春兰根状茎的增殖与分化的影响因素研究

以春兰品种绿云的根状茎为外植体,研究了多个因素对根状茎的增殖与分化的影响.结果表明,B5与1/2MS基本培养基的转换培养较单一培养基利于根状茎的增殖;细胞分裂秦BA、KT对根状茎的增殖有明显的促进作用,但KT浓度超过1.0 mg·L-1后根状茎易玻璃化;在0～3.0 mg·L-1范围内生长素浓度越高越利于伸长型根状茎的形成,IBA促进根状茎的生长较NAA效果好.1/2MS+BA 1.0 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1培养基最有利于根状茎的分化,芽分化率达到37.3%.3种培养基附加物中,芋艿糊优于椰子汁和香蕉泥.根状茎分割以掰开方式较好,增殖团块带有3～5条根状茎较适宜.     

蕙兰种子无菌萌发及植株再生

以中国传统国兰之一的蕙兰‘大一品'种子为外植体进行无菌萌发,然后对形成的根状茎进行诱导、增殖和成苗.结果表明:种子离体培养在附加HAA0.5 mg·L-1的改良Ms培养基上,3个月后开始萌发形成原球茎;低无机盐浓度的培养基适合蕙兰种子萌发.将原球茎转移到附加NAA2.0 mg·L-1的培养基上后,原球茎逐渐转变为根状茎形式进行增殖.50 ml·L-1椰子汁可大大促进根状茎的诱导和增殖.MS基本培养基中添加0.5～2.0 mg·L-1BA和1 g·L-1活性炭,60 d后根状茎可形成芽苗.     

春兰根状茎的增殖与分化条件优化

以春兰种子无菌萌发的根状茎为材料,采用正交设计方法,研究了春兰根状茎增殖与分化的适宜条件.结果表明,根状茎增殖适宜的培养基为1/2MS+3 mg·L-1BA+蔗糖3%+香蕉5%+琼脂0.8%,根状茎分化适宜的培养基为1/2MS+3.0mg·L-1BA+1.0mg·L-1NAA+0.8mg·L-1IBA+蔗糖3%+琼脂0.8%.使用100 g.L-1香蕉作为附加物,春兰根状茎在培养30d后重量可达初重的2.1倍.根状茎在固体培养过程中不发生褐变现象,添加活性炭能促使根状茎产生根毛类似物.     

无患子组织培养研究

采用无患子 Sapindus mukorossi Gaerth成年结果母树上的越冬芽、半木质化春、夏梢嫩茎芽、叶切块为外植体,在含BA、NAA、2,4-D、IBA、KT不同浓度及其配比的MS培养基上进行芽的诱导.结果表明,剥除鳞片的越冬芽是无患子快速繁殖最理想的外植体.无患子越冬芽萌发的适宜培养基为MS + BA 1.5mg·L-1 + NAA 0.2mg·L-1;春、夏梢芽萌发的适宜培养基为MS + BA 4.0mg·L-1+ NAA 0.3mg·L-1;春、夏梢芽切块形成愈伤组织的适宜培养基为MS + 2,4-D 1.5mg·L-1 + BA 0.2mg·L-1;无患子愈伤组织诱导萌芽的适宜培养基为MS + BA 3.0mg·L-1+ NAA 0.2mg·L-1+ KT 0.2mg·L-1;适宜的幼苗增殖培养基为MS + BA 1.0mg·L-1 + IBA 0.02mg·L-1;适宜的小苗生根培养基为1/2 MS + NAA 0.5mg·L-1 + IBA 0.1mg·L-1.     

矮秆一串红离体培养快繁技术

以带腋芽的幼嫩茎段为外植体 ,研究矮秆一串红的离体快繁技术 .结果表明 :附加 1.5 mg· L-1BA和0 .1mg· L-1NAA的 MS固体培养基可诱导腋芽萌发 ,诱导率达 90 %以上 ;附加 2 .0 mg· L-1BA和 0 .1mg·L-1NAA的 MS固体培养基为适宜的芽苗继代增殖培养基 ;在附加 1.5 mg· L-1NAA的 1/ 2 MS生根培养基上 ,芽苗 7d后即可生根 .幼苗移栽成活率在 85 %以上     

薄荚相思种子离体萌发与快速繁殖

以薄荚相思优良种子为材料,进行离体快繁技术的初步研究。结果表明:薄荚相思种子经浓硫酸结合沸水处理后,离体萌发率达90%以上;比较适宜的增殖培养基为MS+0.5 mg.L-1BA;在1/2MS+1.0 mg.L-1IBA培养基上,生根率几乎达100%。     

结缕草高频再生体系的建立和优化

以结缕草叶片为外植体进行离体再生研究.结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是 MS+1.5 mg·L-1 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.5 mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+26 g·L-1 蔗糖+5.0 g·L-1 琼脂,诱导率为 65.36%,无性世代增殖倍数高达 9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化最佳培养基为 MS+3.0 mg·L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 萘乙酸(NAA) +1.5 mg·L-1 AgNO3+35 g·L-1 蔗糖+6.5 g·L-1 琼脂,分化率为 67.30%,增殖系数为 8.67;生根培养基选用 1/4 MS+0.2 mg·L-1 吲哚丁酸(IBA)+0.3 mg·L-1 NAA+28 g·L-1 蔗糖+4.5 g·L-1 琼脂,生根率为 90.00%.     

建莲茎尖离体培养研究初报

选用不同品种的“建莲”地下茎茎尖为外植体进行离体再生研究 .结果表明 :对“建莲”地下茎茎尖培养 ,品种间存在一定差异 ;筛选出了适合于“建莲”地下茎茎尖离体培养的分化培养基 ,即 MS+2 mg·L- 1 ZT+0 .5 mg· L- 1 GA3;增殖培养基为 MS+3 mg· L- 1 BA+0 .5 mg· L- 1 NAA;生根培养基为 MS+0 .5 mg· L- 1 BA+0 .1 mg· L- 1 IBA+1 .0 mg· L- 1 NAA,并对已生根的试管芽苗进行了成功的移栽     

曼地亚红豆杉离体培养及植株再生

以红豆杉带侧芽茎段为外植体进行离体繁殖.结果表明:在WPM、MS、B53种基本培养基中,WPM为红豆杉离体培养最适的基本培养基;初代培养的最适培养基为WPM+4.0mg·L-12-ip+30.0mg·L-1Ad;芽继代增殖的最适培养基为WPM+4.0mg·L-12-ip+1.0mg·L-1IAA;生根壮苗的最适培养基为1/2WPM+0.5mg·L-1IBA+0.1mg·L-1NAA.     

三倍体毛白杨组培快繁技术

试验研究了不同基本培养基(1/2MS和WPM)和不同浓度的NAA和BA组合对三倍体毛白杨离体快繁的影响.结果表明:1/2MS+BA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1为适宜的增殖培养基,芽分化率达86.4%,平均芽数达4.4;1/2MS+NAA0.05mg·L-1为适宜的壮苗生根培养基,生根率达94.1%,平均根数为3.1,平均根长为3.5cm,试管苗平均高度达7.4cm;在移栽过程中发现,带愈伤组织的试管苗成活率高于不带愈伤组织的试管苗,达97.0%.     

条叶百合和垂花百合高效快繁体系的建立

以条叶百合和垂花百合的鳞片为外植体,应用均匀设计法对各步骤各主要因子和水平的作用进行了试验探讨.结果表明:条叶百合鳞茎诱导最适宜的培养基为N6+0.05 mg.L-1IAA+0.01 mg.L-1NAA+0.50 mg.L-1KT,诱导率为95.5%,鳞茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+0.01 mg.L-1IAA,萌发率为94%;垂花百合鳞茎诱导最适宜的培养基为N6+0.05 mg.L-1IAA+0.50 mg.L-1KT,诱导率为95%,鳞茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+0.01 mg.L-1IAA+0.001 mg.L-1NAA,萌发率为92.5%.以鳞茎的切片为材料进行快繁的结果表明,在35-40 d的一个培养周期内,增殖系数达10以上.对不同阶段培养材料的形态及超微结构的观察证明了2种百合的鳞茎发生发育过程.     

亚洲百合试管鳞茎诱导

为进一步优化百合离体培养条件,以亚洲百合鳞片为外植体,研究不同鳞片部位、不同激素配比对亚洲百合试管鳞茎诱导的影响。结果表明:鳞茎内层下部分化率最高,鳞茎中层下部鳞片污染率低,是亚洲百合适宜选取的外植体材料。6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)鳞片分化率最高为75.00%,鳞片分化数最高的激素配比为6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化数为3.05。在6-BA和NAA配合使用的情况下,6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)增殖效果最好,增殖数为13.4个。百合试管鳞茎膨大的理想激素浓度配比为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+PP_(333)4.0mg·L~(-1)。     

大花蕙兰茎尖组织培养与植株再生研究

文章以大花蕙兰为材料,研究其茎尖组织培养再生体系。结果表明,最佳原球茎诱导培养基为VW+0.8mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖+0.05g·L-1AC,pH5.2。原球茎体分化丛生芽经壮苗生根后可进行移栽,最佳移栽基质为树皮块和水苔藓。     

圆齿野鸦椿种子外植体的快繁体系

以圆齿野鸦椿的成熟种子为外植体,研究组培繁殖育苗技术,以筛选最适的培养基配方.结果表明:(1)激素种类和含量对种子无菌株系建立的影响不同,BA含量为0.5-2.5 mg.L-1时,种子的成活率随BA含量的升高而下降,而NAA对其影响不大,种子无菌株系建立的最佳培养基为MS+0.5 mg.L-1BA+0.3 mg.L-1NAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖;(2)在细胞分裂素含量相同的情况下,芽的增殖系数随着生长素含量的增加呈先增大后减小的趋势,在MS+1.0 mg.L-1BA+0.5 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-1IAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖培育基上,发芽率达50%,增殖系数为3.70,芽饱满健壮;(3)细胞分裂素和生长素适当的配比是芽增殖的关键,最佳培养基为MS+2.0 mg.L-1BA+0.3 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-1IAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖,增殖倍数达5.0;(4)一定含量的NAA有利于诱导长根,而IBA则不同,培养基中NAA的含量为0.1 mg.L-1,IBA的含量为0.5 mg.L-1时,生根率达95%,根长为3.51 cm.     

铁皮石斛茎段快繁技术研究

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)带节茎段为外植体,比较了不同消毒方法、培养基、激素、天然有机添加物对丛生芽诱导、增殖和生根的影响,建立了铁皮石斛茎段无性快繁体系。结果表明:茎段外植体最佳消毒方法为 75% C2H6O 30 s+0.1% HgCl28min,污染率为 24.45%,发芽率为 62.22%;诱导腋芽的最佳激素组合为 2.0 mg·L-16-BA+1.0 mg·L-1NAA,腋芽诱导系数为 1.65;最适合铁皮石斛丛生芽增殖的培养基为 Hyponex2+1.5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 NAA+20%香蕉泥,增殖系数为 5.46;最佳生根激素组合为 1.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-1IBA,生根率为 95%。     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

籼稻品种93-11遗传转化中抗生素适宜剂量的筛选

为优化农杆菌介导转化体系,研究了两种常用抑菌剂头孢霉素(cef)和羧苄青霉素(cb)的抑菌效果和对籼稻品种93-11成熟胚培养的影响,并进一步研究选择剂潮霉素(hyg)对愈伤诱导、分化和种子萌发生根的影响,确定其作为选择剂的有效浓度.对cb和cef共设置12种质量浓度处理,各处理都能完全抑制农杆菌的生长,同时对愈伤的诱导和生长没有不良影响,但是有些处理使愈伤的分化率下降.150、250 mg.L-1cb的单独作用,400、500 mg.L-1cef的单独作用,以及cb为100mg.L-1时,300、400、500 mg.L-1cef的3种互作处理都不影响愈伤的分化率;但cef高达600 mg.L-1时明显降低愈伤的分化率,达极显著水平,使分化率降到7%;cb为50 mg.L-1时,350、450、550 mg.L-1cef的3种互作处理都极显著地降低愈伤的分化率,表明高浓度的cef以及添加小量cb的处理与cef之间的互作对分化率的影响十分显著.两种抑菌剂单独使用(400-500 mg.L-1cef,150-250 mg.L-1cb)即有效抑制转化和培养过程中农杆菌的繁殖,同时不影响愈伤的生长和分化.对hyg的研究表明,愈伤诱导和分化对hyg最为敏感,5 mg.L-1的剂量足以使出愈率为0,使愈伤的分化率为0;hyg对愈伤的致死剂量为40 mg.L-1;hyg对种子萌发生根的致死剂量为25 mg.L-1.因此,在愈伤分化阶段不宜加入选择剂;在抗性愈伤组织筛选阶段加入hyg的适宜质量浓度要大于40 mg.L-1;利用愈伤诱导和种子萌发生根对hyg的敏感性,可用于转基因种子的筛选,筛选质量浓度分别要大于5和25 mg.L-1.     

费菜无性系建立的研究

对费菜的嫩茎进行了无性系建立和快速繁殖的研究。结果表明:MS+BA0.5 mg·L-1+2,4-D1.2 mg·L-1是诱导嫩茎形成愈伤组织的理想培养基;1/2 MS+NH4H2PO450 mg·L-1+AgNO31.0 mg·L-1+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2 MS+NH4H2PO450 mg.L-1+AgNO31.0 mg.L-1+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+GA31.0 mg·L-1是费菜不定芽继代分化培养的理想培养基;以1/2 MS+NAA0.1 mg·L-1+IAA0.3 mg·L-1为生根培养基,变温、自然光是费菜试管苗生根培养的理想条件;试管苗扦插成活率为94.5%,移植成活的试管苗株型大而整齐、根系发达,当年可正常开花结实。     

罗汉松和五针松体外花粉萌发及花粉管生长研究

研究了温度、矿质元素和植物生长调节剂对罗汉松和五针松的花粉萌发和花粉管伸长的影响。结果表明:对罗汉松来说,其花粉的萌发和生长最适温度是30℃,最适矿质元素浓度分别是Mn 5 mg.L-1、Ca 20 mg.L-1、B 15mg.L-1、Zn 10 mg.L-1、Mo 1 mg.L-1,最适植物生长调节剂浓度分别是GA36 mg.L-1、2,4-D6 mg.L-1;对于五针松来说,其花粉萌发和生长最适温度是25℃,最适矿质元素浓度度分别是Mn 15 mg.L-1、Ca 15 mg.L-1、B15mg.L-1、Zn 10 mg.L-1、Mo 1 mg.L-1;最适的植物生长调节剂浓度分别是GA312 mg.L-1、2,4-D 6 mg.L-1。     

微毛樱离体快繁初步研究

以微毛樱茎段为外植体,探讨了不同生长调节物质对其不定芽诱导、增殖和生根的影响.结果表明,MS+1.0 mg·L-1 6-BA +0.05 mg·L-1 NAA为不定芽诱导的最适培养基,诱导率达87.5％;单芽在MS+ 0.5 mg·L -1 6-BA+0.05mg·L-1 NAA培养基中增殖系数为2.5,丛芽在MS +...