转基因水稻外源基因的遗传和表达初步研究

将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽肿胚，获得转基因植株2株，转基因水稻T1－T5 5个世代不同株系，对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究。结果表明：转基因后代株系bar^R:bar^S在部分符合3：1分离比率。T1、T4转基因株系PCR、Southern印迹分析表明，T18株有抗菌肽B基因；T4仍有4个株系有抗菌肽基因，其他的株系基因丢失，T3 1个株系Northern印迹证明抗菌肽基因在RNA水平有表达；抗菌肽B转基因水委对白叶枯病的抗病性有提高，抗性能传递到高世代，在T3得到抗病性提高的株系。     

双抗植物表达载体的构建

用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂基因从质粒ｐＢｉｎ２０上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽Ｂ和抗菌肽Ｄ基因的植物表达载体ｐＤＢ３和ＸｂａＩ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有３个抗性基因的双抗植物表达载体ｐＤＢＴ。     

双抗植物表达载体的构建

用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂（ＴＩ）基因从质粒ｐＢｉｎ２０上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽Ｂ和抗菌肽Ｄ基因的植物表达载体ｐＤＢ３的ＸｂａⅠ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有３个抗性基因的双抗植物表达载体ｐＤＢＴ．     

昆虫抗菌肽基因的合成及克隆

设计并合成了昆虫抗菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ）Ｂ 基因,合成的抗菌肽Ｂ 基因全长１３２个碱基对,克隆到ＰＵＣ１９ 载体上,经过ＤＮＡ 序列分析证实,合成的基因序列与设计的序列完全一致。     

抗菌肽的应用及展望

抗菌肽（Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｐｅｐｔｉｄｅ）是昆虫体内经诱导而产生的一类具有抗菌活性的碱性多肽物质，它有Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ等多种结构。抗菌肽具有广谱的杀菌活性，它具有分子量小、热稳定、水溶性好，以及材料来源丰富等优点。更为重要的是抗菌肽对正常的真核细胞几乎没有作用，仅仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞，抗菌肽具有广谱的杀菌活性，不仅作用于革兰氏阳性细菌，而且也作用于真菌、昆虫、某些病毒和肿瘤细胞，同时还能加速免疫和伤口的愈合过程。１抗菌肽在基因工程上的应用抗菌肽基因的化学合成方面在国内…     

中国家蚕抗菌肽基因的PCR扩增,克隆和序列测定

本实验采用ＰＣＲ技术，扩增中国家蚕抗菌肽ｃｅｃｒｏｐｉｎＢ基因片段，并以ＰＵＣ１９质粒为载体，将该基因片段转化到大肠杆菌中。从筛选得到的阳性克隆中分离出ｃｅｃｒｏｐｉｎＢ基因，测定其序列，并由此推导出氨基酸序列。结果表明：（１）抗菌肽ｃｅｃｒｏｐｉｎＢ基因片段长为８６６ｂｐ，包括７３ｂｐ的ＥｘｏｎＩ，５５６ｂｐ的Ｉｎｔｒｏｎ，８７ｂｐ的ＥｘｏｎⅡ和１５０ｂｐ的３’端非编码区。其中，非内含子部分的碱基序列与已克隆的日本家蚕的两个ｃｅｒｏｐｉｎＢｃＤＮＡ序列比较，同源性分别为８７．５％和９５％；（２）推导出的成熟抗菌肽由３７个氨基酸残基组成，其氨基酸序列与日本家蚕和天蚕的氨基酸序列相比较，同源性为９１．９％和８０．６％。     

抗菌肽Shiva A基因导入杂交水稻恢复系明恢63的初步研究

利用农杆菌介导法将抗菌肽Ｓｈｉｖａ Ａ 基因导入杂交水稻恢复系明恢６３ 成熟胚诱导的愈伤组织中，并再生植株。经ＰＣＲ检测分析证明Ｓｈｉｖａ Ａ 基因已整合到再生植株的基因组中。     

转基因水稻目的性状稳定性的研究

本文根据分子杂交的证据,确认转基因水稻株以后,用人工接种白叶枯病病菌的办法,从转入抗菌肽 Ｂ（ Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ） 基因的水稻种子后代中筛选出抗性植株。连续３ 年,用人工接种病原菌的办法检测抗性植株有性后代的抗病性。结果表明,转基因水稻有性后代的目的性状（ 抗白叶枯病） 并不一致,出现敏感、中感、中抗等分离,而从有性后代中选出中抗植株后,中抗株的有性后代能保持目的性状的稳定性。     

转基因水稻目的性状稳定性的研究

本文根据分子杂交的证据,确认转基因水稻株以后,用人工接种白叶枯病菌的办法,从转入抗菌肽Ｂ基因的水稻种子后代中筛选出抗性植株。连续３年,用人工接种病原菌的办法检测抗性植株有性后代的抗病性。结果表明,转基因水稻有性后代的目的性状（抗白叶枯病）并不一致,出现敏感,中感中抗等分离,而从有性后代中选出中抗植株后,中抗株的有性后代能保持目的性状的稳定性。     

转Bar基因水稻的应用现状与前景

目前，科学家正在利用分子生物学和遗传学在杂草科学应用上的最新成果，通过生物技术将抗除草剂基因（Ｂａｒ）转入优良恢复系，与不育系配组选配抗除草剂强优超净杂交稻，以解决水稻杂种纯度和提高杂种优势的问题。一、转Ｂａｒ基因水稻的研究现状１草丁膦的毒害机理和Ｂａｒ基因的抗性机理草丁膦是低毒、广谱的有机磷类除草剂。它被植物吸收后，能强烈抑制谷酰胺合成酶（ｇｌｕｔａｍｉｎｅｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ，ＧＳ）的活性，导致细胞内氨的迅速积累。进而抑制光合反应，减少跨膜ｐＨ梯度，使光合磷酸化解偶联，随之叶绿体结构解体，最…     

对虾抗菌肽Penaeidins的研究进展

抗菌肽广泛存在于自然界中，在寄主先天性免疫机制中占有重要地位。尽管已经对其他节肢动物(包括昆虫和螯肢动物)体内的大量抗菌肽进行了研究鉴定，对甲壳动物体内分离出来的抗菌肽的研究报道却较少。Penaeidins是从南美白对虾血液中分离出来的一组抗菌肽。本文介绍了Penaeidins的结构、抗菌属性、免疫功能以及受到微生物刺激时Penaeidin基因的表达和Penaeidins的分布，并且对Penaeidins以及其他抗菌肽在水产动物疾病防治中的应用前景进行了展望。     

亲和层析法提纯鸡马立克病毒gB基因重组产物

应用针对鸡马立克病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）抗原单克隆抗体ＩＡＮ８６制备亲和层析柱，从感染重组杆状病毒（ｇＢ－ＡｃＮＰＶ）的昆虫细胞中提纯鸡ＭＤＶｇＢ基因重组产物，获得较好效果。提纯的蛋白质在ＳＤＳ－ｐＡＧＥ中出现的５条条带中有４条在免疫印迹试验中出现，其分子量为１００，６０，４９，４０ｋｄ占蛋白总量的５４．７％。试验证明用单克隆抗体亲和层析法提纯ＭＤＶｇＢ基因重组产物是一个行之有效的方法。     

水稻敏感性,矮生性调控机理研究连报（I）：携不同矮秆基因水稻…

以高秆水稻品种百叶籼（对照）及不同矮秆基因的水稻半矮秆品种为材料，研究了其幼苗对ＧＡ３，ＡＢＡ，ＩＡＡ的反应。结果显示，携有ｓｄ－１ｓｄ－１矮秆基因的水稻幼苗对ＧＡ３的敏感性强于携有ｓｄ－ｇｓｄ－ｇ矮秆基因的材料，对ＡＢＡ的敏感性无明显差异，携有ｓｄ－１ｓｄ－１ｓｄ－ｇｓｄ－ｇ矮秆基因的双矮对ＡＢＡ，ＩＡＡ的敏感性均较弱，在控制苗高对ＧＡ３的敏感性方面，ｓｄ－ｇ对ｓｄ－１可能具上位作用。     

水稻细菌性条斑病的抗性遗传

选用４个水稻品种Ａｃｃ８５１８、Ａｃｃ８５５８、Ｈ３５９及建农８号，配制Ｆ１、ＢＣ１、ＢＣ２和Ｆ２等世代，研究了水稻对细菌性条斑病的抗性遗传．结果表明，水稻对细条病的抗性与细胞质无关，属多基因控制的数量性状，符合简单的加性模型，基因的效应为积加作用，具有较高的广义和狭义遗传力     

抗菌肽B基因合成与在植物表达载体中的克隆

设计了两条引物（Ｆ１：７５ｂｐ、Ｆ２：７５ｂｐ）,用ＰＣＲ扩增的方法合成惜古比天蚕抗菌肽基因Ｂ（ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ）、包括两侧的酶切点、保护基团全长为１３２个碱基。经测序分析证实合成的结构基因与原序列一致。将此基因克隆到植物表达载体ＰＢ１１２１上。     

应用低能离子束将抗菌肽ShivaA基因导入恢复系明恢63的研究(简报)

利用低能离子束介导转基因法于 1993年首次获得成功 ,本研究通过这一技术将抗菌肽ShivaA基因导入水稻恢复系明恢6 3成熟胚中 ,经过诱导愈伤和绿苗分化 ,并再生植株 ,经PCR检测分析证明外源基因已整合到再生植株基因组中。     

抗菌肽在水稻抗病研究中的应用

抗菌肽是生物体抵御外来入侵病菌的一系列短肽,在生物界中广泛存在。抗菌肽具有广谱杀菌活性及不易引起病原微生物产生耐药性等优点,可以显著提高动植物的抗病能力。总结了抗菌肽的生物学特性、分类与作用机制,重点介绍了几种不同来源的抗菌肽在水稻白叶枯病、稻瘟病及纹枯病等病害防治方面的应用研究进展,并提出了存在的问题和发展建议。     

转Bt基因水稻对稻飞虱及蜘蛛种群数量的影响

近年来转基因作物种植面积的迅速增加 ,引起了全世界的普遍关注。人们在肯定其积极意义的同时 ,对转基因作物对环境安全性和非靶标生物的影响则更为关心[1～5] 。转基因水稻在我国已经进入了田间试验阶段 ,预计在不久的将来会大面积推广 ,对其安全性评价已在各个方面开展。笔者在进行转Ｂｔ基因水稻抗虫性田间测定工作的同时 ,观察了转基因水稻对非靶标昆虫稻飞虱和水稻害虫的主要天敌蜘蛛种群数量的影响 ,现将结果整理如下。1　材料与方法1 .1　供试水稻1 999年转Ｂｔ基因水稻品种为转Ｂｔ明恢 63(简称ＭＨＢｔ)、转Ｂｔ汕优 63(ＳＹＢｔ) …     

水稻花粉管通道法导入含Xa21总基因的研究简报

采用花粉管通道法，将含Ｘａ２１基因（广谱抗白叶枯病基因）的水稻（ｏｒｙｚａｓａｚｔｉｖａ）品种１１８８的总ＤＮＡ及ＰＢＩ１２１质粒ＤＮＡ导入丙１０６７、宁６７、繁７、宁波２号，２９３，浙７３３和舟９０３等七个品种（系）收获转基因的当代水稻种子并进行大田选育，将外源ＤＮＡ含有ＰＢＩ１２１的转化处理后代种子发芽，在１４天苗龄时分别提取水稻幼苗总ＤＮＡ而后经多种限制性内切酶酶切，并以ｇｕｓ基因片段为探讨     

早稻转bar基因效果研究初报

以孀交早稻恢复系测早２－２、Ｒ４０２、Ｍ３１、２６７１５和早稻浙９２４８、浙７３３、浙辐４９、中早１１等为轮回亲本，转育抗除草剂Ｂａｓｔａ的ｂａｒ基因水稻。结果表明，以轮回亲本为母本，对除草剂Ｂａｓｔａ非稳定性抗性的转基因供体Ｂ１、Ｆ３－２７２、Ｂ３Ｆ１为父李配制转育ｂａｒ基因组合，后代Ｆ１水稻植株抗除草剂Ｂａｓｔａ较少，转育效果较差。对除草剂Ｂａｓｔａ具有稳定抗性的纯系或轮回亲本为父本，配制转育