鸡新城疫V4弱毒疫苗免疫效果观察

选用Ｖ４弱毒疫苗免疫ＳＰＦ来航鸡，结果表明：接种该苗，１０天即产生免疫ＨＩ效价均值为５．０ｌｏｇ２，免疫后２０天达到免疫高峰ＨＩ效价均值为５．６ｌｏｇ２，免疫持续期为３４０天，此时，ＨＩ效价均值为５．０ｌｏｇ２。Ｖ４弱毒疫苗稍优于ｃｌｏｎ３－３０弱毒疫苗，但两者差异不显著。     

雏鸡感染柔嫩艾美尔球虫局部黏膜免疫细胞的动态变化

本试验采用免疫组化法检测柔嫩艾美尔球虫感染雏鸡后盲肠黏膜sIgA+细胞和T细胞亚群的动态变化。结果发现:sIgA+细胞和CD4+T细胞数量在感染球虫后第2天就明显升高,第5天达到高峰,随后逐渐下降。而CD8+T细胞在感染球虫后第4天,才显著增加,感染后第7天达到高峰。表明雏鸡感染球虫后,机体能迅速启动黏膜免疫应答,不同的免疫细胞在抵抗柔嫩艾美尔球虫感染不同阶段发挥不同的作用。     

迷走神经对免疫系统调控的研究进展

神经系统和免疫系统之间存在密切的互作关系，迷走神经对神经系统与免疫系统间的信息交流非常重要。迷走神经传入神经末梢感知炎症区域或周围的炎症因子，并将信号传递到脑干神经核，而后传递到下丘脑和前脑区域；传出纤维则通过胆碱能信号调控炎症免疫。本研究就迷走神经对免疫系统功能的调节及其在临床上的应用进行了综述，为神经调控免疫的研究提供理论依据。     

新城疫La Sota、V4疫苗免疫鸡和免疫攻毒鸡的特异性IgA抗体动态变化规律比较

应用间接ELISA对新城疫LaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的IgA抗体动态变化进行了测定和比较。试验表明，LaSota和V4免疫鸡泪液中特异性IgA均在免疫后第5天出现，8天开始明显升高，与血清中IgG出现时间相似，免疫后21天达到高峰。LaSota免疫鸡的泪液IgA抗体水平略高于V4免疫鸡；而两免疫组哈德氏腺(HG)中的特异性IgA高峰出现较迟。免疫攻毒鸡泪液中的特异性IgA抗体水平均先呈短暂的升高，之后下降的趋势，而HG中的IgA则首先表现降低，之后很快升高，5天后趋于下降，两攻毒组差异不显著，对IgA回忆应答均不明显。     

迷走神经调节机体细胞免疫反应的研究

采用电生理学和药理学方法，研究了家兔迷走神经对机体细胞免疫反应的影响。结果表明：（ｌ）电刺激迷走神经可显著提高机体的细胞免疫功能。电刺激迷走神经离中瑞结果与此相似。静脉注射阿托品可消除上述刺激迷走神经引起的细胞免疫增强效应。（２）剪断迷走神经，机体细胞免疫功能显著降低；静脉注射阿托品进行化学阻断获得同样结果。（３）刺激迷走神经向中端可显著提高机体的细胞免疫功能。以上结果提示，迷走神经兴奋可增强机体细胞免疫反应，这一作用是通过迷走神经末梢释放乙酰胆碱作用于淋巴细胞上的相应受体实现的；迷走神经对机体正常的细胞免疫水平有支持作用；迷走神经的传入纤维可能具有向中枢传递免疫反应信息的功能。     

多头绦虫抗原特性的研究：———绵羊免疫及感染后的细胞应答反应研究

分别用多头蚴原头节抗原、原头节排泄分泌抗原、囊壁抗原、囊液抗原对绵羊免疫注射３次,以及攻击感染多头绦虫虫卵后,运用酸性α－醋酸萘酯酶染色法及姬姆萨染色法研究了外周血液Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的应答反应。结果表明,绵羊感染多头绦虫虫卵后外周血液中Ｔ淋巴细胞数量增加,Ｂ淋巴细胞数量减少,感染后第５周到第６周Ｔ淋巴细胞数量达到峰值,此后开始下降,第３２周时趋于正常,淋巴细胞总数在感     

佐剂对鸡补体水平影响的研究

６０只未免疫的伊莎褐雄鸡雏分成４组，于２４日龄开始用试管法以５０％溶血度为标准样检测补体。３１日时Ａ，Ｂ，Ｃ三组分别皮下注射司盘－８０＋白油，氢氧化铝胶和ＢＣＧ，Ｄ组对照；４６日龄时再次注射。从３１日龄至５６日龄每隔５天检测一次。结果表明，佐剂使鸡的补体水平普遍升高。于每次注射后第５天达到高峰，第１０天左右接近正常。其中ＢＣＧ影响现大，并于５１日龄时天对照组异显著（０．０１＜Ｐ＜０．０５）．     

多头绦虫抗原特性的研究——绵羊免疫后及感染后的抗体消长规律

用多头绦虫原头节，囊壁，囊液层析纯化抗原及原头节排泄分泌（ＥＳ）抗原对绵羊免疫及攻击感染多头涤虫虫卵后的血清进行ＥＬＩＳＡ检测，观察了血清抗体的消长规律，结果表明，绵羊在感染虫卵后第１周即可检测出血清抗体，感染后３～５周抗体效价达峰值，一直持续到试验结束，免疫组绵羊在免疫３次后，血清抗体效价迅速升高，第３次免疫后１～２周达到峰值，且抗体水平明显高于虫卵感染组，在攻击虫卵后抗体效价开始下降，但直到试     

人工感染MDV雏鸡免疫器官中PMG~＋浆细胞动态观察

对健康和免疫后攻击京－１株ＭＤ强毒鸡中枢免疫器官中ＰＭＣ＋浆细胞的动态变化进行了观察．结果表明，健康攻毒组免疫器官中ＰＭＧ＋浆细胞数在攻毒后３天开始下降．１５～２０天迅带回升，３０天左右达到峰值，以后又迅速下降；免疫攻毒组，免疫器中中的ＰＭＧ＋浆细胞数在攻毒后２０天以前一直处于较高的水平，之后与对照组差异不明显。     

柔嫩艾美耳球虫免疫期间鸡盲肠扁桃体γ干扰素表达动态的检测

根据GenBank鸡β-actin、IFN-γ的基因序列设计引物,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术克隆获得β-actin和IFN-γ基因,采用β-actin为内参的半定量方法检测IFN-γ mRNA在鸡柔嫩艾美耳球虫免疫前后不同时间的表达情况,以探讨IFN-γ的表达动态与柔嫩艾美耳球虫免疫的关系。结果显示,IFN-γ在两次免疫期间的表达量整体上呈现双峰模式,首免后第7天达到一个高峰,二免后第7天达到另一个高峰。     

小反刍兽疫活疫苗二次免疫效果评价

为研究已免疫小反刍兽疫(PPR)活疫苗的羊群经二次免疫后PPR抗体水平的变化趋势,对初免21 d羊群进行了第二次免疫,同时监测初免21 d及二免后3 d、7 d、14 d、21 d的血清中和抗体。结果显示,一次免疫羊21 d PPR中和抗体滴度平均可达5.18±2.87,阳性率为84%;二次免疫后3 d、7 d、14 d、21 d,PPR抗体呈上升趋势,平均滴度分别为5.65±2.56、6.95±1.82、7.28±1.18、8.12±1.31,阳性率分别为90%、100%、100%、100%。一免试验组21 d~323 d PPR抗体阳性率为83%,二免试验组在二次免疫7 d PPR抗体阳性率达到100%,并且维持到21 d。试验表明,活疫苗二次免疫增强了免疫效果,对已经有PPR抗体的羊进行二次免疫,可明显提升免疫抗体阳性率。     

旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡对小鼠免疫保护作用

本试验通过差速超速离心法获得旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡(Trichinella spiralis muscle larvae extracellular vesicles,Ts-ML-EVs),经透射电镜观察、纳米颗粒追踪分析、流式细胞术和Western blot鉴定。选择6～8周龄的健康雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只。试验设计为PBS对照组(PBS组)、佐剂对照组(PBS+佐剂组)、旋毛虫肌幼虫期排泄分泌产物免疫组(Ts-ML-ES+佐剂组)以及旋毛虫肌幼虫期胞外囊泡免疫组(Ts-ML-EVs+佐剂组),分别取相应抗原与佐剂等体积混合采用多点皮下注射方式免疫小鼠。首免后第2,4周各加强免疫1次,剂量不变。三免后2周,每只小鼠灌胃300条旋毛虫肌幼虫,灌胃后6 d每组取2只剖杀,统计旋毛虫成虫减虫结果;攻虫35 d后所有小鼠全部处死,计算肌幼虫减虫率。每次免疫前、攻虫前以及处死前眼眶采血收集血清并保存,统一进行ELISA分析。结果显示：成功获得Ts-ML-EVs,随着免疫次数增加,小鼠血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA和IgE抗体水平均显著上升,在三免后2周达到...     

鸡传染性法氏囊病活疫苗（B87株 CA株 CF株）安全性及免疫效果评价

通过观察疫苗免疫后鸡群的生长情况和临床症状,检测免疫后不同时期鸡群的ELISA抗体水平和攻毒保护率以及对鸡新城疫（ND）疫苗免疫后不同时间鸡群的HI抗体水平,评价和检测鸡传染性法氏囊病活疫苗（B87株 CA株 CF株）在石家庄地区临床应用的安全性、免疫效果、免疫持续期以及是否会产生免疫抑制。结果表明,试验疫苗接种蛋鸡和肉鸡后,均没有观察到因疫苗引起的不良反应,对蛋鸡和肉鸡均安全。疫苗接种蛋鸡后14 d、28 d、42 d、60 d和90 d,接种肉鸡后14 d、21 d、36 d攻毒保护率均达80%以上;商品蛋鸡接种疫苗后90 d其ELISA抗体水平仍高达6500以上。ND HI抗体检测结果表明,试验疫苗接种后对ND疫苗的免疫应答无显著影响,不引起免疫抑制。结论：试验疫苗安全、有效,质量稳定,适用于预防鸡传染性法氏囊病。     

胸腺五肽溶液作为冻干疫苗稀释剂对疫苗免疫效果的影响

研究胸腺五肽(TP5)溶液作为冻干疫苗稀释剂对疫苗免疫效果的影响。用不同浓度的TP5溶液稀释鸡新城疫Ⅳ系弱毒冻干苗,对ICR小鼠进行滴鼻免疫2次,间隔2周,并设立生理盐水对照组,分别于二免后1、2、3周眼眶采血并分离血清,采用间接ELISA方法测定总IgG水平。结果表明,与对照组相比,0.25-0.5 mg/mLTP5溶液可显著提高二免后1周和2周小鼠血清中的抗体水平(P<0.05)。提示TP5溶液可作为弱毒冻干疫苗的稀释液以增强疫苗的免疫效果。     

禽流感灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸽呼吸道抗体分泌细胞的影响

通过禽流感灭活抗原配合黏膜免疫佐剂鼻腔免疫乳鸽,研究鸽呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量。结果显示,首免后第3、5周,应用CpG免疫后肺IgG分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）,首免后第5,7周,应用CpG免疫后肺IgA分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）;首免后第3、5、7周,应用灭活禽流感抗原免疫后,鸽呼吸道各部位IgG分泌细胞和IgA分泌细胞面积与对照组无显著差异;应用禽流感抗原配合CpG和胆酸钠免疫后鸽呼吸道各部位单位面积中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞面积均显著或极显著高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）。结果表明,灭活禽流感抗原配合黏膜免疫佐剂通过鼻腔免疫能够提高呼吸道中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,增强局部呼吸道体液免疫应答水平。     

重组牛皮蝇素A蛋白的免疫试验

用由毕赤酵母表达的皮蝇素A（Hypdermin A，HA）蛋白分别免疫新西兰大白兔和牦牛，了解该蛋白免疫效果。用两种不同分子量的重组HA蛋白分别免疫新西兰大白兔1次和2次，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，3周后抗体水平达到峰值，后缓慢下降。50KD蛋白免疫效果较30KD蛋白好，差异非常显著（P〈0．01）。用其中50KD的重组HA蛋白分别在7月和9月免疫自然感染牛皮蝇蛆病牦牛，观察感染率和感染强度，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，7月免疫组与9月免疫组感染率分别为83．3％和36．3％（对照组为55．5％）；平均感染强度分别为6．5和4．2（对照组为13．0），差异不显著（P〉0．05）。免疫后，抗体水平上升，3个月后缓慢下降。9月免疫组免疫效果较7月免疫组好，三组抗体水平差异非常显著（P〈0．01）。上述研究结果为防治牛皮蝇蛆病疫苗的深入研究和实践运用提供了参考依据。     

Enhancement of protective immune responses by oral vaccination with Saccharomyces cerevisiae expressing recombinant Actinobacillus pleuropneumoniae ApxIA or ApxIIA in mice

We previously induced protective immune response by oral immunization with yeast expressing the ApxIIA antigen. The ApxI antigen is also an important factor in the protection against Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 5 infection; therefore, the protective immunity in mice following oral immunization with Saccharomyces cerevisiae expressing either ApxIA (group C) or ApxIIA (group D) alone or both (group E) was compared with that in two control groups (group A and B). The immunogenicity of the rApxIA antigen derived from the yeast was confirmed by a high survival rate and an ApxIA-specific IgG antibody response (p < 0.01). The highest systemic (IgG) and local (IgA) humoral immune responses to ApxIA and ApxIIA were detected in group E after the third immunization (p < 0.05). The levels of IL-1β and IL-6 after challenge with an A. pleuropneumoniae field isolate did not change significantly in the vaccinated groups. The level of TNF-α increased in a time-dependent manner in group E but was not significantly different after the challenge. After the challenge, the mice in group E had a significantly lower infectious burden and a higher level of protection than the mice in the other groups (p < 0.05). The survival rate in each group was closely correlated to the immune response and histopathological observations in the lung following the challenge. These results suggested that immunity to the ApxIA antigen is required for optimal protection.     

Partial inhibition of the humoral immune response of pigs after early postnatal immunization

The ability of young pigs to be immunized during the postnatal period was studied. Eight groups of pigs born on the same day from 3 sows were injected with hen egg-white lysozyme in Freund's incomplete adjuvant at days 0, 1, 2, 3, 4, 5, 7, and 10 after birth. The serum antibody titers were determined each week. Results indicated that pigs injected within the first 3 days of life exhibited a delay of 10 days in the appearance of the humoral antibodies, compared with the antibody response observed in pigs injected later. Serum antibody titers were markedly lower in the early immunized pigs. The secondary immune response was similar in all pigs. This partial inhibition is not directly linked to the corticoids present in the serum at the immunization day. Possible reasons for this impairment of the humoral immune response were reviewed.     

生长抑素和皮质抑素双表达DNA疫苗免疫杂交水牛育成牛的促生长效果研究

试验旨在探究生长抑素（SS）和皮质抑素（CST）双表达DNA疫苗免疫杂交水牛育成牛的促生长效果,并对其安全性进行验证。将鉴定正确的pVGS/2SS-2A-S/CST-asd质粒电转入减毒猪霍乱沙门氏菌C500构建生长抑素和皮质抑素双表达活载体疫苗。将16头6~12月龄杂交水牛育成牛随机分为低（TL）、中（TM）、高（TH）剂量组及PBS对照组（NC）,每组4头,试验组和对照组分别用双表达疫苗和PBS进行鼻腔免疫,初免时每天09：00和15：00免疫2次,连续免疫3 d,2周后以相同程序加强免疫1次,对免疫后不同时期的增重效果和免疫应答水平等进行监测。免疫应答结果显示,各剂量组免疫后均引起了免疫应答,TL组在初免后2周产生的SS抗体水平高于TM和TH组,而TM组SS抗体阳性率最高,为100%,优于TL （75%）和TH组（50%）;初免后2周产生的CST抗体水平则呈现完全相反的趋势,抗体水平随免疫剂量下降呈下降的趋势;初免后7周SS抗体和CST抗体水平和阳性率整体呈下降趋势,但也有部分牛出现抗体升高趋势;免疫因子检测结果显示,初免后2周TL和TM组IL-4水平极显著高于对照组（P<0.01）,而免疫后7周对照组的IL-4水平显著高于TL组（P<0.05）,与其他各组之间差异均不显著（P>0.05）;对照组INF-γ水平在初免后2周显著高于TL和TM组（P<0.05）,免疫后7周对照组显著高于TL组（P<0.05）,与其他各组之间差异均不显著（P>0.05）;对比抗体阳性组和阴性组发现,初免后2周抗体阳性组的IL-4水平极显著高于阴性组（P<0.01）,初免后7周则显著低于对照组（P<0.05）,而抗体阳性组INF-γ在初免后2和7周均显著低于阴性组（P<0.05）。增重效果检测显示,初免后2周各试验组平均日增重均显著高于对照组（P<0.05）,而在其他各时期各组之间差异均不显著（P>0.05）,抗体阳性组仅在初免后2周显著高于阴性组（P<0.05）。激素检测结果显示,各试验组生长激素（GH）和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）在初免后2周均极显著高于对照组（P<0.01）,而初免后7周TL组GH和IGF-1水平显著低于对照组（P<0.05）,其他各组之间均差异不显著（P>0.05）;抗体阳性组的GH和IGF-1水平在初免后2周极显著高于阴性组（P<0.01）,而初免后7周则极显著低于阴性组（P<0.01）。安全性检测结果显示,各时期采集的水样、土样、粪样中均未检测到目的片段,证实了疫苗的安全性。本试验结果表明,双表达疫苗免疫后机体能产生良好的免疫应答,能提高育成牛的平均日增重,且对环境未产生安全性问题。     

Immunization procedure-related immunoglobulin levels in the development of antibodies against Cysticercus cellulosae

Various immunization procedures were investigated in an effort to improve the number of hybridomas producing antibodies against Cysticercus cellulosae. Ten groups of 5 BALB/c mice were subjected to different immunization procedures and were bled repeatedly over a period of 68 days. The samples of sera thus obtained were tested by enzyme linked immunosorbent assay: total immunoglobulins, IgG and IgM levels were determined. In general, total anticyst antibody titres increased during the course of immunization but in 3 groups the final titre was lower than the maximal antibody titre. Overall, immune tolerance did not appear to be a problem and longer immunization programs seemed to end with slightly higher antibody levels. So far, 4 mice from the group that exhibited the highest immunoglobulin levels have been used for hybridoma production. Out of 124 hybridomas thus obtained, only 1 secreted antibodies against Cysticercus cellulosae.