黑根霉发酵产木聚糖酶的条件优化

利用本实验室提供的黑根霉CY8降解玉米秸秆产木聚糖酶，观察了接种量、碳源、氮源、金属离子、表面活性剂对产木聚糖酶活和纤维素酶活的影响，确定最佳培养条件为：接种量3ml，碳源m（麦麸）：m（玉米芯）和m（麦麸）：m（玉米秸秆）均为3：7，氮源为尿素，Co2＋、Mg2＋、Na＋、K＋对木聚糖酶有促进作用，Mg2＋的激活作用最大，可使酶活性提高37.4％，其它离子如Ca2＋。‘对酶活的影响较小。Tween80表面活性剂对菌株产木聚糖酶有促进作用。在不同温度下观察了酶的热稳定性，结果表明：该酶热稳定性较差，在50C以下热稳定性较好（木聚糖酶活计），而随着温度的升高，酶活力很快丧失．当温度达到80℃时，酶活在40min内就全部丧失。     

耐热木聚糖酶水解法制备木寡糖的研究

为探讨耐热木聚糖酶水解自制甘蔗渣木聚糖制备木寡糖的工艺条件和分析水解液的寡糖成分,试验以产耐热木聚糖酶的基因工程菌1020为原料,水解自制的甘蔗渣木聚糖,分别研究水解过程中酶的用量、木聚糖的浓度及酶解温度对酶解反应的影响,并采用高压液相色谱和质谱联用技术对水解液成分进行分析。试验结果表明,2%的木聚糖浓度,水解温度95℃,酶液用量100U/g,酶解3h后DP值可降至2.94,满足生产木寡糖对聚合度的要求;并且水解液的成分主要为木糖、木二糖和木三糖,没能检测到木四糖。耐热木聚糖酶在高温下酶解木聚糖对酶法制备木寡糖具有重要的应用价值。     

木聚糖酶固态发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验对宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）B-2菌株产木聚糖酶的固态发酵的工艺条件进行了研究。结果表明,该菌的最适培养条件为：发酵最佳培养基为麸皮50％、玉米芯50％、硫酸铵2％、尿素3％,发酵温度为30℃,料水比1：1．2,自然pH值,培养48h,木聚糖酶可以达到8500U左右。     

毕赤酵母产木聚糖酶发酵条件优化及其酶学特性研究

本研究在50 L发酵罐水平上对毕赤酵母产木聚糖酶发酵条件进行优化,并对其酶学特性进行研究。利用单因素试验系统考察了微生物种龄、诱导时机、诱导培养温度和诱导时期p H值对产木聚糖酶的影响。结果表明:在最佳种龄23 h、发酵液细胞湿重121 g/L左右开始诱导,诱导培养温度26℃,诱导时期维持p H值5.6的优化工艺条件下,木聚糖酶酶活可达到47570 U/m L;酶的最适反应p H值为5.0~6.0,且具有较好的耐热性,85℃作用2 min后酶活收率仍可达到87.8%,能够用于饲料高温制粒。     

嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)固态发酵姜苗产内切β-葡聚糖酶条件优化

姜苗营养丰富,但作为饲料存在粗纤维含量高而消化吸收率低的难题。内切β-葡聚糖酶主要由真菌代谢产生,可有效降解纤维素中的葡聚糖。本研究在单因子条件的基础上,探讨应用Plackett-Burman和中心组合设计等方法得到嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)固态发酵姜苗生产β-葡聚糖酶的最适发酵条件。结果表明,最佳培养基组成是姜苗70%(w/w)、豆粕30%(w/w)、初始含水量61.0%、尿素1.70%(w/w),KH2PO40.13%(w/w),Ca Cl20.1%(w/w)(固体培养基的总量)。在上述培养基中50℃培养72 h,β-葡聚糖酶活力可达682.8 U/g,与原始培养条件相比酶活提高了51.2%.     

黑曲霉固体发酵木聚糖酶条件的优化

采用单因素试验对黑曲霉（Aspergillus niger）Y-2菌株产木聚糖酶的固体发酵条件进行了研究。结果表明,以麸皮和玉米芯（7：3）作为复合碳源,1%的（NH4）2SO4作为氮源,添加0.5%的无机盐KH2PO4,料水比为1：1.4,接种量为5%,32℃培养72h时,菌株产木聚糖酶活力达到了5213 U/g干物质,比未优化前提高了127%。     

匍枝根霉固态发酵产木聚糖酶条件研究

木聚糖酶作为环保型饲料添加剂广泛应用于畜牧业,因其具有改善消化道功能、降低食糜黏度和抗营养性、提高饲料利用率及减少环境污染等特点而备受关注.试验首先通过单因素试验法得到了最佳的氮源、料液比、无机盐和表面活性剂,为进一步提高产木聚糖酶的水平,以玉米芯粉为主要基质,采用响应面分析法优化匍枝根霉产木聚糖酶发酵培养基.优化的培养基为尿0.15、ZnSO40.022、Tween-80 0.08及含水量3 g/g干基质(DS),在最佳培养条件下,经7d发酵酶活达到最大值:13.899 8 U/g DS.     

纤维素酶水解甘草废渣产糖条件的研究

采用稀硫酸预处理甘草废渣,结合生物酶酶解法,分别从纤维素酶用量、温度、时间、p H因素及摇床转速考察纤维素酶水解的最优条件。在摇床转速150 r/min,p H 5.2,纤维素酶用量90 mg/g,温度52℃,水解时间12 h的条件下,纤维素酶水解甘草废渣的最大产糖量为70.93 mg/g。通过单因素试验考察,由正交试验确定纤维素酶酶解的最佳工艺,经验证试验确证可行。     

Neurospora crassa产木聚糖酶发酵条件及酶学特性

从青藏高原土壤中筛选出一株产木聚糖酶较高的菌株Neurospora crassa SD10。通过单因素试验和正交试验对菌株进行发酵条件优化和酶学性质探究。结果表明,菌株SD10最佳发酵条件为:麸皮30 g/L、蛋白胨20 g/L、Mn2+0.5 g/L、培养温度33℃、转速230 r/min、接种量2%、初始pH值8.0、发酵时间84 h。菌株产木聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应p H值为6.0,在40～50℃和pH值4.0～8.0时有较好的稳定性,能保持80%以上酶活力,Fe2+、Zn2+、K+对酶活力有促进作用,Na+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Cu2+对酶活力有抑制作用。Neurospora crassa SD10优化后产木聚糖酶活力达9.4 U/mL,所产木聚糖酶具有良好的pH值稳定性。     

饲料用耐热木聚糖酶包涵体蛋白的复性

为了促进耐热木聚糖酶的原核表达以及探究其在饲料工业中的应用前景,研究构建重组菌BL21star(DE3)/pRARE/pET28a-xynB64,同时寻找木聚糖酶xynB64包涵体复性的最优条件。试验结果表明,pH值7.6、蛋白浓度0.01 mg/ml、尿素1.0 mol/l,并且添加终浓度为0.014 mol/l的β-环糊精,采用方式③向蛋白溶液中分批添加复性剂的方法,复性效率达到65%。     

一株瘤胃源产纤维素酶菌株的培养条件优化

山羊瘤胃内容物菌群中分离得到的一株产纤维素酶菌株T15,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)进行优化。对菌株培养基成分碳源、氮源和金属离子进行优化时发现,6 g/L的葡萄糖为碳源和5 g/L的牛肉膏为氮源时,产生酶活力达到最高。培养基中添加0.03 mol/L的Ca~(2+),对菌株产生纤维素酶有促进作用。在最优发酵培养基成分为基础,对菌株T15的发酵培养温度、培养时间、培养pH条件和接种量等四因素、三水平进行正交试验,该菌株的产纤维素酶最优发酵条件:以9 mL为接种量,培养基pH值7,培养温度35℃和培养时间40 h,其产生酶活力达到26.76 U/mL;其中培养时间、接种量、培养温度、和培养基酸碱条件对菌株发酵产纤维素酶影响依次增大。     

地衣芽孢杆菌产芽孢培养基和培养条件的优化

本研究以地衣芽孢杆菌CICC 20514为对象,芽孢数和芽孢率为目标参数,采用单因素、正交试验方法对培养基配方进行筛选,并在此配方基础上对培养条件进一步优化。结果表明：最终产芽孢发酵培养基的最佳组合为20 g/L果糖、20 g/L豆粕、5 g/L K₂HPO₄、7 g/L NaCl、0.8 g/L CaCO₃和0.8 g/L MgSO₄;产芽孢最佳培养条件为37℃,220 r/min,接种量5%,装样量20%,初始pH 6.5～7.5,发酵培养时间48 h。优化后的地衣芽孢杆菌CICC 20514培养基芽孢数及芽孢率均具有良好的稳定性,发酵液芽孢数达5.8×10⁹CFU/mL,比优化前提高了58倍。     

响应面法优化乳酸菌产抗真菌物质的培养条件

为提高实验室保存的乳酸菌N22产抗真菌物质的产量, 以毕赤酵母为指示菌, 产生的抑菌圈大小为评价指标, 通过响应面法优化乳酸菌产抗真菌物质的培养条件。对MRS培养基碳源、氮源进行优化, 考查不同温度、初始pH值和发酵时间对乳酸菌产抗真菌物质的影响, 温度、初始pH值和发酵时间是主要影响因素, 最后采用Box-Behnken试验设计和响应面法分析确定乳酸菌最佳培养条件为34.16 ℃、初始pH值为5.33、培养35.44 h, 此时, 最大抑菌圈直径为16.34 mm, 可取率为97.90%。经验证, 最大抑菌圈直径为16.58 mm。该培养条件增加了乳酸菌抗真菌物质的产量。     

黑曲霉ASP-12固态发酵木聚糖酶培养条件研究

通过三角瓶和托盘固态发酵对黑曲霉ASP-12产木聚糖酶的各种环境因素进行了研究。结果表明,培养基的初始pH值为4.5￣5.0,发酵温度为28￣32℃,托盘发酵起始水分应控制在60%￣65%,三角瓶的水分为55%左右,接种量为1%(v/m,109个/ml),培养48h,可以达到最高酶活。对发酵过程酶活的变化趋势研究发现,高峰分别出现在32h和48h,且48h高于32h时的木聚糖酶酶活。正交试验结果显示培养基最优配方为:玉米芯5%、K2HPO40.2%、豆粕2%、麸皮95%。     

黑曲霉降解水解单宁培养条件的研究

本实验研究了培养时间、温度、培养液初始pH、装液量、单宁浓度等条件对菌株降解单宁的影响。结果表明,黑曲霉降解水解单宁的适宜降解条件为28～30℃、pH 7.0、250 mL三角瓶中装入50～75 mL培养液,180 r/min连续培养3 d。随着单宁浓度的提高,降解率逐步降低。     

海南产辣木叶粗多糖提取条件优化及其抗氧化活性研究

试验旨在研究海南辣木叶粗多糖的提取最佳工艺,以及对其抗氧化活性进行测定。试验以海南产辣木叶干粉为原料,采用水为提取剂,通过对不同浸提温度、浸提时间与次数及料液比研究最佳的提取条件。采用水杨酸法测定辣木多糖对羟自由基的清除率,以确定提取物的抗氧化活性。试验结果表明,辣木茎叶多糖最佳提取工艺条件为料液比1:20、浸提温度80℃、浸提时间120 min、浸提次数3次,在此条件下,辣木粗多糖的提取率可达15.42%,多糖提取物对羟自由基有清除作用,且随着提取物浓度的提高清除作用逐渐增强,呈现剂量效应关系。     

酿酒酵母培养条件优化

采用单因素试验及响应面试验对酿酒酵母培养条件进行优化。先对酿酒酵母菌体干质量培养的重要条件进行单因素试验,筛选培养温度、培养时间、培养基初始pH、菌龄4个重要影响因素,根据Box-Behnken设计原理设计响应面试验。结果表明,建立以酵母菌体干质量为响应值的多元二次回归方程,分析模型得出酿酒酵母最优培养条件为：培养温度23.5℃、培养时间71.5 h、培养基初始pH=6.5、菌龄12 h。在最优培养条件下酵母菌体干质量达到（29.70±0.04）g/L,较优化前提高了33.12%。     

绿色木霉水解甘草渣产糖条件的研究

为了延长甘草渣加工产业链,利用废弃甘草渣中的纤维素、半纤维素、木质素等大分子碳水化合物水解为单糖,再由单糖发酵成蛋白质用于饲料生产,试验采用甘草渣为原料,以绿色木霉为催化剂,研究产糖工艺条件。结果表明:各因素对产糖率影响由大到小依次为反应温度反应时间酶的用量反应pH值;最佳工艺条件为1.0 g甘草渣底物中加入绿色木霉活化液90 mL,反应时间为35 h,反应温度为55℃,pH值为4.8,在最佳工艺下水解甘草渣产糖率为9.93%。     

乳酸菌培养条件的优化

1材料与方法 1．1菌种 乳酸菌菌种由广东绿百多生物技术有限公司提供。     

黑曲霉产木聚糖酶的应用特性研究

木聚糖酶能降解木聚糖中的β－１，４糖苷键，在饲料中能降低木聚糖的抗营养作用，提高养分消化利用率，开发非常规谷物资源，提高畜禽生产性能，减轻粪便污染；在造纸业中，能减少纸浆预漂白中有毒物的用量，可大大降低环境污染物的排放，解决造纸业的严重污染问题。其在饲料、食品、造纸工业中得到广泛应用。不同行业对酶的作用特性有不同要求；不同来源的木聚糖酶具不同特性，适用的范围也不一样。本文对所选育的黑曲霉产生的木聚糖酶的部分与应用相关的特性进行了研究，结果显示该酶制剂适合应用于饲料及食品中。１材料和方法１．１木聚…