超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究

以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊     

猪核移植重组胚胎的发育能力

以ＭｃＧｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ（１９８３）提供的去（注）核方法，将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞，借助电融合的方法（ＡＣ；５Ｖ，１．５ＭＨｚ，１２－１５ｓ；ＤＣ：２ｋＶ／ｃｍ，４０μｓ。电激活／融合液：０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋－．１ｍｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４＋０．１ｍｍｏｌＣａｃＬ２＋７．５ｍｇ／ｍｌＣＣＢ）融入受体胞质构成重级胚，体外培养（培养液为改衣ＴＣＭ－１９９；培养条件为５％     

白唇鹿血清生化指标测定

测定了３５头青海白唇鹿的１９项血清生化指标。结果为Ｎａ＾２＋１３８．１±５．８４ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｋ＾＋５．７５±０．７３ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｃａ＾２＋２．４２±０．２０／Ｌ，Ｐ２．３３±．３８ｍｍｏｌ／，Ｃｌ＾－，１０２．２±６．０３ｍｍｏｌ／Ｌ，总蛋白８７．５０±６．１７ｇ／Ｌ白蛋白５９．１８±６．９６ｇ／Ｌ球蛋白２８．３４±５．２６ｇ／Ｌ，Ａ／Ｇ，２．１９±０．５９，血清蛋白质组分（％）Ａ６７．５７±     

祁边马鹿血清生化指标的测定

对祁连县养鹿场围栏放牧的３７～４０头马鹿的１２项血清生化指标进行了测定。结果为：Ｋ＾＋５．３５±０．６４ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｎａ＾２＋１４０．１９±４．４７ｎｍｏｌ／Ｌ,Ｃａ＾＋＋２．３６±０．１９ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｐ２．４５±０．４２ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｃｌ＾－１０１．４８±５．５４ｍｍｏｌ／Ｌ,总蛋白８６．２４±５．４９ｇ／Ｌ,白蛋白５５．２０±５．６３ｇ／Ｌ,球蛋白３１．０４±４．５７ｇ／Ｌ,Ａ／Ｇ１．８３     

以包涵体形式表达的猪带绦虫六钩蚴重组原的复性与纯化

应用比浊法,可溶必蛋白百分比,夹心ＥＬＩＳＡ及变性与非变性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等方法来评价猪带绦虫六钩蚴重组抗原的不同复性条件。透析法复性,透析液为含２ｍｏｌ／Ｌ尿素,１６０℃ｍｏｌ／ＬＰＥＧ４０００,１．０ｍｍｏｌ／Ｌ－０．１ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ－ＧＳＳＧ的ＰＨ９．０的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液,蛋白浓度为２－５ｍｇ＝ｍＬ,以静置缓慢透年为佳,上述条件任意缺一或快速透析,则免疫活性下降,二聚体,多聚体明显     

乐都驴血液生化参数测定

对青海省乐都县５１头驴的１３项血清（浆）生化参数进行测定，结果：总蛋白为７４．４±９．７ｇ／Ｌ，Ａ／Ｇ为Ｏ．９±０．２，总脂为２．５±０．６ｇ／Ｌ，胆固醇为２．５±０．９ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｋ￣＋为４．５±０．５ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｎａ￣＋为１３７±３ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｃａ￣（２＋）为２．３±０．３ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ￣（２＋）为１．６±０．４ｍｍｏｌ／Ｌ，无机磷为２．０±０．６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＰＴ为８．４±６．４ＩＵ／Ｌ，ＧＯＴ为１１．６±９．７ＩＵ／Ｌ，血浆葡萄糖为５．６±０．５ｍｍｏｌ／Ｌ；上述参数在骟、母驴间无显著差异。     

北极狐生理指标和血液生化参数测定

对引入青海高原的２７只北极狐作２０项生理生化参数测定。测定结果：ＲＢＣ，ＷＢＣ，Ｈｂ，嗜中性白细胞，淋巴细胞，单核细胞，嗜酸性、嗜碱性白细胞分别为９．４０±１．８６（１０￣（１２）／Ｌ），７．４０±１．２８（１０￣９／Ｌ），１４．２０±１．８（ｇ／ｄｌ），４０．５８±１．５５（％），５６．５０±１．９３（％）．２．４０±０．７５（％），０．８１±０．０８（％），０．２９±０．０６（％）；血清总蛋白，Ａ／Ｇ，尿素氮，血清总脂，淀粉酶，血糖，Ｋ￣＋，Ｎａ￣＋，Ｃｌ￣－，Ｃａ￣（２＋），Ｍｇ￣（２＋），Ｐ分别为５８．４１±５．３０（ｇ／Ｌ），１．８０±０．１８，６．６９±１．５５（ｍｍｏｌ／Ｌ），７．８８±０．６６（ｇ／Ｌ），６２１±８７．０７（Ｕ／ｄｌ），５．２２±０．６３（ｍｍｏｌ／Ｌ），２．２４±０．５３（ｍｍｏｌ／Ｌ），１７７．０８±１３．４２（ｍｍｏｌ／Ｌ），１０５．５０±１１．６０（ｍｍｏｌ／Ｌ），２．４８±０．４５（ｍｍｏｌ／Ｌ），１．１７±０．２３（ｍｍｏｌ／Ｌ），２．４１±１．０６（ｍｍｏｌ／Ｌ）；同时测得Ｔ，Ｐ，Ｒ分别为３９．２±０．３９（℃），１２７±１０．３（次／ｍｉｎ），２９．２±５．２     

青海省三角城种羊场绵羊体内的矿物元素检测

青海省三角城种羊场绵羊块Ｎａ，Ｓｅ，Ｐ，Ｃｕ和Ｉ。夏季泌母羊唾液Ｎａ：Ｋ＝４．４：１，粪Ｎａ浓度５１０ｍｇ／ｋｇＤＭ。多数季节血浆Ｐ２为０．８０－１．１６ｍｍｏｌ／Ｌ，血浆Ｃｕ浓度为５．８２ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｃｕ：Ｍｏ〈２：１。乳汁Ｉ一低于临界值。     

红三叶组织培养及再生植株

本文采用ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２作为基本培养基，在不同激素组合条件下对红三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｐｒａｔｅｎｓｅ）子叶及下胚轴进行组织培养。在ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２附加２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／ＬＢＡ的培养基上，子叶及下胚轴愈伤组织诱导率均在８９％以上。愈伤组织继代在Ｂ５无机盐十三倍ＭＳ有机成分＋３％蔗糖＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ，＋１０ｍｇ／ＬＶｃ的培养基上生长良好。愈伤组织在Ｂ５附加０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＩＢＡ的培养基上再生植株。下胚轴在ＭＳ附加２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋１ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上直接分化形成丛生苗，转入无激素ＮＳ培养基上再生根。实验表明ＶＥ，Ｖｃ，ＰＶＰ和活性碳对愈伤组织褐化有抑制作用，１０ｍｇ／ＬＶｃ抗褐化作用最好。     

ＮａＣｌ处理对梭梭生长及生理生态特征的影响

 以１年生梭梭幼株为材料,采用盆栽试验研究不同浓度（０,５０,１００,２００,４００ ｍｍｏｌ／Ｌ）ＮａＣｌ处理对梭梭生长状况及同化枝过氧化氢（Ｈ_２Ｏ_２）、丙二醛（ＭＤＡ）含量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰＸ）活性、水势、可溶性糖和脯氨酸含量的影响。结果表明,低浓度的ＮａＣｌ处理（５０ｍｍｏｌ／Ｌ）对梭梭的生长具有促进作用,梭梭株高和基茎粗在４００ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ处理下较对照显著减少,冠幅面积和同化枝、茎干重在ＮａＣｌ浓度为≥２００ ｍｍｏｌ／Ｌ 时较对照开始显著减少,根干重在ＮａＣｌ浓度为≥１００ｍｍｏｌ／Ｌ时较对照呈显著减少趋势。因此,ＮａＣｌ胁迫对梭梭根生长的抑制作用大于对冠幅面积,同化枝和茎干重大于对株高和基茎粗。根冠比在ＮａＣｌ浓度≥１００ ｍｍｏｌ／Ｌ 时较对照显著减少。Ｈ_２Ｏ_２ 和ＭＤＡ 含量在高浓度ＮａＣｌ处理下较对照出现积累现象。低浓度ＮａＣｌ处理下（≤１００ｍｍｏｌ／Ｌ）,梭梭同化枝ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ 和ＡＰＸ 活性较对照均有所提高,它们协调一致的共同作用,有效地清除植物体内的活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）,高浓度的ＮａＣｌ处理下（≥２００ｍｍｏｌ／Ｌ）,ＣＡＴ 和ＰＯＤ 活性较对照开始降低,抗氧化酶系统对ＲＯＳ的清除效率减弱。梭梭同化枝水势随ＮａＣｌ处理浓度升高而降低。可溶性糖和脯氨酸含量随ＮａＣｌ浓度增加较对照先上升后降低。     

牛Y染色体特异DNA序列的体外扩增

本试验建立了用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）体外扩增牛Ｙ染色体特异ＤＮＡ序列的方法。在牛、山羊和绵羊Ｙ染色体特异ＤＮＡ同源序列高度保守区设计一对引物，两条引物均为２０ＮＴ，对公牛Ｙ染色体特异的３０７ｂｐ序列进行体外扩增。从屠宰的成年公牛、母牛肝提取ＤＮＡ，用作ＰＣＲ扩增的模板。ＰＣＲ反应总体积为５０μＬ，各成分含量为：２５ｍｍｏ１／ＬＴｒｉｓ－ＨＣＩ（ｐＨ８．２），２５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４、２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍＬｇｅｌａｔｉｎ、５％Ｆｏｒｍａｍｉｄｅ、ｌμｇ模板、引物各为２５ｐｍｏｌ、ｄＮＴＰ各为２００μｍｏｌ／Ｌ、ＤＮＡ聚合酶２ＩＵ。反应在微机控制ＰＣＲ仪上进行，采用９２．５℃变性，５５℃退火，７２℃延伸，共３５个循环。扩增产物在２％琼脂糖凝胶上电泳，用ｐＧＥＭ－７ｚｆ（＋）Ｈａｅ　Ⅲ作分子量标准。电泳结果，公牛个体样品显示清晰可见的特异ＤＮＡ扩增带，而母牛个体样品无扩增片段出现。扩增产物用ＰｓｔⅠ酶解后出现３条区带，与预期结果一致。     

高原绵羊血气分析

用血气分析仪对２５只高原绵羊进行血气分析，结果：ｐＨ７．３０６±０．０５，ｐＯ２４．４５±０．４８ｋＰａ，ｐＣＯ２４．９４±０．４９ｋＰａ，Ｏ２Ｓ％５８．７３±６．９３，ＨＣＯ－３２０．７０±３．５３ｍｍｏｌ／Ｌ，ＴＣＯ２２１．６８±２．８３ｍｍｏｌ／Ｌ，ＢＥ－４．２８±２．８８ｍｍｏｌ／Ｌ，ＳＢＣ２０．３０±２．７１ｍｍｏｌ／Ｌ，ＳＢＥ－５．３±３．１１ｍｍｏｌ／Ｌ。     

青海细毛羊生化遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和火焰光度法对５０９只青海细毛羊细血液和乳汁中ＨＢ，ＥＰ－１，ＥＰ－２，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ１，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｈｐα－ＬＡ和β－ＬＧ总共１３个位点的多态性进行了研究。结果为：（１）在青海细毛羊的ＨＢ，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ１，Ｈｐ，β－ＬＧ总共９个位点上发现多态性，多态性位点的比例为６９．２３％；（２）每个位点实有的平均等位     

SPF鸡人工感染鸡败血霉形体后血液生物化学变化

用鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准强毒Ｒ株人工感染１５日龄ＳＰＦ鸡,在感染后１５ｄ采血作血液生物化学检验。结果：ＴＢｉｌ、ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＡＬＰ、ＬＤｈ、ＣＯ２－ＣＰ、ＣＲＥ、ＢｕＮ、ＣＲＥ－Ｕ、无机磷、Ｍｇ＾２＋明显升高,而ＴＰ、ＡＬＢ、Ａ／Ｇ、Ｃｈｏ、Ｇｌｕ、Ｃａ＾２＋等明显下降,ＲＢＣ和Ｈｂ下降,ＷＢＣ上升,其中ＬＣ和嗜酸性白细胞明显上升。说明ＭＧ不仅造成呼吸系统障碍,也对肝功能和功能产生较大影     

家蚕RAPD的扩增条件、重复性及遗传模型研究

发现当ＰＣＲ体系中Ｍｇ￣（２＋）为２ｍｍｏｌ／Ｌ、ｄＮＴＰｓ为１５０μｍｏｌ／Ｌ、Ｔａｇ酶为１Ｕ、引物为０．２μｍｏｌ／Ｌ时，以４０～４２℃退火可得到稳定结果；８％的ＤＭＳＯ对提高扩增特异性有利；分别从蚕卵、蚁蚕、５龄蚕丝腺、体壁及生殖腺、蛹、蛾中提取模板ＤＮＡ，其ＲＡＰＤ结果一致；以Ｃ＿（１０８）×大造为材料，发现其Ｆ＿１ＲＡＰＤ为共显性。     

正交设计优化山野豌豆ＳＲＡＰ－ＰＣＲ反应体系与引物筛选

 采用正交试验设计,以山野豌豆叶片ＤＮＡ 为模板,从Ｍｇ^２＋ 、ｄＮＴＰ、引物和ＴａｑＤＮＡ 聚合酶４种因素３个水平,对山野豌豆ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 反应体系进行优化,并比较了不同浓度模板ＤＮＡ 对扩增效果的影响,建立了山野豌豆的ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 最佳反应体系。结果表明,山野豌豆ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 最佳反应体系为：２μＬ１０×ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ（不含Ｍｇ^２＋ ）、３０ｎｇ的模板ＤＮＡ、引物２．０μｍｏｌ／Ｌ、Ｍｇ^２＋ ２．０ｍｍｏｌ／Ｌ、ＴａｑＤＮＡ 聚合酶１．５Ｕ、ｄＮＴＰ０．２ｍｍｏｌ／Ｌ,总体积为２５μＬ。各因素对扩增反应结果均有不同影响,其中以引物浓度影响最大,ｄＮＴＰ 浓度的影响最小。运用该体系对３份山野豌豆种源进行验证,证明该体系稳定可靠,并从９８对ＳＲＡＰ 引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的２０对引物组合。这一体系的建立及多态性引物组合的筛选为ＳＲＡＰ分子标记技术进行山野豌豆分子遗传学研究奠定了基础。     

中山龙牙蕉采后防裂试验

有报道指出,香牙蕉（ＡＡＡ）植株缺钙时果实品质差且成熟时果皮开裂。也有试验证实对红江橙、荔枝等果树叶面喷钙及植物生长调节剂可减轻采前裂果现象。据此笔者于１９９７－１９９８年在对中山龙牙蕉裂果发生过程进行观察的同时,开展了田间喷钙及植物生长调节剂的防裂试验。 试验设８个处理：（１）０．５％ＣａＣｌ２（氯化钙）,（２）１％ＣａＣｌ２,（３）１．５％ＣａＣｌ２,（４）０.５％ＣａＣｌ２＋ＧＡ３（赤霉素）１０ｍｇ／ｌ,（５）０．５％ＣａＣｌ２＋２,４－Ｄ１０ｍｇ／ｌ,（６）０．５％ＣａＣｌ２＋ ２,４－Ｄ…     

甘肃新生羔羊腹泻症的矿物元素检测

探讨甘肃省６个地区７日龄内新生羔羊体内的矿物元素水平与新生羔羊腹泻症的关系。羔羊血浆Ｚｎ含量为１２×１０－３ｍｍｏｌ／ｌ～２３×１０－３ｍｍｏｌ／ｌ,Ｓｅ含量为０．３１×１０－４ｍｍｏｌ／ｌ～２．９２×１０－４ｍｍｏｌ／ｌ,呈严重缺乏。     

青海省河卡种羊场绵羊体内的矿物元素检测

经检测河卡种羊场绵羊缺Ｎａ，Ｓｅ，Ｍｇ，Ｓ，Ｐ，Ｃｕ，Ｚｎ，Ｉ矿物元素。夏季 乳母羊唾液Ｎａ：Ｋ＝５．７：１，全年粪Ｎａ浓度为５６２－９３２ｍｇ／ｋｇ，多数季节血浆Ｓｅ浓度为１．０１－１．３９ｍｏｌ／Ｌ，粪Ｓｅ浓度为０．０２４－０．０４５ｍｇ／ｋｇ。     

^60CO—γ射线辐照和高压熏蒸对SPF鸡饲料营养成分的影响

采用３．０Ｍｒａｄ＾６０ＣＯ－γ射线辐照和高压熏（１２１℃，２０ｍｉｎ）ＳＰＦ鸡饲料，并对处理后中料营养成分于试验后７天进行分析，辐照后７天粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为１．１、４．４、２．３、５．３、５．０、６．７、１０．０、０、０、０、。辐射后ＶＢ６、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为９．７、１１．５