兽药人工抗原合成的研究进展

在兽药的免疫化学残留分析中,能否合成稳定的具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的最关键步骤.综述了国内外兽药人工抗原合成过程中载体的选择、半抗原的设计（强调偶联部位和间隔臂的引入）、半抗原与载体的偶联方法、人工抗原的纯化与鉴定等方面的研究进展.     

人工抗原的合成及单克隆抗体的纯化

制备单克隆抗体，建立优化ELISA方法检测兽药残留过程中，人工抗原的合成是较重要的步骤。对人工抗原合成时半抗原和载体的选择，化学反应的类型及应注意的事项进行了阐述，以期促进兽药残留分析的发展。     

动物性食品中兽药人工抗原合成的研究

本文综述了兽药分子人工抗原合成中半抗原的设计原则、半抗原合成、载体选择、人工抗原合成方法、鉴定、纯化和影响因素等方面研究进展。     

马波沙星人工抗原的合成及其免疫原性的鉴定

合成、鉴定了马波沙星(MBF)人工抗原,为马波沙星单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。以牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)为载体蛋白,采用碳二亚胺法分别合成马波沙星免疫抗原(MBF-BSA)和包被抗原(MBF-OVA),并使用紫外分光光度法、SDS-PAGE、ELISA方法鉴定人工抗原合成效果。初步鉴定结果显示,MBF-BSA与MBF-OVA均偶联成功;用免疫抗原MBF-BSA免疫小鼠,经ELISA方法检测,五免后血清中抗体效价可达1∶5.12×105,半数抑制率为90.20 ng/m L。研究表明,马波沙星人工抗原合成成功,其免疫抗原具有良好的免疫原性,免疫小鼠可获得高效价、高特异性多克隆抗体。     

β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法研究进展

开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主要综述了碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法、重氮化法、戊二醛法等β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法,以及紫外光谱法、核磁共振法等人工抗原鉴定方法,以期为免疫分析等相关工作研究提供参考。     

己烯雌酚人工抗原的合成研究

采用三步反应合成了己烯雌酚人工抗原，为己烯雌酚酶免疫检测技术的进一步研究奠定基础。试验结果证实，己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象，酸碱处理是降低交联前衍生物中顺式体比例的有效方法；经三步合成，成功地制备出了人工抗原；人工免疫原及包被原的最适结合比例分别为1：28和1：7。     

氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接．三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验，结果产生了特异性抗体。交叉试验表明：产生的特异性抗体与氯霉素反应明显，与其他类似物交叉反应不明显。     

新霉素人工抗原的合成与鉴定

用水溶性碳化二亚胺(EDC)法将新霉素(NEO)偶联于栽体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(O-vA),合成免疫原BSA-NEO和包被原OVA-NEO,用红外扫描(IR)、SDS-PAGE法进行鉴定;用BSA-NEO免疫BALB/C小鼠,问接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性.结果表明,BSA-NEO的红外光谱与BSA相比发生了改变,BSA-NEO的电泳条带与BSA的相比出现了明显的拖尾现象;通过系列ELISA鉴定,获得了高价、敏感、特异的pAb,为NEO残留免疫学检测方法的建立奠定了基础.     

沙丁胺醇人工抗原的合成与鉴定

通过沙丁胺醇(SAL)与琥珀酸酐的醇解反应制备SAL的琥珀酸衍生物,用EDC法将SAL琥珀酸衍生物偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SAL和包被原OVA-SAL,用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SAL免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-SAL的UV与BSA、SAL的相比发生了改变;通过UV分析,SAL-HS与BSA的分子结合比约为7.2∶1;通过系列ELISA鉴定,获得了高价、敏感、特异的pAb,为SAL残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

庆大霉素人工抗原的合成与鉴定

庆大霉素（gentamicin,GM）属于氨基糖甙类抗生素,抗菌谱较广,对革兰阳性菌和革兰阴性菌都有作用,对革兰阴性菌作用强。在兽医临床和畜禽的养殖生产中,常用于治疗动物的消化道疾病和呼吸道疾病。随着庆大霉素在畜牧业中的应用越来越广泛,其在动物体内的残留问题也日益严重。研究旨在为GM残留免疫学检测方法的建立奠定基础。     

兽药单克隆抗体研究进展

兽药大多属于小分子物质(半抗原),没有免疫原性,必须与载体交联成人工合成抗原(完全抗原)才能获得免疫原性,用人工合成的抗原来免疫动物制备兽药单克隆抗体。对兽药单克隆抗体的研究是随着兽药残留检测技术发展而开始的,人们已经在制备兽药单克隆抗体所需技术如兽药人工抗原合成的方法、选择合成兽药人工抗原的所需载体、对兽药结构的改造、免疫动物的注射方式、免疫程序、杂交瘤细胞的筛选及培养等方面进行一些研究,并成功地制备出十几种兽药单克隆抗体,且大多已应用于兽药免疫测定法(IAs)。目前仅有一种兽药单克隆抗体已应用于兽药免疫亲和色谱(IAC)。     

二氟沙星人工抗原的合成与鉴定

通过化学方法合成了二氟沙星人工免疫原和包被原；采用碳二亚胺法将半抗原二氟沙星与载体蛋白BSA连接制备人工免疫原；并采用氯甲酸异丁酯法将二氟沙星与载体蛋白OVA连接制备人工包被原，经FeCl3显色反应、紫外扫描分析和动物免疫试验证实人工抗原合成成功。这对抗二氟沙星单克隆抗体的制备具有重要意义。     

呋喃妥因残留代谢物人工抗原的合成与鉴定

利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行验证。将偶联成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清抗体效价为1:32 000。用间接竞争ELISA鉴定抗体特性,结果显示:抗体对AHD与对硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的灵敏度高,IC50为30.63μg/L,特异性好,与CPAHD有部分交叉反应外,与其他3类硝基呋喃类药物及代谢产物无交叉反应(交叉反应率<0.01%)。结果表明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可诱导产生针对AHD衍生物(NPAHD)的特异性抗体,为进一步制备AHD单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。     

兽药残留分析技术研究进展

随着兽药在畜牧生产的广泛应用以及人们对食品安全的要求,检测动物源性食品的兽药残留分析技术已成为迫切需求并取得较大的发展,作者通过对该技术的综述,旨在较深入了解兽药残留检测样品分离纯化技术及确证技术的现状和发展趋势。     

苯乙醇胺A人工抗原的合成及鉴定

采用重氮化法将苯乙醇胺A分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原苯乙醇胺A(PEAA)-BSA和检测抗原PEAA-OVA。经紫外扫描法和SDS-PAGE鉴定表明偶联成功,偶联比分别为15∶1、17.4∶1。用PEAA-BSA免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法检测抗体效价,采用竞争ELISA法检测IC50值,获得了效价4.1×105以上、IC50值为0.2μg/L的多抗血清,证明合成了具有免疫原性的人工免疫原。     

多拉菌素人工抗原的制备与鉴定

多拉菌素(25-环己基阿维菌素，doramectin，DOR)为阿维菌素类药物家族中的一员，采用突变生物法合成(结构见图1)。自1993年发现起，就被认为是其家族中最优秀的驱虫药，在畜牧业生产中得以广泛应用，因而其残留问题势必引起大众的关注。目前兽药残留检测技术的研究方兴未艾，其中快速筛选技术，是保障动物性食品安全的主流方向，最为常用的是ELISA方法和试纸条技术，     

兽药残留对养猪业的危害

兽药残留已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。近年来兽药残留引起食物中毒及影响畜禽产品出口的报道越来越多。药物残留不仅可以直接对人体产生急、慢性毒性作用,导致细菌耐药性,还可以通过环境和食物链的作用间接对人体健康造成潜在危害。多数人认为,兽药残留是监管部门的事,与     

苯并咪唑类兽药残留分析研究进展

苯并咪唑类化合物作为一类广谱抗蠕虫药,已被列入《中华人民共和国动物及动物源食品中残留物质监控计划》药物之中。笔者总结了近年来的苯并咪唑类兽药相关研究情况,对其在动物源食品中的残留分析技术进行综述,介绍此类药物残留检测的样品分离纯化技术及确证技术的现状及发展趋势。     

兽药残留分析技术研究进展

随着兽药的种类和应用规横剧增，人们对兽药残留问题的日益关注以及国际间贸易等原因，使兽药残留分析对象，样本数量和测定难度大大增加．迫切需要发展简便、快速、灵敏、并能同时处理测定大批量样品的兽药残留分析技术．传统的波谱、色谱等理化分析手段难以适应兽药残留分析的要求。     

我国兽药残留检测试剂盒市场的规范化管理

一、兽药残留试剂盒规范化管理的必要性 动物源食品中兽药残留已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。近年来兽药残留引起食物中毒和影响畜禽产品出口的报道越来越多。药物残留不仅可以直接对人体产生急慢性毒性作用，引起细菌耐药性的增加，还可以通过环境和食物链的作用间接对人体健康造成潜在危害。兽药残留还影响我国养殖业的发展和走向国际市场。因此兽药残留的检测势在必行。