N~+注入诱变黑曲霉选育单宁酶生产菌株

以黑曲霉为出发菌株,经多次N+注入诱变,得到突变高产单宁酶菌株黑曲霉ANO2。该突变菌株其产单宁酶酶活为670.2 U/mL,较出发菌株的单宁酶酶活442.3 U/mL提高51.4%以上,突变菌株经传10代培养,产酶特性稳定,是一株比较理想的单宁酶生产菌株。     

红平菇木质素降解酶系统漆酶、锰过氧化物酶及木质素过氧化物酶的检测

木材白腐菌在分解木质素的过程中会产生非特异性的分解木质素结构的酶系统,这些酶系统主要包括细胞外过氧化物酶[锰过氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)、木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)]和细胞外酚氧化酶[漆酶(laccase)].因此,在生物修复方面,白腐菌能够有效地降解废水和土壤中难被降解的多氯联苯、多环芳烃、DDT、染料、炸药和其他氯化物、叠氮化合物等.     

锰过氧化物酶应用的研究进展

介绍了锰过氧化物酶(MnP)及其产生菌的研究概况,综述了近年国内外关于MnP在纸浆的生物漂白、有机污染物的降解、染料的脱色、褐煤的生物降解、农业废弃物的处理和催化聚合反应等方面应用的研究进展。     

锰过氧化物酶对结晶紫脱色的研究

利用茯苓PoriaCOCOS在液体发酵条件下产锰过氧化物酶,并对其用于染料结晶紫降解脱色,确定其最适工艺条件．结果表明：茯苓产的锰过氧化物酶对染料结晶紫的最适脱色条件为H2O2浓度0．15mmol／L,pH5．0,反应温度40℃．     

灵芝属木质素降解高效菌株筛选

The diagnostic methods of extracelluar oxidase mat were used to select lignin-degrading enzymes producers among nineteen Ganoderma lucidum fungal strains. The results showed that the producing laccase activity of G.sp.var. Tianzhi was the highest,followed by that of G.lucidum 10 and G.lucidum 8.The producing lignin peroxidase activity of G.sp.var Tianzhi was the highes, and the producing Manganese peroxidase activity of G.sp.var yuanzhi 6 and G.lucidum G8 were the highest, followed by that of the G.sp.var. Tianzhi and G.lucidum 10. It was found that G.sp.var Tianzhi, G.sp.var. Yuanzhi 6, G.lucidum 8 and G.lucidum 10 showed the highest lignin-degrading enzymes activity.     

猴头菌菌株CB1的系统发育分析与木质素降解酶的检测

首先对猴头菌菌株CBI进行培养特性观察,表明菌株能产生较多的厚垣孢子;对其ITS序列进行扩增(GenBank登录号为GU584100),并与猴头菌属5个种的17个不同地域菌株进行基于ITS序列的系统发育分析,结果表明菌株CB1与猴头菌同种其他菌株遗传距离较近并聚类在一起.明确该菌株的分类地位后,对其进行木质素降解酶系统的检测,结果表明猴头菌可产生锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(laccase),但不产生木质素过氧化物酶(LiP).MnP和漆酶的酶活性变化是有规律的,Mn2是猴头菌产生MnP的必要因子,而漆酶的产生则不受该条件的制约.在含Mn2+的LNAS培养基中加入木屑为底物的条件下,猴头菌MnP最大酶活性为45.56 U·L-1,漆酶最大酶活性为61.85 U·L-1.     

偏肿栓菌产锰过氧化物酶条件优化

采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基用4种不同的底物处理方式,对白腐菌偏肿栓菌在28℃下进行静止培养,得到不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测在470,420,310nm处对于2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、藜芦醇(VA)的氧化作用后光密度值的变化情况,作为其木质素降解酶系统锰过氧化物酶(MnP)、漆酶和木质素过氧化物酶(LiP)产生的依据。结果表明:偏肿栓菌可产生MnP(必须在Mn2+存在的条件下)和漆酶(不依赖于Mn2+),但不产生LiP;在培养液内添加底物木屑和2,6-DMP后可显著提高2种酶的分泌量。在此基础上,用含Mn2+和青杨木屑的LNAS培养基对偏肿栓菌在30℃下静止培养作为初始培养条件,然后采用2次正交试验和多种单因素试验对偏肿栓菌产MnP的培养基组分和培养条件进行优化。结果表明:在试验设定的因素和水平范围内的最优组合是培养液果糖浓度为5g.L-1、酒石酸铵浓度为15mmol.L-1、锰离子浓度是200μmol.L-1、吐温-80浓度为0.25mL.L-1,MgSO4.7H2O浓度为0.35g.L-1、矿质...     

YK-624产锰过氧化物酶的生产及初步纯化

利用白腐菌PhanerochaetesordidaYK 624(ATCC90872),采用Kirk液体培养基在富氧条件下进行振动培养,可得到锰过氧化物酶(MnP)活性较高和漆酶活性微量的酶液。该酶液通过超滤、透析、二乙氨基乙基琼脂糖凝胶(DEAE sepharoseCL 6B,pharmacia)离子交换柱层析的方法进行初步纯化后,得到比活性很高(1941.54IU/mg)的MnP酶液。漆酶活性和MnP活性比值的变化、SDS PAGE凝胶电泳试验和406nm附近的吸光值变化均表明,经离子交换柱层析后的YK1部分是主要的MnP,电泳试验同时表明纯化后的主要MnP的分子质量约为43kDa。经超滤、透析、离子交换柱层析纯化后得到的酶液YK1可用于进一步地研究及应用。     

灰树花的系统发育分析和主要木质素降解酶的测定

对灰树花菌株迁西二号进行了ITS序列扩增与测序(GenBank登录号为GU584099),并对灰树花及相关白腐菌进行了基于ITS序列的系统发育分析,结果表明灰树花与Grifola sordulenta (Mont.) Singer等白腐菌的亲缘关系较近。采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加4种不同底物,对菌株迁西二号在25 ℃恒温下静置培养,得到了不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测了在470 、420 、310 nm处对于2,6-二甲氧基苯酚 (2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、3,4-二甲氧基苯甲醇/藜芦醇(VA)的氧化作用后光密度值的变化情况,作为锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Laccase)和木质素过氧化物酶(LiP)产生和活性大小的依据,从而获得了灰树花木质素降解酶系统的主要酶系及其与培养基的成分和酶作用底物的基本关系。结果表明,灰树花可产生MnP和漆酶,但不产生LiP;对比4种成分不同的培养液酶活力测定结果,未添加底物的培养液MnP最大酶活仅为2.96 U·L^-1,漆酶最大酶活仅为4.49 U·L^-1。添加底物木屑和2,6-DMP后MnP最大酶活为8.06 U·L^-1,漆酶最大酶活为9.85 U·L^-1,表明在培养液内添加酶的底物木屑后能轻微地提高两种酶的分泌量。     

猴头菌锰过氧化物酶1基因在构巢曲霉的异源转化与表达

为提高猴头菌菌株CB1锰过氧化物酶(MnP)基因的表达产量,采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化方法,将携带有He-mnp1的重组质粒pLB01/He-mnp1转入到构巢曲霉尿嘧啶尿苷营养缺陷菌株TN02A7的原生质体中,获得了转化子菌株TN02A7-He-mnp1,并在乙醇脱氢酶启动子alcA(p)控制下实现了异源表达。将TN02A7-He-mnp1、TN02A7、构巢曲霉野生型菌株WJA01、猴头菌菌株CB1在相同的木质素环境下进行培养并检测MnP酶活性,结果表明:转化子菌株TN02A7-He-mnp1在0.05 g.L-1血红素的情况下、诱导96 h后酶活性最高为38.31 U.L-1,比不添加血红素的酶活力高8.64倍,但比猴头菌菌株CB1的酶活力低,而TN02A7与WJA01始终无MnP酶活性,说明基因He-mnp1已经成功地被转化到TN02A7-He-mnp1中,并在木质素环境下得到表达,血红素是重组MnP基因异源表达的限制性因素之一。本文为生产MnP和提高MnP产量提供了新的途径。     

土壤中产淀粉酶菌株的分离、鉴定及提高产酶能力的研究

利用形态分析结合18S rDNA序列分析鉴定菌株,采用物理诱变、化学诱变及复合诱变等方法诱变菌株,进一步筛选获得了具有更高产淀粉酶能力的菌株。研究表明：通过筛选获得具有高产淀粉酶能力的真菌菌株fu-1,鉴定为黑曲霉,命名为黑曲霉An。An进一步经紫外诱变、化学诱变筛、复合诱变筛选出产酶活力最大的菌株。成功得到了高产淀粉酶活力的菌株An-7c-2u。     

榛子优良品种及高产栽培技术

综述了榛子的优良品种、生物学特性和榛子高产栽培关键的技术；并针对棒子的栽培殃状和问题提出了榛子的产业化对策。     

核桃楸早实丰产栽培技术

核桃楸是东北地区重要用材树种,但因其果仁营养丰富,用途广泛,价格较高而引起人们的高度重视。通过直播并嫁接建园,采用低干矮冠大冠的整形与修剪方法,合理改土施肥灌水,花期人工授粉和有效防治病虫害,可实现早果而丰产。     

八角的丰产栽培技术

八角是一种价值高的经济林木。通过试验及产区生产经验的总结 ,从优良品种选择、育苗、造林地类型划分、种植、林木的管理措施、病虫害防治等方面介绍了云南省的八角丰产栽培技术     

不同鱼腥草生物特性及高效高产栽培技术研究

对鱼腥草的生物学特性进行了调查观察,特别对鱼腥草的人工栽培技术等方面进行了探索研究。收集鱼腥草种质资源23个,进行种植保存;并建立30多亩生产示范基地。结果：不同种源鱼腥草主要经济性状存在显著差异,其中地上茎叶产量以11号处理最高干品产量达0.93kg/m^2,比最低的10号处理0.38kg/m^2高144.74%。地下根鲜产量以处理4最高达5.5kg/m^2,比最低的17号处理1.7kg/m^2高223.53%;通过对23个种源地上干品产量、地下根鲜品产量统计比较结果,可选用11号、17号、16号等作为售茎叶为主的药用栽培品种,3号、4号、13号等作为售鲜根为主的菜用栽培品种。在栽培地上套种吊瓜可增产增效。     

北方石榴品种及优质栽培技术

石榴花果兼赏，形色俱佳，营养丰富，药用和绿化效果很高。石榴适应性强，栽培区域广。石榴种下分类共有7个变种，北方主栽培优良品种主要有河阴铜皮、豫石榴1号、3号、泰山红、大白甜等。优质栽培技术主要有高标准建园，合理密植，科学的土肥水管理，整形修剪，花果保疏，病虫害防治等，成熟后采收，统一分级，可分为4个档次标准。     

自带介质血红密孔菌NFZH-1的鉴定及其木质素降解特性

菌株自带介质可提高其漆酶降解木质素能力,因此自带介质高产漆酶菌株的筛选、鉴定对漆酶的商业应用将起到促进作用。从南京山林地区分离出两株血红密孔菌NFZH-1和NFZH-2,并以杂色云芝为对照,研究了两株血红密孔菌发酵产漆酶和木质素降解特性。首先通过形态学特性鉴定了NFZH-1为自带介质血红密孔菌。其次以愈创木酚为反应底物,平板接种菌株,培养5天,NFZH-1颜色圈较菌丝圈大,且颜色最深;经10天固态发酵,NFZH-1所产漆酶酶活高达23600 U/g,且未检测出木质素过氧化物酶( LiP)和锰过氧化物酶( MnP)。平板显色和固态发酵产酶结果表明自带介质血红密孔菌NFZH-1为漆酶高产菌株。麦草粉经菌株 NFZH-130天降解,木质素降解率、综纤维素降解率分别达56.7%和36.6%,表明血红密孔菌NFZH-1为选择性高木质素降解活性菌株。     

实施天然林保护工程中人工速生丰产林技术的探讨

本文详细介绍了营造速生丰产林的技术、生产量指标及技术措施。     

高产优质茶树新品种76-38号选育

茶树新品种76－38号是云南省农科院茶叶研究所以南糯大叶茶群体后代为原始材料，经系统选育而成的无性系良种。该品种产量高，品质较好，适应性强。