犬腺病毒Ⅱ型病毒株的致弱及狐狸脑炎弱毒苗的研究

 将犬腺病毒Ⅱ型（CAV-2）病毒株用PK#-15细胞继代53代后毒力减弱，然后用A#-72细胞继续继代20代。经对继代毒的毒力测定和抗原稳定性试验证明，53-73代毒对狐无致病性，而且毒力稳定。我们选用60-69代毒做制苗种毒，成功地研制出狐狸脑炎弱毒苗。试验表明，该苗具有使用安全、免疫原性好等优点。狐免疫接种10#+(4、5)TCID50/ml疫苗，保护率可达100%，该苗免疫21天后狐狸能耐受10#+2CAV-1强毒的攻击，免疫期为一年。现场应用26754头份均取得良好的免疫效果。     

狐源犬Ⅰ型腺病毒分离与鉴定

在研究山东地区狐狸传染性脑炎流行情况的过程中,从潍坊某养狐场送检的9份疑似狐狸传染性脑炎病死狐脏器中分离到一株病毒。对所分离到的病毒进行形态学观察、病毒核酸型鉴定、特异性试验、PCR检测及动物感染试验的系统鉴定,并通过耐热性试验,耐酸性试验,脂溶剂敏感试验,血凝实验对其主要生物学特性进行研究,试验结果显示该病毒能在DK细胞中生长,引起"葡萄串样"细胞病变效应(CPE),抗犬Ⅰ型腺病毒抗体能够特异性地抑制所分离病毒在DK细胞内的增殖。形态为20面体立体对称、直径约80nm的腺病毒样粒子,对5-IUDR敏感,对56℃、pH3.0的酸、氯仿有一定抵抗力,能凝集鸡、豚鼠和人O型红细胞,用E3区特异性引物能扩增出CAV-1特异性核酸片段,能感染狐狸引起狐狸传染性脑炎症状。结果表明所分离到的病毒为犬Ⅰ型腺病毒(Canine adenovirus type 1,CAV-1),将其命名为CAV-1-FOX/WF株。     

犬瘟热、细小病毒性肠炎、犬传染性肝炎(狐狸脑炎)三联弱毒疫苗的研究

犬瘟热、细小病毒性肠炎、腺病毒性犬肝炎(狐狸脑炎),是危害犬科及鼬科动物较严重的传染性疫病,幼兽的发病致死率可达100%.随着特种养殖业的发展,几种疫病的发生呈上升趋势,注射疫苗是有效防治的关键.     

Ⅰ型鸭肝炎病毒鸡胚致弱毒MY株的培育及实验研究

将I型鸭肝炎分离株XC-1适应鸡胚,培育成1株毒力弱而稳定、免疫原性良好的鸭肝炎鸡胚化MY弱毒株.该毒株毒力为1011.40ELD50/0.1mL,1013.62TCID50/0.1mL;对雏鸭无致病性;在雏鸭体内连续盲传5代未见毒力返强;1日龄雏鸭用8,000 ELD)50/0.1mL的MY株致弱毒腿部肌注0.2ml免疫后3d强毒原液0.5mL/只攻击,可产生2/5的保护,第6d-21d产生完全保护,免疫后第3d、5d、6d、7d、9d、14d、21d抗DHV I的中和抗体滴度分别为10-1.38、10-1.55、10-1.64、10-1.65、10-1.68、10-1.8、10-1.89,表明MY是1株理想的鸡胚弱毒疫苗后备株;通过MY株的鸡胚的繁殖规律观察,确定该病毒的最佳收毒时间为接胚后的72h～84h,为疫苗生产条件的建立提供了依据.     

Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗对比试验

为了解自主研发的Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗（简称：自Ⅰ型）免疫效果,将自Ⅰ型与目前使用的上海某公司生产的Ⅰ型鸭病毒性肝弱毒疫苗进行对比试验．分别对1日龄雏鸭进行免疫接种,通过动物攻毒保护试验结果评估疫苗免疫效果。结果显示．自Ⅰ型比对比品对早期野毒感染预防效果更好．     

鸡毒霉形体S6株的致弱研究

鸡毒霉形体（ＭＧ）中毒株Ｓ６在固体平板上的３次克隆后，在无细胞培养上基上传１００代以上进行致弱培养，用ＭＧＳ６Ｆ１０８株培养物在雏物和ＳＰＦ鸡胚上作６次回归感染，证明ＭＧＳ６Ｆ１０８不返强，通过气管环培养，纤毛运动损伤试验及对鸡点眼，滴鼻，工胸气囊注射不同代培养物（Ｆ１０８，Ｆ１４３，Ｆ１２１，Ｆ１５０，Ｆ１５３）检查气囊病变和病原体再分离，结果证明Ｆ１０８以上代次的菌株低毒，安全，且有较强的免疫     

鸭瘟弱毒疫苗诱导IgA、IgM和IgG产生规律的研究

【目的】探讨鸭瘟弱毒苗诱导鸭局部黏膜和系统免疫中抗体发生的规律。【方法】将DPV弱毒苗Cha株经皮下、口服和滴鼻途径免疫20日龄樱桃谷鸭后60 d内定时随机剖杀5只鸭,采集血清、气管和消化道（食道、十二指肠、空肠和直肠）分泌液,应用间接ELISA检测抗DPV的IgA、IgM和IgG抗体滴度（以lg表示）。【结果】所有免疫鸭检测样品中均可检测到DPV特异性IgG、IgM和IgA抗体。血清中抗体滴度由高到低均为IgG、IgM和IgA,其中IgM检出时间最早,IgG存留时间最长。皮下免疫DPV弱毒苗可更早诱导鸭血清中生成特异性IgG,且抗体滴度最高;气管和消化道分泌液中抗体滴度由高到低均为IgA、IgM和IgG,其中IgA和IgM检出时间最早,IgA存留时间最长。口服和滴鼻途径免疫鸭消化道和气管分泌液中IgA滴度较皮下免疫鸭高。【结论】不同途径免疫鸭瘟弱毒疫苗均可迅速诱导免疫鸭体液免疫介导的黏膜免疫和系统免疫。以DPV特异性IgA为主要抗体的黏膜免疫在预防DPV强毒早期对鸭消化道和呼吸道等局部黏膜的感染中具有十分重要的作用,使DPV弱毒疫苗快速产生免疫保护的机制从黏膜免疫的角度得到一定程度解释。     

猪瘟野毒与疫苗弱毒鉴别方法的研究进展

概述了当前鉴别猪瘟强弱毒的几种方法,即免疫学方法(胶体金免疫层析技术、单克隆抗体法和单抗-酶联免疫吸附试验)、核酸检测方法(RT-PCR技术、RT-PCR与其他方法的结合)和动物试验方法.同时提出了鉴别猪瘟强弱毒方法的发展方向.     

我国家禽耐热型弱毒活疫苗的研究进展

综述了近几年国内研究禽用耐热型新城疫冻干活疫苗 ,传染性法氏囊病冻干活疫苗 ,传染性支气管炎冻干活疫苗 ,鸡痘冻干活疫苗和鸡马立克氏病冻干活疫苗的概况 ,并对各种疫苗的质量标准 (参数 )进行了分析。     

淮北狐传染性脑炎混感大肠杆菌的试验研究

[目的]明确淮北狐急性、大量死亡的原因。[方法]结合病死淮北狐的流行病学材料和临床症状,对该狐进行了病理剖检、病毒检测、细菌分离及生化鉴定。[结果]初步判定导致该淮北狐急性、大量死亡的原因为狐狸传染性脑炎混合感染大肠杆菌。对有临床症状的病狐紧急注射康复狐狸的血清和丙种球蛋白,并全群使用经药敏试验筛选的敏感药物治疗大肠杆菌,10 d内基本上控制了疫情。[结论]广大狐狸养殖户应提高警惕,对幼狐进行传染性脑炎病毒的疫苗免疫。     

表达外源绿荧光蛋白的重组犬2型腺病毒的构建及其生物学特性分析

以pUC18载体为骨架质粒,犬2型腺病毒(canine adenovirus 2,CAV-2)Tomnto A26/61株为亲本毒株,以复制非必需区E3的侧翼序列为同源重组臂,对外源基因的插入靶点E3区进行了缺失,并在缺失位置插入hCMV IE启动子、多克隆位点,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)、SV40早期转录poly-A信号,构建了E3区缺失的转移栽体pUC-△E3-EGFP.该载体与CAV-2亲本毒株共转染MDCK细胞,二者发生同源重组,经蚀斑筛选获得了表达EGFP的重组病毒rCAV-2△E3-EGFP.经鉴定重组病毒保持了亲本毒株的生物学性状并能够稳定表达外源基因,动物试验证实E3区的缺失对病毒的致病力无明显影响,为进一步开展CAV-2活载体疫苗研制及相关基础研究提供了技术平台.     

小反刍兽疫弱毒疫苗区域免疫试验研究

为进一步做好免疫工作,掌握免疫基础数据,为主管部门决策提供科学依据,根据农牧厅兽医局安排,青海省动物疫病预防控制中心在德令哈市开展小反刍兽疫弱毒疫苗区域试验,掌握山羊和绵羊进行小反刍兽疫弱毒疫苗免疫后体液免疫抗体消长规律,评价疫苗的安全性和免疫效果。结果表明,疫苗具有良好的免疫效果和较长的免疫持续期,大规模使用对山羊和绵羊的安全性能良好。     

大剂量猪瘟弱毒疫苗对猪瘟的治疗试验

猪瘟是一种具有强烈传染性和接触性的传染病,是猪瘟病毒所诱发的,对于养猪业有着十分严重的危害.在对猪瘟病猪进行确诊后,抑制病情发展和治疗的手段通常是紧急接种免疫和消毒清栏等,而通过猪瘟疫苗来对猪瘟病例进行治疗的情况虽然有,但其应用并不广泛,实际效果褒贬不一.基于此,开展弱毒疫苗治疗猪瘟试验,探讨大剂量疫苗的治疗效果.     

大剂量猪瘟弱毒疫苗对猪瘟的治疗试验

在对猪瘟病猪进行确诊后,抑制病情发展和治疗的手段通常是紧急接种免疫和消毒清栏等,而通过猪瘟疫苗来对猪瘟病例进行治疗的情况虽然有,但其应用并不广泛,实际效果褒贬不一.基于此,开展弱毒疫苗治疗猪瘟试验,探讨大剂量疫苗的治疗效果.