不同品种紫花苜蓿耐盐性研究

为了筛选出耐盐苜蓿品种,试验通过对9个苜蓿品种在不同盐浓度下萌芽率、生长量、脯氨酸含量的测定和综合加权分析．认为：苜蓿品种的耐盐性由强到弱依次为劳博、游客、WL323、创新、苜蓿王、中苜1号、青睐、龙牧801、皇后。时培养皿发芽试验和脯氨酸含量与植物耐盐性的关系进行了讨论,并提出保丰和宁苜1号也是较有希望的品种。     

不同品种紫花苜蓿耐盐性研究

为了筛选出耐盐苜蓿品种,试验通过对9个苜蓿品种在不同盐浓度下萌芽率、生长量、脯氨酸含量的测定和综合加权分析,认为:苜蓿品种的耐盐性由强到弱依次为劳博、游客、WL 323、创新、苜蓿王、中苜1号、青睐、龙牧801、皇后.对培养皿发芽试验和脯氨酸含量与植物耐盐性的关系进行了讨论,并提出保丰和宁苜1号也是较有希望的品种.     

紫花苜蓿转基因技术研究进展

紫花苜蓿（Medicago sativa L.）是世界上重要的豆科牧草,它具有品质优良,易于栽培等特点,在生态环境保护方面也发挥着积极作用。近年来利用转基因技术对紫花苜蓿进行遗传改良的研究已取得了较大的进展。本文总结了紫花苜蓿在基因转化受体、转化方法及基因工程遗传改良等方面的研究现状,并展望了紫花苜蓿转基因技术在今后研究工作中的重要地位和前景。     

无菌培养条件下8个紫花苜蓿品种的苗期耐盐性研究

【目的】探讨8个紫花苜蓿品种的耐盐性,为盐碱地改良与利用选择适宜的苜蓿品种。【方法】以8个紫花苜蓿品种种子为材料,在组织培养条件下,观测8个品种在不同浓度NaCl(MS培养基中NaCl浓度分别为0,50,85,120,170 mmol/L)胁迫下的发芽率、单株鲜质量、根长、苗高以及游离脯氨酸含量的变化,并对其耐盐性进行综合评价。【结果】低浓度(50 mmol/L)NaCl处理对紫花苜蓿的萌发和生长具有促进作用;随着NaCl浓度(85~170mmol/L)的升高,紫花苜蓿的发芽率和生长受到明显抑制,表现为相对发芽率、相对根长、相对苗高以及相对单株鲜质量明显下降,而游离脯氨酸含量明显升高。8个紫花苜蓿品种耐盐性的综合排序及其得分为"金皇后"(3.095)"巨人201"(2.467)"三得利"(2.379)"阿尔冈金"(2.369)"保定"(2.077)"中苜1号"(1.474)"敖汉"(0.885)"WL-232"(0.310)。【结论】"金皇后"是耐盐性最高的紫花苜蓿品种,适宜在土壤盐碱含量较高的地区种植;而耐盐性最差的是"敖汉"和"WL-232",盐碱地应尽量避免选种这2个品种。     

不同品种紫花苜蓿的耐盐性筛选试验

选择5个耐盐品种劳博、WL323、苜蓿王、游客、创新进行耐盐筛选试验,通过对不同盐浓度下植株萌芽率、株高、植株鲜质量、植株干质量生长指标的测定和综合加权分析得出:劳博在0.8%盐浓度胁迫下抗盐性最强,表现出萌芽率高、植株生长快、干物质积累多等特点;其次是WL323和苜蓿王,耐盐性中等;游客和创新苜蓿耐盐性相对较差。劳博在1.0%盐浓度胁迫下抗盐性仍然最强;其次是创新,耐盐性中等;WL323、苜蓿王和游客苜蓿耐盐性相对较差。     

转基因烟草的耐盐性研究

通过植物基因工程技术,获得了分别表达编码细菌1-磷酸甘露醇脱氢酶基因(mtlD)和6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD)的转基因烟草。Southern和Northernblot结果表明,mtlD基因和gutD基因均已整合到烟草染色体DNA中,并转录产生对应的mRNA。糖醇含量测定表明,在所测试的mtlD基因转化烟草中,均有不同剂量的甘露醇的合成;在gutD基因转化烟草中,gutD的表达导致了细胞内山梨醇相对浓度的提高。在含1.75%NaClHoagland溶液中的耐盐实验表明,转化植株的耐盐性比非转化植株的大为增强。     

紫花苜蓿高频体胚发生及萌发成苗技术与转基因应用

以紫花苜蓿的子叶或叶片为外植体,建立高频体胚发生及成苗技术体系,为苜蓿耐逆性状的遗传改良提供技术支撑。在愈伤诱导、体胚诱导、体胚成熟与萌发等几个关键环节,分析比较培养基组分对培养效果的影响。建立在SHDK培养基上诱导愈伤、MB(-/+)+ABA 0.4mg/L+PEG-6000 50g/L+蔗糖50g/L培养基上诱导体胚、Bio2Y培养基上促体胚发育成熟、1/2 MS(或SH)培养基上体胚萌发成苗的高频再生技术体系。最适条件下,每克胚性愈伤组织可产生77.9个正常萌发成苗的健康体胚。再生植株在生长箱内经过2周20℃、16h/d的光照培养后移栽温室,成活率达90%以上。利用该离体再生技术成功地将凝集素基因PPA导入苜蓿中,获得抗蚜转基因苜蓿。     

紫花苜蓿MsDWF4的表达特性及耐盐性效应

【目的】分离紫花苜蓿(Medicago sativa L.)油菜素内酯(brassionsterinds,BRs)合成酶基因MsDWF4,分析基因表达特性,开展基因的耐盐性研究,为揭示MsDWF4对紫花苜蓿非生物胁迫的调控机制提供参考。【方法】根据已知的拟南芥DWF4序列,应用同源克隆技术获得紫花苜蓿MsDWF4,对序列进行生物信息学分析。利用qRT-PCR技术分析MsDWF4的组织表达特异性,及其在多种非生物胁迫(高温、冷害、干旱和高盐)和激素(生长素、油菜素内酯、脱落酸和茉莉酸)处理下的表达模式;构建MsDWF4超表达载体,利用农杆菌介导遗传转化法转化紫花苜蓿,获得超表达MsDWF4的紫花苜蓿株系,用高盐(200 mmol·L^-1 NaCl)处理紫花苜蓿转基因株系并结合抗氧化酶活性分析,研究MsDWF4是否提高紫花苜蓿的耐盐性。【结果】获得MsDWF4的cDNA序列,其CDS全长1 470 bp,编码489个氨基酸,该基因编码的蛋白质为P450超家族成员,共含有67个激酶磷酸化位点。序列分析和系统发育树分析表明紫花苜蓿MsDWF4与蒺藜苜蓿DWF4的亲缘关系最...     

接种根瘤菌后3个紫花苜蓿品种耐盐性综合评价

研究苜蓿中华根瘤菌共生3个耐盐性高的紫花苜蓿品种,以选育适宜在内蒙古盐渍土地区大量种植的紫花苜蓿品种。以内蒙古地区常见的3个紫花苜蓿品种(中苜1号、金皇后、阿尔冈金)为试验材料,利用不同浓度NaCl溶液(0、50、150 mmol/L)模拟盐害环境,对3个紫花苜蓿品种接种苜蓿中华根瘤菌,测定紫花苜蓿品种的地上部分鲜质量、根鲜质量、根瘤数、有效根瘤数、丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、可溶性糖质量分数6项指标,依据隶属函数法进行耐盐性综合评价。当盐浓度达到50 mmol/L时,3个紫花苜蓿品种中金皇后与苜蓿中华根瘤菌共生耐盐效果最好,相比于不接种地上部分鲜质量增加6.14 g,MDA质量摩尔浓度低至0.91mmol/g,可溶性糖质量分数高达21.65 mg/g,在3个紫花苜蓿品种中膜脂过氧化程度最低,渗透调节能力最强。当盐浓度达到150 mmol/L时,接种苜蓿中华根瘤菌对3个紫花苜蓿品种影响微弱。耐盐性强弱依次为金皇后(接种RM)、中苜1号(接种RM)、阿尔冈金(接种RM)、中苜1号(未接种RM)、金皇后(未接种RM)、阿尔冈金(未接种RM)。不同盐浓度(0、50、150 mmol/L)对3个紫花苜蓿品种生长均有抑制作用,且抑制效果随盐浓度升高而增强。在轻度盐害(50 mmol/L)环境下,接种苜蓿中华根瘤菌有效缓解盐对紫花苜蓿的伤害,其中金皇后耐盐性最强。当重度盐害(150 mmol/L)发生时,接种苜蓿中华根瘤菌对紫花苜蓿作用效果不明显甚至不起作用。     

紫花苜蓿耐盐性的研究进展

回顾了国内外紫花苜蓿在耐盐生理、耐盐材料的筛选、品种选育及其遗传基础方面的研究进展，并简单介绍了分子标记存在苜蓿耐盐育种工作中的应用。     

转mtlD基因早稻的耐盐性研究

利用基因枪转化技术将来源于大肠杆菌的mtlD(1-磷酸甘露醇脱氢酶)基因导入旱稻。研究结果表明：旱稻愈伤组织的继代时间对抗性愈伤的筛选频率无明显影响；基因枪轰击后愈伤组织的恢复时间(≤7d)较长时，潮霉素B质量浓度应适当提高。转基因植株及其后代的PCR，dot blotting，southern blotting和northern blotting检测表明，mtlD基因已整合到旱稻基因组中，并且稳定表达。在含1．096(质量分数，下同)NaCl的MS培养基上，转基因植株生长速率明显大于阴性对照；在含0．75％ NaCl的盆中，转基因植株能够生长。盐分对转基因植株质膜的伤害减轻，Na^ 向地上部运输受抑，转基因植株的Na^ 与K^ 比率低于阴性对照。T1代转基因旱稻耐盐和盐敏感以及抗潮霉素B和潮霉素B敏感的分离比例均大于3：1，说明基因枪轰击为多拷贝转化。     

苜蓿转基因研究进展

介绍近年来国内外苜蓿转基因在抗逆、抗生物胁迫、改良品质等方面取得的最新研究进展.针对目前苜蓿转基因存在的问题进行讨论分析并提出相应的解决对策,对苜蓿转基因的发展方向提出建议.     

农杆菌介导马铃薯转化体系的优化及转基因马铃薯的耐盐性研究

通过农杆菌介导的方式将獐茅液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因(AlNHX)表达在马铃薯中,并对影响马铃薯转化的几种因素(抗生素浓度、农杆菌菌液浓度、共培养时间等)进行优化。结果表明:最适农杆菌菌液浓度是OD600=0.6,最适侵染时间是5min,最适共培养时间是2d,马铃薯转化中最适头孢霉素浓度是400mg/L;经PCR检测确认的转基因马铃薯植株在含0.7%NaCl的培养基中可以生长,而野生型马铃薯无法在此培养基中正常生长。在盐胁迫条件下,转基因马铃薯的Na~+、K~+含量及K~+/Na~+的比值均高于野生型马铃薯。研究证实马铃薯植物的的耐盐性可以通过农杆菌转化导入獐茅液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因而得到提高。     

四种植物材料离体培养条件下的耐盐性比较

以紫薇、风箱树、盐桦和鞑靼忍冬4种植物组培苗茎段为材料,培养基中附加不同浓度NaCl胁迫,根据生长指标和Na+、K+离子分布及含量的变化对其耐盐性进行比较.结果表明:NaCl胁迫对4种材料组培苗生物产量均有显著影响,除鞑靼忍冬外,其他均表现为低盐浓度(0.1%~0.3%)促进生长,高盐浓度(≥0.6%)植物生长受到明显抑制,根据相对生物量的变化可知,4种材料忍耐NaCl胁迫能力的大小顺序为盐桦>紫薇>风箱树>鞑靼忍冬;4种材料的Na+含量随着NaCl浓度的增大迅速升高,且不同材料的不同组织中升高幅度不同,根中Na+含量较多,除盐桦外,其他材料叶片中Na+含量较少;相反,随着NaCl浓度的增大,K+的含量逐渐减小;RSK、Na值表明,紫薇和盐桦对K+运输的选择性较高,而风箱树和鞑靼忍冬则较低.     

核果类果树砧木耐盐性差异的研究

采用盆栽试验结合田间观察,对山桃(Prunusdavidiana)、毛桃(P.persica)、山杏(Ameniacasibirica)、山樱桃(P.serrulata)、毛樱桃(P.tomentosa)5种核果类果树砧木的耐盐性进行了研究。盆栽砧木苗用不同浓度的NaCl溶液处理后,对砧木苗相对生长量、盐害指数、植株受害率及叶片中游离脯氨酸含量等指标进行了测定。通过各项指标的分析并结合田间观察结果,发现这5种砧木在耐盐性方面表现出较大差异,其耐盐性由强到弱的顺序依次为山桃>毛桃>山杏>山樱桃>毛樱桃。     

不同紫花苜蓿品种生产效能研究

比较了引进美国的15个紫花苜蓿品种和新疆大叶苜蓿的生长特性、产草量、营养价值、产出能量、经济效益等的差异。结果表明,15个引进品种中有10个品种的各个性状均优于对照品种,其中牧歌401、巨人201的生长势、再生性能强;鲜干草产量、粗蛋白含量高,营养丰富;产能效率高、经济效益好,值得大面积推广。     

NaCl胁迫下8个多年生黑麦草品种萌发期耐盐性的比较

试验采用6种不同浓度的NaCl溶液(0%、0.3%、0.6%、0.9%、1.2%和1.5%)对8个多年生黑麦草品种种子进行NaCl胁迫萌发,测定相对发芽率、胚根胚芽比、萌发指数和萌发活力指数.结果表明:多年生黑麦草种子萌发适宜的NaCl浓度≤0.66%,而其耐盐的临界浓度在0.9%～1.2%之间;利用聚类分析得出,在8个供试品种中,‘全顺’、‘守门员’和‘雷神4’具有较强的耐盐性,‘启萌’的耐盐性较弱.     

玉米耐盐愈伤组织变异体的筛选及耐盐性分析

为了筛选玉米耐盐愈伤组织变异体,选用4个适于玉米组织培养基因型的幼胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。继代5次后,分别用200 mmol/L NaCl和5.5 mmol/L Hyp连续筛选3次,获得耐盐愈伤组织变异体,分别称为rn变异体和rh变异体,以普通继代培养基上培养的愈伤组织为对照。经一代回复培养,分别在200,250和300 mmol/L NaCl胁迫下,分别测定了rn变异体r、h变异体和对照愈伤组织存活率,胚性愈伤组织百分率,K+、Na+含量;在300 mmol/L NaCl胁迫下,测定了rn变异体、rh变异体和对照愈伤组织的生长量及脯氨酸含量。结果表明,rh变异体愈伤组织的分化频率高于rn变异体,Hyp的选择频率是NaCl的2倍左右;在不同浓度NaCl胁迫下,rh变异体具有较高的愈伤组织存活率和K+、Na+含量;在300 mmol/L NaCl胁迫下,rh变异体的生长量和脯氨酸含量均最高,表现出了较好的耐盐性。     

苜蓿多糖提取工艺研究

对苜蓿多糖提取、纯化条件进行优化研究,正交试验结果表明苜蓿多糖提取最佳条件为100℃水浴浸提2h,料水比为1∶20,醇析浓度为80%乙醇.粗多糖得率11.08%.粗多糖脱蛋白时,样品-氯仿+正丁醇(v/v)为1∶1,氯仿-正丁醇(v/v)为4∶1,萃取时间采用30min效果最佳,多糖得率70.8%.此外,本文还从经济效益和工厂化角度探讨了苜蓿多糖提取条件的最佳组合.     

鸡β-防御素Gal-3在转基因紫花苜蓿中的表达

【目的】在紫花苜蓿中表达鸡β-防御素3(Gal-3),为利用紫花苜蓿规模化生产Gal-3奠定基础。【方法】PCR扩增鸡Gal-3基因,以潮霉素作为转基因植物的选择标记,将鸡β-防御素Gal-3基因克隆至表达载体pCAM-BIA1390R(简写为p1390R)上,构建重组表达质粒p1390R-Gal-3;采用冻融法将质粒p1390R-Gal-3转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化至紫花苜蓿;采用PCR检测、Southern blot筛选阳性转基因苜蓿植株,并对Gal-3蛋白进行抑菌活性研究。【结果】PCR扩增获得了240bp的鸡Gal-3基因,成功构建植物表达载体p1390R-Gal-3,在苜蓿中初步建立了Gal-3的遗传转化体系,共获得22株转基因苜蓿植株,其中4株为阳性植株,转化率为18.2%。PCR扩增和Southern blot检测表明,Gal-3基因已整合到转基因苜蓿基因组中。提取转基因苜蓿的Gal-3蛋白进行抑菌活性试验,结果显示转基因苜蓿对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌均有抑制作用。【结论】获得了具有抑菌活性的转鸡β-防御素Gal-3基因的苜蓿植株。