丰花月季再生体系的建立

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导及植株再生的研究。结果表明,丰花月季诱导愈伤组织最佳激素浓度配比是1/2MS+2,4D 5 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;所得到的愈伤组织在MS+6-BA1 mg.L-1+2,4D 2.5 mg.L-1+GA3 1 mg.L-1的培养基上继代保存两个月后于MS+NAA 0.02 mg.L-1+TDZ 1.8 mg.L-1+KT1 mg.L-1上分化出不定芽;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg.L-1上的生根率为91.25%。     

粉和平月季植株再生体系建立研究

以试管苗的幼嫩小叶为外植体,探讨了粉和平月季通过诱导愈伤组织建立植株再生体系的方法。结果表明:2,4-D能有效诱导无菌小叶产生愈伤组织,经5.0mg/L的2,4-D光下诱导愈伤20d后,愈伤组织诱导率最高可达91.11%,且其愈伤质量最优。将生长良好的愈伤组织转至TDZ浓度为0.5～2.0mg/L的MS培养基中发现,暗培养8～16d均能诱导愈伤组织产生不定芽,但暗培养时间超过16d愈伤组织容易褐化死亡。在含1.2mg/LTDZ的MS培养基上暗培养14d后其不定芽诱导率可达30%。将生长良好的不定芽转入壮苗培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L中培养25d左右,组培苗芽枝叶粗壮,生长旺盛;将长至2～3cm长的健壮小苗转入生根培养基,生根率最高仅为8%。     

大花香水月季的授粉率及花粉管生长途径

 研究大花香水月季雌蕊群的授粉率及花粉管生长途径,为其育种应用及资源保护提供依据。显微观察统计大花香水月季花期雌蕊群的授粉效率,荧光显微观察花粉管生长途径。结果表明：花朵萼片平行伸展后120h,柱头授粉率接近100%,单柱头花粉量达最大值为（84.20±5.8）粒;自萼片自然伸展48h时柱头上少量萌发,72h后花粉管伸长至花柱中下部,90h后观察到有花粉管进入子房。大花香水月季单花雄蕊（129±20）枚,雌蕊（30±5）枚,开放持续5～7d;花粉自萌发至花粉管进入胚珠需要30～40h。     

黄和平月季植株再生体系建立研究

以试管苗的幼嫩小叶为外植体,探讨了黄和平月季通过愈伤组织建立植株再生体系的方法.结果表明:2,4-D能有效诱导无菌小叶产生愈伤组织,经5.0 mg/L 2,4-D光下诱导20 d后,愈伤组织诱导率最高可达93.33%,且其愈伤质量优.将生长良好的愈伤组织转至TDZ 0.5～2.0 mg/L的MS培养基上,发现黑暗培养8～16 d均能诱导愈伤组织产生不定芽,但暗培养时间为16 d时,愈伤组织容易褐化死亡.在含1.2 mg/L TDZ的MS培养基上黑暗培养12 d后其不定芽诱导率可达87.33%,而光下培养时愈伤组织有生根现象,未能产生不定芽.     

香水百合再生体系的建立

[目的]探讨不同外源激素水平对香水百合小鳞茎分化、增值及不定根形成的影响,为其再生体系的建立奠定技术基础。[方法]取香水百合鳞叶为外植体,探讨不同植物生长调节剂组合对其离体培养中愈伤形成、不定芽分化、增值、不定根形成的影响,并对试管苗移栽技术进行研究。[结果]香水百合小鳞茎分化与增值培养以MS+0.5～1.0 mg/L 6-BA+0.1～0.3 mg/L IAA效果好,分化率达78.5%以上,增值率可达5.6以上;生根以1/2 MS+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA或1/2 MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1～0.3 mg/L NAA或1/2 MS+0.1 mg/L 6-BA+0.8 mg/L IBA效果好,生根率可达96.0%;在泥炭∶珍珠岩=1∶1的基质中驯苗,成活率可达96.3%。[结论]香水百合离体培养技术的研究对其规模化快速育苗及进一步利用基因工程技术实现香水百合遗传转化具有重要意义。     

大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。     

大花蕙兰高频再生体系的建立

以大花蕙兰的不同部位作外植体,对其启动诱导;采用正交试验设计等方法筛选大花蕙兰类原球茎诱导、增殖与生根壮苗的最佳培养基。结果表明:在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,在1/2MS NAA 1.0 mg/L GA31.0 mg/L 香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。     

大花香水月季不同基质绿枝扦插比较试验

在大花香水月季绿枝扦插繁殖中,为了选择一种最佳基质,本试验以细沙、锯木屑、细炉灰渣、蛭石、珍珠岩5种基质组成不同配比进行绿枝扦插比较试验.通过比较扦插苗的生根率、根长、根重、根粗等生根状况指标及幼苗的叶绿素含量、根系活力、可溶性糖含量等生理指标,结果得出处理2(细炉灰渣:细沙=1:1)各种生根状况指标均较好,处理2(细炉灰渣:细沙=1:1)和处理3(蛭石:细沙=1:1)的生理指标均较好.最后综合得出处理2(细炉灰渣:细沙=1:1)最适合作为大花香水月季扦插繁殖基质.     

月季体胚诱导和植株再生的研究

以丰花月季品种"红帽子"叶片为试材,研究了不同植物生长调节剂及暗培养时间对月季体胚诱导和植株再生的影响。结果表明,在5 mg/L 2,4-D的MS培养基上光下培养,20 d的愈伤组织诱导效果最好,诱导率达98%;在MS 1.2 mg/L TDZ 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L的培养基上暗培养8 d后转入光下培养,体胚诱导率为33.3%,植株再生率为16.7%,暗培养时间超过8 d,外植体易形成愈伤组织而不利于体胚的分化。     

大花香水月季(Rosa odorata var. gigantea)茎段组织培养的抗褐化研究

以大花香水月季(R. odorata var. gigantea)单芽茎段为外植体,研究了不同培养基、抗褐化剂以及不同时长黑暗低温预处理对组培过程中褐化的影响。结果表明:WPM培养基为适合的基本培养基;添加有3 g/L活性炭(AC)的培养基中褐化率降至最低的9%,但外植体萌发率远低于2 g/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)下的78%,硝酸银(AgNO3)未达到预期效果;24 h的黑暗低温预处理可减轻褐变。试验表明:大花香水月季外植体于4℃下黑暗低温处理24 h后,接种于含有2 g/L PVP的WPM+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上,3周后褐化率为15%,萌发率可达83.3%。     

紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立及其影响因子的研究

 对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行了系统研究。经筛选获得了以改良的SH大量元素 +MS微量元素及铁盐 +水解酪蛋白 +VB19.9mg·L-1+VB69.5mg·L-1+尼克酸 4 .5mg·L-1+琼脂 8g·L-1为基本成分的愈伤成苗高频再生体系。其中 ,诱导愈伤和保持愈伤的培养基加 2 .0mg·L-12 ,4 -D +0 .0 2 5mg·L-1KT ;诱导再生植株分化的培养基加 0 .4mg·L-1KT +2 0g·L-1的蔗糖 ;诱导生根的培养基为 1/ 2MS ,其中蔗糖浓度为 10 g·L-1。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 10 0 % ,下胚轴愈伤组织分化率达 92 %以上。以该体系完成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速的特点 ,完成植株再生仅需 6 0～ 70d。     

6-BA浓度对红色大花月季愈伤组织诱导的影响

以红色大花月季不带芽茎段为外植体,研究了不同浓度6-BA对红色大花月季愈伤组织诱导的影响。结果表明,适宜浓度的6-BA对愈伤组织的诱导率、生长量和产生速率都有明显的促进作用;6-BA浓度为1.5 mg/L时,愈伤组织的诱导率和生长量均达到最高,分别为94%和0.9706 g/瓶;红色大花月季愈伤组织诱导的最佳诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

香水月季类原球茎(PLBs)途径再生植株的研究

以香水月季(Rosa odorata)的嫩叶为外植体,采用MS基本培养基,添加不同质量浓度的2,4-D、TDZ和IBA,研究了类原球茎再生植株的效果.主要步骤如下:1)嫩叶在MS 2,4-D1.0 mg/L 蔗糖30 g/L Gelrite 3 g/L培养基上暗培养4周,愈伤组织诱导率达100%,愈伤组织上的类根体(rhizoid)发生率最高,生成率可达71%.2)类根体在含TDZ的培养基(1/2 MS TDZ 13 mg/L 蔗糖30 g/L Gelrite 3 g/L)上,分化成类原球茎柬,诱导率达71.0%,平均类球茎束为2.1.3)类原球茎在含IBA的培养基(Ms BA 2.0 mg/L IBA 0.01 mg/L GA 3 0.1 mg/L 蔗糖30 g/L Gelrite 3 g/L)上,发育出小植株,萌发率为29.3%;不能萌发的类原球茎上有白色假珠芽产生.白色珠芽可进行增殖、脱分化、再分化出芽,其植株再生率为46.7%.4)再生苗的生根培养基为1/2MS NAA 0.2 mg/L 蔗糖30 g/L 琼脂6 g/L,生根率为100%.5)小苗经驯化后移栽到灭菌草炭土:蛭石(体积比为1:1)基质上,成活率为95%.     

高粱幼穗离体培养再生体系的建立

6个基因型的高粱幼穗接种于YD10、L2、YLMDS和MS1诱导培养基,结果在MS1培养基上6个基因型的幼穗都诱导出愈伤组织,05DL15A诱导率最高为96.0%,四杂40诱导率最低为27.5%。获得的淡黄色颗粒状愈伤组织分化出不定芽,不定芽高8cm左右转入生根培养基再生植株。     

结缕草高效再生体系的建立

为了获得结缕草的转基因再生植株,从而利用转基因技术改造结缕草,建立草坪草的遗传转化体系,研究了不同培养基、激素浓度及光照条件对结缕草愈伤组织诱导、分化和植株再生的影响,建立了结缕草再生体系。结果表明,在愈伤组织诱导阶段,不同培养基(MS培养基和NB培养基)在同一激素质量浓度下,愈伤组织诱导率差别不大;而同一培养基不同激素浓度间愈伤组织诱导率存在一定差别,以添加2 mg/L的2,4-D处理诱导率较高;光培养和暗培养条件下愈伤组织诱导率差别不大。在愈伤组织的分化阶段,MS培养基远远优于NB培养基,MS培养基上愈伤组织有60%～70%能产生胚性愈伤并得到再生植株,而NB培养基上愈伤组织全部变成绿色的硬块状,并伴随许多毛状根生成,最终不能得到再生植株;暗培养条件下愈伤组织的分化率(55%)和植株再生率(47%)大大高于光培养(10%,7%)。     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

辣椒组织培养再生体系的影响因素研究

以早熟辣椒、红线辣椒、茄门大辣椒(绿辣椒)3个品种为材料,研究了辣椒组织培养再生体系的影响因素。结果表明:红线辣椒为最佳基因型,辣椒离体再生最适外植体为茎段、子叶。诱导茎段愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA;子叶愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L6-BA+4.0 mg/L NAA;高效不定芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;高效不定根分化培养基为MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

马铃薯品种"大西洋"高效再生体系的建立

以马铃薯品种“大西洋”为试材,进行了叶片和茎段的离体再生研究。结果表明,叶片与茎段愈伤组织最佳诱导培养基分别为MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.3 mg/L和MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.2 mg/L,诱导率均达100%。叶片与茎段愈伤诱导不定芽分化的最佳培养基分别MS＋6 BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋GA35.0 mg/L和MS＋6 BA2.0 mg/L＋NAA0.05 mg/L＋GA35.0 mg/L,不定芽分化率分别达100%和80%。诱导试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋0.2 mg/LNAA,生根率为100%,试管苗移栽成活率为91%。