蛹虫草浅层发酵产虫草素培养基优化

为了获得蛹虫草CY1909菌株的最佳培养条件,通过单因素试验和响应面试验设计,对该菌株进行液态发酵培养基优化.得到生产虫草素的最优培养基配方:酵母蛋白胨52.25 g/L、酵母粉8.43 g/L、硫酸亚铁0.06 g/L、腺嘌呤3 g/L+甘氨酸12 g/L.在此条件下进行验证,测得虫草素产量6.35 g/L,与预测的产量几乎一致.优化后配方为高产虫草素及其后期开发应用提供了坚实的基础.     

蛹虫草浅层发酵产虫草素培养基优化

为了获得蛹虫草CY1909菌株的最佳培养条件,通过单因素试验和响应面试验设计,对该菌株进行液态发酵培养基优化.得到生产虫草素的最优培养基配方:酵母蛋白胨52.25 g/L、酵母粉8.43 g/L、硫酸亚铁0.06 g/L、腺嘌呤3 g/L+甘氨酸12 g/L.在此条件下进行验证,测得虫草素产量6.35 g/L,与预测的产量几乎一致.优化后配方为高产虫草素及其后期开发应用提供了坚实的基础.     

液体发酵条件对蛹虫草产虫草素的影响

采用摇瓶培养方法,研究不同发酵条件(培养温度、装液量、初始pH值)对蛹虫草产虫草素的影响。在单因素试验的基础上采用L_9(3~4)正交试验优化发酵培养条件,结果表明:优化后的发酵条件为:培养温度26℃,300 mL三角瓶装液量100 mL,培养液初始pH值6.5。     

北虫草液体发酵培养基优化研究

对北虫草菌的液体发酵培养基进行了优化研究,结果表明,以蔗糖2%、蛋白胨1%、KH2PO40.10%为主的发酵培养基,在25℃、转速150r/m in、接种量5%的条件下,摇床振荡培养4d,菌丝体产量较高。     

北虫草液体发酵培养基优化研究

对北虫草菌的液体发酵培养基进行了优化研究,结果表明,以蔗糖2%、蛋白胨1%、KH2PO40.10%为主的发酵培养基,在25℃、转速150r/m in、接种量5%的条件下,摇床振荡培养4d,菌丝体产量较高。     

北虫草液体发酵产多糖培养基优化研究

通过单因子试验和正交试验确定了以蔗糖3%、蛋白胨1%、KH2PO40.1%为主的发酵培养基,在培养条件为25℃,转速150 r/min,接种量5%,摇床振荡培养4d,发酵液多糖产量较高。     

不同添加物对蛹虫草液体发酵虫草素的影响

为探讨8种微量添加物(维生素B1、核黄素、烟酰胺、腺嘌呤、D-泛酸钙、叶酸、钴胺素以及甘氨酸与腺嘌呤混合物)对蛹虫草菌发酵液虫草素产量的影响,筛选提高虫草素产量的最佳方法,将不同质量浓度的微量添加物单独加入蛹虫草液体发酵培养基中,以HPLC法测定发酵液的虫草素产量。结果表明:甘氨酸和腺嘌呤的混合物、腺嘌呤、核黄素、D-泛酸钙均能显著促进虫草素的生物合成,适宜添加质量浓度为:甘氨酸14g/L和腺嘌呤2g/L的混合物、腺嘌呤2g/L、核黄素1g/L、D-泛酸钙2g/L;维生素B1和钴胺素均能促进虫草素的生物合成,适宜添加质量浓度均为2和2g/L;而烟酰胺和叶酸均抑制虫草素的生物合成。其中,添加甘氨酸14g/L和腺嘌呤2g/L的混合物对发酵液虫草素产量的提高作用最显著,比对照提高了103%。当甘氨酸与腺嘌呤的质量浓度比为7∶1时,两者通过协同互补过程促进虫草素合成的作用最为显著;此外,本研究认为甘氨酸和腺嘌呤分别由从头合成和补救合成途径共同促进了虫草素的生物合成。     

蛹虫草小麦培养基中虫草素提取工艺研究

通过对比提取溶剂、料液比、温度、pH值及时间对提取蛹虫草小麦培养基中虫草素的影响,以确定虫草素提取最佳工艺参数.结果表明:最佳提取参数为水提取、pH值5,料液比1:50、温度70℃、时间3h.该方法从蛹虫草小麦培养基中提取虫草素,提取率可达94.87％.     

虫草发酵培养基研究

采用摇瓶培养方法,以菌丝体干质量为指标,通过单因素和正交试验,对虫草液体发酵培养基组成进行研究。结果表明,虫草液体最优发酵培养基组成为:葡萄糖2.0%,蛋白胨4.0%,KH2PO4 0.20%,MgSO40.10%,在该条件下菌丝体干质量平均可达15.64 mg/mL。     

蛹虫草菌深层发酵培养基正交试验

通过选择碳、氮、无机盐的三因素三水平正交试验 ,对蛹虫草 2 0 0 1-A深层发酵培养基进行优化。经过对菌丝体干重的测量及分析得出最适培养基组成为玉米粉 2 %、蛹粉 0 5 %、Mg SO4 0 0 5 %。菌丝体干重可达 0 812g/ 5 0ml (4天 )。     

蛹虫草发酵条件的初步优化

采用单因素法,研究了蛹虫草发酵过程中培养温度、培养时间、种龄、接种量、培养基初始pH值等因素对蛹虫草发酵的影响,最后通过蛹虫草的菌丝收率,来确定最佳发酵条件。研究结果表明：培养基初始pH值为6．0,种龄为4d,培养温度为27℃,培养时间为55h,接种量为7．5％（v／v）,在该条件下所得蛹虫草菌丝收率最高,以此确定蛹虫草发酵的最佳条件。     

蛹虫草中虫草素测定方法的比较

采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定蛹虫草子实体中虫草素的含量。结果表明:这两种方法在测定蛹虫草子实体中虫草素的平均回收率分别为100.1%和100.2%,RSD分别为2.3%和1.2%。这两种方法均可作为蛹虫草子实体中虫草素含量的测定方法,但高效液相色谱法专属性强,灵敏度高,测定结果更为准确。     

蛹虫草产胞外多糖发酵培养研究

[目的]对蛹虫草产胞外多糖发酵培养进行研究。[方法]通过响应面方法分析蔗糖、蛋白胨和KH2PO43个主要因素对蛹虫草产胞外多糖得率的影响,以获得比较适宜的培养基组成。另外,对发酵培养的条件进行了研究。[结果]蛹虫草胞外多糖优化发酵培养基组成为：蔗糖2.00%,蛋白胨1.50%,KH2PO40.05%,酵母粉0.20%,硫酸镁0.01% 发酵培养的适宜条件为：pH值6.8,温度28℃。在上述条件下蛹虫草胞外多糖得率为19.4 g/L。[结论]得到蛹虫草产胞外多糖的优化工艺条件,为上罐提供理论依据。     

北冬虫夏草发酵液中虫草素和腺苷含量的HPLC分析

试用高效液相色谱法同时检测了5株北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素和腺苷的含量,并系统地研究了各种发酵条件对虫草素和腺苷含量的影响.结果表明,虫草素和腺苷在所设色谱条件下得到了很好的分离,二组分的线性关系良好,回收率满意,其中虫草素峰保留时间为11.443min,腺苷峰保留时间为9.054min;虫草素的回收率为103.22%,RSD=4.4%,腺苷的回收率为98.42%,RSD=3.2%;虫草素和腺苷的线性范围分别为0.49～98μg/mL,0.46～92μg/mL.5株待测菌株发酵液中的菌丝干重第5天都达到了最大值,其中Cordycepsmilitaris G5124菌株的虫草素含量第9天达最大值,腺苷含量第1天达最大值.试验结果还表明,不同菌株发酵液中的虫草素和腺苷含量具有明显差异,这可能与菌株本身的遗传特性有关.其中C.militaris G（04）5f菌株的虫草素含量最高,可用作发酵生产虫草素的高功能菌株,进一步试验表明,当起始pH值为9时该菌株的虫草素含量达到最高.     

人工蛹虫草固体培养基虫草素的分离纯化研究

以人工蛹虫草固体培养基为原料,首先热水浸提虫草素,然后设计单因素试验和正交试验,通过离子交换层析进行分离。结果表明:洗脱流速、料水比为主要影响因子。最优条件为:料水比1∶16,洗脱流速为30滴/min,离子柱pH 3.5,此时虫草素的得率为0.014 2%。     

北冬虫夏草中虫草素的微波辅助提取

利用微波辅助萃取法提取了北冬虫夏草中的虫草素,考查了水、甲醇、乙醇3种溶剂,固液比,萃取温度,萃取时间对虫草素提取率的影响。结果表明:最佳提取条件为,以水为提取溶剂,温度70℃,固液比1∶20,提取时间15min,微波功率400W,并采用HPLC测定了提取液中的虫草素质量分数。     

不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量分析

确定不出草的蛹虫草(Cordyceps militaris)固体培养基中虫草素含量,可为合理利用不出草的蛹虫草固体培养基提供理论依据。以虫草素含量为检测指标,利用优化后的虫草素超声提取条件以及高效液相色谱定量分析条件,分别对5个不同批次不出草蛹虫草固体培养基中的虫草含量进行了测定。结果表明:5个批次的不出草蛹虫草固体培养基中均含有一定数量的虫草素,虫草素含量为347.2~735.5μg/g,平均548.5μg/g。不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量较高,具有开发利用价值。本研究结果为今后从不出草的废弃固体培养基中提取虫草素提供了依据,有利于减少虫草资源的浪费。     

蛹虫草摇瓶菌种培养基的优化

[目的]优化蛹虫草摇瓶菌种培养基。[方法]以菌丝体干质量为指标,首先采用单因素试验筛选适于菌丝体生长的最佳碳氮源,再以正交试验优化碳源与氮源以及无机盐与VB1的最佳配比。[结果]蛹虫草优化的摇瓶培养基配方为红薯50 g/L、可溶性淀粉10 g/L、牛肉膏10 g/L、酵母膏10 g/L、KH2PO41.5 g/L、Mg SO4·7H2O 1.0 g/L、VB10.10 g/L,p H自然,利用该配方菌丝干质量可达36.33 g/L。[结论]优化的摇瓶培养基可为后续研究和生产提供基础数据。