半胱胺对草鱼酮体代谢、转氨酶和碱性磷酸酶活性的影响

通过对草鱼鱼种腹腔注射半胱胺(Cys—teamine)的测定结果表明：注射后3h，鱼体肝、胰脏酮体生成量达最大值，比对照组增加357％。注射后5h，谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT）、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(AKP)活性达最高值，此时肝、胰脏GPT、GOT和AKP活性分别比对照组增加了86％、58．8％、110％。肌肉GOT、GPT和AKP活性比对照组增加了34．8％、33．3％、58．56％。AKP活性11h恢复到正常水平，GPT、GOT活性恢复正常水平时间较长。一次性注射半胱胺0．375～1．500mg／kg BW。草鱼肝、胰脏和肌肉的酮体生成量和AKP活性和肝胰脏的GOT、GFT活性均比对照组显著增加，肌肉中GOT、GPT活性与对照组相比差异均不显著。     

莱克多巴胺对鼠的毒性研究

莱克多巴胺急性毒性按寇氏法测得LD50分别为大鼠：1854．81（1601．77－2147．83）mg/kg，小鼠LD50为：1829．79（1616．59－2071．09）mg/kg。根据化学物质的急性毒性分级标准，属低毒纸。采用剂量定期递增法给药测得蓄积系数K值大于5．3，根据蓄积系数评价标准为轻度蓄积。大鼠90天亚慢性试验，从精神状况、体重、采食、血液学指标和组织切片光镜检查上看，在饲料中添加20、200、2000mg/kg莱克多巴胺均无明显毒性反应。     

莱克多巴胺对小鼠热敏感性的影响

目的:研究莱克多巴胺的镇痛作用.方法:以小鼠为实验对象,热刺激反应出现时间为指标.小鼠40只,体重20～40g,随机分为A、B、C、D四组,分别饮用自来水、20mg/kg、200mg/kg和2000mg/kg莱克多巴胺水溶液.结果:和对照组相比,B、C、D三组小鼠痛阈逐渐提高,说明莱克多巴胺具有镇痛作用,镇痛效果与剂量呈正相关.     

莱克多巴胺的检测方法

莱克多巴胺又名雷托帕明、舒喘灵、权莱克、金莱多巴、Paylean．化学成分为1-（4-羟基苯基）-2-[1-甲基-3-（4-羟基苯基）-丙氨基]-乙醇。动物生产中以RCT盐酸盐形式用作饲料添加剂,称之为盐酸莱克多巴胺（RCT·HCI）。莱克多巴胺（Ractopamine,RAC）与沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）是苯乙胺类药物,均为中等极性的疏水性物质,呈酸碱两性。     

莱克多巴胺的检测方法

莱克多巴胺又名雷托帕明、舒喘灵、权莱克、金莱多巴、Paylean．化学成分为1-（4-羟基苯基）-2-[1-甲基-3-（4-羟基苯基）-丙氨基]-乙醇。动物生产中以RCT盐酸盐形式用作饲料添加剂，称之为盐酸莱克多巴胺（RCT·HCI）。莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）与沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）是苯乙胺类药物，均为中等极性的疏水性物质，呈酸碱两性。     

莱克多巴胺多克隆抗体的制备

采用多元酸酐法活化盐酸莱克多巴胺，用混合酸酐法将活化的莱克多巴胺与载体蛋白（KLH，BSA）偶联，制备了莱克多巴胺免疫原KLH-Rac和包被抗原BSA-Rac。以KLH-Rac免疫新西兰白兔获得了莱克多巴胺多克隆抗体，以BSA-Rac为包被抗原，采用间接ELISA检测抗血清，其效价达到1：6000，间接竞争ELISA测得抗血清的IC50值约为5ng／mL，其与克伦特罗、沙丁胺醇、特布它林的交叉反应性小于0．01％。     

莱克多巴胺人工抗原的合成与鉴定

用戊二酸酐将盐酸莱克多巴胺活化成莱克多巴胺-戊二酸酐半醛,用混合酸酐法将莱克多巴胺-戊二酸酐半醛与KLH和BSA偶联,合成免疫原和包被抗原,经核磁共振法和紫外吸收法鉴定,偶联成功.用紫外吸收法测定免疫原和包被抗原的偶联比分别为24：1和2.5：1.用免疫原免疫新西兰白兔,采用间接ELISA法检测抗体效价,采用间接竞争ELISA法检测IC50值,获得了效价为1：6 000以上、IC50值为10 ng/mL的多克隆抗体,证明合成的人工免疫原具有免疫原性.     

畜产品中莱克多巴胺残留的快速检测

莱克多巴胺属于β类肾上腺激素,因具有减脂增肉的作用而被广泛用于畜牧生产中,但在动物机体中有较大的残留时会严重威胁人类健康。检测莱克多巴胺有多种方法,而ELISA应用抗原抗体反应,能够对猪尿、猪肝中的莱克多巴胺残留快速进行检测筛选,从而有效控制瘦肉精在动物及人体的残留。     

氟苯尼考等兽药对莱克多巴胺ELISA检测的影响

本文通过对氟苯尼考等常用兽药对莱克多巴胺ELISA残留筛选检测的影响研究实验。结果表明,这些药物在5ng/ml(或10ng/ml)作为我国动植物检验检疫判定标准下,对莱克多巴胺ELISA检测无影响。     

检测莱克多巴胺胶体金免疫层析试验的建立

采用混合酸酐法制备莱克多巴胺-OVA偶联抗原,胶体金标记莱克多巴胺单克隆抗体,建立了检测莱克多巴胺的胶体金免疫层析试验。该试验具有较好的敏感性和特异性,最低可检测10ng/mL的莱克多巴胺,而与克伦特罗和沙丁醇胺无交叉反应。胶体金免疫层析试验对尿液和饲料样品中莱克多巴胺的最低检测量分别为10ng/mL和0.01mg/kg。     

饲料中莱克多巴胺的HPLC法测定

用碱性甲醇提取试样中的莱克多巴胺,经SLA固相萃取柱净化,浓缩后用2%乙酸溶液定容,过膜后用高效液相色谱-荧光检测法分离测定;色谱柱类型Waters Svmmetry C18柱,250mm×4.6mm(i.d.),粒径5μm;流动相为戊烷磺酸钠溶液:乙腈(体积比80:20);激发波长为226nm,发射波长为306nm;流速1ml/min;进样量50μl;饲料中莱克多巴胺的检测限为0.5mg/kg;莱克多巴胺的测定在0.02-0.50μg/ml范围内具有良好的线性关系,平均回收率在85.1%以上,RSD小于7.5%;方法简单,灵敏度高,可用于饲料中莱克多巴胺的含量测定。     

高效液相色谱-串联质谱法研究猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺的残留及代谢规律

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺残留的方法。猪毛发经1 mol/L氢氧化钠溶液水解、乙酸乙酯萃取、MCX固相萃取柱净化,流动相溶解后用HPLC-MS/MS进行检测。克仑特罗在1.9～463.2 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 0);回收率为83.3%～86.6%,相对标准偏差为6.7%～9.2%;检出限为0.3μg/kg,定量限为0.8μg/kg。莱克多巴胺在2.8～562.9 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 2);回收率为83.4%～88.4%,相对标准偏差为7.2%～9.6%;检出限为0.4μg/kg,定量限为1.2μg/kg。应用该方法研究了克仑特罗、莱克多巴胺在猪毛发中的代谢规律并进行了猪毛发样品检测。结果喂药7 d至停药21 d猪毛发中均检出克仑特罗、莱克多巴胺残留;检测猪毛发样品25份,1份样品检出克仑特罗,残留量为58.68μg/kg。     

HPLC-MS/MS快速检测动物尿液中的莱克多巴胺和克伦特罗

建立了以高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)快速检测动物尿液中的莱克多巴胺和克伦特罗分析方法.样品经SCX柱净化浓缩后,以乙腈-5 mmol/L乙酸铵(65:35,V/V)为流动相,采用Kromasil CN色谱柱分离,通过电喷雾(ESI)离子源电离多反应监测(MRM)对莱克多巴胺和克伦特罗作定性和定量分析.在1.0～500.0 μg/L的范围内线性良好(r>0.999).在0.5、4.0、40.0、80.0、200.0 μg/L添加水平下,回收率在89.7%～103.3%,相对标准偏差为2.0%～7.8%.检测限(S/N=5)为0.1 μg/L.     

莱克多巴胺单克隆抗体间接竞争ELISA检测方法的建立

用混合酸酐法将莱克多巴胺(Rac)与匙孔蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,经紫外光谱扫描确定偶联成功,测得偶联物Rac-KLH浓度为3.6 mg/mL,Rac-BSA浓度为6.2 mg/mL。以偶联物Rac-KLH作为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/O-Ag-14进行融合。以Rac-BSA作为包被抗原,经间接ELISA筛选出阳性细胞株,再用有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D9、1F3、2C11、5C3、3A10、4A8、6B7、6D5、7C11、7D3。其中单克隆抗体5C3和3A10间接ELISA效价1∶500 000,对莱克多巴胺的半数阻断浓度(IC50)均为3.98 ng/mL,对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的IC50均大于2 000 ng/mL;对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的交叉反应率均小于0.2%。间接竞争ELISA检测莱克多巴胺在0.5～100 ng/mL范围内为线性分布,确定的最低检测限为0.5 ng/mL。     

三种ELISA法检测猪尿中莱克多巴胺的比较分析

在各种莱克多巴胺检测方法中，适合应用于大批检测样品的是ELISA方法。但目前市场上的大多数检测莱克多巴胺的试剂盒对猪尿样的检测会造成假阳性，有的假阳性率达到33.3％。本实验用三种不同厂家的试剂盒对15份猪尿样进行了检测，通过比较分析得出：对尿样的稀释可以有效的减少阳性的产生，在制备标准曲线时加入尿样背景也可以减少假阳性的产生。方法C的添加回收率在65％以上，可以比较准确的检测猪尿中的莱克多巴胺。     

氟苯尼考等兽药对莱克多巴胺ELISA检测的影响

莱克多巴胺(Ractopam ine,商品名Paylean),是苯乙醇胺类β-受体激动剂,用于猪只改善饲料利用率和提高瘦肉率。由美国E lanco AnimalHealth公司(礼来公司的分公司)开发成功并被美国FDA于2000年7月份批准生产应用于养猪业,也是迄今唯一被FDA批准应用于食品动物提高瘦肉率的药物[1]。基于莱克多巴胺与克仑特罗为同类药物,其在动物源性食品中如有高浓度的残留可能会对人体健康产生危害,因而在我国目前仍属违禁药物[2-3]。ELISA是莱克多巴胺残留筛选检测的主要方法,具有简单、快速、高通量的优点。但在检测过程中易出现在饲料中用ELISA…     

动物产品中莱克多巴胺的残留检测研究进展

莱克多巴胺（Ractopamine, RAC）是一种人工合成的β-肾上腺素能受体激动剂类化合物，属于第二代“瘦肉精”。本文分别从传统仪器检测法和快速检测法及生物传感器技术三个方面综述了当前RAC在动物性产品中残留检测技术的研究进展，并对RAC检测技术的发展趋势进行了展望，旨在为RAC的残留监控提供方法学上的参考，为检测新方法的建立提供思路。     

莱克多巴胺药物残留的检测与监控

莱克多巴胺又称苯乙醇胺,与克仑特罗("瘦肉精")一样,都是β-兴奋剂类药物中的一员,属违禁药物.莱克多巴胺在动物体内的代谢机理与盐酸克伦特罗有相似之处,可以影响动物体内的营养分配,可有效地减少脂肪增长,提高瘦肉率.     

莱克多巴胺药物残留的检测与监控

莱克多巴胺又称苯乙醇胺,与克仑特罗（“瘦肉精”）一样,都是β-兴奋剂类药物中的一员,属违禁药物。莱克多巴胺在动物体内的代谢机理与盐酸克伦特罗有相似之处,可以影响动物体内的营养分配,可有效地减少脂肪增长,提高瘦肉率。     

生物样本中莱克多巴胺检测方法的研究进展

莱克多巴胺(ractopamine,RAC)是一种常用的β-兴奋剂,近年来,人们发展了许多方法检测其在食用动物中的残留情况,以期达到对其使用的有效监控.作者在介绍RAC基本理化性质和作用机理的基础上,论述了国内外检测生物样本中RAC的分析方法,并对这些方法的优缺点进行了分析,进一步说明无论仪器分析方法还是免疫分析方法都有其固有的特性和优缺点,彼此是无法完全替代的,并在此基础上,对未来RAC分析方法的发展方向进行了展望.