蜂王浆中抗金黄色葡萄球菌肽的分离

分别用透析法和DEAE离子交换层析法分离蜂王浆抗金黄色葡萄球菌肽.用透析法分离获得了分子质量≤3.5 ku、介于3.5 ku与12 ku之间以及≥12 ku的3种组分,测定结果显示分子质量≤3.5 ku和介于3.5 ku与12 ku之间的蜂王浆组分具有抗金黄色葡萄球菌的活性.用DEAE离子交换层析法分离了分子质量≤3.5 ku和介于3.5与12 ku之间的2种蜂王浆透析组分,其中分子质量≤3.5 ku的6个离子交换分离组分中,组分1和组分6具有抗金黄色葡萄球菌活性;分子质量介于3.5 ku与12 ku之间的6个离子交换分离组分中,组分1具有较强的抗金黄色葡萄球菌活性.     

抗多重耐药金黄色葡萄球菌土壤放线菌筛选

[目的]从土壤中发现拮抗多重耐药金黄色葡萄球菌的放线菌。[方法]将土壤稀释后在高氏一号培养基上划线分离放线菌,并测试抗菌活性。[结果]获得放线菌一株B0602具有很强的抗菌活性。[结论]放线菌B0602可能开发出高活性的抗生素制品。     

鸭金黄色葡萄球菌的分离与鉴定

从病鸭肝、脾和关节液中分离到1株细菌,经细菌形态学观察、鉴别培养、生化试验、血浆凝固酶试验、过氧化氢酶试验鉴定为金黄色葡萄球菌。该分离株能引起家兔局部皮肤溃疡、坏死,动物回归试验中,能使雏鸭发病并死亡。药敏试验结果表明,该菌株对先锋霉素V、丁胺卡那、氨苄青霉素高敏。     

鹅金黄色葡萄球菌的分离及鉴定

从采自死亡肉鹅肝和脾病料中分离到一株细菌，经细菌形态学观察，鉴别培养，梅里埃微生物全自动分析仪检验，血浆凝固酶试验鉴定为金黄色葡萄球菌。该分离菌株对小白鼠有致病性，动物回归试验中，能使雏鹅发病并全部死亡。从而证明本病的病原为致病性金黄色葡萄球菌。药敏试验结果表明，该菌株对环丙沙星、先锋V、毒霉素和氨苄青霉素高度敏感，而对复方新诺明不敏感。     

具有杀虫活性的海洋微生物的筛选

以棉铃虫(H.armigera)为初筛试虫,采用常规浸虫和微型筛选法测定采自中国海域的908株海洋微生物的杀虫活性,获得了14株具有杀虫活性的菌株,进一步测定在初筛中具有高杀虫活性的JAAS01菌株浓缩发酵液对棉铃虫、菜青虫(P.linnaeus)、粘虫(L.separata)、小菜蛾(P.xylostella)和菜缢管蚜(R.pseudobrassicae)的室内杀虫活性。结果表明,JAAS01菌株浓缩发酵液对粘虫的杀虫活性最高,达94 36%,对菜青虫和棉铃虫的杀虫活性中等,而对菜缢管蚜和小菜蛾的杀虫活性较低。研究结果显示,从海洋微生物中可筛选出对农业害虫具有杀虫活性的新型微生物资源。     

市售鲜牛奶中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

[目的]通过对石河子地区市售鲜牛奶中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性的分析,评估该区域鲜牛奶的安全性。[方法]采用稀释涂平板法分离金黄色葡萄球菌,结合接触酶、兔血浆凝固酶试验,nuc基因扩增,16S r RNA基因测序进行鉴定。同时,选用K-B纸片法测定分离菌株的耐药性。[结果]从10份样品中分离得到金黄色葡萄球菌16株。其中,47.8%的菌株表现为多重耐药,12株金黄色葡萄球菌对头孢他啶具有耐药性。[结论]样品中金黄色葡萄球菌多重耐药性严重,应该采取相应的措施加以监管。     

牛源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

研究金黄色葡萄球菌的耐药性状况,指导兽医临床用药。采用高盐甘露醇进行纯化培养,梅里埃全自动微生物分析系统对葡萄球菌鉴定板进行鉴定,纸片扩散法进行药敏实验。从阳性乳房炎样品中分离纯化并鉴定了样品中的金黄色葡萄球菌2株,测定了其耐药性。在选取的5种药物中,青霉素对分离病原菌的抗菌活性较高,其次是恩诺沙星和庆大霉素,而链霉素和磺胺嘧啶钠对分离病菌的抗菌活性较低。     

毛囊炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定与药敏试验

从一例人毛囊炎脓液中分离到一株细菌,经细菌形态特性观察,培养特性观察,血浆凝固酶试验鉴定为金黄色葡萄球菌.该分离菌株对小白鼠有致病性,生化试验表明VP试验阳性,发酵甘露醇,从而证明本病的病原为致病性金黄色葡萄球菌.抗生素药敏试验结果表明,该菌株对先锋霉素Ⅴ、头孢拉定、恩诺沙星、环丙沙星、氟哌酸、卡那霉素、丁胺卡那霉素、氨苄青霉素等高度敏感,对复方新诺明、乙酰螺旋霉素、罗红霉素、红霉素等不敏感.中草药药敏试验结果表明,该菌株对乌梅、黄连、诃子、黄柏等高度敏感,对其它中草药不敏感.     

牛粪中致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物试验

为了进一步追踪由牛源致病性金黄色葡萄球菌造成的粪便污染源头,对100头荷斯坦泌乳奶牛的新鲜粪便进行了致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定。通过分离纯培养,共分离出32株疑似金黄色葡萄球菌,再经血浆凝固酶试验、动物致病性试验和生化鉴定,从32株疑似金黄色葡萄球菌中分离到6株致病性金黄色葡萄球菌,致病菌检出率为18.75%(6/32)。在此基础上选用乌梅、黄芩、大黄、黄连、穿心莲、金银花、板蓝根、桂枝等8种中草药,按照试管液体二倍稀释法,进行药物M IC试验,结果表明,抑菌效果较好的药物是乌梅、黄芩;其他中草药对致病性金黄色葡萄球菌抑菌效果较差。     

某奶牛场牛乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性调查

从山西某奶牛场随机采集25份奶样,进行细菌分离培养、染色镜检、H2O2酶试验鉴定,并对其进行了9种药物的敏感性试验。结果表明,从25份奶样中分离出18株金黄色葡萄球菌;这18株金黄色葡萄球菌对多种药物呈现出耐药性,其中,对阿莫西林耐药率最高,达77.8%,对卡那霉素、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星、磷霉素、头孢曲松的耐药率介于11.1%~44.4%,对左氧氟沙星的耐药率最低,为5.6%。说明金黄色葡萄球菌为该奶牛场奶牛乳房炎的主要致病菌,该场奶牛对9种抗生素产生了普遍的耐药性,建议该奶牛场以体外药物敏感试验为参考,进一步扩大药物的筛选范围,选择更多敏感药物进行治疗。     

钒抗性微生物的筛选

试验从四川省攀枝花市朱家包包钒钛磁铁矿区的表层土壤中筛选出21株钒抗性微生物,经16S r RNA基因测序鉴定可知,筛选所得的微生物分别属于放线菌纲、α-变形菌纲、β-变形菌纲和γ-变形菌纲。这些菌株的获得将为钒污染地区微生物资源的开发利用及矿区生态修复提供理论和技术支持。     

舟山海域海泥细菌的分离及抗水产病原弧菌的筛选

采集中国东海舟山海域海底不同层次9个海泥样品,通过稀释培养分离纯化得到海洋细菌78株。采用滤纸片琼脂扩散法测定上述分离所得海洋细菌对鳗弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌、费氏弧菌等5种水产病害常见病原弧菌的抑制作用,获得具有抑弧菌作用的海洋细菌17株,占21.8%。其中6株菌株对费氏弧菌有明显的抑菌作用,占7.7%。7株菌株对哈维氏弧菌的抑菌作用较显著,占9.0%。2株菌株对创伤弧菌有明显的抑菌作用,占2.6%。2株菌株对溶藻弧菌和鳗弧菌显示一定的抑制作用,各占1.3%。研究结果表明：通过稀释培养法能分离到一定数量和种类的海洋细菌;来自海底泥的海洋细菌中存在较多的具有水产病原弧菌拮抗活性的菌株。     

桑赤锈病病原菌拮抗微生物的分离与筛选

为寻求生防微生物用于防治桑赤锈病,采用平板对峙法初步筛选农田根际及非根际土壤、贫瘠山地土壤及健康桑叶分离的微生物,用琼脂平板扩散法测定初筛拮抗菌株发酵液的抑菌活性。结果表明:初筛共得到25株菌株对桑赤锈病病原菌有明显的抑菌带,复筛共得到5株菌株对其具有较强的拮抗作用,以细菌C53的抑菌效果最好,抑菌率达65.4%。     

乳样中金黄色葡萄球菌的靶向分离及其致临床型乳腺炎的风险分析

【目的】研究奶牛养殖场中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的分离效率,快速评估分离株致临床型乳腺炎的风险。【方法】使用葡萄球菌选择培养基结合CHROM SA显色培养基对乳样中的SA进行靶向分离,经斯皮尔曼等级相关系数分析,建立定量测定分泌性溶血素评价SA毒力的方法。【结果】对采集的64份临床型乳腺炎、157份隐性乳腺炎和213份健康乳样进行SA分离,从中分别分离出27株、21株和17株SA菌;对应样本分离株中,溶血素分泌量≥1 500 VH50 U/mL(强毒力)的菌株分别为9株(33.3%)、1株(4.8%)和2株(11.8%)、溶血素分泌量在1 000~1 500 VH50 U/mL(中等毒力)的菌株1株(4.8%)、13株(61.9%)和4株(23.5%)、溶血素分泌量<1 000 VH50 U/mL(弱毒力)的2株(11.8%)、7株(33.3%)和11株(64.7%)。临床型乳腺炎的发生与感染溶血素分泌量≥1 000 VH50 U/mL(中、强毒力)菌株呈正相关(ρ=1,P=0.006 9),与感染溶血素分泌量<1 000 VH50 U/mL(弱毒力)菌株呈负相关(ρ=-1,P=0.10)。【结论】靶向分离方法提高了SA分离效率,可真实反应奶牛养殖场中SA感染率;定量测定溶血素可用于SA毒力评价,根据中、强毒力菌株的感染情况可以初步预测临床型奶牛乳腺炎发生风险,配合临床药物敏感性试验有可能提高SA性临床型乳腺炎的治愈率,减少耐药株的扩散。     

黄芩抗金黄葡萄球菌提取工艺的优化

以纸片扩散法测抑菌圈大小为指标,设计正交试验确定黄芩水提物中活性组分抗金黄色葡萄球菌的最佳浸提工艺。并进一步研究黄芩水提物最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:黄芩水提物抗金黄色葡萄球菌的最佳提取工艺为提取温度80℃,料液比1∶60(g·m L~(-1)),提取时间1 h。MIC为6.25 g·L~(-1);MBC为25 g·L~(-1)。     

人参内生菌的分离及拮抗菌株的筛选

利用研磨法和组织块法对我国吉林省5个不同地区来源的健康人参植株分别进行了内生细菌和内生真菌的分离,并采用菌体初筛和发酵液复筛相结合的方法,筛选了对6种人参主要病害病原菌具有抑菌活性的内生菌株.结果显示:在人参根、茎、叶不同器官中共分离获得152株内生细菌和46株内生真菌,初筛后得到对2种以上病原菌有抑菌活性的内生细菌16株,内生真菌3株,复筛后对4种以上病原菌具有抑菌活性的内生细菌2株,内生真菌1株,还发现了对灰霉病菌具有明显抑制作用的菌株3株.     

葡萄霜霉病拮抗细菌N6的分离、筛选及鉴定

筛选葡萄霜霉病菌的拮抗菌株,为该病害的生物防治提供更多的资源.采用稀释平板分离法,从3个品种的健康葡萄叶片上分离得到细菌153株.初筛采用平板对峙法,得到5株拮抗辣椒疫病菌的菌株.采用叶盘法进行复筛,得到防治葡萄霜霉病效果好并且稳定的菌株N6,其防效达到74.2％.通过对菌株N6的形态、生长特性、生理生化反应、16S rDNA序列测定和系统发育分析,鉴定该菌株为砖红微杆菌(Microbacterium testaceum).