分子标记在葡萄遗传育种研究中的应用

分子标记是随着分子生物学技术的发展出现的一类重要的遗传标记,近年来发展迅速。分子标记技术是研究葡萄起源和新品种选育的重要工具,目前已在葡萄遗传育种等方面的研究中得到广泛应用。该文综述了近年来分子标记在葡萄种质资源鉴定、分子遗传图谱构建以及分子标记辅助育种等方面的应用,评述了分子标记在葡萄遗传育种等方面的应用前景以及目前存在的问题,以期为优质葡萄种质资源的挖掘和分子标记辅助育种提供一定的理论依据。     

分子标记在山葡萄品种鉴定上的应用现状

分子标记已在山葡萄资源鉴定中得到较为广泛的应用。现以山葡萄资源收集、保存、鉴定和利用现状的基础上,归纳、分析了分子标记在山葡萄品种鉴定上的应用现状,重点阐述了DNA条形码的分析过程,并指出已有分子标记技术在品种鉴定中的优势与不足,认为山葡萄资源鉴定应侧重于功能型分子标记,因此,提出将DNA条形码分子技术应用到山葡萄品种鉴定的重要性。     

分子标记在桃上的应用

遗传标记有形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记等几种方法。分子标记是随着分子生物学的发展新近形成的遗传标记方法 ,能从生物体的遗传物质 (ＤＮＡ)去揭示生物体的遗传本质。有关分子标记应用的原理及其在果树上的应用已有文献综述[1～ 2 ] 。本文根据笔者对 2 0 3份桃类植物的分子标记研究和国内外有关桃分子标记方面的研究报道 ,对分子标记在桃上的应用作一简要介绍。1　分子标记技术在桃种质资源研究上的应用1 1　桃属种的系统发育和分类　笔者采用ＲＡＰＤ技术 ,用从 2 0 0多个随机引物筛选的 2 2个引物 ,对桃属主要种的ＤＮＡ进…     

与葡萄抗性性状相关联的分子标记研究进展

分子标记在果树上的研究应用已取得了很大的突破,在葡萄抗性性状上的研究也取得了不菲的成绩。本文就分子标记在葡萄抗黑痘病、霜霉病、白腐病、抗寒、无核等几个抗性性状上的研究进展进行了综述,以期为葡萄的遗传育种及高效栽培提供参考依据。     

利用RAPD 标记和种间杂交组合构建葡萄的分子标记连锁图谱

 利用随机扩增多态性DNA (RAPD) 在一个葡萄的种间杂交组合〔毛葡萄8324296 (Vitis quinquangularis) ×欧洲葡萄粉红玫瑰(V. vinifera) 〕的F1 群体中发展分子标记,共产生了89 个稳定的RAPD 标记,连同4 个形态标记(花型、霜霉病抗性、果皮颜色、果汁颜色) 构建了一个葡萄RAPD分子连锁图。该图覆盖基因组总长度为1 033 cM,标记间平均距离为17.8 cM, 为毛葡萄连锁图谱的构建提供了一个连锁框架。     

分子标记在葡萄品种鉴定和辅助筛选上的应用

本文综述了同工酶、RFLP、RAPD、STS、AFLP等分子标记技术在葡萄品种鉴定、标记辅助筛选上的应用，并讨论了标记技术在杂交亲本选择、遗传图谱构建和功能基因克隆等方面应用的前景。     

葡萄无核基因SCAR标记的序列构成与酶切分析

利用葡萄无核基因的特异探针１８ｂｐ,通过ＰＣＲ扩增获得了与葡萄无核基因相连锁的ＳＣＡＲ标记约５９０ｂｐ,采用自动荧光ＤＮＡ测序仪对该片段的核苷酸组成进行双向测序,来自无核白的无核基因特异标记由５６９对核苷酸组成。该标记可以作为合成探针和设计特异引物进行ＰＣＲ扩增的基础,用于检测葡萄育种材料和无核品种的无核性。     

山葡萄性别相关AFLP分子标记的筛选及SCAR标记的转化

 山葡萄是一种重要的抗寒、抗病葡萄种质资源。通过AFLP分子标记方法,应用64对引物组合EcoR I-NNN/Mse I-NNN对山葡萄雌花、雄花和完全花植株基因池进行筛选,引物E-AGC/M-CTG在雄花和完全花植株基因池DNA中扩增出一条分子量为283 bp的特异性条带;经组池个体和其它品系验证,该特异性条带能在雄株和完全植株中稳定出现。将该特异性条带回收、克隆、测序,设计SCAR标记引物,对已知性别的85份山葡萄种质进行盲测,准确率达到97.6％,表明标记转化成功。由于该SCAR标记在绝大多数山葡萄栽培品种和有育种价值的种质资源中得到验证,可利用该SCAR标记对山葡萄杂交后代在苗期进行性别鉴定,提高育种效率。     

天津利用分子标记优化葡萄纯度

由天津市林业果树研究所、中国农业大学和天津市汉沽区林业局联合承担的市农委和市科委的“天津市重大农业科技合作项目——利用分子标记技术提高茶淀玫瑰香葡萄优化纯度及标准化栽培技术”日前通过有关部门组织的专家鉴定。天津该项目经过科研人员历时5年的研究推广,不仅用DNA技术优化了葡萄的品质,研究出的无核剂,还将无籽茶淀玫瑰香葡萄变为现实,极大地提高了葡萄的附加值,为农民带来了极大的经济效益。天津完成的利用分子标记优化葡萄纯度技术今年将进入大面积推广阶段。天津利用分子标记优化葡萄纯度     

山葡萄性别相关AFLP标记筛选及SCAR标记转化

通过AFLP分子标记方法,应用64对引物组合EcoR Ⅰ-NNN/Mse Ⅰ-NNN对山葡萄雌花、雄花和两性花植株基因池进行筛选,引物E-AGC/M-CTG在雄花和两性花植株基因池DNA中扩增出一条分子量为283 bp的特异性条带;经组池个体和其它品系验证,该特异性条带能在雄株和完全植株中稳定出现.将该特异性条带回收、克隆、测序,设计SCAR标记引物,对已知性别的85份山葡萄种质进行盲测,准确率达到97.6%,表明标记转化成功.由于该SCAR标记在绝大多数山葡萄栽培品种和有育种价值的种质资源中得到验证,可利用该SCAR标记对山葡萄杂交后代在苗期进行性别鉴定,提高育种效率.     

SSR标记及其在葡萄上的应用

SSR(simple sequence repeat)作为第2代基于PCR的一种新型DNA分子遗传标记,数量丰富、多态性高、重复性好、分布于整个基因组、特异位点扩增、发生频率高、共显性遗传。对SSR引物开发,SSR标记在葡萄品种鉴别、系谱重建、遗传图谱构建、商业品种保护等方面的研究进展进行了综述,并指出了未来的研究方向。     

宁夏永宁葡萄育苗圃根结线虫鉴定

对宁夏永宁县葡萄育苗圃中15个葡萄品种的根结线虫进行形态学和分子生物学鉴定。结果表明:宁夏永宁县葡萄育苗圃根结线虫病危害严重,不同葡萄品种的苗木感病症状表现不同。根据根结线虫雌虫和2龄幼虫的形态特征及雌虫会阴花纹,初步鉴定出该地区葡萄根结线虫的种类是南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和花生根结线虫(M.arenaria)。利用根结线虫线粒体DNA(mtDNA)通用引物(C2F3/1108)及序列特异性扩增区(SCAR)特异性引物(MI-F/MI-R和Far F/Far R)对葡萄根结线虫的种类再次鉴定,鉴定结果与形态学鉴定结果一致。另外发现不同葡萄品种上根结线虫的种类与数量存在差异,南方根结线虫(M. incognita)占根结线虫群体的88.57%,为优势种群。     

中国野生葡萄副梢长度的RAPD标记

为培育短副梢葡萄品种,对中国野生葡萄副梢长度性状进行调查,以葡萄短梢×长梢的葡萄种间杂交组合(燕山-1×河岸葡萄)F183个单株为试材,采用BSA法和RAPD技术,通过369个随机引物的筛选,获得了1个与中国野生葡萄副梢长度基因连锁的RAPD标记OPB07-2000,并在中国野生葡萄17个种46个株系中得到验证。这就为葡萄短副梢分子辅助育种提供了科学依据,进而从根本上解决葡萄生产上夏季副梢生长过旺的问题。     

葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化

SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16(45)正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2+浓度.综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为:Mg2+2.0 mmol·L-1、dNTPs 0.3 ...     

不同酿酒葡萄品种白藜芦醇合酶基因的克隆和序列分析

以红葡萄品种“赤霞珠”、“品丽珠”、“黑比诺”和白葡萄品种“雷司令”为试材,采用改良CTAB法提取葡萄叶片组织中的DNA,并扩增得到4个酿酒葡萄品种的白藜芦醇合酶基因部分片段.结果表明:红葡萄品种“赤霞珠”、“品丽珠”、“黑比诺”的扩增产物均为1 419 bp,白葡萄品种“雷司令”扩增产物为1 417 bp.通过序列多重比较分析,所得到的4个白藜芦醇基因片段与Genbank中河岸葡萄(AF128861)的该基因序列同源性较高(90％以上),外显子区同源性高于内含子;红色葡萄姊妹品种之间、红色葡萄不同品种之间、红色葡萄与白色葡萄品种之间的序列同源性依次递减.     

葡萄种质资源的RAPD分析

以采自新疆维吾尔自治区葡萄瓜果开发研究中心的180份葡萄材料为试材,采用改良CTAB法提取葡萄DNA,进行了RAPD分析;同时从已发表文章中选出96个适合于葡萄RAPD分析所用随机引物进行引物筛选,旨在对供试葡萄品种进行亲缘关系的分析.结果表明:DNA产率和纯度都较好,产率绝大多数都在100 ng/μL以上,可以用于RAPD分析;筛选出的21个条带较多且清晰的引物,通过聚类分析,180份材料共分为7类.     

DNA分子标记技术在瓜类蔬菜遗传育种中的应用

介绍了瓜类蔬菜育种常用的几种DNA分子标记技术,对其在瓜类蔬菜遗传育种研究中的应用现状进行了概述,同时也对其应用前景进行了展望。     

避雨栽培技术对葡萄霜霉病的控效

云南省宾川县在2011年、2012年就避雨栽培技术对葡萄霜霉病的控制效果进行研究,得出避雨栽培技术对葡萄叶部霜霉病平均控制效果为91.51%,对葡萄果粒霜霉病控制效果为93.45%,控制效果均良好,并且对果粒霜霉病控制效果好于叶部霜霉病。葡萄避雨栽培技术不影响农事操作,造价低,具有广阔的推广应用前景。     

葡萄抗病分子育种研究进展

 近年来分子标记已广泛应用于葡萄辅助育种，大大缩短葡萄抗病育种周期。随着越来越多的抗病基因被逐渐鉴定分离，转基因定向抗病育种也取得初步成绩。本文中综述了葡萄抗病分子育种近年来的研究进展及所取得成果，对抗病分子育种中存在的问题进行了分析和讨论。