咖啡因在小鼠中的抗凝血作用研究

研究了咖啡因灌胃对BALB/c小鼠尾出血时间(BT)、凝血时间(CT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)等的影响。结果表明:咖啡因显著地延长了小鼠的体内和体外凝血时间,但对APTT、PT、TT值,以及纤维蛋白原含量、PT活性和PT国际标准化比率均没有显著的影响。     

复合红花黄色素抗凝血作用研究

[目的]研究双亚酸、红花黄色素及其复合制剂的抗凝血作用.[方法]用双亚酸、红花黄色素及其复合制剂给小鼠灌胃20 d后,测定其对小鼠的凝血时间和出血时间的作用;其对小鼠凝血酶原时间(PT)、小鼠活化部分凝血激酶时间(APTT)的影响.[结果]双亚酸、红花黄色素及其复合制剂能显著延长小鼠的凝血时间和出血时间,能够显著延长小鼠的凝血酶原时间、小鼠活化部分凝血激酶时间.[结论]红花黄色素具有抗凝血的作用,红花黄色素和双亚酸复合制剂的抗凝血作用强于红花黄色素单一组分药物.     

增效抗凝血灭鼠剂对大鼠、小鼠CT和PT的影响及中毒鼠肝脏病理学观察

以SD大鼠和小鼠为实验动物,检测和比较了增效抗凝血火鼠剂对凝血时间(CT)和凝血酶原时间(PT)的影响.并观察增效抗凝血灭鼠剂中毒鼠的肝脏组织病理变化,结果表明,增效杀鼠醚能引起SD大鼠和小鼠的CT和PT显著延长,相对于杀鼠醚,相同浓度的增效杀鼠醚具有史强的抗凝血功能;中毒鼠肝脏病理学观察结果发现.增效火鼠剂引起更严重的肝组织损伤、坏死,进一步阻碍其凝血功能,其中增效杀鼠醚对SD大鼠的影响程度大于小鼠,说明增效杀鼠醚埘SD人鼠作川效果更明显.     

尿激酶原基因在小鼠体内的表达

将构建的２种重组表达质粒ｐＳＶ２－ｕＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｕｐＡ分别直接注入小鼠骨骼肌,观察了Ｓｃｕ－ＰＡ ｃＤＮＡ在小鼠体内的表达情况。体外凝血试验显示注射质粒ＤＮＡ后,第５ｄ凝血时间有所延长,第１５ｄ凝血时间延长幅度最大,较对照组平均延长６ｍｉｎ左右;第２０ｄ体内诱导产生ＤＩＣ,体外凝血时间试验组较对照组延长一倍,抗凝效果明显,２种表达质粒在体内的表达水平无明显差异。     

槲皮素单硫酸酯钠盐和柚皮素单硫酸酯钠盐对小鼠出血时间和凝血时间的影响

目的 了解槲皮素单硫酸酯钠盐(SQMS)和柚皮素单硫酸酯钠盐(SNMS)对小鼠出血时间(BT)和凝血时间(CT)的影响.方法80只昆明小鼠随机分成8组,即生理盐水组(阴性对照),低、中、高剂量SQMS和SNMS组,血栓通组(阳性对照),每组10只.BT及CT分别采用断尾法和玻片法观察.结果 SQMS和SNMS名-剂量组...     

基因打靶技术在小鼠中的研究及在畜牧中的作用

基因打靶是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或激活的技术。通常意义上的基因打靶主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到改变遗传信息的目的。近几年在大型家畜及小鼠上发展起来的基因打靶技术有借助Cre／LoxP系统建立的条件性基因敲除法、诱导性基因敲除法、基因捕获法。随着基因打靶技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因插入突变和RNAi,它们同样可以达到基因敲除的目的。将新发展的RNm与基因打靶的优势结合起来将是今后生物技术发展的趋势。     

高效液相色谱法测定茶叶中的咖啡因

[目的]建立HPLC法快速测定茶叶中的咖啡因。[方法]色谱柱Zorbax-C8（4.6 mm×250.0 mm,5.0μm）;流动相为0.04 mol/L柠檬酸水溶液∶N,N-二甲基甲酰胺（DMF）∶四氢呋喃（THF）=90∶16∶4;流速为1.00 ml/min;柱温60℃;检测波长280 nm;进样量为10μl。[结果]咖啡因在20~100μg/ml时,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,加标回收率为98.9%~102.3%,相对标准偏差RSD为0.23%。[结论]该方法简单、快速、准确,适用于茶叶和茶饮料中咖啡因含量的测定。     

绿茶中提取咖啡因的方法研究

[目的]对从绿茶中提取咖啡因的关键技术问题进行初步探讨。[方法]用水相结晶分离法纯化样品,用国标法测定供试品溶液中的咖啡因含量。采用正交实验方法得出提取咖啡因的最佳条件为：用100℃的水为提取剂,浸提5min,固液比为1：20,UV法测定。[结果]结果表明,水相结晶分离法纯化的产物的纯度达87．00％,收率为3．56％。采用该方法可将试验时间缩短到1．0～1．5h。咖啡因稳定的最大吸收波长为274mm,其吸光度的线性回归方程为：C=1．096×10^-4＋0．05A（r=0．9999）。影响咖啡因提取的因素为：温度〉固液比〉时间。经水相分离提纯的咖啡因纯度为87．00％。[结论]从绿茶中提取出的样品为咖啡因,且杂质含量较少。     

超高效液相色谱法快速测定食品中的咖啡因研究

采用超高效液相色谱测定食品中的咖啡因,采用ACQUITYUPLC BEHC18色谱柱分离,以甲醇-水溶液为流动相进行洗脱,流速为0.4mL/min,柱温30℃,检测波长为272nm。结果表明,咖啡因与其他杂质均能达到基线分离,咖啡因的浓度在2～200mg/L时与峰面积成良好的线性关系。回收率为95.0%～99.1%,精密度测试结果的RSD为1.02%。该方法简便、准确、快速、重现性好、回收率高,适用于食品中咖啡因的测定。     

绿茶中咖啡因含量测定研究

[目的]建立绿茶中咖啡因含量测定的方法。[方法]采用高效液相色谱法测定绿茶中咖啡因的含量,以C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水-冰醋酸-乙二胺四乙酸(15.0∶82.8∶2.0∶0.2)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长278 nm。[结果]绿茶中咖啡因在0.64～3.20μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.49%(RSD=1.12%)。[结论]该方法简便、准确、重现性好,可作为绿茶中咖啡因含量的测定方法。     

天然咖啡因与人工合成咖啡因的鉴别

[目的]通过研究咖啡因自身结构差异性,得到一种新的鉴别天然与人工合成咖啡因的方法.[方法]通过茶叶提取天然高纯度咖啡因,利用连续流同位素质谱法检测被测咖啡因样品元素的同位素比值,根据其差值来进行判定,鉴别出天然咖啡因与合成咖啡因.[结果]研究表明,利用连续流同位素质谱法,将实验室提取制备的天然牛磺酸与市场购买的人工合成牛磺酸进行元素的同位素比值测定,发现天然咖啡因的δ13C同位素比值为-25,δ15N同位素比值为-1.5;而人工合成咖啡因的δ13C同位素比值为-36,δ15N同位素比值为-10,其同位素比值存在明显的差异,根据同位素比值的差异性可以对天然与人工合成的咖啡因进行鉴别判定.[结论]天然咖啡因和合成咖啡因的δ13C、δ15N同位素比值存在明显的差异,可通过其差异性比值鉴别出天然与人工合成咖啡因.     

小鼠胚胎嵌合的研究

选用昆白.CI_(57)及B/L_(615)三个品系小鼠,对其8细胞期(8C),桑椹期(M)和囊胚期(B)的全胚和半胚(半)进行聚合,培养和移植试验。8细胞期及桑椹期胚胎的聚合发育率显著高于囊胚期(P<0.05),全胚聚合的发育率显著高于半胚(P<0.05)。将同品系和不同品系的8细胞期,桑椹期和囊胚期胚胎嵌合移植给27只受体,9只妊娠,妊娠率分别为17％(1/6),40％(6/15)及33％(2/6),平均为33％(9/27),共产仔35只,其中不同品系胚胎的嵌合胚移植,产仔15只,4只为皮毛嵌合体。     

咖啡因的抑菌试验

采用一系列真菌和细菌,试验了咖啡因的抑菌作用。结果表明,咖啡因对食品常见污染菌有明显的抑菌作用,且具有热稳定性强、抑菌浓度低及抑菌pH范围广的特点。     

黑曲霉发酵对咖啡碱代谢的影响

普洱茶固态发酵过程的实质是微生物代谢作用,而黑曲霉在代谢中为优势菌,对咖啡碱代谢产生巨大影响。以黑曲霉为单一菌种,分别接种到茶叶、茶汤和含咖啡碱的液态培养基,并测定不同发酵阶段嘌呤碱的含量。结果表明,黑曲霉对茶叶碱的影响大于可可碱,对可可碱的影响大于咖啡碱,在咖啡碱液态培养基发酵中,茶叶碱增加幅度最大,且与咖啡碱浓度存在正相关性。     

黑曲霉发酵对咖啡碱代谢的影响

普洱茶固态发酵过程的实质是微生物代谢作用,而黑曲霉在代谢中为优势菌,对咖啡碱代谢产生巨大影响。以黑曲霉为单一菌种,分别接种到茶叶、茶汤和含咖啡碱的液态培养基,并测定不同发酵阶段嘌呤碱的含量。结果表明,黑曲霉对茶叶碱的影响大于可可碱,对可可碱的影响大于咖啡碱,在咖啡碱液态培养基发酵中,茶叶碱增加幅度最大,且与咖啡碱浓度存在正相关性。     

2株芽胞杆菌饲喂小鼠的安全性研究

[目的]研究2株芽胞杆菌的安全性,为进一步开发益生菌添加剂奠定基础。[方法]以芽孢杆菌L2-19、Y25为材料,以健康小白鼠为试验动物,通过经口灌胃和腹腔注射2个途径对菌株进行安全性试验。[结果]全部小白鼠健康存活,体重明显增加,灌胃处理后对照(生理盐水)、L2-19和Y25试验组小白鼠的体重分别比处理前增加5.06、4.925、.04 g,注射处理后对照(生理盐水)、L2-19和Y25的体重分别比处理前增加5.38、4.964、.80 g。试验组小白鼠的脏器无明显异常,脏器系数与对照组无显著差异(P>0.05),未见任何毒性反应。[结论]芽孢杆菌L2-19、Y25对小白鼠安全无毒,且增加了小白鼠体重,有进一步研发成为益生菌添加剂的价值。