ALK3基因敲除小鼠的繁育及基因鉴定

为了繁育和鉴定ALK3基因敲除小鼠,将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后提取每种基因型小鼠组织基因组DNA,用PCR法进行鉴定,将其雄性杂合子与雌性杂合子交配。结果表明：ALK3杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠。说明正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得ALK3基因敲除纯合子小鼠的有效途径。     

腺苷A2A受体基因敲除小鼠繁殖能力分析

为提高腺苷A2A受体基因敲除小鼠的繁殖能力并加强保种工作,利用不同代数的腺苷A2A受体基因敲除小鼠产仔记录,分析该小鼠的繁殖特性。结果表明,F回交、F1、F2之间的胎平均产仔数差异均不显著(P>0.05),但均极显著高于F3的胎平均产仔数(P<0.01)。提示随着繁殖代数的增加,腺苷A2A受体基因敲除小鼠的繁殖能力下降,但回交可提高其繁殖能力。     

PCSK9基因工程小鼠的饲养繁殖及鉴定

本研究旨在对PCSK9基因工程小鼠进行繁育和鉴定,为研究人类高胆固醇血症等心血管疾病获得一种小鼠的疾病模型.基因工程小鼠由于数量较少,故在饲养繁育方面要求更高.本研究采用雄鼠或雌鼠与野生型小鼠长期合笼的方式进行繁殖,并利用PCR和琼脂糖凝胶电泳法对子代小鼠进行基因型鉴定,同时对PCR阳性结果进行测序验证,结果获得9只P...     

利用体外受精-胚胎移植技术对ALK3基因敲除小鼠进行保种鉴定

目的建立用于ALK3基因敲除小鼠品种保存的体外受精-胚胎移植(IVF-ET)模型.方法取杂合子雌性ALK3小鼠卵子与杂合子雄性ALK3小鼠精子进行体外受精,收集2-cell,进行胚胎冷冻,1周后进行胚胎复苏移植,通过PCR方法对仔代鉴定.结果冻存胚胎242枚,复苏获得存活胚胎196枚,移植78枚,产仔19只,获得杂合子...     

宁夏滩羊雌激素受体(ESR)基因多态性的研究

雌激素受体(ESR)是核受体超家族的一员,是一种配体依赖性的转录因子。目前,国内外许多研究已经证明ESR基因是控制猪高产仔数的主效基因之一。Hewitt S C等研究发现,敲除ESR的小鼠不能排卵,促黄体生成素(LH)调节紊乱,子宫对雌激素不敏感,说明ESR在繁殖中有重要作用。由于ESR基因在动物繁殖中的综合作用,国内外许多学者将ESR基因作为绵羊繁殖性能的一个候选基因进行研究。     

利用CRISPR/Cas9技术构建gdf11基因敲除小鼠及其表型鉴定

为了探讨敲除生长分化因子11(gdf11)基因对小鼠生长性状的影响，本试验根据gdf11基因序列设计向导RNA(sgRNA)并利用规律成蔟的短间隔回文重复序列和CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas9)基因编辑系统对该基因进行敲除，利用显微注射的方法获得gdf11敲除型F0代小鼠，通过聚合酶链式反应(PCR)和测序鉴定子代小鼠基因型。繁育后观察F1代小鼠形态，并采用骨架染色方法观察不同基因型小鼠的性状。结果显示，成功构建了gdf11基因敲除小鼠，并且通过繁育得到了野生型(gdf11^+/+)、杂合型(gdf11^+/-)和纯合型(gdf11^-/-)3种基因型的小鼠；形态观察发现，与野生型小鼠相比，纯合型小鼠在围产期死亡且尾巴是截断的，骨架染色显示，野生型小鼠有13个胸椎和6个腰椎，纯合型小鼠有18个胸椎和9个腰椎。结果表明，敲除gdf11基因可能会影响小鼠胚胎和中轴骨发育从而改变小鼠的生长性状。     

使用TALENs技术构建丁酰胆碱酯酶敲除小鼠模型研究

为了使用转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)技术构建丁酰胆碱酯酶(BChE)敲除小鼠模型,试验设计多对TALENs组合,合成相应的载体,并通过3T3细胞系对这些载体的活性进行检测,选择出活性最高的组合进行体外转录获得TALENs mRNA,并注射入小鼠受精卵中,对子代小鼠进行基因测序并筛选,最终获得BChE基因敲除小鼠。结果表明:针对4个基因位点设计并构建了30对TALENs组合,选择最优3L3-3R1组合进行体外转录并注射入小鼠受精卵,获得4只携带突变的F0代嵌合体小鼠;通过杂交及筛选,最终获得4只携带移码突变的F1代小鼠,可用于交配繁殖。说明通过TALENs技术可以稳定可靠地制备BChE基因敲除小鼠,并用于后续BChE功能的研究。     

心房钠尿肽基因敲除小鼠的鉴定

研究心房钠尿肽基因敲除小鼠(ANP-/-小鼠)的生物学及病理学特性。ANP-/-小鼠与C57BL/6小鼠饲养于SPF级环境中,观察小鼠的繁育状况及其生物学特性,选取合适时间处死小鼠,通过HE染色观察脏器形态及组织结构。ANP-/-小鼠的繁殖周期比C57BL/6长,产仔率较低;ANP-/-小鼠肝脏、肺脏、脾脏较C57BL/6小鼠的有明显炎症反应,但是C57BL/6小鼠未见明显的病理改变。提示ANP基因的缺失可能与炎症发生有关。说明ANP-/-小鼠繁殖较慢、产仔率低,且正常繁殖的普通小鼠不会引起器官的病理学改变。但作为一种在心血管、代谢疾病上的动物模型,并与炎症甚至肿瘤有可能的未知联系的转基因动物,其很有研究和探索价值。     

荣昌猪初产繁殖性状的全基因组关联研究

旨在鉴定荣昌猪初产繁殖性状的重要变异位点和基因,为荣昌猪繁殖性状的遗传改良提供重要的分子标记和基因资源。本研究选取429头荣昌母猪进行猪50K芯片基因分型,经过质量控制和基因型填充后,保留35 046个SNPs用于分析。采用主成分分析法研究群体结构,利用混合线性模型(mixed-linear model, MLM)将出生年、出生月作为固定效应,将主成分值作为协变量对总产仔数、活产仔数、死胎数和初生窝重性状进行全基因组关联分析(GWAS)。结果显示,在全基因组显著水平上鉴定出2个影响荣昌猪初生窝重的SNPs和1个影响荣昌猪死胎数的SNP;在潜在显著水平上鉴定到5个影响荣昌猪总产仔数的SNPs, 3个影响荣昌猪活产仔数的SNPs和10个影响荣昌猪死胎数的SNPs。通过全基因组关联分析筛选到1个显著的SNP(SSC17:57 315 180 bp)同时影响荣昌猪总产仔数、活产仔数和初生窝重,1个显著的SNP(SSC1:279 214 647 bp)同时影响荣昌猪活产仔数和总产仔数,暗示基因在不同性状间具有一因多效性。本研究根据候选基因的相关分子生物学功能,确定BMP7基因为影响荣昌猪总产仔数...     

空间环境大小对小鼠繁殖性能的影响

<正>小鼠具有体型小、繁殖快、性周期短、产仔数多、饲养管理费用低等优点,是当今世界上研究最详尽的哺乳类实验动物[1]。小鼠中昆明鼠(KM)、NIH、ICR为最常用3个品种[2]。KM小鼠起源于远交系小鼠,于1944年引入云南昆明,经过半个多世纪的饲养繁殖,已成为我国目前使用最为广泛的小鼠,是我国独有的远交群实验动物[3]。动物福利是一个广泛的概念,它包括动物生理上和精神上两方面的"康乐"[4],以及为了达到"康乐"