植酸酶体外降解米糠粕中植酸的工艺研究

为研究米糠粕中植酸体外降解的最适酶解条件,本试验以植酸降解率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用四因素三水平的正交试验,研究了植酸酶对米糠粕中植酸降解的工艺条件.结果表明:3种植酸酶中,植酸酶3对米糠粕中植酸的降解效果最好,酶解pH、酶解温度、酶解时间均是影响植酸降解率的极显著因素,酶添加量是影响植酸降解率的显著因素...     

植酸酶活性测定应注意的几个问题

1温度植酸酶作为一种酶制剂,对温度非常敏感,温度低会降低它的生物活性;温度高也会降低其生物活性,甚至完全失活。因此,在检测过程中对温度的控制则显得非常重要,国标要求植酸酶活性测定时的温度为(37±0.1)℃。在33℃时植酸酶不能很好地发挥其活性,酶活与其真实值相比约低10%;     

无淀粉麦麸为底物体外植酸酶活性评价方法的建立

为提高体外检测方法的科学性和客观性,预测植酸酶在动物体内的活性和作用效果,研究以无淀粉麦麸为底物,探索并建立了一种更为客观评价植酸酶活性的检测方法.与现有的植酸酶酶活测定国家标准相比,在不同pH值的缓冲液中检验植酸酶降解天然植酸的效果,具有更为科学、客观与简便等优点.     

植酸酶在不同反应条件下对大口黑鲈饲料中植酸磷降解率的影响

在大口黑鲈饲料中添加不同水平植酸酶(500、1000、1500U/kg),研究在不同反应时间、温度和pH值条件下饲料中植酸磷的降解率的变化。结果显示,植酸磷的降解率与植酸酶添加量的关系为1500U/kg>1000U/kg>500U/kg。饲料中添加500U/kg植酸酶可分解70%左右的植酸磷,添加1000U/kg植酸酶可分解85%左右的植酸磷,添加1500U/kg植酸酶可分解93%左右的植酸磷。1500和1000U/kg组植酸磷的降解率在催化3h后基本趋于平缓,500U/kg组植酸磷降解率在催化4h后趋于平缓。在20～40℃范围内,植酸磷的降解率随催化温度的升高而增加。在pH值1.5～6.5范围内,植酸磷降解率有两个高峰点,分别出现在pH值为2.5与5.5,在pH值为6.5时,各组饲料中植酸磷的降解率最低。在大口黑鲈饲料中添加植酸酶是可行的。     

NSP酶对植酸酶降解植酸效率影响的报告

本试验旨在研究NSP酶对植酸酶降解植酸效率的影响。试验以肉鸡常用豆粕为研究材料,设6个处理,试验Ⅰ为对照组,不添加任何酶制剂,试验Ⅱ组添加0.5FTU/g植酸酶,试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别在试验Ⅱ日粮基础上添加纤维素酶20U、果胶酶20U、木聚糖酶20U、复合酶（7U纤维素酶＋7U果胶酶＋7U木聚糖酶）,比较不同处理植酸磷的释放量。结果表明：与不添加任何酶比较,添加植酸酶、植酸酶＋纤维素酶、植酸酶＋果胶酶、植酸酶＋木聚糖酶、植酸酶＋纤维素复合酶对豆粕中植酸磷的降解率分别提高了36.98%、37.06%、37.67%、38.20%和38.28%。与仅添加植酸酶比较,植酸酶＋纤维素酶、植酸酶＋果胶酶、植酸酶＋木聚糖酶、植酸酶＋纤维素复合酶对豆粕中植酸磷的降解率分别提高了0.10%、0.87%、1.55%、1.64%。此结果说明,NSP酶能够提高植酸酶降解植酸的效率。     

植酸酶对大豆分离蛋白中植酸的酶解研究

在不同的温度、ｐＨ 值、酶量的情况下，用目前常用的一种植酸酶在体外酶解大豆分离蛋白中的植酸， 采用间接测铁法测定酶解前后样本中植酸的含量， 从而得出该植酸酶在不同条件下酶解植酸的活性。在温度为５５℃、ｐＨ 值为２．５ 或５ ．５ 的条件下最强。在此条件下，当酶使用量为１ ５００Ｕ／ｋｇ ，酶解时间为４５ｍｉｎ 时，能将大豆分离蛋白中的植酸分解率达到８０．８４ ％ 。从中揭示了所使用的植酸酶在不同条件下的酶活规律，为有效使用该植酸酶于不同的动物饲料提供了依据。     

饲用植酸酶酶活测定过程中底物的影响研究

参照国标法测定饲用植酸酶活性,研究不同来源的底物植酸钠、底物浓度、底物pH对饲用植酸酶活性的影响。结果表明,以P8810为代表的植酸钠盐水合物作为底物,其测定出的植酸酶酶活显著高于使用以P3168为代表的植酸钠作为底物所测定的植酸酶酶活。以P8810作为底物时,其反应浓度在高于6.6 mmol/L时,会产生底物抑制效应。以P8810作为底物时,调节底物pH至国标中定义的5.5与未调节pH所测得的植酸酶酶活相比较,差异并不显著,且在低底物pH条件下,某些植酸酶同样能够释放出最大催化活性。因此现有的国标法测定饲用植酸酶活性已与实际应用有一定的差别,不能照搬国标方法测定现有饲用植酸酶产品。     

肉仔鸡日粮中植酸酶、钙、磷浓度对植酸磷水解的影响

以饲喂玉米-豆粕基础日粮的21日龄肉仔鸡为研究对象,通过3个连续5 d的试验,研究微生物植酸酶对表观植酸磷(PP)水解的影响。试验1:在玉米-豆粕基础日粮(Ca 0.7%,TP 0.4%,NPP 0.12%)中分别添加0、250、500,750、1000、1500、2000和5000 FTU/kg的植酸酶,植酸磷水解率分别达到43.12%、68.12%、74.7%、85.02%、85.25%、92.77%、96.91%和99.45%。试验2:在肉仔鸡玉米-豆粕基础日粮(Ca 0.5%,PP 0.17%)中不添加植酸酶,分别添加0.08%、0.13%、0.18%、0.23%、0.28%、0.33%、0.38%和0.45%NPP,植酸磷水解率分别为8.5%、27.6%、26.4%、28.9%、26.3%、17.1%、21.0%和27.7%。肉仔鸡饲喂相同日粮(Ca 0.5%,分别添加不同剂量的NPP),并添加1000 FTU/kg的植酸酶,可以使植酸磷水解率显著增加(P<0.05)到80.9%、75.9%、73.5%、72.2%、68.4%、71.6%、58.3%和62.5%。试验3:除将Ca提高到0.9%外,其他和试验2的方式相同。不添加植酸酶的条件下,添加0.08%、0.13%、0.18%、0.23%、0.28%、0.33%、0.38%和0.45%NPP时植酸磷水解率分别为49.2%、19.6%、16.0%、8.0%、9.4%、2.1%、4.0%和4.2%。添加植酸酶使植酸磷的水解率显著提高(P<0.05)到85.3%、76.1%、70.0%、76.1%、62.6%、68.6%、67.4%和63.7%。这些研究结果表明,当日粮补充高浓度植酸酶(5000 FTU/kg)时,可以水解几乎所有的植酸磷(99.45%),但补充1000 FTU/kg植酸酶可获得最高的总磷存留量。补充1000 FTU/kg植酸酶时,日粮NPP的浓度越低(0.08%),植酸磷的水解率越高。这些数据也表明,与不添加植酸酶的低Ca(0.5%)日粮相比,饲喂高Ca(0.9%)日粮的肉仔鸡体内P的生理阈值较高。     

植酸酶基因在嗜酸乳杆菌中的表达

植酸酶和嗜酸乳杆菌是重要的饲料添加剂,为获得产植酸酶的嗜酸乳杆菌菌株,克隆了大肠杆菌植酸酶基因,构建表达载体并转化嗜酸乳杆菌,对重组嗜酸乳杆菌进行发酵产酶并测定所产酶液的酶学性质,进一步研究重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及植酸酶液的抗蛋白酶活性。结果表明：重组嗜酸乳杆菌发酵24 h植酸酶活性为984 U/mL,植酸酶的最适催化pH为4.5,最适催化温度为60℃。重组嗜酸乳杆菌在pH 2.0～4.5有一定的耐酸性,在pH 2.0条件下2 h的存活率为76.4%。植酸酶液用胃蛋白酶处理160 min后植酸酶液剩余85%的相对酶活,用胰蛋白酶处理160 min后剩余29%的相对酶活。上述研究结果为重组嗜酸乳杆菌后续应用研究提供了重要依据。     

6种商品植酸酶对热和pH的耐受性比较

本试验测定了六种商品植酸酶(A、B、C、D、E和F)分别在不同的温度和pH条件下的酶活性,以比较这6种商品植酸酶对不同温度和pH的耐受性。试验结果表明,A、B、C、D、E和F等6种植酸酶产品经40℃水浴处理15h后残留的相对酶活分别为88%、83%、93%、76%、51%和43%;经80℃水浴处理1min后残留的相对酶活分别为97%、96%、69%、84%、67%和98%;经95℃水浴处理5min后残留的相对酶活分别为83%、76%和22%;在偏离pH5.5时,6种植酸酶的相对酶活均呈大幅下降,其中在pH6.0时均下降到60%以下,在pH2.0时分别下降至43%、42%、24%、30%、45%和52%。     

植酸酶对五种常用饲料原料中植酸磷降解效率的研究

为了研究2种来源的植酸酶对5种常用饲料原料中植酸磷的体外降解效果,试验采用体外试验方法,在温度37℃和p H值5.5条件下,在5种原料中分别添加相同剂量不同来源的植酸酶。结果表明:不同饲料原料中植酸磷含量差异较大,2种植酸酶水解玉米、豆粕、棉粕和麸皮240 min降解率均差异不显著(P0.05),植酸酶Ⅰ水解菜籽粕240 min降解率极显著高于植酸酶Ⅱ(P0.01)。说明毕赤酵母源植酸酶降解5种饲料原料中植酸磷的总体效果优于大肠杆菌源植酸酶。     

饲料中植酸酶活性检测方法的比较与研究

<正>植酸酶是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶。植酸酶具有特殊的空间结构,能够依次分离植酸分子中的磷,将植酸(盐)降解为肌醇和无机磷,同时释放出与植酸     

植酸酶磷当量的研究

<正>1植酸酶活性与磷当量之间的关系酶活指酶催化其底物能力的大小,通常用活力单位来表示。目前国际上通用的植酸酶酶活定义为37℃及pH值5.5的条件下,1min内从5.1mmol/l的植酸钠溶液中水解1μmol无机磷所需要的酶量为一个酶活单位。所谓当量关系就是不同物质之间针对某一共     

国标法测定植酸酶活性存在问题的探讨

利用国标法测定植酸酶活性过程中发现,植酸钠底物溶液pH为6.48,高于酶活性单位定义中pH5.5。为进一步探讨植酸钠底物溶液pH对植酸酶活性的影响,本试验研究了调节与不调节植酸钠底物溶液pH对样品空白的吸光值以及植酸酶活性的影响。结果表明:将植酸钠溶液pH由6.48调至5.5对酶活测定中的样品空白无显著影响(P>0.05),但极显著影响植酸酶活性(P<0.01),未调节pH组植酸酶活性仅相当于调节pH组的66%,利用不同的酸调节植酸钠溶液pH,对植酸酶活性无显著影响(P>0.05)。     

吸附剂膨润土对植酸酶活性的影响

在水溶液中研究了不同酶加入量、作用时间、pH、热处理条件下，膨润土对植酸酶活性的影响。结果表明，膨润土对植酸酶活性无破坏作用；在植酸酶一般添加量时，膨润土有催化酶活性作用，随着酶加入量增加膨润土对释放的磷有吸附作用，这种吸附作用不受作用时间影响，随着pH值升高吸附减少；在80℃湿热处理时，膨润土对酶活性有保护作用。     

植酸酶在肉仔鸡消化道内环境下活性变化的体外研究

本研究在体外条件下对肉仔鸡消化道内pH环境以及蛋白质水解酶对黑曲霉植酸酶活性的影响进行了研究。结果表明,该植酸酶为酸性植酸酶,最适pH为5.5。该植酸酶对pH环境和蛋白质水解酶较为敏感。当环境pH远离其最适pH时其活性迅速下降,且大部分酶活损失发生在30 min内,然后趋于稳定。在pH3.0和pH6.0条件下,加入胃蛋白酶和胰酶后,植酸酶活性亦进一步迅速降低,然后趋于稳定,但与胃蛋白酶相比,胰酶对植酸酶活性的影响更大。从植酸酶在14、28和42日龄肉仔鸡胃和小肠稳定性的研究可以看出,植酸酶在胃存留率分别为42%、40%和49%,在小肠内的存留率仅19%。植酸酶在胃内的稳定性好于小肠,小肠内环境不利于植酸酶存活。植酸酶活性受肉仔鸡消化道pH和蛋白酶的影响较大,这可能是影响植酸酶作用效果的主要因素之一。     

液体植酸酶的稳定性研究

此文研究了液体植酸酶在不同贮存温度下的酶活稳定性,以及不同稀释倍数和调节稀释后酶液的pH时液体棱酸酶的活性和物理性状的影响,同时探讨了液体植酸酶与液体木聚糖酶复配的稳定性能。试验结果表明：液体植酸酶在低温下贮存酶活稳定性较好;不同稀释倍数对液体植酸酶活性无明显影响,但稀释倍数较大显著影响？植酸酶溶液的物理性状;通过调节稀释后的植酸酶溶液的pH可以显著改善其物理性状。此外,与液体木聚糖酶复配无论是复配后酶液蛇活性还是其物理性状均具有很好盼稳定性。     

响应面法优化产植酸酶黑曲霉L2-2的培养基和培养条件

采用中心组合设计和Box-Behnken设计,分别对影响植酸酶产生菌L2-2培养基主要成分和培养条件进行优化,经响应面分析,得到培养基中的3个因素葡萄糖、硫酸铵、植酸钠的最佳组合为:葡萄糖2.57%,植酸钠0.24%,硫酸铵0.30%;培养条件中的3个因素pH、温度、发酵周期的最佳组合为:pH 5.6,温度31.1℃,发酵周期112.8 h。经优化后,黑曲霉L2-2的植酸酶酶活可达15.73 U/mL。     

瘤胃微生物植酸酶的分类与酶学性质研究进展

反刍动物能很大程度上依靠瘤胃微生物来消化利用饲料中的植酸盐,但目前国内有关瘤胃微生物植酸酶的研究报道较少.本文对瘤胃微生物植酸酶的主要来源和活性进行了综述分析,发现主要有5种瘤胃细菌能分泌植酸酶,其中,反刍兽新月形单胞菌(Selenomonas ruminantium)分泌的植酸酶活性最高(199.1～703.6 U·mL-1)；根据酶促反应的最适pH和催化机理,可将瘤胃微生物植酸酶分别归类为酸性植酸酶和半胱氨酸磷酸酶植酸酶；根据植酸酶水解植酸时的立体专一性,发现瘤胃微生物植酸酶中可能同时存在3-植酸酶和5-植酸酶2类植酸酶.最后本文论述了瘤胃微生物植酸酶酶促反应动力学特性,发现反刍兽新月形单胞菌植酸酶的最适pH为4.0～5.5、最适温度为50～55℃、对植酸和ATP表现出较强的活性；埃氏巨形球菌植酸酶的最适pH为5,0、最适温度为60℃、仅对植酸表现出活性.     

固态发酵饲用植酸酶酶活的快速测定法

植酸酶是近年来新出现的饲用酶制剂,在提高饲料的营养价值和改善生态环境等方面均发挥积极的作用.植酸酶酶活的测定方法很多,但大多比较烦琐,操作时间较长.笔者通过实验发现采用FeSO4--钼蓝法测定饲用植酸酶的酶活比较快速、简便,并且具有较好的准确度 .该方法是利用植酸酶水解植酸盐释放无机磷,通过加入盐酸或10%三氯乙酸(TCA)使水解反应停止,然后加入钼酸铵和FeSO4.7H2O混合液起显色反应,在750 nm下测定其吸光度,以标准磷酸溶液为参照,间接计算被测样品中植酸酶的含量.