中草药浸出液体外杀灭刺激隐核虫的效果

刺激隐核虫是一种严重危害海水鱼类的寄生虫,研究了18种中草药浸出液在体外对激隐核虫幼虫和包囊的杀灭效果,结果表明:辣椒和槟榔的杀虫效果最好,辣椒和槟榔在浓度为1 g/L时杀死全部刺激隐核虫幼虫所用的时间分别为(5.3±0.6)min和(16.0±1.7)min;大蒜、生姜、蛇床子、百部、川楝子、苦参、乌梅、大黄、枳壳的杀虫效果较弱,在浓度为50g/L时才能够在30 min内杀死全部刺激隐核虫幼虫;而牵牛子、贯众、黄柏、茯苓、荆芥、熟地黄、鹤虱没有杀虫效果。     

浸浴硝唑尼特对刺激隐核虫的驱虫效果

[目的]明确浸浴硝唑尼特(NTZ)对刺激隐核虫的驱虫效果,为其在水产养殖中的推广应用提供参考依据.[方法]将NTZ溶于二甲亚砜(DMSO)制成溶液,探讨NTZ对刺激隐核虫感染幼虫和滋养体的驱虫效果,并分析药物浓度、日换水量、硫酸铜(CuSO4)和渗透剂对其驱除刺激隐核虫滋养体的影响.[结果]NTZ对刺激隐核虫感染幼虫的杀灭作用随药物浓度的升高而逐渐提高,至20.0 μg/L时刺激隐核虫感染幼虫的死亡率达97.33%.经1.0 g/m3 NTZ浸浴72 h后,患病大黄鱼的刺激隐核虫滋养体完全脱落;NTZ与CuSO4配伍能有效提高药物对刺激隐核虫滋养体的驱除效果,以NTZ 1.2 g/m3+CuSO4 0.5 g/m3浸浴72 h后患病大黄鱼体表和鳃部均无刺激隐核虫滋养体寄生,病鱼存活率达100.00%;渗透剂氮酮和换水方式与NTZ驱除刺激隐核虫滋养体的效果无相关性.[结论]NTZ浸浴鱼体能有效驱杀刺激隐核虫滋养体,尤其与CuSO4配伍可有效提高药物对刺激隐核虫滋养体的驱除效果,生产中建议使用剂量为NTZ 1.2 g/m3+CuSO4 0.5 g/m3.     

中草药对刺激隐核虫幼虫的杀灭效果

选择几种具有杀虫功效的中草药或中草药提取物开展对刺激隐核虫幼虫的防治效果试验,结果表明:苦参、鹤芽草、鸦胆子、荜澄茄、使君子、苦楝皮浓度25~800 mg/L作用4 h内均无杀虫效果。双氢青蒿素浓度200 mg/L、400 mg/L和800 mg/L 3个处理的杀虫效果相当,作用3 h内无杀虫效果,作用3 h以上死亡率超过50%。苦皮藤素浓度200 mg/L和400 mg/L 2个处理效果相当,作用10 min开始出现部分幼虫死亡,作用4 h的死亡率为100%;浓度800 mg/L作用10min开始出现部分幼虫死亡,作用2 h死亡率100%。贯众浓度40 mg/L以上的各处理均表现出一定的杀虫效果,作用10 min死亡率大于50%,作用2 h各处理死亡率均为100%,其中浓度200mg/L作用1 h的死亡率达100%,浓度400 mg/L和800 mg/L 2个处理作用10 min的死亡率达100%。说明:贯众杀虫效果最佳,其次为苦皮藤素,贯众和苦皮藤素具有针对性药用开发价值。     

过氧乙酸对小瓜虫幼虫和包囊的杀灭效果

采用过氧乙酸对4种主要养殖鱼类进行急性毒性试验,测试了过氧乙酸对小瓜虫幼虫和不同发育阶段包囊的杀灭效果。结果显示:过氧乙酸对斑点叉尾鲴、草鱼、奥尼罗非鱼,鲫鱼的安全浓度依次为1.73、3.00、3.57、5.20 mg/L。过氧乙酸在浓度为6.250 mg/L时,0.5 h即能杀死全部小瓜虫幼虫;在1.562 mg/L时,1 h即能杀死全部幼虫。过氧乙酸对不同发育阶段的包囊都具有一定的杀灭效果,当过氧乙酸的浓度为6.250、3.125、1.562 mg/L时,刚脱落的包囊的死亡率依次为75.63%、45.60%、25.60%,脱落2h的包囊的死亡率分别为64.23%、46.32%、20.20%,脱落10 h的包囊的死亡率分别为65.86%、35.07%、10.20%。因此,过氧乙酸在较低的浓度范围内对小瓜虫的幼虫和包囊具有一定的杀灭效果。     

八种渔药对半刺厚唇鱼小瓜虫病的治疗效果

为筛选治疗半刺厚唇鱼(Acrossocheilius hemispinus)小瓜虫病的有效药物,选用8种渔药,对人工感染小瓜虫(Ichthyopthirius multifillis)的半刺厚唇鱼进行治疗。结果表明,硫酸铜可以加速小瓜虫的分裂增殖;百草解毒剂(天然植物炭)对小瓜虫营养体无杀灭作用;单独使用甲醛溶液时对小瓜虫营养体有一定的杀灭作用,但治疗周期长,患病鱼成活率低;本稳精(干姜、花椒、杏叶)对小瓜虫营养体无杀灭作用,但可以提高患病鱼抵抗力,降低死亡率,宜与其他杀虫药物配合使用;当工业盐(NaCl)浓度在3 000～5 000 mg/L时,能有效去除患病鱼体表小瓜虫营养体,对患病鱼治愈率可达(86.7±9.4)%。小瓜绝杀(苦参碱、辣椒碱)使用前期能够加速小瓜虫的分裂增殖,但后期能有效杀灭小瓜虫幼虫,宜在患病鱼虫体数量不多时使用;鱼康乐(活性碳酸钙)治疗浓度为4～6 mg/L时,杀虫效果明显,患病鱼治愈率达(46.7±9.4)%～(60.0±0.0)%;百灵小瓜净(植物提取剂)治疗浓度为1.6～2.0 mg/L,杀虫效果明显,患病鱼治愈率达(80.0±0.0)%。     

氯虫酰胺对甜菜夜蛾神经元钠离子通道电流的影响

为了研究新型杀虫剂氯虫酰胺对甜菜夜蛾（Laphygma exigua）的杀虫机制,应用全细胞膜片钳技术记录了氯虫酰胺对急性分离的甜菜夜蛾幼虫中枢神经细胞电压门控钠离子通道的影响。结果显示,在电压钳模式下,0.1 g/L药物作用1 min、5 min、15 min后平均钠离子通道电流峰值分别是（-9.627±0.114）nA、（-11.668±0.131）nA、（-8.726±0.398）nA。在电流钳模式下,0.4 g/L药物作用1 min、3 min、5 min后动作电位峰值分别为（94.366±4.596）m V、（90.363±2.258） m V、（83.15±2.959）m V ,时程分别为（5.025±0.884）m s、（6.032±0.073） m s、（6.387±0.376） ms ,药物作用10 min后只能产生电紧张,无法发放动作电位。以上结果表明,氯虫酰胺对钠电流的作用明显具有时间依赖性,0.1g/L药物初始可增加钠离子通道电流峰值,但随用药时间延长效果减弱。高质量浓度氯虫酰胺可时间依赖性地降低动作电位峰值和延长时程,降低细胞膜兴奋性。甜菜夜蛾中枢神经细胞钠离子通道是氯虫酰胺药物的作用靶标之一。     

40 种中草药杀灭离体多子小瓜虫效果研究

研究了40种中草药不同浓度水提物对多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)的离体杀灭效果,结果表明:夏枯草、仙鹤草和三七等18种中草药在浓度为50g/L时才能在4h内杀灭多子小瓜虫滋养体;药物浓度为10g/L时,槐花、皂角刺和毛冬青等13种中草药可杀灭滋养体;药物浓度为1g/L时,紫荆和鹅不食草即可杀灭滋养体;药物浓度为0.1g/L时,只有生姜能杀灭多子小瓜虫滋养体。生姜水提物对滋养体和幼虫的最低致死浓度分别为100、50mg/L,半数有效浓度分别为30.3、15.7mg/L,100mg/L可完全抑制包囊孵化。由此可见生姜是一种可有效杀灭多子小瓜虫的中草药。     

链霉菌-XY52代谢产物对小瓜虫的体外杀灭活性研究

[目的]研究链霉菌发酵代谢产物对小瓜虫幼虫和包囊的杀灭活性.[方法]通过不同极性溶剂回流提取链霉菌发酵液,制备粗提物,进行杀灭小瓜虫幼虫和包囊的药效活性试验,并对活性部位进行安全性评价.[结果]链霉菌发酵液的乙酸乙酯和正丁醇提取物体外杀幼虫效果明显高于其他组别,其对小瓜虫幼虫的半数致死浓度分别为48.2和15.5 mg/L,正丁醇提取物浓度为30.0 mg/L时对小瓜虫包囊杀灭率为100％.急性毒性试验结果表明,正丁醇提取物对草鱼的48h半致死浓度为(LC50)为195.0 mg/L,其安全浓度为48.7 mg/L.[结论]链霉菌-XY52代谢产物有望开发为一种比较安全的杀虫候选药物.     

香茅精油对番石榴实蝇成虫和幼虫的抑制作用

研究香茅(Cymbopogon nardus)精油对番石榴实蝇(Bactrocera correcta Bezzi)成虫的产卵驱避作用和对幼虫生长发育的抑制作用。结果表明,香茅精油对番石榴实蝇产卵具有很好的驱避作用,不同浓度香茅精油处理番石榴上的产卵均显著低于对照。在24 h下1 000μg/m L浓度时番石榴实蝇雌虫的选择产卵驱避率为(5.26±2.38)%,10 000μg/m L浓度时雌虫的选择产卵驱避率为(85.73±10.45)%。经24 h后,1 000μg/m L浓度时番石榴实蝇的非选择产卵驱避率为(49.88±3.57)%,10 000μg/m L浓度时的非选择产卵驱避率为(90.29±9.54)%。香茅精油对番石榴实蝇2龄幼虫在浓度为1 000μg/m L时24 h后拒食率为(37.82±5.27)%,48 h后拒食率为(53.15±4.76)%;浓度为10 000μg/m L时24 h后拒食率为(86.25±12.79)%,48 h后拒食率为(91.05±9.51)%。香茅精油对番石榴实蝇2龄幼虫化蛹的影响为在浓度1 000μg/m L时,12 h番石榴实蝇幼虫的化蛹率为(79.44±13.58)%,24 h的化蛹率为(70.52±8.23)%,48 h的化蛹率为(42.22±7.93)%,72 h的化蛹率为(27.67±5.93)%;浓度为10 000μg/m L时,12 h番石榴实蝇幼虫的化蛹率为(6.77±2.49)%,24 h的化蛹率为(6.53±1.23)%,48 h的化蛹率为(4.33±1.85)%,72 h的化蛹率为0。     

刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备与特性分析

为获得刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体并初步分析单抗特性,提取刺激隐核虫幼虫膜蛋白,免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合,以间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞。通过ELISA方法检测单克隆抗体的亚类及效价;通过SDS-PAGE和western blot分析单抗特异性结合的蛋白,并以串联质谱方法对所识别条带进行鉴定;采用免疫荧光法分析单抗的抗原结合位点和特异性。结果得到3株能稳定分泌刺激隐核虫幼虫膜蛋白抗体的细胞株(5D11AG5、5H9BG3、6E11CE7)。这3株细胞株产生的抗体亚型均为IgM,ELISA效价分别为1∶3200、1∶25600、1∶51200。单抗5D11AG5和单抗5H9BG3株能够识别~35kDa的刺激隐核虫幼虫膜蛋白线性抗原表位,单抗5D11AG5所识别的蛋白与数据库中刺激隐核虫表面抗原蛋白、嗜热四膜虫微管蛋白(tubulin)的肽段具有较高覆盖率。免疫荧光结果显示单抗5D11AG5和单抗5H9DG3识别部位主要在虫体表面近胞口的前端,而单抗6E11CE7识别虫体表面外膜。刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备,为刺激隐核虫功能性蛋白的筛选、纯化和功能分析提供了条件。