猪链球菌2型与马链球菌兽疫亚种生物学特性的初步比较

１９９８年从病死猪分离了数株链球菌（其中２株编号为９８０１,９８０２）,经鉴定,９８０１株为猪链球菌２型,９８０２株为马链球菌兽疫亚种。９８０１株系从暴发流行地区的病猪中分离,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相同血清型的链球菌而死亡的病例;９８０２株系从散发病猪中分离。临床有共同点,又有各自特点。病理变化均呈现典型的败血症变化,但肝、脾、肺等病变上有一些差别,而染色镜检基本一致。对兔均敏感,对小鼠和猪的敏感性有所不同。９８０１株菌落灰色,中心浑浊,直径０．５ｍｍ,α溶血,有草绿色色素沉着;９８０２株菌落湿润,半透明,直径１．５－２ｍｍ,β溶血。９８０１株对氧哌嗪青霉素、头孢他啶、氨苄青霉素最敏感;９８０２株对氧哌嗪青霉素、复方磺胺、头孢哌酮、呋喃妥因最敏感。     

猪链球菌2型与马链球菌兽疫亚种生物学特性的初步比较

1998年从病死猪分离了数株链球菌 ,其中 2株编号为 980 1,980 2。经鉴定 ,980 1株为猪链球菌 2型 ,980 2株为马链球菌兽疫亚种。 980 1株系从暴发流行地区的病猪中分离 ,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相同血清型的链球菌而死亡的病例 ;980 2株系从散发病猪中分离。临床有共同点 ,又有各自特点。病理变化均呈现典型的败血症变化 ,但肝、脾、肺等病变上有一些差别 ,而染色镜检基本一致。对兔均敏感 ,对小白鼠和猪的敏感性有所不同。 980 1株菌落灰色 ,中心浑浊 ,直径 0 5mm ,α溶血 ,有草绿色色素沉着 ;980 2株菌落湿润 ,半透明 ,直径 1 5～ 2mm ,β溶血。 980 1株对氧哌嗪青霉素、头孢他啶、氨苄青霉素最敏感 ;980 2株对氧哌嗪青霉素、复方磺胺、头孢哌酮、呋喃妥因最敏感     

快速鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种双重PCR方法的建立

本试验旨在建立一种快速、特异、敏感的双重PCR鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种病原检测方法。根据猪链球菌GDH蛋白和马链球菌类 M 蛋白的基因保守区分别设计引物,优化了该双重PCR检测方法的引物浓度及比例,并筛选了其最佳退火温度;用该双重PCR反应体系以其他几株阴性菌株为对照,检测了该反应体系的特异性。以新鲜培养的猪链球菌倍比稀释后进行菌落计数,对该检测方法的敏感性进行了鉴定。M-like和GDH引物的加入量均为1 μL(20 pmol/L),最佳退火温度为52.3℃;该双重PCR反应体系有较高敏感性,检测马链球菌兽疫亚种和猪链球菌的敏感度分别达100和10 CFU;特异性试验结果显示,常见的5种病原菌在该双重PCR体系中无特异性条带出现;临床应用该方法分离鉴定了1株猪链球菌和2株马链球菌兽疫亚种。本试验建立了一种能同时检测猪链球菌和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法,且该方法应用快速、特异且敏感。     

猪链球菌2型分离株的生物学特性试验

对从济南某猪场急性死亡的病例中分离得到的猪链球菌2型病原菌,进行生化试验、药敏试验及致病性试验研究。生化试验表明其各项指标均符合链球菌的标准,药敏试验结果表明该菌对多种抗菌素均有耐药性,对复方新诺明、氨苄西林、恩诺沙星等高度敏感,动物致病性试验表明能100%致死小白鼠。     

猪链球菌2型引致的猪链球菌病

2005年6月至8月间在四川暴发的导致猪和人死亡的猪链球菌病，是由致病性链球菌2型感染引起的一种人畜共患病。根据《中华人民共和国动物防疫法》及其有关规定．猪链球菌病为二类动物疫病。多种猪源链球菌均可导致猪链球菌病．可致病的猪源链球菌中．最常见的是猪链球菌2型及马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌）。     

猪链球菌病双重PCR诊断方法的建立

根据猪链球菌2型荚膜多糖和马链球菌兽疫亚种类M蛋白的保守区序列分别设计了2对简并引物,建立了一种能同时检测猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法。结果显示,该双重PCR能从100个细菌的混合纯培养物中扩增出2条目的片段。而且可以直接从病料组织中检测到相应的病原菌。用建立的双重PCR方法和细菌分离培养法平行检测人工感染的组织病料,PCR方法与细菌培养法的阳性检出率基本一致,但PCR方法的特异性好、敏感性高,简便易行,可以用于猪链球菌病的流行病学调查和实验室的快速鉴别诊断。     

豚鼠源马链球菌兽疫亚种的分离鉴定

为了查明河北省唐山市某豚鼠养殖场发病豚鼠感染的病原菌,本试验采集发病豚鼠的眼角脓性分泌物,采用细菌分离纯化、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增方法对分离菌进行鉴定,通过K-B试纸法检测分离菌株对24种抗菌药的敏感性,试管二倍稀释法测定19种中药对该分离菌株的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过动物回归试验检测该分离菌株的致病性。结果显示,分离菌株在血琼脂培养基培养24 h生长为针尖状透明菌落、呈β溶血,革兰染色为阳性圆球状、3～5个连接呈短链状,生化特性与马链球菌兽疫亚种相符,将其命名为MLQJ-1;16S rRNA序列比对结果显示,MLQJ-1与马链球菌兽疫亚种同源性高达99.72%,在系统进化树中处于同一分支,鉴定为马链球菌兽疫亚种;MLQJ-1对24种抗菌药的敏感性不同,对青霉素、头孢曲松和阿莫西林等8种抗菌药敏感,对阿米卡星、新霉素和卡那霉素等10种抗菌药耐药;苦地丁、苦参、黄芩和千里光对MLQJ-1的MIC值介于1.9～15.6 mg/mL,MBC值介于1.9～31.2 mg/mL;小鼠腹腔接种MLQJ-1菌液后24 h内全部死亡。结果表明,...     

2种猪源链球菌对猪、兔的致病性试验

检测了4株猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)和2株马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equisubsp.zooepidem icus,SEZ)对猪、兔的致病性。SS2-1、SS2-H及SS2-006444株均分离自发病猪内脏,前2株毒力因子表现型为MRP+EF+SLY+,后者为MRP-EF-SLY-;SS2-D株为国外引进的SS2人源株,作为对照,其毒力因子的表现型为MRP+EF*SLY+;SEZ-CY和SEZ-CN株均分离自发病猪并经鉴定。SS2-1、SS2-H、SEZ-CY和SEZ-CN株对猪(2~3头/组)的最小致死量分别为106、107、104和108cfu;对兔(2~3只/组)的最小致死量分别为100~1 000、1 000、100和105cfu;SS2-D株108cfu对猪不致死,对兔的最小致死量为108cfu,而SS2-006444对猪、兔无致病性。显示SS2毒力因子与其对猪、兔的致病性有关;SS2与SEZ菌株对兔或猪的致病性一致,可用兔取代猪做试验;SS2和SEZ菌株通过腹腔、皮下、肌肉或静脉注射均可感染兔(2~4只/组),并致死,SEZ还可经口、鼻感染;SEZ与SS2静脉感染猪后10 m in即可检出细菌,此后2~4 h为无菌血症阶段,之后重新出现。     

猪链球菌2型分离株的生物学特性试验

对从济南某猪场急性死亡的病例中分离得到的阳性球菌进行了形态学观察、生化试验、PCR鉴定及序列测定,药敏试验结果显示该分离菌的形态、培养特性及生化特性符合链球菌2型的特点。PCR扩增出现长度为675bp的目的条带,其核苷酸序列与Genebank中猪链球菌2型参考菌株的同源性高达98%～100%。药敏试验表明该分离菌株对复方新诺明、氨苄西林、恩诺沙星、青霉素、万古霉素、阿莫西林高度敏感。动物致病性试验表明能100%致死小白鼠。     

猪链球菌病及其疫苗研究进展

猪链球菌病(Streptococcosis suis)是由多种不同群的链球菌引起的不同临诊症状传染病的总称〔1〕。该病以导致猪败血症、化脓性淋巴结炎、脑膜炎、关节炎为主要特征,在某些特定诱因作用下,发病猪群死亡率可达80%左右。我国将猪链球菌病列为二类动物疾病〔1,2〕。近年来,我国南方大部分地区发生和流行的猪链球菌病的主要病原是猪链球菌2型(Streptococcus suis type2)及马链球菌兽疫亚种(Streptococcusequine subspecies.zooepidemicus)。本文着重对这2种不同型猪链球菌的病原学、流行病学及疫苗的研究近况进行了综述。1病原学猪链球菌为需…     

猪链球菌2型的分离鉴定及免疫预防

从某猪场分离到一株细菌，通过培养特性、菌体形态、菌落形态、染色特性、生化试验及血清学试验等一系列的系统鉴定，确定为猪链球菌2型。动物致病性试验表明该菌对小白鼠和仔猪有较强的致病性，引起其死亡。药敏试验证明该菌对青霉素、氯霉素等高度敏感，对头抱拉定、卡那霉素等中度敏感，对痢特灵、氟派酸等不敏感。分离菌制成油佐剂灭活苗能有效的预防该猪场猪群的发病。     

支气管败血波氏菌共培养对马链球菌兽疫亚种致病相关特性的影响

旨在探究犬的传染性呼吸道疾病常见病原支气管败血波氏菌(Brodetella bronchiseptica, Bb)与马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidimicus, SEZ)共培养对2种细菌各自致病生物学特性的影响。将相同浓度菌体的SEZ与Bb在PBS中共培养24 h,然后采用平板划线法分离共培养后的单菌落SEZ(SEZ^Bb)和Bb(Bb^SEZ),比较共培养前后菌株的生物被膜形成能力、对上皮细胞的黏附能力、抗巨噬细胞吞噬能力、胞内存活能力以及感染小鼠的存活率和组织细菌载量等方面的差异。结果显示：共培养后,Bb^SEZ的细菌数量和致病生物学特性均无明显改变,但SEZ^Bb较单独培养的SEZ在细菌数量上减少约67%,在生物被膜形成能力、对上皮细胞A549的黏附能力以及在巨噬细胞内的存活能力等方面均有显著提升,对小鼠的致病性增强,且大大提高了对脑组织的侵袭能力。研究结果为揭示多病原混合感染的致病机制奠定了基础。     

猪链球菌2型分离株的生物学特性研究

<正>对从山东省淄博某猪场急性死亡的病例中分离得到的猪链球菌2型病原菌,进行生化试验、药敏试验及致病性试验研究。生化试验表明其各项指标均符合链球菌的标准,药敏试验结果表明该菌对多种抗菌素均有耐药性,对恩诺沙星、青霉素、阿莫西林等高度敏感,动物致病性试验表明能100%致死小白鼠。猪链球菌2型感染可引起猪脑膜脑炎、心内膜炎、关节炎、肺炎和败血症等疾病,也可感染人并致死,是一种重要的人兽共患病病原菌,在全国范围内都是优势流行株。在我国,1990年在广东省首次发现2型菌株,2005年7月发生在四川地区的2型猪链球菌感染事件造成了极大的经济损     

2型猪链球菌病的防治

引起猪链球菌病的病原多为C群的兽疫链球菌(S.zooepidemicus)和类马链球菌(S.epuisimilis),D群的猪链球菌(S.suis),以及E、L、S、R等群。猪链球菌按照荚膜多糖抗原的不同可将其分成35个荚膜血清型,即1～34和1/2型(同时含有1型和2型抗原的菌株),早期曾将猪链球菌分类到兰氏分类法R、S、和T群,实际上与兰氏R、S和T群分别对应的是荚膜2、1和15型。对人致病的大多属于A族,A族又称为化脓性链球菌,在动物中对人类造成严重威胁是猪链球菌,尤其是血清2型链球菌不仅对猪的致病性最强,而且可感染特定人群并致死,是一种重要的人畜共患病病原菌。…     

马链球菌兽疫亚种的保护性抗原SzP蛋白的鉴定与评价

马链球菌兽疫亚种是引起猪链球菌病的主要病原之一。该菌的致病机理尚不清楚,且缺乏合适的疫苗,使猪链球菌病很难得到有效的控制。本实验通过构建SzP重组表达载体,纯化重组蛋白,对其的免疫效力进行了评价。结果表明该蛋白可以诱导高滴度的血清IgG抗体,并且可提供一定的免疫保护效力。进一步研究表明该蛋白是一个重要的体内诱导抗原,可诱导高水平的Thl和Th2型免疫应答。揭示了SzP蛋白在致病过程中起到重要作用,为新型疫苗的研制及致病机制的研究奠定了基础。     

猪链球菌2型广西分离株的生物学特性鉴定

猪链球菌2型是一种人兽共患病原菌,主要引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症和突然死亡等。在我国许多地方发病率呈不断上升趋势。各年龄段的猪都可感染此病,但多发于3～12周龄的猪,尤其是断奶仔猪易感染此病。猪链球菌2型不但对猪有致病性,而且可引起人的感染并致死。我国江苏省、四川省部分地区暴发2型猪链球菌病导致人员感染致死。本试验对从发病猪中分离到的链球菌株进行了形态、培养特性和使用猪链球2型、1型抗血清进行凝集试验,结果证明4株细菌为荚膜2型猪链球菌。PCR方法检测其5种毒力因子和对仔猪、家兔、小鼠的致病性试验。现将鉴定和试验结果报告如下。     

猪链球菌2型JX分离株的生物学特性

从临床表现为脑膜炎、关节炎及败血症的发病猪分离到2株细菌，分别命名为JX02和JX03，经鉴定其形态、染色及培养特性均符合链球菌的特点，具α或β溶血，生化试验结果不稳定。用猪链球菌2型、1型和9型抗血清进行凝集试验，结果2株菌均能与猪链球2型抗血清凝集，其中1株菌对小鼠和家兔均有致病性，另1株菌只能致死家兔。PCR均能扩增2株菌的主要毒力因子基因。表明发病猪的病原不同于以往的C群链球菌，不是马链球菌兽疫亚种，而是属于R群的猪链球菌。     

猪链球菌2型安徽株的分离鉴定与药物敏感试验

2005年8月,安徽某地出现1例猪急性死亡病例,通过对猪病料进行细菌分离、培养以及生化和分子生物学鉴定,确诊为猪链球菌2型感染,分离菌株被命名为SSah0501。动物致病性试验表明,该菌株对小鼠有致病性,但无致死性。药敏试验显示SSah0501对青霉素类药物及头孢类药物敏感,对氨基糖苷类和四环素类药物高度耐药。     

内肽酶O对马链球菌兽疫亚种突破血脑屏障的影响

运用同源重组法构建马链球菌兽疫亚种(SEZ) ATCC35246株(SEZ WT)pepO基因缺失株(SEZ△pepO)及互补株(SEZ C△pepO),比较分析pepO基因对SEZ形态特征、生长性能、感染小鼠的能力、小鼠全血存活率及小鼠脑组织定殖能力的影响;观察感染后小鼠脑组织的病理变化;选取人脑微血管内皮细胞(hBMEC)为体外血脑屏障模型细胞,测定pepO基因对hBMEC细胞的黏附侵袭能力以及对体外血脑屏障模型的穿透能力的影响。结果显示,pepO基因缺失后不影响SEZ在培养基中的生长速率,也不影响SEZ在小鼠全血中的存活率,但缺失株感染小鼠的能力显著降低(P<0.05),在小鼠脑组织细菌载量显著降低(P<0.05);SEZ WT株和SEZ C△pepO株感染组小鼠脑组织出现明显充血、出血、水肿的脑膜炎症状,组织切片可见大量出血及炎性细胞浸润,SEZ△pepO株感染组小鼠脑组织未见明显病变;SEZ△pepO对hBMEC细胞的黏附侵袭率以及对体外血脑屏障模型的穿透率较SEZ WT和SEZ C△pepO均显著降低(P<0.001)。本研究初步证明内肽酶O与SEZ毒力密...