高产活性成分蛹虫草菌株的筛选

对7株不同的蛹虫草菌株进行比较分析,以期筛选得到高产活性成分的优质蛹虫草菌株。通过对7株蛹虫草菌株子实体的形态、产量、子实体中活性成分(虫草素、虫草酸、腺苷、虫草粗多糖)的含量等进行对比研究。结果表明,菌株H05综合品质最好,子实体产量可达20.4g·瓶-1,虫草素含量为0.523%、腺苷含量为0.556%、虫草酸含量为4.97%,虫草粗多糖含量为9.89%。此菌株子实体产量高,活性成分含量也较高,经济价值高,值得开发利用。     

蛹虫草孢子粉活性成分分析

蛹虫草是虫草属的模式种,也是冬虫夏草的近缘种。其活性成分和医疗保健功效与冬虫夏草相近。由于冬虫夏草寄主专一、生境特殊,人工培养尚未完全成功,以致货源稀缺,价格高昂,人们便将研究开发的重点放在蛹虫草上。目前蛹虫草已开发出发酵菌丝体、米饭子实体、蚕蛹草和蚕虫草等品种,但蛹虫草的孢子粉尚未引起人们关注。同属珍贵药用菌的灵芝,人们在开发子实体的同时注重灵芝孢子粉的研究开发,使灵芝孢子粉成为灵芝系列产品的重要品种。为此,我们对蛹虫草孢子粉的活性成分进行分析检测,并与蛹虫草进行对比,以期为研究开发蛹虫草孢子粉提供科学依据。     

加硒对蛹虫草主要活性成分含量的影响

[目的]明确不同加硒量对蛹虫草主要活性成分含量的影响。[方法]向固体培养基中加入不同含量的亚硒酸钠,接种培养后用高效液相色谱法测定虫草素和腺苷,用高碘酸钠法测定虫草酸,用苯酚-硫酸法测定虫草多糖。[结果]虫草素在加硒量为5.5mg/kg时达到4.50mg/g,虫草酸在加硒量为4.0mg/kg时达到30.06mg/g,腺苷和虫草多糖含量与加硒量无明显相关性。[结论]加硒可显著提高蛹虫草固体培养物中虫草素和虫草酸含量,但医疗保健功效的提高还需通过动物试验加以验证。     

蛹虫草栽培基质的模型优化研究

【目的】对蛹虫草人工栽培的栽培基质进行优化。【方法】以蛹虫草菌株CDM-003为供试材料,采用400mL玻璃罐头瓶为栽培容器,研究了蚕蛹粉、基质含水率、葡萄糖、蛋白胨和微量元素添加剂对蛹虫草子座生物学效率的影响。通过建立数学模型,确定蛹虫草人工栽培中上述几种常用基本基质用量与子座生物学效率之间的函数关系。【结果】确定了基质中各主要成分的最佳用量为:蚕蛹粉0.156g/g,葡萄糖12.19g/L,蛋白胨10g/L,基质含水率66.75%,微量元素添加剂25g/L。【结论】蚕蛹粉用量、基质含水率及栽培营养液中葡萄糖、蛋白胨、微量元素添加剂的含量对蛹虫草的生物学效率具有显著的影响。     

提高蛹虫草培养物中虫草素含量的研究

为提高蛹虫草的虫草素含量，从寄主培养、液体培养、固体培养和代料栽培等方面进行研究，使蛹虫草培养物的虫草素含量获得显著提高，寄主培养的蚕虫草虫草素含量超过12mg／g，菌核超过30mg/g；液体培养的培养液超过0．2mg／ml，菌丝体超过3mg／g；固体培养物超过10mg/g，代料栽培子实体超过3mg/g，采后培养基的虫草素含量比子实体还要高。     

高温和强光对蛹虫草子实体成分和酪氨酸酶抑制活性的影响

以蛹虫草子实体为研究对象,研究高温和强光对蛹虫草培养后期子实体中多糖、核苷含量和酪氨酸酶抑制活性的影响。结果表明,在蛹虫草子实体培养后期,提高温度和增加光照强度,可显著提高蛹虫草子实体多糖、尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素等核苷类物质的含量(P0.05),尤其是多糖、腺苷和虫草素的含量较常规培养子实体分别提高0.77、1.76倍和3.58倍。另外发现经过高温和强光胁迫蛹虫草子实体抑制酪氨酸酶活性也有所增强,并且从子实体甲醇提取物中分离到酪氨酸酶抑制活性纯品物质,结果显示该物质对单酚酶活性的IC50为27.8386μg·m L~(-1),二酚酶活性的IC50为38.1432μg·m L~(-1)。     

不同配方下固体培养蛹虫草活性成分含量比较

以蚕蛹、黄豆、玉米糁、蛋白胨为原料固体栽培蛹虫草,研究不同配方培养基对蛹虫草虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量的影响。结果表明,配方5下蛹虫草虫草素含量最高,配方1下腺苷含量最高,配方4下多糖、虫草酸含量最高,在纯蛹培养基中添加适量黄豆、玉米糁、蛋白胨有利于蛹虫草活性物质的提高。     

硒对人工栽培蛹虫草生长和组分的影响

１ 材料和方法１．１ 材料 野生蛹虫草，采自沈阳辉山。１．２ 方法 在培养基中分别加入不同浓度的亚硒酸钠，菌种来源为野生蛹虫草单抱分离获得的纯培养的菌株。接种量为 ０．１２ｇ／１００ｍｌ，在 ２２～２５℃条件下振荡培养，７ｄ后取样测定成分。多糖含量测定采用苯酚－硫酸法，多糖成分的测定采用硅胶Ｇ薄层层析法，甘露醇含量的测定采用碘量法，ＳＯＤ活力的测定采用ＮＢＴ光还原法，硒含量的测定采用２，３．二氨基萘荧光法。２ 结果与分析２．１液体培养基加硒对蛹虫草硒含量的影响 为了提高人工栽培蛹虫草硒的含量，在液体培养…     

不同培养条件对蛹虫草原基形成的影响

以米饭为培养基质,研究了不同光照强度、昼夜温差和划线刺激对蛹虫草原基形成的影响,结果表明：光照强度200 lx,昼夜温差10℃、划线规格1 cm×1cm的培养条件,有利于蛹虫草原基形成。     

3种虫草活性成分的对比分析

对比分析了野生冬虫夏草、野生蛹虫草和人工栽培蛹虫草3种常见虫草的活性成分,结果表明,人工栽培的蛹虫草活性成分的种类与野生虫草相同,氨基酸总量高于野生冬虫夏草,虫草素、虫草酸、虫草多糖,超氧化物歧化酶(SOD)、维生素含量远高于野生蛹虫草,而人工栽培的蛹虫草中微量元素种类也与野生虫草相同,且未检测到对人体有害的Pb和Cr。人工栽培的蛹虫草完全可以代替野生蛹虫草来进行工厂规模化生产。     

不同人工栽培培养基对蛹虫草子实体发育的影响及效益分析

[目的]蛹虫草(Cordyceps militaris)又名北虫草、北冬虫夏草,是一种药(食)用真菌,具有替代名贵中药冬虫夏草的潜力,目前已大规模开发利用;但在人工栽培过程中,仍存在栽培基质配方不佳、子实体形成及优质率不高等问题.[方法]从新疆天山区域采集野生蛹虫草子实体,经分离纯化,筛选出优良菌株,设计不同的人工栽培培养基配方,在恒温培养条件下,明确不同培养基对新疆蛹虫草的子实体生长影响.[结果]不同培养基对蛹虫草的菌丝生长及子实体形成发育具有差异性影响.与对照处理相比,其它处理对蛹虫草的子实体长度、鲜重、干重、鲜干比、生物转化率,以及每瓶投入、产出和净利润等方面均呈显著性差异(P＜0.05);不同的培养基配方对蛹虫草的菌丝、子实体形成具有重要的影响,处理1(大米培养基,20 9/瓶)和处理10(大米:小麦:水稻壳=6:3:1)表现最好.[结论]蛹虫草人工栽培可使用处理1或处理10配方培养基适宜新疆地区蛹虫草的规模化生产,丰富该地区人工栽培蛹虫草培养基配方,为伊犁乃至新疆大面积人工栽培蛹虫草提供技术支持.     

不同栽培基质对石韦活性成分含量的影响

[目的]筛选适宜石韦（Pyrrosia lingua）人工栽培的基质。[方法]在大田试验条件下,采用随机区组设计,研究石韦在甘蔗渣、蘑菇渣、木糠和炉渣分别与土壤按1∶1比例混合形成的4种栽培基质中扦插苗叶片的活性成分含量。[结果]甘蔗渣混土基质可显著提高石韦叶片的总黄酮、多糖、总皂苷、蒽醌和绿原酸含量;蘑菇渣混土和炉渣混土基质可显著提高多糖和总皂苷含量,但同时会降低总黄酮含量,且对蒽醌和绿原酸含量无显著影响;木糠混土基质可显著提高多糖、总皂苷和绿原酸含量,但对总黄酮和蒽醌含量无显著影响。[结论]甘蔗渣混土是石韦较适宜的人工栽培基质。     

蛹虫草001号高产菌株栽培试验

对001号蛹虫草菌种与市售蛹虫草菌种进行了对比试验,并观察了菌株在人工培养基上的生长状况.结果表明,蛹虫草001号菌种生长良好,菌丝和子实体生长速度快,产量和质量均超过对照菌株.001号蛹虫草菌种适合人工栽培和工业化生产.     

不同培养液对蛹虫草多糖及虫草酸含量的影响

[目的]明确不同碳氮源培养液对蛹虫草多糖及虫草酸含量的影响。[方法]以不同碳氮源培养液振荡培养蛹虫草,用苯酚-硫酸法测定虫草多糖含量,用高碘酸钠法测定虫草酸含量。[结果]培养液中多糖含量以米蛹配方最高,为6.48mg/ml,其次为玉米糁蛹的5.87mg/ml;虫草酸含量以玉米糁蛹配方最高,为5.21mg/ml,其次为米蛹的4.94mg/ml;菌丝体中多糖含量以玉米糁蛹配方最高,为68.32mg/g,其次为米蛹的57.91mg/g;虫草酸以麦米蛹配方最高,达186.29mg/g,其次为小麦蛹的180.32mg/g。[结论]选择适宜碳氮源进行蛹虫草的液体培养,可获得多糖和虫草酸含量很高的培养物。     

加速溶剂萃取法提取蛹虫草主要成分工艺优化分析

【目的】蛹虫草(Cordyceps militaris)成分内含有大量的核苷类、多糖、虫草酸、甾醇、糖醇、酶和色素等多种活性物质,其中对虫草素(cordycepin)、腺苷(adenosine)、多糖等研究广泛。【方法】目前提取虫草素、腺苷常用超声法、回流法、渗漉提取法等。采取加速溶剂萃取法,从蛹虫草子实体中获取虫草素、腺苷活性物质,并进行四因素(温度、静态萃取时间、乙醇浓度和循环次数)三水平正交试验设计,明确其最优组合条件。【结果】通过试验得到了加速萃取法提取虫草素、腺苷的最佳组合条件。【结论】加速萃取法提取虫草素的最适条件是:温度70℃,时间5 min,乙醇浓度20%,循环次数2次;提取腺苷的最适条件是:温度100℃,时间10 min,乙醇含量0,循环次数2次。     

不同重量培养基对北虫草子实体生长的影响

通过不同重量小麦培养基对比试验,筛选出适合北虫草生长的最佳培养基配方。结果显示:在常压灭菌条件下,人工栽培北虫草的小麦培养基在料水比为1∶1.3的条件下,培养料重量采用35 g为宜,在这个重量下,北虫草子实体生长粗细均匀,干物质比重大,产品质量多为一等品。     

蛹虫草主要有效成分分析

[目的]进一步开发蛹虫草,满足人们对药品和滋补保健品的需求。[方法]通过用HPLC测定核苷类化合物和氨基酸,乙醇沉淀法测定虫草多糖,比色法测定虫草酸,SOD Assay Kit-WST试剂盒测定SOD酶酶活分析蛹虫草的主要有效成分。[结果]蛹虫草子实体中含有虫草素(3′-脱氧腺苷)、腺嘌呤、脱氧胸苷、尿嘧啶、腺苷、次黄嘌呤、鸟苷、尿苷等核苷类化合物,18种氨基酸,其中以谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、亮氨酸含量最高;甘露聚糖和葡萄糖含量分别为13.88和16.68 mg/g,虫草酸含量为17 mg/g,胞内SOD酶酶活为515.40 U/g。[结论]蛹虫草的主要有效成分为:核苷类化合物(虫草素、腺苷、鸟苷、尿苷、肌苷)、虫草酸、虫草多糖、氨基酸、SOD酶等。     

外植体处理及接种部位对鲁山虫草菌种分离的影响

研究了野生状态下鲁山虫草的菌种分离方法。发现以0．5％的碘伏浸泡30s,然后用无菌水冲洗,再加入0．1％升汞中浸泡3min为外殖体消毒剂时表面消毒效果最佳。而对不同接种部位试验发现虫草子实体顶端2cm左右为最佳分离部位。     

北虫草人工栽培条件的优化

通过单因素试验和主要因素的正交试验结果表明:北虫草(Cordyceps m ilitaris)栽培的最佳的原料为大米 10%的蛹粉,原料含水量以60%为佳;最适子实体生长温度为19℃;最适pH为5.5~7.5;黑暗培养不利于子实体生长,在300~700 lx的散射光照时产量最高。