羊骨蛋白酶解物免疫活性及酶解条件的研究

【目的】利用羊骨中胶原蛋白以获得免疫调节活性肽。【方法】利用木瓜蛋白酶对羊骨蛋白进行酶解,采用四元二次通用旋转设计,考察酶用量（E/S）、水解温度（Temp）、水解时间（t）和底物浓度（S）对免疫活性的影响,并选出最佳的酶解条件。同时采用Folin-酚法测定了酶解产物中可溶性肽的含量,采用SAS软件分析可溶性肽含量与免疫活性之间的相关关系。经Design expert 7.1.2软件优选最佳酶解条件。【结果】得出木瓜蛋白酶的最佳水解条件为：酶用量（E/S）1 576 U•g-1,水解温度为（Temp）64.05℃,水解时间（t）7.22 h,底物浓度为（S）0.271 kg•L-1。可溶性肽含量与免疫活性之间的相关系数r=0.045相似文献   

胃蛋白酶制备鲤鱼鳞胶原肽及其特性研究

以鲤鱼鳞为原料,用胃蛋白酶制备胶原肽。以水解度为指标,采用正交试验的方法对酶解条件进行优化。对制备的胶原肽的抗氧化性、清除羟自由基能力以及清除DPPH的能力进行测定。结果表明：胃蛋白酶水解鲤鱼鱼鳞的最佳水解条件为：底物浓度为8％、酶的添加量为8％、水解温度为35℃、水解时间为48h、此时的水解度为47．06％,且具备以上特性。     

双酶水解鱼鳞蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化研究

本试验的原料为脱钙鱼鳞粉,以ACE抑制率为指标,用胃蛋白酶、胰蛋白酶先后水解并进行单因素和正交优化试验,确定制备ACE抑制肽的最佳条件。结果表明,胃蛋白酶水解脱钙鱼鳞粉的最佳酶解条件:当胃蛋白酶的添加量为6%,料液比1∶50(g/ml),水解时间2 h时,鱼鳞蛋白的ACE抑制率为84.89%;胰蛋白酶水解脱钙鱼鳞蛋白的最佳酶解条件:胰蛋白酶的添加量为6%,水解时间2 h,此时ACE抑制率为93.37%。     

响应曲面法优化卵白蛋白抗氧化肽制备工艺研究

为优化酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的工艺条件.以酶解物羟自由基(HO·)清除率为指标,在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,根据Box - Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,研究底物浓度,酶添加量和水解时间工艺的影响,对酶解条件进行优化研究.结果胃蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的最优条件为:底物浓度3.24%、胃蛋白酶添加量11 332.12U/g蛋白、水解时间7.8h.酶解液的羟自由基清除率为44.20%,与预测值的相对误差为4.088%,理论值与预测值基本一致,与模型预测具有较好的拟合性.结论建立的模型在实践中进行预测是可行的.     

胃蛋白酶水解乳清蛋白技术条件的优化

以浓缩乳清蛋白为原料,选择胃蛋白酶,采用均匀实验设计安排多因素多水平,寻求酶解乳清蛋白的最佳优化条件,利用DPS数据处理软件对试验结果进行回归分析,得到了具有拟合度较高的回归方程.确定胃蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳水解条件为:酶解温度40.5 ℃、pH 2.5、酶和底物比1/25、底物浓度5.25%、酶解时间187 min,水解度16.98%.     

胃蛋白酶水解松仁蛋白的研究

[目的]优化得到胃蛋白酶水解松仁蛋白的酶解工艺,并检验水解蛋白清除自由基的效果。[方法]选用胃蛋白酶水解松仁蛋白,并进行酶解工艺优化,同时检测了松仁蛋白胃蛋白酶水解物的还原能力和清除羟基自由基的效果。以可溶性蛋白质量浓度为响应值,进行了单因素及正交试验。[结果]确定了胃蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件:酶添加量7.5 U/g干蛋白质、水解温度50℃、水解时间3.75 h、pH 2.0,各因素对结果的影响程度大小依次为pH、水解时间、酶添加量、温度。抗氧化试验表明,松仁蛋白胃蛋白酶酶解物具有清除羟基自由基的能力和还原能力。[结论]研究可为松仁的精深开发利用提供参考依据。     

酶制剂处理羽毛粉效果的研究

为探索酶制剂处理水解羽毛粉提高其蛋白质利用率的效果,首先采用６个不同浓度的复合蛋白酶制剂对水解羽毛粉进行酶解。得出以１．２０ｇ／ｋｇ酶浓度酶解的羽毛粉,可溶性蛋白含量较高。然后采用Ｓｉｂｂａｌｄ鸡“ＴＭＥ”测定法,测定用１．２０ｇ／ｋｇ酶浓度酶解羽毛粉的氨基酸利用率,并以水解羽毛粉和鱼粉为对照。结果表明,酶解羽毛粉氨基酸利用率显著高于（Ｐ＜０．０５）水解羽毛粉,而与鱼粉无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

酶制剂处理羽毛粉效果的研究

为探索酶制剂处理水解羽毛粉提高其蛋白质利用率的效果,首先采用６个不同浓度的复合蛋白酶制对水解羽毛粉进行酶解。得出以１．２０ｇ／ｋｇ酶浓度酶解的羽毛粉,,可溶性蛋白含量较高。然后采用Ｓｉｂｂａｌｄ鸡“ＴＭＥ”测定法,测定用１．２０ｇ／ｋｇ酶浓度酶解羽毛粉的氨基酸利用率,并以水解羽毛粉和鱼粉为对照。结果表明,酶解羽毛粉氨基酸利用率显著高于水解羽毛粉,而与鱼粉无显著差异。     

响应面法优化王浆蛋白酶解工艺研究

采用响应面分析法,优化胃蛋白酶酶解王浆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)清除率为响应值,研究了酶与底物的比值([E]/[S])、底物浓度以及酶解时间对蜂王浆酶解物抗氧化的影响.结果表明,最终确定出制备抗氧化肽的最优酶解条件为,[E]/[S]2.24％、底物浓度1.61％、酶解时间3.7h,在该条件下制备的王浆蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为47.84％.     

胃蛋白酶水解草鱼鱼鳞制备胶原肽的工艺优化

以草鱼鱼鳞为材料,研究蛋白酶种类、酶解条件对鱼鳞酶水解的水解度、氮收率和凝胶强度的影响,并采用正交试验对鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化,以获得较高凝胶强度的鱼鳞胶原肽.结果表明:在胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶中,采用胃蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白时氮收率较高,且水解产物具有凝胶形成能力;酶解条件对鱼鳞胶原蛋白的水解度、氮收率和凝胶强度均有显著影响;胃蛋白酶在底物质量分数为5%、起始pH值为4.0、加酶量为140 U/g、水解温度为65℃条件下,水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的凝胶强度和氮收率都较好,其中水解度为1.46%、氮收率为64.38%、凝胶强度为2 051 g.     

来源于枯草芽孢杆菌的漆酶cotA基因克隆与表达及其酶学性质研究

漆酶作为一种含铜离子的多酚氧化酶,在环境保护、生物能源、食品工业和纸浆漂白等工业中有重要的应用价值。从枯草芽孢杆菌168菌株中克隆漆酶cotA基因,全长1 542 bp,编码513个氨基酸,外加一个终止密码子。将该基因在大肠杆菌Transetta（DE3）菌株中通过微好氧发酵法进行异源表达和纯化,获得的重组酶蛋白CotA的最适反应温度为60℃,最适pH为4.5。该酶在60℃具有较好的热稳定性,保温90 min后仍有71.70%的剩余酶活。最适反应条件下,重组酶对ABTS的Km为63.9±5 μmol/L,kcat为39.1±1/s,最大反应速率为0.005 μmol/L·min·mg,且在最适反应条件下,微好氧发酵法获得的重组酶蛋白CotA的比活（557.8 U/mg）是低温诱导法（0.2 U/mg）的2 655.4倍。因此,通过微好氧发酵法可以显著提高重组漆酶CotA的比活力。     

响应面法优化脱酚棉籽蛋白双酶水解的工艺条件

研究Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最佳条件。以水解度为评价指标,采用Plackett-Burman(PB)设计和Box-Behnken响应面分析法对影响双酶分步水解棉籽蛋白的9个工艺条件进行筛选优化。双酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最优操作条件为：先用Alcalase水解蛋白酶在底物浓度(w/v) 9.66%,温度60.5℃、pH 8.0、酶用量25000 U/g的条件下水解150 min,灭酶后再用Flavourzyme风味蛋白酶在温度50℃、pH 6.0、酶用量26576 U/g的条件下水解120 min。在此条件下水解液的水解度可达到42.73%。试验结果可为棉籽蛋白多肽的开发利用提供依据。     

改善大米蛋白溶解性的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大米蛋白的水解作用以改善大米蛋白的溶解性.[方法]通过单因素试验,研究pH、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大米蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大米蛋白的最佳水解条件.[结果]Alcalase蛋白酶水解大米蛋白的最佳水解条件是pH 8.0、温度55℃、酶浓度1 200 U/g、底物浓度4％、水解时间2h,此条件下大米蛋白的溶解度为71.25％.[结论]酶解后大米蛋白的溶解度显著提高.     

中性蛋白酶酶解绿豆蛋白制备寡肽的研究

[目的]利用中性蛋白酶将绿豆蛋白质水解成肽和氨基酸,通过优化酶解条件得到水解度较高的绿豆肽。[方法]选用中性蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解以制备寡肽。在单因素考察的基础上,采用四因素三水平的正交试验设计优化酶解条件。[结果]试验得出,最适的反应条件为温度50℃、pH值6.5、底物浓度7%、酶浓度6000 U/g、水解时间240 min。[结论]绿豆分离蛋白在此条件下酶解,水解度的平均值可达28.82%。     

混菌固态发酵玉米秸秆提高基质粗蛋白含量的优化培养及相关酶系活性的研究

[目的]研究平菇和酵母菌混菌固态发酵玉米秸秆提高基质粗蛋白含量的优化培养条件,并探讨基质粗蛋白含量与相关酶系活性的关系。[方法]以酵母种类(酿酒酵母、热带假丝酵母和产朊假丝酵母)、酵母接种量和酵母接种时间为因素设计正交试验,研究了平菇和酵母菌混菌发酵玉米秸秆提高基质粗蛋白含量的优化培养条件,同时研究了各培养条件组合下木质素酶系、滤纸酶和羧甲基纤维素酶的活性,探讨了基质粗蛋白含量与相关酶系活性的关系。[结果]正交试验结果表明在A3B2C1组合培养条件下发酵基质粗蛋白含量最高,达13.36%;在此发酵条件下,培养的第5～15天漆酶和锰过氧化物酶的活性也最高,而各组合培养条件下基质滤纸酶和羧甲纤维素酶的活性则无规律可循。[结论]混菌固态发酵玉米秸秆基质粗蛋白含量的优化培养条件为:在接种平菇的同时接种10%的产朊假丝酵母液体菌种。木质素酶系的活性与发酵基质的粗蛋白含量可能呈正相关关系。     

Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用及水解物的性质。[方法]通过单因素试验,研究pH值、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大豆分离蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0、温度60℃、酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,大豆分离蛋白水解度为46.13%。[结论]酶解后大豆分离蛋白的水解度达到了制备大豆多肽的要求。     

泥鳅蛋白抗氧化肽的Plastein反应修饰研究

采用中性蛋白酶水解泥鳅蛋白制备抗氧化肽,以DPPH自由基清除能力为指标,用木瓜白酶对泥鳅蛋白抗氧化肽进行Plastein反应修饰研究。通过单因素试验研究了外源氨基酸种类、pH值、时间、E/S、温度和外源氨基酸的添加量对泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰的影响,在此基础上采用响应面法对泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰工艺进行了优化。结果表明,泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰的最佳条件为:底物浓度40%、组氨酸添加量为0.5 mmol·g^-1、E/S为1 782.49 U·g^-1 、pH值9.0、温度35 ℃、时间3 h,此条件下制备的Plastein反应修饰产物的抗氧化活性是修饰前的1.99倍,其对DPPH自由基的清除率为(77.98±0.08)%。     

菜子冷榨饼蛋白质和油脂的水酶法提取工艺初探

比较了4种酶对提取脱皮菜子冷榨饼中的蛋白质与油脂的影响.结果表明,复合酶提取蛋白质与油脂的得率最高,蛋白酶次之,戊聚糖复合酶较差,且三者皆高于无酶水浸提,果胶酶作用不明显.同时探索了酶处理时加酶量、酶反应时间、液固比、物料粒径、反应搅拌速度等因素对蛋白和油脂提取率的影响.     

酶解制备鸭肉香精前体物的工艺优化

为获得制备鸭肉香精较优的反应基料,采用蛋白酶对鸭肉蛋白进行酶解.结果表明:复合风味蛋白酶和肉类水解专用酶对鸭肉蛋白的水解效果优于木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,前二者复配使用的效果优于单独使用;酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃,酶底物比(酶活性与底物蛋白质质量的比)1500 U/g,初始 pH 8.0,酶比(蛋白酶酶活性的比)为3∶1(复合风味蛋白酶与肉类水解专用酶的酶比);在该条件下水解3 h 得到的酶解液水解度约达36%;用水解度约36%的酶解液参与美拉德反应的产物风味较佳     

鲤鱼鱼鳞蛋白的酶解制备工艺及其抗氧化活性

[目的]确定鲤鱼鱼磷蛋白的酶解制备工艺,并分析所得的鱼磷抗氧化肽的抗氧化性能。[方法]以鲤鱼鱼鳞为原料,选用胰蛋白酶考察其加酶量、反应温度、酶解时间、pH、底物浓度等因素对鱼鳞蛋白水解程度的影响,用单因素及正交试验的方法优选出鱼鳞蛋白酶解的最佳条件并测定其抗氧化活性。[结果]试验得到鲤鱼鱼磷抗氧化肽酶法制备的最佳工艺条件为pH 8.4、酶解温度45℃、加酶量4000 U/g、酶解时间3 h、底物浓度15%,此条件下得到的鱼磷抗氧化肽水解度较佳(29.97%),抗氧化能力较好。[结论]胰蛋白酶有溶解鲤鱼鱼鳞蛋白的能力,并且酶解产物的抗氧化活性与水解度有关。