用正交试验法优化香水百合试管鳞茎的诱导

通过正交试验研究了不同浓度(0～0.5 mg/L) NAA、不同浓度(0.5～2.0 mg/L) 6-BA、不同鳞片层次(外层、中层、内层)及不同鳞片部位(上部、中部、基部)对香水百合试管鳞茎诱导的影响,并优化了诱导试管鳞茎的组织培养条件。结果表明:各因素对诱导试管鳞茎的影响大小为NAA6-BA鳞片层次鳞片部位;试管鳞茎诱导的最佳组合条件是MS基本培养基+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA+中层鳞片+鳞片中部部位,在此条件下诱导香水百合试管鳞茎,诱导率达到100%,平均分化数达到4.89。     

亚洲百合试管鳞茎诱导

为进一步优化百合离体培养条件,以亚洲百合鳞片为外植体,研究不同鳞片部位、不同激素配比对亚洲百合试管鳞茎诱导的影响。结果表明:鳞茎内层下部分化率最高,鳞茎中层下部鳞片污染率低,是亚洲百合适宜选取的外植体材料。6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)鳞片分化率最高为75.00%,鳞片分化数最高的激素配比为6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化数为3.05。在6-BA和NAA配合使用的情况下,6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)增殖效果最好,增殖数为13.4个。百合试管鳞茎膨大的理想激素浓度配比为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+PP_(333)4.0mg·L~(-1)。     

香水百合组织培养和快速繁殖条件的优化

以香水百合无菌试管苗小鳞茎作为外植体,从外植物体创伤、基本培养基、植物生长调节剂的配比以及培养基的物理状态等几个方面研究了百合鳞茎增殖的最优条件,并对百合组培苗的生根条件进行了优化。结果表明,一定的外植体创伤处理、氮元素含量较高的基本培养基和合适的植物生长调节剂浓度组合有利于鳞茎的增殖,香水百合鳞茎最佳增殖培养基配方为N6+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA;在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基中,液体培养的鳞茎增殖倍数极显著高于固体培养;香水百合小苗的最佳生根培养基配方为1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA。     

饱和D-最优设计在龙牙百合小鳞茎诱导中的应用

为探讨龙牙百合小鳞茎诱导的最优培养基,以龙牙百合鳞茎上不同部位鳞片为外植体,以MS为基本培养基,采用饱和D-最优设计对不同激素水平(6-BA,NAA)培养基方案进行设计,应用统计分析软件进行分析寻优,并对寻优结果进行验证.结果表明,鳞茎中部和中部稍偏外部鳞片的下段是适宜小鳞茎诱导的外植体;6-BA对小鳞茎诱导的影响大于NAA,诱导小鳞茎数计算方程为y=159.73±2.447×8.28,小鳞茎数为139.44～180.02个;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L为鳞片诱导小鳞茎的最佳培养基,诱导的小鳞茎数为1 52.0个.     

激素对东方百合鳞片扦插繁殖的影响

通过激素(6-BA、NAA、IBA、GA3)的不同浓度处理技术的应用,得出诱导东方百合鳞茎、促进叶芽生长健壮的方法。结果表明,东方百合鳞茎的最佳诱导及增殖激素组合为6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L;扦插鳞片根的诱导最佳激素组合为6-BA 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;GA3促进东方百合幼芽及根生长的理想浓度为0.05 mg/L。     

淡黄花百合丛生小鳞茎的诱导及快速繁殖

分别以淡黄花百合的鳞片、叶片、叶柄为外植体,“一步法”获得丛生小鳞茎及其再生植株,建立了淡黄花百合的快速无性繁殖体系。结果表明:鳞片为最佳外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率最高达到95.0%,平均小鳞茎增殖系数最高可达8.6;叶片、叶柄最佳小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

毛百合鳞片组织培养再生体系的建立

以毛百合鳞片为外植体,比较了不同激素种类及浓度对鳞片小鳞茎等诱导的影响,旨在建立毛百合鳞片组织培养再生体系.结果表明:最佳不定芽诱导培养基为MS+ 0.5 mg/L NAA+ 0.5 mg/L 6-BA,诱导率达到86.7％,分化系数6.77;最佳增殖培养基为MS+ 0.1 mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA,增殖系数7.8;毛百合小鳞茎生根较容易,最佳生根培养基为1/2MS +0.3 mg/L NAA,生根率91.7％,平均生根数7.20.     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

丽江百合组织培养及再生体系建立

为我国特有易危种丽江百合(Lilium lijiangense)的种质资源保护、快速繁殖及园林应用奠定基础,以野生丽江百合鳞片为外植体,探究其最佳灭菌方法,鳞茎不同部位诱导不定芽的能力,以及不同植物生长调节剂对丽江百合愈伤组织及不定芽诱导、不定芽增殖、生根结鳞茎的影响。结果表明,丽江百合鳞片最佳灭菌方案为5%NaClO 8 min+75%乙醇30 s;鳞片分化能力为基部>中部>上部;愈伤组织和不定芽诱导最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根结鳞茎培养基为1/2MS+0.1 mg/LNAA+0.01 mg/L IBA。该研究成功建立了一套适宜丽江百合的组织培养和再生体系。     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

西伯利亚百合不同部位鳞片的快速繁育

为西伯利亚百合种质保存、工厂化育苗及遗传改良提供依据,以西伯利亚百合的外、中、内3层鳞片为外植体进行组织培养研究,建立了西伯利亚百合鳞片的快速繁殖体系.结果表明:中部鳞片的小磷茎诱导率最高,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率达85.7％;试管苗生根培养基以1/2 MS+...     

野百合鳞茎芽的诱导和增殖的初步研究

以野生百合的鳞茎为外植体,研究鳞茎的最佳消毒时间、诱导鳞茎芽的最佳部位、影响鳞茎芽诱导的最佳激素组合以及不同激素对鳞茎芽增殖的影响。结果表明:用75%酒精30 s+0.1%HgCl25 min消毒效果最好。鳞茎芽的诱导能力依次是:内层>中层>外层;基部>中部>上部。MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L对鳞茎芽的诱导比较好,MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L对鳞茎芽的增殖比较好。     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

LA百合品种Eyeliner组培繁殖技术研究

以LA系列百合品种Eyeliner的不同层次鳞片为外植体,研究不同生长调节剂种类和浓度配比对Eyeliner离体组织培养微繁效果的影响.试验结果表明:Eyeliner的各层鳞片诱导分化新芽的能力大小依次为外层>中层>内层;Eyeliner的鳞片最佳诱导分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L,最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,最佳生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L.     

香水百合鳞片组织培养研究

为了提高香水百合繁殖系数和速度,生产出优质脱毒苗,满足工厂化生产,选用香水百合鳞茎的鳞片作为外植体,对外植体的消毒时间、生长调节剂种类和浓度对鳞片诱导、增殖、生根及移栽基质的影响进行研究。结果表明:香水百合鳞片用75%酒精消毒30s,0.1%升汞消毒12min效果较好;鳞片最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均每鳞片分化芽数达6.52个;鳞片最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数达5.7,鳞片最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,生根率达到100%,平均根数5.6个,根长3.5cm,长势好。移栽基质以采用蛭石:草炭为=4:1和蛭石:蚯蚓粪=4:1作为移栽基质时成活率均最高,达到93.3%。     

秦岭野生宜昌百合的组织培养研究

为了有效地保存、扩繁秦岭野生宜昌百合资源,以秦岭野生宜昌百合为材料,研究了鳞片和叶片不同部位,以及不同激素配比对不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,鳞片诱导不定芽的适宜培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,鳞片分化不定芽的能力为基部>中部>上部,三者之间差异极显著;叶片诱导不定芽的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D,叶片不定芽的诱导率为基部高,中部和尖部低,且基部与中部和尖部差异极显著;不定芽增殖的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;适宜生根的培养基为1/2MS+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭(AC)。以上结果表明,鳞片和叶片分化不定芽存在明显的位置效应,6-BA和NAA配合对不定芽增殖有良好的效果,NAA和AC配合适宜生根。     

兰州百合快速繁殖研究

优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系.采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基,附加不同浓度NAA(0.2~1.0 mg/L)、6-BA(0.5~2.0 mg/L)、KT(0.1~1.0 mg/L)、IBA(0.2~1.0 mg/L)、IAA(0.2~1.0 mg/L),对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比.6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2~1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA组合平均小鳞茎最多,为5.9个.与0.5~1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/I组合相比,添加0.5~1.5 mg/L6-BA+0.5~1.0 mg/L KT或0.2NAA mg/L组合培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基从芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多.在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2~1.0 mg/LIAA或IBA培养基中,随着IAA或IBA浓度升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同.从根质量来看,MS培养基根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合.鳞茎诱导最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5~1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好.     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

洋水仙Arkle离体快速繁殖体系的建立

【目的】初步构建洋水仙的组培快繁体系,为洋水仙种球工厂化生产奠定基础。【方法】以洋水仙品种Arkle为试验材料,选用其叶片、花茎及鳞茎的不同部位作为外殖体,以MS、1/2MS和1/4MS为基本培养基,分别添加不同质量浓度的a-萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)和活性炭(AC),研究不同外植体以及不同培养基对小鳞茎诱导、增殖及生根的影响。【结果】以带鳞茎盘的双鳞片作外植体效果较好,鳞片部位以鳞茎外层鳞片的培养效果较好;较适宜的初代培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+IBA0.2mg/L;较适宜的增殖培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L,其诱导率可达668.00%;适宜小鳞茎的生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+1g/LAC,其生根率可达到80%。【结论】鳞片分化小鳞茎存在着部位效应;6-BA和NAA组合对小鳞茎的诱导和增殖有良好效果;1/2MS与一定浓度的NAA和AC组合有利于生根。     

荷兰百合索尔邦的离体组织培养

[目的]寻找荷兰百合索尔邦最佳离体培养途径,大幅度提高其繁殖速度。[方法]利用荷兰百合索尔邦的不同组织作外植体进行离体培养,进行不同分化培养基对不同外植体分化效果的影响,不同激素浓度对索尔邦百合鳞片诱导出芽效果的影响,不同部位的百合鳞片对诱导出芽效果的影响,不同激素浓度对百合丛生芽增殖的影响和生根与移栽等研究。[结果]结果表明:组培荷兰百合索尔邦以鳞茎为最佳外植体,以MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 1.0mg/L的培养基诱导丛生芽效果最好,其诱导率为96.7%;鳞片诱导中鳞茎中部表现出较大的器官发生潜力;百合继代增殖培养以MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.4mg/L培养基为宜,组培苗在MS+IAA 0.5mg/L的培养基中较易生根,生根时间约25d。[结论]该研究为百合的辐射育种提供了技术支持。