×106个/只.感染对照组用于判断本试验所采用的免疫程序是否成功,该组鸡仅在28日龄时感染卵囊1次,剂量为3×106个/只.3个对照组从7日龄开始直至扑杀当日连续口服生理盐水0.5 mL/次,2次/d;3个试验组从7日龄开始直至扑杀当日分别口服5 g/L L-精氨酸溶液或3 g/L L-氨基胍溶液或6 g/L NG-亚硝基-L-精氨酸甲基酯溶液,0.5 mL/次,2次/d.38日龄时扑杀全部试验鸡,取血清样本用ELISA法测定抗体水平;取十二指肠样本进行肠道病变记分.试验结果表明,给免疫E.acervulina的雏鸡每日口服NO生成底物L-精氨酸、可增加其血清抗体水平(P<0.05);而口服诱导型NO合成酶(iNOS)抑制剂氨基胍和原生型NO合成酶(cNOS)抑制剂NG-亚硝基-L-精氨酸甲基酯,可明显降低其血清抗体水平(P<0.01).上述结果表明,NO具有提高E.acervulina免疫雏鸡体液免疫水平的作用,且由2种NO合成酶(NOS)催化生成的NO均参与了此过程.     

鸡隐孢子虫病有效药物筛选

为寻求治疗鸡隐孢子虫病的有效药物。本试验选取140只1日龄健康无感染鸡,随机分为7组,每组20只,除Ⅰ组外,Ⅱ-Ⅶ组均接种火鸡隐孢子虫卵囊1×106个/只。试验组鸡粪便检查呈阳性后,分别用硝唑尼特、阿奇霉素、巴龙霉素、常山酮和大蒜素等对Ⅲ-Ⅶ组进行治疗试验,以各组雏鸡日采食量、增重量、卵囊排出情况作为疗效指标。结果显示,经大蒜素治疗后的感染鸡,日采食量58.6g、日增重74.9g、每克粪便卵囊排出量减少1 739个,均优于其他药物治疗组,治疗效果显著。大蒜素可以提高病鸡的采食量、机体的免疫力并有效抑制卵囊的排出,可以作为治疗火鸡隐孢子虫病的备选药物。     

人源隐孢子虫小白鼠感染模型的建立

为评价2种常用免疫抑制方法对小白鼠排人源隐孢子虫卵囊规律的影响,将19日龄小白鼠随机分成2组,第1组通过饮水给予地塞米松,第2组采用导胃管灌服地塞米松。第7 d,2组小白鼠灌胃接种人源隐孢子虫,每只小白鼠感染量为1.5×106个卵囊。两组均在感染当天就有卵囊排出,感染后第6 d粪便卵囊计数明显增加,随之出现3个高峰期,此后逐渐下降。免疫抑制组小白鼠在卵囊持续期不断有死亡但无腹泻症状。试验结果表明,用这2种免疫抑制方法,均能成功感染人源隐孢子虫,但通过灌服地塞米松可使小白鼠获得更高的OPG(每克粪便中的卵囊数)值和更长的排卵囊持续期。     

天然大蒜精油对感染球虫蛋雏鸡免疫指标的影响

试验旨在研究饮水中添加天然大蒜精油对感染柔嫩艾美耳球虫蛋雏鸡免疫指标的影响。选择400只农大3号节粮蛋雏鸡,随机分为5组,每组4个重复,每个重复20只,即健康对照组（HC组）、感染组（IN组）以及天然大蒜精油低（L组）、中（M组）、高剂量组（H组）（分别在饮水中添加0.04、0.06、0.08 mL/L天然大蒜精油）。16日龄时,除健康对照组外,其他各组雏鸡口服柔嫩艾美尔球虫卵囊5×104个/只。攻毒期7 d,试验期23 d。结果显示,HC组蛋雏鸡末重、平均增重显著高于IN组、L组和H组（P<0.05）。IN组和L组卵囊值最高,均为40;HC组卵囊值最低为0。20日龄时,M组蛋雏鸡的胸腺指数、血清免疫球蛋白M (IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于其他组（P<0.05）。23日龄时,M组蛋雏鸡血清免疫球蛋白A (IgA)含量显著高于其他组（P<0.05）。研究表明,饮水中添加0.06 mL/L天然大蒜精油具有提高蛋雏鸡免疫机能的作用。     

2株贝氏隐孢子虫鸡源分离株对雏鸡的致病性比较

为了解不同地区鸡源贝氏隐孢子虫的致病特点,对收集到的郑州、林州两地区鸡源贝氏隐孢子虫卵囊经雏鸡传代扩增纯化后,分别以1×106个卵囊量接种3日龄罗曼公雏鸡,从其排卵囊情况、临床症状和病理学变化比较了2个分离株的致病情况。结果表明:2个隐孢子虫分离株均主要引起雏鸡呼吸道症状和法氏囊炎病变;接种雏鸡均于感染后第4天开始排卵囊,林州株和郑州株排卵囊持续期分别为23 d和13 d;排卵囊高峰期均为感染后第8~12天。雏鸡感染2个地区鸡源贝氏隐孢子虫分离株后,排卵囊量及排卵囊规律存在差异。     

中药复方制剂抗鸡柔嫩艾美耳球虫感染效果研究

考察青蒿、诃子、苦参、柴胡、黄芪、山楂、木香7味中药组成的复方中药制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的防治效果。选取120只健康雏鸡,随机分为6组,除空白对照组外,其余各组(阳性对照组,药物对照组及复方中药低剂量组、中剂量组、高剂量组)试验鸡均经口感染1.5×10~4个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,考察各组试验鸡相对增重率、病变值、抗球虫指数ACI、相对球虫卵囊产量及血清生化指标等,评价不同剂量复方中药制剂的抗球虫效果。结果显示,复方中药中剂量组与低剂量、高剂量、磺胺氯吡嗪钠组的相对增重均有显著差异(P<0.05)。ACI与相对卵囊产量统计结果表明,复方中药低剂量组与中剂量组之间无显著差异(P>0.05),且均呈低效抗球虫作用。同时,复方中药中剂量组的耗料量增长率最高,雏鸡总蛋白、白蛋白、总胆固醇等3个生化指标均在攻虫第7天呈升高趋势。复方中药3个试验组雏鸡丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平在攻虫后均呈升高趋势,但未达到肝损伤标准。结果表明,该中药复方制剂中剂量浓度有一定的抗球虫作用,可促生长,且在推荐的剂量下使用安全。