近交系小鼠的遗传监测

近交系小鼠在医学与生物学研究领域占重要地位。近交系小鼠遗传质量影响着相关实验的可信度，监测方法主要包括：一般形态学标记、细胞遗传学标记、免疫学标记、生物化学标记和分子生物学标记等。一般形态学标记、细胞学标记、免疫学标记和生物化学标记都是外在表现型或者遗传物质载体的监测，易受外界因素干扰，并且不能覆盖全部染色体。分子生物学标记包括：限制性片段长度多态性、DNA指纹、随机遗传扩增DNA多态性和串联重复序列。分子生物学标记虽基于DNA水平进行监测，但目前尚无标准遗传背景图可供参考。为高速发展的现代医学服务急需建立标准遗传背景图谱。     

利用RAPD标记分析近交系小鼠的遗传多态性

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）标记，分析了BALB／c、57BL／6、DBA／2、C3H／He近交系小鼠的遗传多态性。结果表明，上述小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记；RAPD可作为近交系小鼠的分子标记， 在DNA水平区别4种近交系小鼠。     

豫医无毛小鼠遗传特性

通过时遗传规律、G带核型、13个生化标记位点及毛色基因等的测定，观察了豫医无毛小鼠的遗传特性。结果：该突变小鼠遗传性状符合孟德尔定律，且无性别差异；G显带核型分析发现，大带带型与正常昆明小鼠基本相同；生化标记位点纯合；毛色基因型为AABBccDD。结论：该突变无毛小钉是常染色体上单一隐性基因突变所致，毛色基因纯合，遗传纯度达近交系的要求。     

SMMC/B小鼠遗传纯度的检测及其与亲代昆明种小鼠遗传关系的分析

以遗传研究中的模型蛋白—Hb为监测标记,应用生化学方法从分子水平上对SMMC/B小鼠Hb标记基因进行了检测,并分析了其与祖先昆明种小鼠的遗传关系。结果,SMMC/B小鼠在所检测的基因位点达到了纯合,符合近交系动物的要求;在昆明种封闭群内,按Hb电泳分型有Ⅰ型和Ⅱ型,SMMC/B与Ⅰ型个体之间有3个肽段的差异,与Ⅱ型个体之间有10个肽段的差异。由此认为,SMMC/B与祖先昆明种封闭群内具有Ⅰ型Hb的个体亲缘关系较近。     

微卫星DNA在近交系小鼠遗传监测中的应用

用7对引物对5种不同品系近交系小鼠的微卫星位点进行多态性分析。结果显示,不同品系及同品系不同个体近交系小鼠的扩增产物在7个微卫星位点上均出现一清晰条带,在不同品系小鼠之间筛选出4个（D3Mit22、D6Mitl92、D6Mit36、D6Mitl49）具有多态性的位点;同品系内不同个体之间没有多态性。结果表明,所检测的小鼠符合近交系要求,筛选出的4个微卫星位点可用于国内有关近交系小鼠的遗传背景监测。     

用寡核苷酸探针对近交系小鼠DNA指纹图谱的分析

应用DNA指纹技术，用非放射性标记的寡核苷酸探针(GGAT)。对3个清洁级近交小鼠品系C57、DBA／2、BALB／c进行检测，分析其DNA指纹图谱。结果显示，不同品系近交系小鼠的DNA指纹图谱有明显差异，而品系内小鼠之间的DNA指纹图谱基本一致。证明DNA指纹技术能够较好地检测出近交系小鼠的基因纯合性，反映其遗传质量，可以应用于对近交系小鼠的遗传质量监测。     

DNA指纹技术对近交系小鼠生产扩大群的遗传检测

采用生物素标记的（GGAT）4寡核苷酸探针对C57BL／6J、BALB／c和DBA／2三种近交系生产扩大群F4代小鼠进行了DNA指纹图分析。结果显示（GGAT）4寡核苷酸探针对上述三种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平均DNA指纹图的相似系教（X）在0．88—0．95的范围内,具有相同指纹图的概率（P）均在0．35以上,极显著地高于品系间的相似系数（0．18—0．31）和相同指纹图的概率（P〈8．4×10^-7）。研究结果表明（GGAT）。寡核苷酸探针可用于制作近交系小鼠生产扩大群的DNA指纹图,以对其进行遗传检测。     

不同来源大约克夏猪群遗传纯度的分子检测

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术从分子结构上研究了不同来源大约克夏猪群的遗传纯度。结果表明 :不同来源 (系列及其杂种 )大约克夏的平均带纹相似系数没有显著差异 (P >0 .0 5) ,反映了这些不同来源大约克夏猪群间的遗传结构基本一致。     

DNA指纹图与生化指标分析对近交系小鼠遗传检测的比较

采用JL-02多位点探针对来自北京和西安地区的5个BALB/c群、2个BALB/c-nu/nu群、4个C57群、1个CBA/N群和1个DBA/2群近交系小鼠进行了DNA指纹图分析,并与常规生化标记分析法进行了比较.结果显示,DNA指纹图的图带教均为17～22条,具有良好的多态性.生化标记分析中Hbb位点显示异常的BALB/c及BALB/c-nu/nu小鼠与其同群体正常小鼠的DNA指纹图有较大差异,2个体之间的相似系数(F)及共有带率(X)均在0.8以下,完全相同DNA指纹图的概率(P)均在1.3×10-2以下;生化标记分析未见异常的群体内,DNA指纹图基本一致,P＞2.2×10-1.DNA指纹图显示,不同单位的同一品系间存在一定差异,其F及X均在0.8以下,P＜1.1×10-3.不同品系间DNA指纹图的F及X相差较大,均在0.4以下,P=2.7×10-10.BALB/c群与BALB/c-nu/nu群间DNA指纹图的F和X在0.65以下,P=3.8×10-6.同一动物的基因组DNA,经不同次实验所得出的DNA指纹图基本一致.2种方法比较表明,DNA指纹图在动物遗传检测中比生化标记分析有较大的优势,它不但能确切地反映生化标记分析显示的异常动物的遗传变化,而且还检出了生化标记分析未能检出的动物遗传变异,因此更加灵敏.DNA指纹图能反映出动物个体间、群体间及品系间的变异程度、亲缘关系及遗传距离,这是生化标记分析无法比拟的.     

近交系高表达HBV转基因小鼠的建立及表达传代稳定性

将纯化的高表达 1.3copy HBV全基因 ,通过原核显微注射方法 ,建立了近交系 ( Balb/ c)高表达 HBV转基因小鼠模型 ,以血清 HBs Ag为检测指标 ,对该转基因鼠 HBV基因持续表达水平和数代遗传稳定性进行了研究。结果 ,获高表达 HBV( 1.3copy)转基因 Balb/ c小鼠 Founder 2只 ,用回交传代方法 ,本 HBV转基因小鼠已稳定传至第 8代 ,每代转基因鼠阳性率平均保持在 4 4 .6 7% ,性别对 HBV转基因小鼠总体阳性率有影响 ,雄性小鼠的阳性率 ( 4 4.15 % )明显高于雌性小鼠 ( 4 2 .2 6 % ) ( P<0 .0 5 ) ;血清表达 HBs Ag水平较稳定 ,平均为 ( 85 3.2 8± 2 35 .4 3)μg/ L ,雌雄小鼠之间表达水平没有明显差异。     

BALB/c近交系小鼠的RAPD分析

采用随机扩增多态 DNA(RAPD)技术 ,分析了 BAL B/c近交系小鼠的基因多态性。结果表明 ,BAL B/c近交系小鼠表现出了多态性 RAPD标记 ,单个随机引物扩增的 DNA片段数目为 2至 11条不等 ,片段大小在 30 0～ 2 30 0 bp之间     

微卫星DNA标记技术及其在猪近交系遗传检测中的应用前景

首先对家畜核基因组中DNA微卫星标记作了简要的介绍 ,包括微卫星标记的定义、结构、分布、组成、保守性、优点及丰富的多态性等。其次主要介绍微卫星DNA标记技术在猪近交系遗传检测方面的应用。微卫星标记出现以前 ,只能通过公式来简单的计算近交系数 ,现在通过微卫星标记技术结合PCR(聚合酶链式反应 )技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,可以计算出近交系猪的等位基因频率 ,进一步得到它的多态信息含量。从而可以从分子水平上真正验证近交系猪的基因纯合度及同基因性 ,在转基因研究、异体器官移植和其实验动物化等方面奠定了坚实的遗传学基础     

封闭群 Wistar大鼠的微卫星 DNA遗传监测分析

随机选取9只SPF级Wistar大鼠,其中4只雌性和5只雄性.在大鼠染色体上筛选了30个基因座位点,利用PCR扩增技术对封闭群Wistar大鼠群体进行了微卫星DNA多态性分析.结果有30对引物经扩增后均有图带产生,没有无效基因存在,图带均为双带.不同个体间的相似系数主要分布在0.3～0.8之间,在0.5～0.8之间占总数的94.4%,最高值为0.733.9号个体与其余个体间相似系数相对低于其他个体间的相似系数.筛选出了19个微卫星位点具有显著多态性,为建立一种对Wistar大鼠进行准确可靠、快速简便的遗传监测方法提供了依据.     

应用21个微卫星标记监测马身猪遗传多样性变化趋势

本研究旨在通过对不同年份马身猪群体遗传多样性变化趋势分析,评价马身猪保种效果,制定有效的保种措施。选用FAO-ISAG联合推荐的21个微卫星标记分析不同年份马身猪群体的遗传多样性。结果表明,在马身猪群体中,共检测到105个等位基因,平均等位基因数为5个,平均有效等位基因数为2.244 0,平均观察杂合度和PIC分别为0.317 6和0.391 9。从1999年到2007年,平均等位基因数从4.285 7下降到3.428 6,平均有效等位基因数从2.509 5下降到1.977 0,平均观察杂合度从0.311 6下降到0.298 1,平均多态信息含量从0.441下降到0.341。马身猪群体基因纯度较高,遗传多样性有逐年降低趋势,在今后的保种和利用工作中,应对马身猪群体的遗传多样性进行实时监测,在世代更替中注意低频率等位基因的保护。     

AMMS／13近交系小鼠的培育及其生物学特性

ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符合近交系标准。其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７％。血清ＩｇＧ含量随日龄而增加，相同条件下，雌性比雄性高。该系小鼠可作为莱姆螺旋体病的模型动物。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞凋亡的影响

为了探讨牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的抗凋亡作用,试验采用二苯胺法及实时荧光定量PCR技术分别检测了针对RAW264.7细胞凋亡百分率及凋亡抑制蛋白CIAP-1、CIAP-2和XIAP的mRNA表达影响。结果显示,剂量为0.05、0.10和10 μg/mL TCDCA可以极显著地对抗地塞米松（DEX）诱导的RAW264.7细胞系凋亡（P < 0.01）。1 μg/mL TCDCA对正常RAW264.7细胞系CIAP-1和XIAP表达有显著的促进作用（P < 0.05）;10 μg/mL TCDCA对正常RAW264.7细胞系CIAP-1、CIAP-2和 XIAP表达均具有显著的促进作用（P < 0.05）。TCDCA给药后对DEX诱导的RAW264.7细胞系CIAP-1、CIAP-2和 XIAP表达均具有极显著的促进作用（P < 0.01）,但不同给药剂量的TCDCA作用有所差异。以上研究结果表明,TCDCA具有对抗DEX诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7凋亡作用,且与上调凋亡抑制蛋白mRNA表达有关。     

深县猪保种群遗传多样性简化监测方法研究

为建立深县猪种群多样性监测的简化指标体系,试验采集河北省深县猪4个世代179头猪样本,采用联合国粮农组织和国际动物遗传协会联合推荐的27个微卫星标记进行群体遗传多样性分析,对27个微卫星标记进行两阶段、多梯度抽样,并根据抽样群体和总群体的多态信息含量（PIC）值的变化确定适宜抽样微卫星位点数,再以4个世代样本进行验证。结果表明,选取8个微卫星位点时与全部位点的比较相对偏差可控制在5%以内,且以各分世代的验证比较相对偏差在10%左右,通过比较确定以S0155、S0228、SW632、S0090、CGA、S0101、S0227、SW122这8个微卫星位点构成的简化指标体系可较好地反映深县猪种群遗传多样性的变化。因此,深县猪的保种群群体遗传多样性监测可以简化为检测这8个微卫星位点,同时本研究采用的方法也可为其他保种群的遗传多样性监测方法的简化处理提供参考。     

Study on Simplified Monitoring Method of Genetic Diversity for Shenxian Pig Conservation Population

In order to establish a simple detecting index system for the genetic diversity of Shen-xian pig population, 179 samples in 4 generations of Shenxian pigs were collected,and the population genetic diversity were detected using 27 microsatellite markers which were jointly recommended by the Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) and the International Society for Animal Genetics (ISAG). 2-stage and multi-gradient sampling were conducted to the 27 microsatellite markers. The suitable number of microsatellite loci was determined according to the comparation of the polymorphic information content (PIC) of the sampled groups and total population,then validated with 4 generations of samples. The results showed that the relative deviation value PIC of eight microsatellite markers was no more than 5% comparing with all markers, and the relative deviation was about 10% in the different generations. 8 microsatellite markers including S0155, S0228, SW632, S0090, CGA, S0101, S0227 and SW122 constituted the final simplified index system, which could represent the changes of genetic diversity in Shenxian pig conservation population. Therefore, the genetic diversity monitoring of the population of Shenxian pig could be simplified to detect the eight microsatellite markers. At the same time, the method used in this study could also provide a reference for the simplified treatment of genetic diversity monitoring methods.     

Cloning and Functional Bioinformatics Analysis of TSARG7 Gene in Banna Mini-pig Inbred Line

In order to obtain TSATG7 gene sequence and analyze mRNA expression in tissue of Banna Mini-pig inbred line (BMI), we used TSARG7 gene mRNA sequence of pig and related species from GenBank as reference sequences to design specific primers and amplify BMI TSARG7 gene. The semi-quantitative was used to analyze the expression of TSARG7 gene in 10 important tissues, protein sequence was used to carry out functional bioinformatics analysis. A coding sequence of 1 371 bp (GenBank accession No.: KU950831, the corresponding amino acid sequence accession No.: AMY60405) of BMI TSARG7 was obtained, which encoded a protein of 456 amino acids, the protein molecular weight was 52.05 ku, and the isoelectric point was 9.28. Multiple tissue expression indicated that TSARG7 gene expressed highly in the testis, middle and low expression in the other tissues. Functional bioinformatics analysis indicated that TSARG7 protein contained one conserved domain, three transmembrane regions, and no signal peptide sequences;Its N-terminal was hydrophobic and C-terminal was hydrophilic;It had five kinds functional active sites and a 94.1% to located in cytoplasmic. The results of the study would lay a foundation for further study of the gene about its functions in pig spermatogenesis and sexual maturation.