中国犬吉氏巴贝斯虫srRNA的序列测定及其在PCR诊断上的应用

用特异引物ＢＧ－１和ＢＧ－２从南京株吉氏巴贝斯虫ｃＤＮＡ文库中克隆出ｓｓｒＲＮＡ序列，测定了该序列的核苷酸组成。通过基因库同源性查询表明，该序列与美洲株吉氏巴贝斯虫ｓｓｒＲＮＡ具有８７％的同源性。本实验通过优化ＢＧ－１和ＢＧ－２引物对ｓｓｒＲＮＡ基因的扩增反应条件，建立了对吉氏巴贝斯虫的特异、敏感的诊断方法。该方法可广泛用于其他血液原虫的ＰＣＲ诊断     

吉氏巴贝斯虫的冷冻试验

吉氏巴贝斯虫(Babesia gibsoni)是寄生于犬体内的血液原虫,该虫经中间宿主蜱传播,对我国部分地区的军、警犬及猎犬的危害严重。目前,对该虫的实验室保种方法主要有二种,一种是保存带虫阳性蜱,另一种是将虫体保存在犬体内。这两种方法都比较繁琐,且不经济。如今,牛巴贝斯虫的冷冻保存方法已经建立。但吉氏巴贝斯虫的冷冻保存方法还未见报道。本实验以二甲基亚砜(DMSO)和甘油作为冷冻保护剂,对该虫进行了冷冻保存试验,现将结果报道如下。     

一例犬吉氏巴贝斯虫病的PCR诊断

1例拉布拉多病犬,食欲废绝,喜卧好喘,小便呈酱油色,血涂片、姬姆萨染色、镜检发现,红细胞内有淡蓝色的环形虫体。采集病犬血液样品,提取基因组DNA,通过PCR方法及对PCR产物进行限制性片段长度多态性分析进而确诊该病犬为犬吉氏巴贝斯虫感染。     

吉氏巴贝斯虫cDNA探针的制备及杂交试验

本实验将－６．６ｋｂ的吉氏巴贝斯虫ｃＤＮＡ片段以光照活化法标记光敏生物素，制备成光敏生物素探针。与吉氏巴贝斯虫基因组ＤＮＡ、伊氏锥虫基因组ＤＮＡ、犬白细胞ＤＮＡ的斑点杂交试验表明，该探针可与０．００１ｎｇ以上量的吉氏巴贝斯虫ＤＮＡ杂交，而不与任何浓度的伊氏锥虫ＤＮＡ和犬ＤＮＡ杂交，具有很高的敏感性和特异性。     

犬吉氏巴贝斯虫病的诊断与治疗

犬巴贝斯虫病是由硬蜱传播而引起的血源性原虫病,目前本病在宠物犬中经常发生,危害日益严重.该病有一定的发病规律,患犬以严重的贫血和血红蛋白尿为特征.严重感染时可引起贫血、呕吐、腹泻.本文介绍了两个病例,根据病犬的临床症状,通过实验室的检查,诊断出此犬为吉氏巴贝斯虫病,并给予了相应的药物治疗,经治疗后两犬的病情逐渐好转,最...     

一例犬吉氏巴贝斯虫病的诊治

3岁雄性贵宾犬,体重3.20 kg,免疫完全,未绝育,从未进行过体内外驱虫,院内散养。主诉最近2周发现犬的精神状态渐差,进食量逐渐减少。为了对其进行诊治,采用体格检查、血液学检查以及影像学检查的方法进行诊断,并根据诊断结果进行治疗,结果表明,该犬感染吉氏巴贝斯虫且并发肝脏损伤,通过采取输血、驱虫等治疗措施,患犬的临床症状消失,镜检外周血虫体消失,治疗后未见复发。说明临床上可通过血液学检测对犬的吉氏巴贝斯虫感染进行确诊,且输血结合驱虫治疗可有效治疗该病。     

犬吉氏巴贝斯虫病的诊断与治疗

河北省秦皇岛某犬养殖中心的50只犬出现红尿、厌食、发烧、精神欠佳等症状,通过流行病学调查、临床症状观察、实验室检查,在其血涂片检查中发现红细胞内有染成淡蓝色的小梨籽形虫体,有圆形、环形和逗点形等,虫体的染色质团呈紫红色,清晰可见,1个红细胞内寄生虫体1~3个不等,红细胞染虫率为5%~15%,确诊为犬吉氏巴贝斯虫病。应用伯氨喹啉(0.8~1.0 mg/kg)和乙胺嘧啶(0.8 mg/kg)配合治疗,连用5 d。用药后贫血症状基本缓解,食欲恢复,红细胞染虫率下降到了1%左右,病犬痊愈。表明伯氨喹啉和乙胺嘧啶对犬吉氏巴贝斯虫病具有良好的防治效果。     

36例犬吉氏巴贝斯虫病的诊断与治疗

西安市某宠物医院从2018年-2019年共接诊了36例犬吉氏巴贝斯虫病,对这36例病例的临床症状、流行病学、实验室诊断和治疗进行了调查和研究.结果表明,犬感染吉氏巴贝斯虫后主要症状为虚弱、发热、尿黄等.该病的高发期在9月和10月,占总发病的50％.发病年龄主要是1岁至5岁犬,占69.4％.实验室检查显示感染犬的红细胞和...     

一例犬吉氏巴贝斯虫病的诊断与治疗

文章介绍了1例犬吉氏巴贝斯虫病的诊治情况。通过询问病史、临床检查、血液学检查和聚合酶链式反应（PCR）进行综合分析诊断,采用对症、支持及输血疗法治疗,预后良好。     

北京地区25例犬吉氏巴贝斯虫病例分析

为调查北京地区犬吉氏巴贝斯虫病的感染与治疗情况,2014年10月至2016年1月期间,本试验对中国农业大学动物医院就诊的25例犬吉氏巴贝斯虫感染病例进行调查统计,记录其临床症状,分析全血细胞计数(Complete Blood Count,CBC)、生化检测结果和三氮脒的治疗效果。结果显示,25例患犬均出现不同程度的贫血,73.3%(11/15)的患犬出现了免疫介导性溶血性贫血(Immune mediated hemolytic anemia,IMHA),使用三氮脒和输血疗法治疗后,71.2%(10/14)的患犬取得良好的疗效,但目前跟踪的病例中,21.4%(3/14)的患犬已复发。     

犬吉氏巴贝斯虫截短型抗原BgTRAP的重组表达及其在诊断上的初步应用

吉氏巴贝斯虫Bg TRAP蛋白是一个重要的诊断抗原候选分子。为建立一种实用的犬吉氏巴贝斯虫血清学诊断方法,本研究选取Bg TRAP C-末端跨膜区前,包含TSP功能区和抗原区的411个氨基酸的编码基因片段,重组表达了一个可溶性截短型Bg TRAP抗原,解决了完整蛋白重组表达纯化的困难。免疫荧光试验表明,截短型抗原具有良好的抗原性。纯化的截短型抗原作为酶联免疫试验诊断抗原,可清晰地区分阴性及阳性犬血清,并与其他病原感染无交叉反应,具有良好的特异性。犬感染吉氏巴贝斯虫系列血清检测表明,该抗原可检测早期感染(4 d)和感染200 d以后的样本。结果提示,重组Bg TRAP截短型抗原可作为一种诊断制剂检测犬吉氏巴贝斯虫抗体。     

犬吉氏巴贝斯虫病的胎盘传播及综合防制

犬巴贝斯虫病的危害仅次于犬瘟热,是严重危害警、军犬健康的虫媒性血液原虫病。目前该病在国内广泛性分布，有蜱滋生的地区，春、夏、秋季均可性病。且有流行和暴发的趋势，尤其许多优秀工作犬感染后病程长，即使治俞也容易复发，由于警、军犬经常外出训练和使用，活动范围广，接触的环境复杂，感染此病 机会多，所以，制定一套综合性防制措施，是减少本病的发生、防治警、军犬疾病的重要组成部分。     

南京地区犬巴贝斯虫病的诊断与治疗

4年来,笔者在宠物门诊工作过程中,通过对161例犬巴贝斯虫病的诊治与跟踪调查(治愈148只,死亡13只,治愈率达91.93%),总结出发病规律和治疗方案,发现本地区犬巴贝斯虫病主要是由吉氏巴贝斯虫和犬贝斯虫感染所致。其中由吉氏贝斯虫感染的病例为106例,由犬巴贝斯虫感染的病例为55例,未发现韦巴贝斯虫感染的病例。针对犬巴贝斯虫病的发病特点,提出了预防新措施。     

吉氏巴贝斯虫单克隆抗体制备的研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞株 ,经间接萤光抗体法筛选和克隆 ,获得了 5株能稳定分泌吉氏巴贝斯虫特异性抗体的杂交瘤细胞株 ,分别命名为C3B5、M8B7、E9C5、G6 D8、H2 A7。经过鉴定 ,这 5株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体亚类及相对分子质量分别为IgG2b,1 8× 1 0 4 ;IgG2a,1 8× 1 0 4 ;IgG1 ,1 8× 1 0 4 ;IgM ,3 2× 1 0 4 ;IgM ,1 8× 1 0 4 。腹水效价为 1∶1 0 4 ～ 1∶1 0 5。其中E9C5杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体是一种保护性抗体 ,经对实验感染吉氏巴贝斯虫小鼠体内虫体的杀虫试验证明具有较强的杀灭作用。     

间接荧光抗体试验诊断犬吉氏巴贝斯虫病

利用冷藏抗原玻片 ,用间接荧光抗体试验检测感染吉氏巴贝斯虫犬血清 ,具有特异性强、敏感性高、快速、准确、操作简单等特点。对疫区 82份犬血清的检查 ,阳性率为 37 8% ;对非疫区 50份犬血清的检查 ,假阳性率为 2 %。与血液涂片染色检查比较 ,该法检出率高 ,结果可靠 ,可用于犬吉氏巴贝斯虫病的诊断和流行病学调查     

边境牧羊犬感染吉氏巴贝斯虫的诊断和治疗

犬巴贝斯虫病是经蜱传播的血液原虫病,是由寄生于犬红细胞中的巴贝斯虫引起的.该病临床症状主要为高热、贫血、黄疸和血红蛋白尿等,严重时可导致死亡.因此,对于犬巴贝斯虫病的诊断与治疗刻不容缓.本文对重庆动物医院接诊的一例患病犬进行临床观察以及血常规、PCR等实验室检测,最终确诊为犬吉氏巴贝斯虫病.经过治疗后,患病犬病症趋于好...     

1例犬吉氏巴贝斯虫病继发胰腺炎的诊治

一只8岁雌犬出现食欲不振、精神不佳、呕吐、呼吸急促等症状,采取临床一般检查、犬c反应蛋白检查、ELISA检查后,初诊为犬胰腺炎;后经抗生素滴注后无明显效果,追加血液原虫PCR检查和血涂片检查后确诊为犬吉氏巴贝斯虫感染。根据发病经过及血液学检查,推测该犬是由犬吉氏巴贝斯虫感染继发胰腺炎。经灭虫治疗、对症治疗、支持治疗及输血治疗后,病情得到明显改善。患犬出院后持续口服阿托伐醌配合阿奇霉素,定期复诊结果显示预后良好,最终痊愈。     

一例犬感染吉氏巴贝斯虫的诊治

采用临床检查、血液学检查、影像学检查、巴贝斯虫RT-PCR检测试剂盒等方法对一例9岁的雪纳瑞犬进行检查,根据检查结果最终确诊该犬患有吉氏巴贝斯虫病.患犬临床症状较为严重、血液学检查结果中度贫血,血涂片每个视野可见1～2个虫体,判定病程属于3级,采用第1天、第3天、第7天腿部肌肉注射比利时进口的焦虫针,口服10 d阿奇霉...     

一例犬吉氏巴贝斯虫的诊治与临床分析

在国内根据蜱虫的分布,犬巴贝斯虫发病地区主要在南方地区,而北方临床很少见。犬所发生的巴贝斯虫感染通常是由于犬巴贝斯虫和吉氏巴贝斯虫所造成,这两种虫体造成的感染都会导致犬发生渐进性的贫血。吉氏巴贝斯虫感染多是由于蜱叮咬所导致,通常幼犬多见。动物常表现为可视粘膜苍白,心跳过速,呼吸急促,沉郁,食欲不振,虚弱以及血性排泄物。根据感染阶段的不同,有的犬还会出现黄疸,瘀斑现象和肝脏肿大,进而表现出弥漫性血管内凝血(DIC)。发生急性感染的犬,最常出现的症状是严重贫血,弥漫性血管内凝血(DIC),代谢性酸中毒和肾病。慢性长期感染的犬通常会表现出体重减轻和食欲不振的症状。     

克隆表达的犬吉氏巴贝斯虫重组GST-P130kDa 用于血清学诊断

利用抗体法（picoBlueTMImmunscreening Kit,应用B.gibsoni感染血清）从犬吉氏巴贝斯虫（B.gibsoni）裂殖子mRNA制备的吉氏巴贝斯虫cDNA文库中进行免疫筛选,选出目的基因相cDNA片段（阳性克隆）.测序验证后将该cDNA（基因）克隆至原核表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒,在大肠杆菌E.coli（DH5a）中以GST融合蛋白的形式表达（SDS-PAGE分析证明）;表达产物为130kDa的可溶性融合蛋白.免疫学分析（Western blot和ELISA）结果表明,犬吉氏巴贝斯虫重组GST-P130kDa融合蛋白（rBg GST-P130kDa）能与犬吉氏巴贝斯虫（B.gibsoni）感染血清起反应,且与犬巴贝斯虫（B.canis）无交叉反应.本试验利用犬吉氏巴贝斯虫重组BgGST-P130kDa融合蛋白（作为重组抗原）检测巴西（n=310）、日本（n=100）和中国（n=114,n=30）等国随机采集的自然感染狗血清,其结果为巴西狗血清阳性率为55%、日本为8%、中国为1～9%;其结果与间接荧光抗体法（IFAT）结果为一致（作为验证）.结果表明重组BgGST-P130kDa融合蛋白具有较强的免疫原性和特异性,可用于吉氏巴贝斯虫病的诊断,这为吉氏巴贝斯虫病的早期诊断和深入研究犬吉氏巴贝斯虫病的特异性重组抗原及重组疫苗奠定基础.