浸种及接种内生真菌对茅苍术种子发芽与幼苗生长的影响

探讨了不同浸种时间和温度以及接种内生真菌对茅苍术种子发芽率、幼苗生长的影响,测定了接种内生真菌后茅苍术的有关生理指标,分析了其挥发油含量.结果表明,最佳浸种温度为20℃,最佳浸种时间为48 h;接种的小菌核菌(AL3)、小克银汉霉(AL4)、AL11(未鉴定菌株)、孔球孢霉(AL12)均提高了茅苍术种子发芽率和发芽势,其中以AL11处理的效果最好;AL3、AL11、AL12处理的茅苍术幼苗生物量分别比对照提高了46.92％、24.23％、34.23％;AL3、AL12处理的茅苍术根数分别比对照提高了75.91％、65.79％,AL4、AL11处理对茅苍术生长的影响不显著;AL11、AL12处理的茅苍术SOD和POD含量均显著高于对照;接种内生真菌后茅苍术挥发油4种主要活性成分总含量均提高,4种组分的相对百分含量有所改变.     

茅苍术提取物及其活性成分的杀蚊虫作用

用乙醇超声提取法提取茅苍术根茎物质,并进行杀蚊有效活性成分分离,采用幼虫浸渍法测定其对敏感型淡色库蚊、野生型地下家蚊和白纹伊蚊3龄幼虫的活性。结果发现:乙醇粗提物对淡色库蚊、地下家蚊和白纹伊蚊的24h LC_(50)值分别为22.71、36.30、23.51μg/mL。不同溶剂萃取物对白纹伊蚊生物活性测定结果表明,活性成分主要在正己烷相中,其LC_(50)为16.87μg/mL;而乙酸乙酯相和水相成分基本无活性。进一步对正己烷萃取物以硅胶柱层析分离的不同成分进行生物活性测定,活性成分主要为H2和H6;白纹伊蚊3龄幼虫在其25μg/mL质量浓度下24h死亡率均达100%。结果表明茅苍术的杀虫活性成分对敏感型淡色库蚊、野生型地下家蚊和白纹伊蚊的幼虫均具有较强生物活性,具有新型杀蚊剂开发潜力。     

内生真菌孔球孢霉对茅苍术的生长及挥发油主组分的影响

在茅苍术组培苗阶段接种内生真菌孔球孢霉AL12菌株,以不接菌处理为对照,将炼苗后2年内的茅苍术分7个生长阶段,检测挥发油主要成分含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)活力的变化.结果表明,接种真菌孔球孢霉提高了组培炼苗成活率,比对照提高25.71百分点.在2年的生长阶段内,孔球孢霉AL12处理组植株的生长情况优于对照组.至生长的第7阶段(第2年12月),孔球孢霉AL12处理组植株的全植株重为11.54 g,比对照提高3.5％.分析挥发油的主组分表明,内生真菌孔球孢霉AL12处理组的挥发油含量高于对照组;对照组挥发油中苍术酮、苍术醇0-桉叶醇、苍术素4种成分含量(占植株干重)分别为2.32、0.07、0.19、2.39 mg/g;处理组挥发油的4种成分含量分别是对照组的1.15、1.57、1.37、1.12倍.在2年的生长阶段内,孔球孢霉AL12处理组的SOD、POD、HMGR活力都有所提高.研究表明,对茅苍术接种内生真菌孔球孢霉,在2年的生育期内均有利于宿主植物的生长及活性成分的积累.     

营养条件对茅苍术生长与挥发油含量的影响

为了解营养条件对茅苍术生长及挥发油含量的影响,本试验采用不同梯度浓度营养液和单种营养元素全部或部分亏缺营养液分别浇灌沙培茅苍术,测试相应处理的苍术生长情况和挥发油含量.试验结果表明:40%浓度的营养液最有利于茅苍术生长;茅苍术在肥料匮乏的条件下会大量生根,以寻找养分;氮、磷、钾、镁、硫比例为1 : 1 : 1 : 2 : 2的营养液配比更有利于茅苍术根茎生长;部分元素的单个缺失会导致茅苍术根茎生长量及挥发油含量的变化.     

茅苍术叶片可培养内生细菌多样性及其促生潜力

对江苏省道地药材茅苍术叶片可培养内生细菌的多样性及其固氮、解磷、解钾、产生长素的能力进行研究.依据菌落形态的不同,共分离得到52株内生细菌.能正常传代培养的45株内生细菌经ARDRA分析后归入14个聚类簇,簇内菌株的BOX-PCR指纹图谱相似度不高,在属水平上显示出茅苍术内生细菌丰富的多样性.各聚类簇代表菌株16S rDNA的序列分析表明分离得到的内生细菌与泛菌属、微杆菌属、短杆菌属、农杆菌属、假单胞菌属、芽孢杆菌属细菌亲缘关系相近,优势内生细菌与假单胞菌属细菌亲缘关系相近.45株能正常传代培养的内生细菌中,有10株能够在无氮培养基上正常生长,具固氮潜力.使用nifH基因通用引物对其基因组进行扩增后,除ALEB 33外,其它9株内生细菌均可获得与nifH基因片段大小相近的条带.分别使用NBRIP培养基和蒙金娜有机磷培养基筛选后获得19株和15株能够溶解磷酸钙和卵磷脂的内生细菌,其中ALEB 43溶解无机磷的能力最强,达(251.43±6.55) mg/L;ALEB 4A溶解有机磷的能力最强,达(23.63±1.46) mg/L.部分内生细菌溶解无机磷的能力与其产酸能力呈正相关,而菌株溶解有机磷的能力却无此相关性.通过硅酸盐培养基的筛选,获得具有解钾潜力的菌株24株.43株内生细菌能够将色氨酸转化为生长素,其中ALEB 44产生长素的能力最强,达(268.44±10.12) μg/mL.本研究首次揭示了江苏省道地药材茅苍术体内丰富的内生细菌资源及其促生长潜力,对进一步阐述茅苍术与内生菌之间的相互关系具有重要意义.     

内生真菌AL12对茅苍术代谢产物器官分配的影响(英文)

[目的]研究内生真菌孔球孢霉AL12号菌株对茅苍术组培苗生长及其代谢产物器官分配的影响。[方法]将内生真菌AL12与茅苍术组培苗进行共培养,比较感染前后茅苍术叶、根重量差异,检测接种AL12的组培苗中纤维素、半纤维素、木质素以及可溶性糖在叶片和根中的分布,并利用气相色谱分析挥发油组分。[结果]茅苍术与AL12共生后,与对照组相比,其组培苗叶片和根的鲜重和干重均有明显增加,且叶片木质素和可溶性糖含量增加,根部纤维素、半纤维素、木质素、可溶性糖及挥发油含量均有提高。[结论]该研究结果表明与AL12共生有利于茅苍术根部发育且能促使药用成分向根中转移、积累。     

3种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响(英文)

[目的]研究三种前体化合物对茅苍术组培苗中主要挥发油成分积累的影响,以期为人工栽培茅苍术的品质提高提供帮助。[方法]在茅苍术组培苗MS生根培养基中添加不同化合物,对组培苗进行一段时间培养后,超声提取植株所含的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量。[结果]添加木糖、异戊二烯和四氢呋喃对茅苍术组培苗的生长指标、挥发油得率及四种组分相对百分含量均有影响。6g/L木糖组优化培养基中,检出挥发油中苍术酮、β-桉叶醇的相对百分含量分别达到4.23%和56.34%,分别比对照高出1.41和1.66个百分点;四氢呋喃组优化培养基中苍术酮、苍术醇和苍术素的相对百分含量均有提高,四氢呋喃浓度为0.07g/L时总挥发油含量较对照相比增加49.97%;添加异戊二烯到培养基中虽能提高苍术酮的相对百分含量,但对总挥发油含量的积累起到一定的抑制作用,较对照分别减少23.67%、31.06%和7.10%。[结论]添加木糖和四氢呋喃对茅苍术组培苗中主要挥发油的积累具有促进作用,而异戊二烯则具有抑制作用。     

药用植物内生菌及其产生的活性成分研究现状

药用植物内生茵具有合成与宿主植物相同或相似活性成分的功能,在生物防治、医药卫生等领域有着广阔的前景。从内生茵对药用植物活性成分产生和积累的影响、药用植物内生茵产生的活性成分的作用、研究内生茵与药用植物活性成分的关联性的途径等方面进行了综述,提出了内生菌研究过程中待解决的若干问题,为进一步研究药物植物内生茵提供参考。     

植物内生菌活性提取物对粳稻基因表达的影响

运用基因表达芯片技术,分析了植物内生菌活性提取物对粳稻的根系进行处理后,粳稻根部基因表达谱的差异。处理后,有883个基因发生了变化,超表达13个,与粳稻生长发育有关的基因6个。     

木醋液对茅苍术生长发育的影响

[目的]研究木醋液对茅苍术生长发育的影响。[方法]在茅苍术生长发育阶段,经叶面喷施和灌根方式给予4种不同浓度的木醋液,调查茅苍术的各种生物学性状和产量性状。[结果]叶面喷施和灌根方式给予木醋液都能促进茅苍术生长发育,根茎产量分别提高60．33％和75．05％;叶面喷施的木醋液适宜浓度为200倍,灌根处理的木醋液适宜浓度为500倍。[结论]木醋液能促进茅苍术的生长发育,以灌根方式的效果最佳。     

苍术根腐病及其防治研究进展

苍术根腐病是当前苍术人工种植过程中最严重的一种病害,严重影响苍术产业的发展。苍术根腐病表现为地上部分叶片萎蔫,根及根茎变褐腐烂,导致苍术大面积死亡,产量下降。基于国内外报道,本文阐述了苍术根腐病的病原、病症和病因,及其物理、化学和生物防治等措施,并对目前苍术根腐病在田间生产防治中存在的主要问题进行讨论,旨在为苍术的实际生产和根腐病防治提供参考。     

丛枝菌根真菌对茅苍术实生苗生长及根腐病发生的影响

根腐病是目前茅苍术栽培中危害最严重的病害之一。丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi, AMF）能与90%以上的维管植物互惠共生,对植物土传病害有一定的抑制作用。为明确AMF对茅苍术根腐病的防治效果,试验采用盆栽法研究了Glomus mosseae（Gm）、Glomus intraradices（Gi）和Glomus etunicatum（Ge）3种AMF对1年生茅苍术苗生长及根腐病发生的影响。结果表明：3个AMF接种组的茅苍术苗菌根侵染率由高到低依次为Gm（60.44%）、Ge（55.89%）和Gi（52.33%）;3种AMF均能显著促进茅苍术苗的营养生长,以Ge促生长效果最为显著,但Gm对茅苍术苗地下部分物质积累的促进作用更大,Gm组茅苍术苗地下部分鲜重和干重的菌根依赖性分别达260.34%和285.45%;另外,3种AMF均能降低茅苍术苗根腐病的发生,减轻病情指数,提高其根系抗病相关酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性,其中G. mosseae和G. etunicatum防治效果较好,防效分别为53.15%和62.94%。AMF能促进茅苍术苗的营养生长,减轻其根腐病害的发生,G. mosseae和G. etunicatum可作为茅苍术根腐病防治的备选生物菌剂进行深入的研究与应用。     

北苍术根腐病病原菌分离鉴定及其生防菌筛选

为明确导致北苍术根腐病的病原菌,本实验从承德市感病北苍术块茎中分离病原微生物,并对病原微生物致病性进行回接验证。研究分离获得的具有致病性的病原菌鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）。从健康药用植物根际土壤中分离获得94株根际微生物,通过平板拮抗筛选获得2株生防菌,分别为菌株SFJ-27和菌株SFJ-41,平板对峙实验结果表明2株生防菌抑菌率均在50%以上。通过分子生物学和形态学鉴定2株菌分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillusvelezensis）。盆栽实验结果表明,菌株SFJ-27与菌株SFJ-41对北苍术根腐病具有明显的生防效果,防治效果分别为52.27%和68.19%。研究表明,尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）可以导致北苍术根腐病的发生,枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）对北苍术根腐病具有防治作用。     

核桃叶水浸提液对白术幼苗生长及光合作用的化感效应

【目的】探讨不同质量浓度核桃叶水浸提液对白术幼苗生长和光合作用的化感效应。【方法】通过盆栽试验,测定0,5,50和100 mg/mL核桃叶水浸提液对白术幼苗形态指标、生物量、叶绿素含量和光合作用的影响。【结果】以质量浓度0,5,50和100 mg/mL核桃叶水浸提液处理后,白术幼苗株高增量分别为3.65,4.03,3.68和3.42 cm;地径增量分别为2.16,2.62,2.58和2.25 mm。5 mg/mL核桃叶水浸提液对白术幼苗的生长表现出明显的促进作用,其单株鲜质量达到了1.425 mg;50 mg/mL核桃叶水浸提液对白术幼苗的单株鲜质量、地上生物量、地下生物量和单株干质量均表现出微弱的抑制作用;100 mg/mL核桃叶水浸提液对白术幼苗的生长表现出明显的抑制作用,对单株鲜质量、地上生物量、地下生物量和单株干质量的抑制率分别达到了23.4%,21.7%,28.3%和23.8%。5 mg/mL核桃叶水浸提液处理下,白术幼苗叶绿素含量最高,为2.016 mg/g,50和100 mg/mL处理下其含量均有所降低;5和50 mg/mL核桃叶水浸提液对白术幼苗叶片净光合速率和气孔导度均表现出促进作用,100 mg/mL处理则表现出明显的抑制作用。【结论】核桃叶水浸提液对白术幼苗的株高、地径、叶绿素含量及净光合速率和气孔导度的影响均表现出低促高抑的双重质量浓度效应,推测叶绿素含量及光合因子的改变,是核桃叶水浸提液引起白术幼苗生长产生相应化感效应的生理机制之一。     

拟南芥类受体蛋白激酶的激酶域信号传导强度研究

为了解不同类受体蛋白激酶RLKs激酶域响应病原相关分子PAMPs信号强度的差异,本研究将拟南芥FLS2的胞外域(NT)与6种不同RLKs的激酶域(KD)组合为重组RLKs(rRLKs),构建融合基因表达载体,并通过拟南芥原生质体瞬时表达的方法,将rRLKs/FLS2、35S::GUS(内参)和FRK1::Luciferase(响应报告载体)共转化到拟南芥fls2突变体叶肉原生质体细胞中;后经flg22处理后,通过对萤光素酶(Luciferase)和葡糖苷酸酶(GUS)活性的定量分析和比较,鉴定不同RLKs激酶区域信号传导的强度。结果表明:1)FLS2、EFR、PEPR1和RLK7的激酶域可明显激活抗病响应报告基因FRK1的表达,对植物抗病反应起正调控作用;FLS2和EFR的激酶域信号传导能力最强,两者无显著差异(P0.05);PEPR1和RLK7激酶域的信号传导能力稍弱,其信号传导强度分别是FLS2的57.13%和32.92%,与FLS2差异显著(P0.05);2)CERK1和NIK1的激酶域对FRK1的上调作用不明显,其信号传导强度分别仅有FLS2的9.76%和7.88%,和FLS2NT(对照)之间无显著差异(P0.05);3)PSKR1激酶域引起FRK1表达下调,对PTI起负调控作用。本研究结果有助于了解RLK家族的抗病响应作用机理,并为人工构建更高效的rRLK蛋白提供参考。     

不同种质怀地黄生育期根际土壤挥发性有机物变化分析

【目的】分析不同种质怀地黄生育期根际土壤挥发性有机物（VOCs）的变化特征,为探讨地黄连作障碍及其与根际土壤中化学成分变化的关系提供理论依据。【方法】以金九、北京1号、白选3个种质地黄为研究对象,于07-28（地上部位快速生长期）、08-24（地下块根膨大初期）和10-18（成熟期）采集根际土壤样品,分别编号为J-7、J-8、J-10,B-7、B-8、B-10和X-7、X-8、X-10,利用气相-质谱联用（GC-MS）技术检测其乙酸乙酯和二氯甲烷提取物的VOCs,通过面积归一化法对各成分的相对含量进行计算,并应用统计学方法对不同种质地黄各生育期根际土壤VOCs进行主成分分析（PCA）及聚类分析（HCA）,利用正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）结合t检验筛选各生育期差异的VOCs。【结果】从3个种质地黄不同生育期根际土壤乙酸乙酯提取物中共得到56个共有色谱峰,从二氯甲烷提取物中共得到50个共有峰。不同时期地黄根际土壤VOCs差异较为明显,其中8月根际土壤VOCs与7月、10月差异更为明显,3个生育期地黄根际土壤乙酸乙酯提取物与二氯甲烷提取物共有差异VOCs分属于酮类、醇类、酚类。【结论】不同种质地黄同一时期根际土壤VOCs表现基本一致,但同一种质地黄根际土壤VOCs在不同生育期存在差异。     

拟南芥免疫相关基因启动子对免疫信号分子的响应强度分析

为对比不同的植物抗病相关基因对植物免疫激发子的响应强度,筛选出响应强度较高的报告基因,从拟南芥中克隆5个植物免疫相关基因(WRKY33、FRK1、WRKY29、PR2和PDF1.2)的启动子序列,构建目的基因启动子驱动的萤光素酶(Luciferase,LUC)表达载体,并将其转化到拟南芥原生质体中瞬时表达;经植物免疫激发子(FLG22与PEP1)处理后,进行LUC活性检测,判断目的基因启动子的激活情况,分析上述目的基因启动子对免疫信号分子的响应强度。结果显示:经FLG22与PEP1处理后,拟南芥原生质体细胞中WRKY33响应强度为最高,与对照相比分别上调11.2与4.5倍,WRKY29响应强度次之,分别为对照的10.0与3.1倍;与WRKY相比,FRK1响应强度明显降低,而PR2与PDF1.2均无明显响应。上述结果表明在拟南芥原生质体瞬时表达体系中WRKY33可高效响应植物免疫激发子,pWRKY33::LUC原生质体表达体系可作为一种高效的PTI反应报告系统,用于新型植物免疫激发子的筛选鉴定。     

韭菜和胜红蓟水浸提液和挥发物对香蕉枯萎病菌的抑制作用

【目的】比较不同植物水浸提液对香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,FOC4)的抑制效果,明确韭菜Allium tuberosum和胜红蓟Ageratum conyzoides抑制FOC4的途径。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,测定了12种植物水浸提液及韭菜和胜红蓟挥发物对FOC4的抑制效果。【结果】韭菜根和胜红蓟叶片水浸提液对FOC4具有很好的抑制作用,抑菌率分别达到71%和69%。韭菜叶片和根水浸提液经二氯甲烷萃取,叶片提取液的抑菌率为18.7%,剩余部分的抑菌率为13.0%;根提取液的抑菌率为39.8%,剩余部分的抑菌率为22.1%;说明水浸提原液中含有的抑菌成分主要为水溶性较低的有机化合物。韭菜叶挥发物对FOC4的抑菌效果比根好,1.25 g/L韭菜鲜叶捣碎后产生的挥发物完全抑制FOC4孢子萌发,1.25 g/L根捣碎后产生的挥发物FOC4孢子萌发数为35个/皿。0.5 g/mL的胜红蓟鲜叶水浸提物对FOC4的抑菌率达到50%以上,抑菌效果明显;胜红蓟挥发物对FOC4的抑制作用不明显,说明胜红蓟的主要抑菌物质并非是挥发物。【结论】韭菜的水浸提液和挥发物均可抑制FOC4生长,且挥发物的抑菌效果更好;胜红蓟的水浸提液可抑制FOC4生长,但挥发物的抑制作用不明显。     

油菜内生拮抗细菌SF4对油菜菌核病菌的抑制作用研究

从油菜幼苗中分离出110个内生细菌。采用平板对峙法进行筛选,有4株菌对核盘菌有不同程度的抑制作用。经连续传代10次后,菌株SF4仍具有较高的生防活性。该菌株对核盘菌的菌丝生长发育有显著的抑制效果。在显微镜的观察下,被抑制的菌丝发生畸形,内含物分布不均匀。菌株SF4的挥发性产物及无菌发酵液都能抑制核盘菌的菌丝生长。挥发性产物对菌丝的最高抑制率为33.13%。无菌发酵液的抑制效果随培养时间的不同而有显著差异,96 h的无菌发酵液抑制效果最好。菌株SF4的无菌发酵液可推迟核盘菌菌核形成的时间,减少菌核数目,也可推迟菌核的萌发。在油菜叶片离体实验中,该菌株的菌悬液及无菌发酵液对发病有明显的抑制作用。