大鼠实验性脾虚证动物模型糖原和琥珀酸脱氢酶的组织化学研究

为了研究脾虚证时组织化学的变化及四君子汤对其的影响,选用Wistar大鼠,以利血平复制脾虚证动物模型,实验设正常对照组、脾虚组、脾虚治疗组,每组15只,于第7d、第14d分别扑杀各组动物,取肝脏、十二指肠、胃和肌肉组织,分别应用PAS法和Lojda法染色,组织学半定量法观察糖原和琥珀酸脱氢酶的变化。实验结果表明:第7d时,脾虚组和脾虚治疗组肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著低于对照组(P<0.01),各组织中琥珀酸脱氢酶含量则显著高于对照组(P<0.01);第14d时,脾虚组糖原含量反而显著高于对照组和脾虚治疗组(P<0.05～0.01),琥珀酸脱氢酶含量仍明显高于对照组和脾虚治疗组(P<0.050.01)。说明脾虚证的病理变化过程与机体糖原和琥珀酸脱氢酶等的组织化学变化有一定的联系,健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠的组织学变化有较好的调节作用。     

实验性脾虚证大鼠肝脏和肌肉组织中糖原变化的组织学观察

将45只大白鼠随机分成对照组、脾虚模型组及治疗组,每组15只。以利血平(1mg/kg·d)复制大白鼠脾虚证模型,四君子汤辅助治疗,在实验进行至第7天和第14天分别捕杀各组大白鼠,取肝脏、肌肉组织,用组织化学方法测定在不同组间和不同实验阶段其中糖原的变化。结果,在第7天时,脾虚组和治疗组糖原含量明显低于正常对照组,第14天时,与正常对照组相比较,脾虚组和治疗组糖原含量显著升高,且脾虚组糖原含量较其它两组高,提示肝脏和肌肉组织中糖原的变化可能是脾虚证发生发展的重要指标。     

实验性脾虚证大鼠免疫细胞因子变化及四君子汤对其影响

本文分别通过大鼠肌肉注射利血平和口服小承气汤两种方法复制脾虚证动物模型,比较研究了脾虚证大鼠细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)的含量变化,并用四君子汤治疗以反证.结果表明,不论利血平法复制脾虚证动物模型,还是小承气汤复制脾虚证动物模型,均表现为外周血IL-2、IL-6和TNF含量明显低于正常对照组与四君子汤治疗组(P＜0.01),对照组与治疗组之间除利血平所致脾虚证动物模型用四君子汤治疗后TNF含量明显高于对照组(P＜0.05)以外,以上其它指标均无明显差异(P＞0.05).说明脾虚大鼠产生IL-2、IL-6和TNF等细胞因子能力下降,使免疫功能处于低下状态,四君子汤治疗能够提高脾虚证大鼠产生细胞因子的能力,从而达到健脾益气调整机体的免疫功能.     

实验性脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其的调整作用

分别用小承气汤和利血平复制大鼠脾虚证模型，通过检测血清和心、肝、脾、肾等组织中抗氧化酶SOD和GSHP－Px的活性及脂质过氧化反应终产物MDA含量，研究脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其影响。结果表明：两种方法复制脾虚证模型与对照组比较均表现为SOD活性显著升高（P＜0．05），GSH－Px活性显著降低（P＜0．05）；四君子汤反证治疗组与脾虚证组比较表现为SOD活性显著下降（P＜0．05），GSH－Px活性显著升高（P＜0．05），MDA含量显著降低（P＜0．05），与正常对照组接近。表明大鼠虚证动物模型与体内自由基代谢紊乱，脂质过氧化作用增强存在一定关系，健脾益气方药四君子汤能够提高体内抗氧化酶活性，拮抗自由基对生物膜的过氧化损伤，具有抗脂质过氧化损伤的作用。     

四君子汤对实验性脾虚证模型大鼠血浆内几种神经肽含量的影响

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中部分神经肽的变化规律和健脾益气方剂四君子汤对神经肽的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平和苦寒中药方剂小承气汤两种方法复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法检测了血浆β－内啡肽（β－endorphin,β-EF)、降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP)和神经肽Y（Neuropeptide Y,NPY)的含量变化。结果表明：两种方法复制的大鼠脾虚证模型均表现为血浆β－EP、CGRP比对照组显著升高（P＜0.01)，NPY比对照组显著降低（P＜0.01)，以上变化经四君子汤治疗后都有不同程度的好转，与模型组比较差异极显著（P＜0.01)，接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β－EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，而健脾益气方剂四君子汤对脾虚让模型大鼠血浆内神经肽含量有较好的调节作用，推测这也许是该方能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

银杏叶复方对实验性脾虚证模型小鼠消化酶活性和抗氧化性能的影响

采用利血平复制脾虚证小鼠模型,观察银杏叶复方对脾虚证小鼠消化酶活性和抗氧化性能的影响。结果表明:与脾虚模型组相比,银杏叶复方能显著提高脾虚证小鼠小肠淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性(P0.05)和血清丙二醛(MDA)含量(P0.01),显著提高脾虚证小鼠血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P0.05);银杏叶复方组肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)含量较脾虚模型组也显著提高(P0.05)。说明银杏叶复方对脾虚证小鼠的消化酶活性有保护作用,并通过降低血清中MDA含量,提高SOD和GSH-Px含量,达到清除自由基,维持膜功能稳定的作用。     

脾虚证模型大鼠血浆中β-EP、CGRP、NPY含量的变化

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中β-endorphin，β-EP）、降钙素基因相关肽（calctonin gene related peptide，CGRP）和神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）变化规律和健脾益气方剂四君子汤对其的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法捡测了血浆β-EP、CGRP和NPY的含量变化。结果显示．脾虚证模型大鼠血浆β-EP、CGRP比对照组显著升高（P〈0．01）．NPY比对照组显著降低（P〈0．01）．接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β-EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠血浆内β-EP、CGRP和NPY含量变化有较好的调节作用，推测这也许是四君子汤健脾益气能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

脾虚证模型家兔神经内分泌机能的变化及四君子汤对其调整作用

给家兔胃管投服苦寒中药大黄水煎液,复制出家兔脾虚证动物模型,研究了脾虚证模型家兔神经内分泌机能的变化和健脾益气四 君子汤对其的调 整作用。结果表 明,脾 虚证模型家兔血 浆胃泌素、ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和ｃ Ａ Ｍ Ｐ／ｃ Ｇ Ｍ Ｐ 较试验前和对照组明显下降 （ Ｐ ＜ ００５ 或 Ｐ ＜ ００１）, 血浆胰高血糖素和血清胆碱酯酶活性较对照组和试验前极显著升高 （ Ｐ ＜ ００１）。以上各指标在经四君子汤治疗后均恢复至试验前和对照组水平,与模型期比较变化明显 （ Ｐ ＜ ００５ 或 Ｐ ＜ ００１）。由此说明,脾虚证时神经内分泌机能发生了改变,表现为交感神经机能降低和副交感神经机能相对亢进,以及胃肠道激素如胃泌素和胰高血糖素的分泌发生变化,四君子汤对其有良好的调整作用或拮抗作用。     

脾虚仔猪口服左旋氧氟沙星的"辨证药动学"研究

15头健康仔猪，分3组，每组5头：即健康组、脾虚组和四君子汤反证组。按20mg／kg的剂量内服进行左旋氧氟沙星的辨证药动学研究。高效液相色谱法测定血浆中药物浓度，3p97药代动力学程序处理药时数据。健康组和脾虚组药动学数据符合一级吸收一室模型，四君子汤反证组药动学数据符合一级吸收二室模型。试验结果表明：仔猪脾虚状态下明显影响左旋氧氟沙星内服给药的药动学特征(PK)；四君子汤可使脾虚仔猪异常的左旋氧氟沙星的药动学特征得到恢复，为验证“辨证药动学”假说和完善中西兽医结合提供了进一步的科学依据。     

枳术丸水煎液对幼犬脾阳虚模型治疗作用研究

在观察枳术丸对脾阳虚幼犬模型的治疗作用基础上,比较3种不同剂量枳术丸水煎液的疗效,并研究其对幼犬胃酸分泌量和胃蛋白酶活性的影响。结果显示,枳术丸水煎液中剂量（含生药1.0g/mL）灌胃疗效最好,使幼犬采食量增加、体重恢复、血虚证指标改善最明显;其次为低剂量（含生药0.5g/mL）组;高剂量（含生药5.0g/mL）组和阳性对照组疗效最差;枳术丸水煎液中剂量提高幼犬胃酸分泌量和胃蛋白酶活性最明显。枳术丸水煎液对胃酸分泌量和胃蛋白酶活性的影响可能为其健脾作用机制。     

加减四君子汤对商品肉鸡免疫功能的研究

选用420只1日龄AA肉鸡,随机分成7个处理组,每组设3个重复,每个重复20只。试验鸡在新城疫La Sota系冻干苗免疫时分别应用加减四君子汤和四君子汤煎剂按0．25％、0．5％、0．75％3个添加量兑水自由饮用,连用4d。并于14日龄、28日龄、42日龄分别在鸡翅静脉采血,进行白细胞、淋巴细胞计数,α-醋酸萘酯酶染色（ANAE）和β-微量血凝抑制试验（ND-HI）检测各项免疫指标。结果表明：加减四君子汤以0．25％或四君子汤以0．5％浓度混饮,在14日龄、28日龄、42日龄均可极显著提高鸡的淋巴细胞数和血液中HI抗体水平（P〈0．01）;显著提高白细胞数和T淋巴细胞阳性率（P〈0．05）。且用药剂量加减四君子汤可以减半应用。证明中药古方加减应用能有效提高鸡的特异性免疫和非特异性免疫水平。     

加味四君子汤对脾虚小鼠免疫机能、抗应激和消化吸收的影响

为研究加味四君子汤的药效学,试验通过灌服大黄水煎液制备小鼠脾虚症模型,观察不同剂量加味四君子汤对脾虚小鼠一般体征、免疫机能、抗应激能力、胃肠运动和吸收功能的影响.结果表明,加味四君子汤中,高剂量组可改善脾虚小鼠的体征,显著增加小鼠体重和腹腔巨噬细胞吞噬率(P <0.05),在一定程度上提高小鼠体温;中剂量组可显著提高血清中IgM含量、脾脏指数和胸腺指数(P <0.05);不同剂量加味四君子汤均能显著提高腹腔巨噬细胞吞噬指数和延长小鼠游泳持续时间(P <0.05),改善常压耐缺氧能力,降低胃排空率,减缓小肠的推进,提高脾虚小鼠尿液D-木糖排泄量和血清淀粉酶活性.综上所述,不同剂量的加味四君子汤能改善小鼠脾虚症状,提高小鼠的免疫机能、抗应激和消化吸收能力.     

实验性脾虚证大鼠血浆胃泌素和胃动素含量变化及四君子汤对其调整作用

通过大鼠肌肉注射利血平的方法复制了脾虚证动物模型，并应用四君子汤治疗反证，研究了脾虚证大鼠血浆胃泌素（GAS）和胃动素（MOT）的含量变化。结果表明，脾虚证大鼠血浆GAS和MOT含量显著降低，与对照组和四君子汤治疗组比较差异极显著（P＜0．01），对照组与四君子汤治疗组之间GAS和MOT的变化无明显差异（P＜0．05）；脾虚时的消化吸收机能障碍和胃肠动力学的改变与GAS和MOT的分泌减少密切相关；四君子汤能够提高血浆GAS和MOT含量，有效地改善脾虚证的胃肠功能。     

四君子汤超微粉对脾虚小鼠总抗氧化能力和NO的影响

为测定四君子汤超微粉的作用效果,用利血平复制脾虚小鼠模型,比较分析了不同剂量水平的四君子汤超微粉混悬液和四君子汤传统水煎液对小鼠总抗氧化能力和一氧化氮(NO)的影响,以期为四君子汤超微粉的临床应用奠定基础。结果表明,在总抗氧化能力方面,2个剂量水平(0.15 mL,0.075 mL)超微粉混悬液的作用效果不及传统水煎液;在NO方面,2个剂量水平(0.15mL,0.075 mL)的超微粉混悬液,其作用效果明显优于传统水煎液。     

实验性脾虚大鼠小肠结构与免疫功能的变化

本试验采用利血平复制大鼠脾虚模型,观测和探讨其小肠结构与免疫功能变化。与对照组比较结果显示,脾虚组大鼠体重显著下降(P0.05),十二指肠、空肠和回肠的组织结构均有不同程度的损伤,绒毛长度与肠黏膜厚度均显著降低;黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量均显著增加;绒毛顶端与黏膜下层TLR2表达量均显著降低。表明,小肠黏膜结构损伤是脾虚动物体重下降的原因之一;局部过强的免疫反应是造成小肠黏膜结构损伤的主要机制,且此过程并非通过TLR2介导;小肠结构损伤及TLR2表达的显著下降均提示其抵御病原侵袭的功能下降。     

Kinetin inhibits apoptosis of aging spleen cells induced by D-galactose in rats

Kinetin (Kn) is a cytokinin growth factor that exerts several anti-aging and antioxidant effects on cells and organs. To investigate the mechanism underlying apoptotic events in aging cells induced by D-galactose (D-gal), we examined the effect of Kn delivered via nuchal subcutaneous injection on D-gal-induced aging and apoptosis in rats. Our results showed that interleukin (IL)-2 levels and mitochondrial membrane potential (ΔΨm) were decreased by Kn in aging rats while IL-6 production and apoptosis increased. In addition, the expression of anti-apoptotic Bcl-2 was low while that of Bax was high in the aging group. After treated with Kn, compared with aging group, there showed obvious difference in Kn group with elevated IL-2, proliferation index, Bcl-2, ΔΨm and decreased IL-6 and Bax in splenic lymphocyte. Based on these results, we concluded that Kn can effectively protect the rat spleen from aging, apoptosis, and atrophy.