鲤鱼细菌性败血症的病理学研究

报道了由嗜水气单胞菌嗜水亚种 (Aeromonashydrophilasubsp .hydrophila)感染鲤鱼引起细菌性败血症的病理学变化 ,通过对自然感染和人工感染病例的病理学观察 ,病理变化主要表现为鱼体多处出血 ,特别是体表的出血最为明显 ,上下颌、眼睛、鳃盖、鳍基充血发红 ,皮肤有瘀斑瘀点 ,并发生糜烂、溃疡 ;腹水 ,肛门红肿外突 ;心、肝、肾、肠等内脏器官充血、出血、肿大、变性、坏死、发炎以及红细胞发生溶血等 ,表现出细菌性败血症的病理特征 ,并在病理变化观察的基础上探讨了该病发生的机理。     

鲤鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定

[目的]分离、鉴定鲤鱼嗜水气单胞菌。[方法]从具有典型细菌性败血症症状的病鱼或濒死鱼中分离到2株优势菌,经分离培养、人工感染试验、毒力因子和16S rRNA基因序列的测定,研究分离菌的形态、生理生化特征及致病性。[结果]分离到的2株优势菌的菌落形态特征基本一致,经鉴定,确认为嗜水气单胞菌。无菌滤液试验表明,鲤鱼细菌性败血症不是由病毒引起的。腹腔注射分离菌菌悬液的鱼在7 d内全部死亡,人工感染试验的症状与自然发病相似,且再次感染后又可分离到该菌株。分离提纯的致病菌株产生了β-溶血环,经蛋白酶试验为阳性。16S rRNA基因序列同源性分析发现同源性为98%。[结论]嗜水气单胞菌是鲤鱼细菌性败血症的致病菌。     

中华鳖嗜水气单胞菌病研究概况

综述了嗜水气单胞菌所引起的中华鳖疾病种类、症状、致病机理及防治方法，并就免疫学防治的必要性和可行性提出了一些见解。     

鲢细菌性败血症病原的研究

从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。     

鲤鱼嗜水气单胞菌的检测与分析

对从渔场采集患细菌性败血症的濒死鲤鱼进行细菌分离培养及毒力因子测试,应用镀银染色、负染色技术检测菌体。根据细菌的致病力,形态特征及鞭毛生长位置、数目、长短等指标,判断其菌体。结果表明,分离的菌体无杂菌生长,嗜水气单胞菌是鲤鱼败血症的致病菌。     

鲢细菌性败血症病原的研究

从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。     

鲤鱼细菌性败血症病原菌的药敏试验

[目的]为研制有效防治鲤鱼细菌性败血症的疫苗提供依据。[方法]从河北省某渔场具有典型细菌性败血症症状的鲤鱼中分离出2株优势菌,对分离菌进行生化鉴定、16S rRNA基因序列测定,并研究分离菌的药物敏感性。[结果]根据2株分离菌的菌落形态、生化特性和16S rRNA基因序列的测定结果(同源性为99%),发现2株分离菌均为气单胞菌属的嗜水气单胞菌,认为嗜水气单胞菌是鲤鱼细菌性败血症的病原菌。分离到的2株嗜水气单胞菌对阿米卡星、氨曲南、头孢噻肟、头孢他啶、加替沙星等15种抗生素均敏感,对氨苄西林均耐药,对复方磺胺表现出了菌株差异。[结论]对嗜水气单胞菌敏感的15种抗生素可作为防治鲤鱼细菌性败血症的首选药物。     

三角帆蚌嗜水气单胞菌病的病理研究

采用生物显微镜和透射电镜观察了三角帆蚌人工感染嗜水气单胞菌后肝脏、肠道、鳃、斧足、闭壳肌等主要器官的组织和细胞病理变化。病蚌临床症状与自然染病症状相似，病变早期，体内有大量粘液排出体外，蚌壳后缘出水管喷水无力，两壳微开；病变后期，闭壳肌失去功能，两壳张开，肠道水肿，有腹水，肠内无食物，肝脏呈糜烂状，斧足苍白，鳃暗黄。组织及细胞超微结构观察可见，嗜水气单胞菌对肝脏危害最为严重，肝小管肿大破裂，管腔变小甚至完全堵塞；肝细胞肿大变性，胞浆内出现空泡，细胞核溶解，水肿变性直至坏死，间质中大量的嗜酸性细胞浸润，其次是鳃，鳃丝细胞排列松散，纤毛受到不同程度的破坏，甚至脱落，隐窝深处理胞坏死，水肿，细胞内及细胞间出现空泡，粗面内质网扩张。嗜酸性细胞局部聚集，分泌细胞钙化等。     

鲤细菌性败血症的免疫研究

选取分离于鲤细菌性败血症病例的嗜水气单胞菌强毒力菌株进行复壮,于菌悬液中加入0.2%甲醛于28℃灭活12h制成灭活疫苗,对鲤进行免疫接种后,通过检测抗体,以确定鱼体对疫苗的应答强度。分别取注射免疫后第21,28,35,42天的血清做凝集试验,并于首免6周后做人工感染保护试验。结果抗体最高效价达到212,而对照组为0。受免组攻毒免疫保护率达90%,表明鱼体对嗜水气单胞菌灭活疫苗可以产生免疫应答,对鲤有一定的免疫保护作用。     

黄瓜枯萎病菌生物学特性的研究

研究了温度、pH值、碳源、氮源对黄瓜枯萎病病原菌生长、产孢以及分生孢子萌发的影响,结果表明,该病菌适宜温度为20—30℃,最适温度25℃。病原菌最适宜pH值为6,稍偏酸性环境更适宜病菌生长、产孢和孢子萌发。不同营养试验表明,碳源中蔗糖最有利于病菌生长、产孢和孢子萌发;在氮源中,硝酸钾和尿素最适于病菌生长和产孢,而有机氮较无机氮更有利于孢子萌发。     

细菌菌株NYC-3降解苯酚特性研究

[目的]探讨细菌菌株NYC-3降解苯酚的特性。[方法]摇床处理18和24h试验中,利用HPLC测定从化工废水中分离出的3株细菌培养液中的苯酚含量,计算苯酚降解率,比较降解苯酚的特性。通过模拟SBR工艺试验,研究3株菌的苯酚降解能力,并对苯酚降解优势菌株NYC-3进行细胞形态及生理生化特性分析。[结果]摇床处理试验表明,24h时3株菌株的苯酚降解率均达到较高水平,以菌株NYC-3的苯酚降解率最高,降解率为99%,菌株JHC-1和HFC-1的分别为82%和94%。在SBR模拟试验中,菌株NYC-3的总化学耗氧量变化最大,CODCr值从210.33mg/L降为27.78mg/L。根据NYC-3的细胞形态与生理生化特性,按照伯杰氏细菌系统鉴定手册,初步鉴定该菌株属于假单胞菌属。[结论]摇床试验和模拟SBR试验均证实,菌株NYC-3降解苯酚的能力最强。     

五倍子对鲤鱼细菌性败血症的药效试验初报

以0.5%和1.0%五倍子药饵饲喂鲤鱼,通过肝脏和血液指标的测定,研究五倍子对鲤鱼细菌性败血症的药效。结果表明:攻毒前饲喂药饵16d,防治组肝脏酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性升高(P<0.05);攻毒并给药14d,防治组和治疗组血清肌酐、尿酸、尿素氮含量,谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性均由8d时高于空白组(P<0.05)降低到正常值或与之基本接近(P>0.05);防治组和治疗组死亡率较对照组极显著降低(P<0.01),并且防治组明显低于治疗组(P<0.05),0.5%和1.0%药饵组间无显著差异(P>0.05)。因此,五倍子增强了鱼体非特异性免疫能力,对细菌性败血症有良好的预防和治疗作用。     

百毒杀(BESTAQUAM-s)对鲤鱼、鲫鱼的急性毒性和抑菌作用

对鲤鱼、鲫鱼进行了百毒杀 (BESTAQUAM s)的急性毒性试验 ;同时用试管稀释法进行了百毒杀对嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)、荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescens)两种鱼类常见致病菌的抑菌试验。结果表明百毒杀对鲤鱼 2 4h和 48h的半数致死浓度 (LC50 )分别为 7 13mg/L和 6 87mg/L ,安全浓度为 0 6 9mg/L ;鲫鱼 2 4h和 48h的半数致死浓度 (LC50 )分别为 :13 72mg/L和 13 2 2mg/L ,安全浓度 1 32mg/L ;对嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)和荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescens)的最低抑菌浓度 (MIC)均为 0 0 1mg/L ,最低杀菌浓度 (MRC)为 0 1mg/L ;通过对中毒死亡鱼的病理组织学观察表明 :百毒杀主要是对鱼类的鳃、肠、肝和肾造成较大的损害 ,特别是对鳃的损害与鱼的死亡有很大的关系。     

生姜茎基腐病病原鉴定及生物学特性研究

通过致病性测定、形态特征观察及rDNAITS序列分析,对生姜茎基腐病病原菌进行研究。结果表明:近年来山东生姜上新出现的生姜茎基腐病的病原菌为Pythium myriotylum,该病原菌生长的温度范围是1～35℃,最适温度25℃,pH值范围5～12,最适pH值为7。     

辣椒细菌性果实条斑病病原鉴定

【目的】研究鉴定2018年在新疆巴音郭楞蒙古自治州和硕县辣椒种植区内新发现一种辣椒细菌性果实条斑病病原,为该病田间病害规律研究和病害防治提供依据。【方法】采用组织分离法、柯赫氏法则回接证病、形态学观察、生理生化特性测定、16S rDNA分子鉴定等方法,鉴定该病病原菌,运用针刺接种法对辣椒果面进行致病性回接测定。【结果】从田间采集的发病辣椒果面上分离、纯化共获得30个单菌落;获得了4个致病性强的菌株,4个菌株形态特征及生理生化测定结果一致。4个致病菌株均与已报道的阿根廷假单胞菌Pseudomonas argentinensis聚在一个进化发育分支中,并且与模式菌株P. argentinensis CH01T (登录号:AY691188)的相似性达到99.2%。【结论】新疆和硕县辣椒细菌性果实条斑病的病原菌鉴定为P. argentinensis。     

冬菇菌种分离与培养特性研究

[目的]研究一株野生高产冬菇菌种的培养特性。[方法]以新鲜野生冬菇子实体为材料,采用组织分离法获得冬菇菌种,研究其培养特性。[结果]冬菇在加富PDA培养基上菌丝生长良好,菌丝白色、呈细棉绒状或绒毡状,稍有爬壁现象。在显微镜下,菌丝粗细均匀,有锁状联合。菌丝在pH值5.5~7.5范围内均能生长,pH值6.0时生长最快,长势最好。菌丝在21~29℃范围内均能生长,25℃时生长最快。冬菇菌丝在棉籽壳、木屑培养基中的满袋时间分别为40、44 d,冬菇产量分别为1.47、1.15 kg,生物学效率分别为49.06%、38.33%。[结论]冬菇菌丝生长的最适pH值为6.0,最适温度为25℃,人工栽培的最适培养基是棉籽壳培养基。     

五味子叶枯病病原菌的生物学特性及其拮抗放线菌的初筛

采用室内平皿培养法研究五味子叶枯病菌的生物学特性,平板对峙法筛选拮抗放线菌。结果表明:叶枯病病原菌在PDA及PDBA培养基上最有利于菌丝生长及产孢;温度对菌丝生长和产孢量影响较大,25℃为其最适温度,同样温度下,黑暗条件显著有利于产生孢子,光照更利于菌丝生长;p H 6~7为菌株生长最适p H;最佳碳、氮源分别为果糖及蛋白胨;孢子致死温度测定为54℃。筛选到2株对五味子叶枯病病原菌拮抗效果较好的放线菌A-25-8和A38,其拮抗率分别为66.26%和66.10%。     

新城疫热稳定性天然弱毒株B95生物学与免疫学特性初步研究

新城疫病毒Ｂ９５（ＮＤＶＢ９５）是从国外引进的一株稳定性的天弱毒株。本项研究证明：本毒株对鸡 鸡无毒副作用,ＩＣＰＩ和ＩＶＰＩ值分别为０;该病毒可凝集鸡、鸭、牛、绵羊、鹅、猪、小白鼠和人的红血球,血凝价与Ｉ系、ＨＢ１和Ｌａｓｏｔａ相似将病毒置５６℃２ｈ,置３７℃保存１０ｄ,仍见有血凝性和对鸡胚感染性;经点眼、饮水、非免疫鸡与免疫鸡同居,均能获得好的免疫效果,并能耐受新城疫强毒株的攻击。