僵蚕乙醇提取物对HearNPV的增效作用研究

【目的】利用僵蚕乙醇提取物作为棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)的生物增效剂,研究其对棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)毒力的增效作用与内在机制。【方法】以棉铃虫3龄幼虫为标靶试虫,在HearNPV中添加0~80μg/mL僵蚕乙醇提取物,研究其对HearNPV的增效作用,并通过僵蚕乙醇提取物对试虫ALP活性的影响探讨其增效作用机理。【结果】僵蚕乙醇提取物对HearNPV具有显著的增效作用,能够显著提高病毒的毒力,40μg/mL的剂量水平就能够使病毒感染的3龄棉铃虫在第6天达到90%的死亡率、第7天达到100%的死亡率。剂量80μg/mL的僵蚕乙醇提取物能够显著缩短棉铃虫3龄试虫的LT50和LT90值,其LT50和LT90分别较对照缩短23.2%和27.8%。同时,在HearNPV中添加僵蚕乙醇提取物可以显著降低试虫中肠的ALP活性,僵蚕乙醇提取物的使用剂量达到40μg/mL以上时,试虫中肠ALP活性较对照显著下降,且差异随感染时间的延长进一步增大。【结论】僵蚕可以作为病毒增效剂新材料,其在克服传统杆状病毒制剂杀虫速度慢的缺陷方面具有极好的发展前景。     

茚虫威对甜菜夜蛾的毒力及后效应

为明确茚虫威对甜菜夜蛾幼虫 的作用特点,采用浸叶法和点滴法测定了茚虫威对甜菜夜蛾3龄和4龄幼虫的毒力,及其羧酸酯酶活性的影响.结果表明:茚虫威对甜菜夜蛾3龄和4龄幼虫均有胃毒毒力和触杀毒力,且胃毒毒力高于触杀毒力.同时,茚虫威对4龄幼虫的胃毒毒力(LC50为2.69 mg·L-1)稍高于其3龄幼虫(LC50为3.65 mg·L-1).茚虫威对不同龄期的甜菜夜蛾幼虫体内羧酸酯酶的影响均表现为先激活后抑制,且对4龄幼虫的影响更强烈.茚虫威不同剂量处理对4龄幼虫的化蛹率、蛹重、羽化率及子代幼虫成活率产生了明显影响,影响程度为LC50＞ LC30＞ LC10.     

息半夏皮乙醇提取物对小菜蛾的杀虫活性

为探索息半夏皮中生物活性物质在小菜蛾防治上的应用,采用叶片浸渍法和浸虫法测定息半夏皮乙醇提取物对3龄小菜蛾幼虫的拒食活性、触杀活性和胃毒活性。结果显示：息半夏皮乙醇提取物对小菜蛾幼虫的拒食和胃毒作用较为突出。在选择性拒食试验中,乙醇提取物对小菜蛾幼虫24 h和48 h的拒食中浓度（AFC50）分别为30.89 mg/mL和38.71 mg/mL;在非选择性拒食试验中,乙醇提取物对小菜蛾幼虫24 h和48 h的拒食中浓度（AFC50）分别为24.63 mg/mL和6.54 mg/mL。乙醇提取物对小菜蛾有触杀和胃毒作用,100 mg/mL药液处理72 h小菜蛾幼虫触杀和胃毒校正死亡率分别为65.87%和71.42%。     

半夏乙醇提取物对小菜蛾幼虫生物活性的研究

[研究目的]为了有效控制小菜蛾的危害,研发新型、高效植物源杀虫剂.[方法]采用95%乙醇对半夏干粉进行索式提取,以叶片浸渍法和浸虫法测定了提取液对小菜蛾幼虫的杀虫活性.[结果]半夏乙醇提取物对小菜蛾3龄幼虫具有较好的拒食、触杀、胃毒和生长抑制的作用,提取物浓度越高,效果越明显.在触杀试验中,当提取物在100 mg/ml浓度下,处理72 h后小菜蛾幼虫的校正死亡率为61.44%.在选择性拒食试验中,提取物对3龄幼虫的AFC50分别为32.68 mg/ml(24 h)和39.16 mg/ml(48 h);在非选择性拒食试验中,提取物对3龄幼虫的AFC50分别为17.26 mg/ml(24 h)和21.32 mg/ml(48 h).半夏乙醇提取物对小菜蛾的胃毒及生长发育抑制作用也明显.饲喂72h时,浓度为100mg/ml处理的小菜蛾幼虫校正死亡率高达69.41%;在处理48h,浓度为100mg/ml的提取物对小菜蛾3龄幼虫的生长抑制率为64.43%o[结论]半夏提取物对小菜蛾幼虫具有较高的生物活性和理想的控制效果.     

两类昆虫生长调节剂对棉铃虫毒性研究

研究了两类作用机制完全相反的昆虫生长调节剂(IGR)氟铃脲和抑食肌、米满单用或混用对棉铃虫中毒症状、毒性及作用方式。供试3龄幼虫经氟铃脲点滴处理后，逐渐表现出活动缓慢、反应迟钝、取食减少，最终死亡。共试了龄幼虫经抑食处理后，先也表现为行为与取食减缓，最终死亡的现象。两种药刺混合处理后，部分试虫则表现抑食肼中毒症状，少量个体出现两种症状混合现象。氟铃脲对棉铃虫3龄幼虫的LD50战值(点滴法)和对棉铃虫l龄幼虫的I‰值(叶片法)分别为0．7434μgai．／头和2．0592mg/L，表现出很强的触杀作用和胃毒作用：米满对棉铃虫l龄幼虫的LC50值为25．2576mg／L，胃毒作用也较强，但抑食肼对棉铃虫3龄幼虫的LC50值超过39．3633μgai．／头，触杀毒力很弱。氟铃脲与米满混合处理后，对棉铃虫的作用以相互独立作用为主，但氟铃脲1mg/L加米满5m/L则呈现增效作用趋势。     

中国粗榧杀虫活性初步研究

【目的】明确中国粗榧的杀虫活性并初步探索其活性成分分离条件,为进一步深入研究中国粗榧的杀虫作用奠定基础。【方法】采用室内生物活性测定方法,评价中国粗榧丙酮提取物对小菜蛾、粘虫、玉米象、淡色库蚊、家蝇、烟蚜和酢浆草茹叶螨等7种重要害虫的杀虫活性;并以粘虫3龄幼虫为试虫,采用活性追踪初步探索中国粗榧中杀虫活性成分的分离条件。【结果】中国粗榧丙酮提取物对供试的7种重要害虫均具有一定的生物活性,其中对小菜蛾和粘虫幼虫的杀虫活性较好,处理48h后,其对小菜蛾3龄幼虫的胃毒致死中浓度(LC50)为74.94mg/mL,拒食中浓度(AFC50)为45.39mg/mL,对粘虫3龄幼虫的胃毒LC50为562.28mg/mL,AFC50为71.96mg/mL;处理24h后,对粘虫3龄幼虫的触杀致死中量(LD50)为0.22mg/头;初步分离结果表明,中国粗榧杀虫活性成分主要集中在石油醚萃取物中的Y5和Y6组分中,点滴量为0.05μg/头时,其触杀死亡率均为100%。【结论】中国粗榧丙酮提取物具有较好的杀虫活性,其作用方式表现为拒食、胃毒及触杀,活性成分主要是非极性亲脂物质。     

虱螨脲亚致死剂量对棉铃虫生长发育和繁殖力的影响

用虱螨脲亚致死剂量处理棉铃虫1龄幼虫和3龄幼虫,结果表明:虱螨脲具有较强后效性,能降低棉铃虫化蛹率、羽化率、产卵量,提高畸形蛹、畸形蛾比例.1龄幼虫按0.1和0.2 mg/kg一次饲毒后,化蛹率分别为20.00%和15.50%,与对照相比显著降低;处理代雌、雄成虫羽化率分别下降6.50%、9.91%和18.48%、21.76%,雌、雄畸形蛾率分别上升15.61%、12.71%和27.55%、19.50%,产卵量下降34.06%和36.50%.第2、3代与第1代相比,化蛹率、羽化率、产卵量、卵孵化率逐渐有所提高,畸形蛹率、畸形蛾率降低,但与对照仍存在差异,表明虱螨脲对试虫的影响随世代延续而减弱,但至少可持续到第3代,且随用药剂量提高,其影响加大.与1龄幼虫饲毒结果相比,对3龄幼虫的影响程度相对较小,但趋势一致.     

巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究

研究巴东醉鱼草(Buddleja albiflora Hemsl.)95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物对3种鳞翅目害虫和朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus B.)的生物活性.结果表明:巴东醉鱼草95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取物对试虫有较高的生物活性,其中乙酸乙酯萃取物在24 h对3龄小菜蛾(Plutella xylostellaL.)幼虫的拒食率达到94.22%,48 h时对4龄菜青虫(Pieris rapaeL.)幼虫的拒食率达到83.94%,对3龄粘虫(Mythi mna separataW.)幼虫的24 h拒食中浓度(AFC50)为2.4185mg·mL-1,对朱砂叶螨(T.cinnabarinus)4 h致死中浓度(LC50)为0.2108 mg·mL-1;石油醚萃取物72h对3龄小菜蛾(P.xylostella)幼虫的拒食率为64.11%,48 h对4龄菜青虫(P.rapae)幼虫的拒食率为75.18%,对3龄粘虫(M.separata)幼虫48 h的AFC50值最高(1.1392 mg·mL-1),对朱砂叶螨(T.cinnabarinus)4 h LC50为0.3606 mg·mL-1;巴东醉鱼草95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物还抑制试虫的生长发育,导致试虫化蛹和羽化不正常,其中石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物的作用尤为突出.     

3-羟基印楝素的制备、结构鉴定及生物活性测定

对印楝素进行水解反应,得到3-羟基印楝素。3-羟基印楝素处理后24、48 h,对斜纹夜蛾3龄幼虫拒食中体积质量(media antifeedant concentration,AFC50)分别为14.10和35.82mg.L-1。在3 mg.L-1的剂量下处理后24 h,3-羟基印楝素对小菜蛾3龄幼虫的拒食率为65.93%;在5 mg.L-1的剂量下处理后24 h,对棉铃虫3龄幼虫的拒食率为80.05%;在3 mg.L-1的剂量下处理后72 h,小菜蛾3龄幼虫的死亡率为79.34%;在5 mg.L-1的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的死亡率为79.81%;在2 mg.L-1的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的体重下降率为89.06%;在1 mg.L-1的剂量下处理后72 h,斜纹夜蛾3龄幼虫的体重下降率为51.89%。     

氟铃脲对棉铃虫的毒力及几丁质和几丁质酶的影响

【目的】探讨氟铃脲对棉铃虫的毒性机制,为苯甲酰基脲类农药在农业生产上的应用以及新农药的研发提供科学依据。【方法】以棉铃虫为材料,研究了氟铃脲对棉铃虫的杀虫活性,探讨氟铃脲处理后对棉铃虫几丁质含量和几丁质酶活性的影响,并采用实时定量PCR技术研究了氟铃脲对几丁质酶基因表达的影响。【结果】供试棉铃虫3龄幼虫经氟铃脲直接浸渍处理后,逐渐表现出反应迟钝、非正常蜕皮以及表皮发育异常等中毒症状,最终畸形死亡。氟铃脲处理后96h的LC50值为226.43mg/L,表现出较强的触杀作用以及致畸活性。用氟铃脲120和240mg/L处理72h后棉铃虫3龄幼虫几丁质含量显著降低,并且120mg/L氟铃脲处理72h后显著激活了试虫几丁质酶活性,而亚致死质量浓度(60mg/L)诱导棉铃虫体内几丁质酶活性需要较长的作用时间。实时定量PCR结果表明,氟铃脲(60mg/L)处理后显著抑制了棉铃虫幼虫几丁质酶基因的表达水平。【结论】氟铃脲对棉铃虫具有较强的毒性作用,能够降低棉铃虫虫体几丁质含量,激活棉铃虫几丁质酶活性,几丁质酶的变化可能与氟铃脲对棉铃虫的毒性有关。     

Cry1Ac抗、感棉铃虫碱性磷酸酯酶（ALP1）的表达量比较

【目的】通过比较Cry1Ac抗、感棉铃虫昆虫中肠碱性磷酸酶（ALP1）表达量的差异及抗性棉铃虫取食Cry1Ac蛋白对ALP1表达量的影响,分析ALP1表达量变化与抗性的关系,为进一步明确Bt抗性机制、制定抗性治理策略提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR技术,比较敏感棉铃虫、Cry1Ac抗性棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料和正常饲料后ALP1表达量的差异。【结果】ALP1在棉铃虫整个发育期都表达,幼虫的表达量最高,蛹期表达量最低,在成虫体内也有较高的表达;ALP1在幼虫中肠表达量最高,其次是后肠、前肠、马氏管,表皮中的表达量最低;与敏感品系相比,对Cry1Ac具有中等水平抗性的棉铃虫ALP1表达量明显增加,尤其是取食含Cry1Ac蛋白饲料的抗性棉铃虫幼虫的ALP1的表达量显著升高,但抗性棉铃虫取食正常饲料后,2、3龄幼虫的ALP1的表达量与敏感棉铃虫差异不显著;所有的抗性品系4龄棉铃虫幼虫中肠ALP1的表达量都显著高于敏感品系,而且随着棉铃虫抗性倍数的升高,ALP1的表达量呈逐渐降低的趋势。【结论】抗性棉铃虫中肠ALP1表达量的改变可能与Cry1Ac抗性、Cry1Ac代谢有一定的关系。     

美国白蛾生长发育对寄主植物不同次生代谢物质的适应性

为探明林木叶部害虫美国白蛾(Hyphantria cunea)对寄主的适应性,分析了寄主植物不同次生代谢物质对其生长发育的影响。分别用含有单宁(5、50 mg·g-1)、黄酮(3、8 mg·g-1)、肉桂酸(3、8 mg·g-1)、水杨甙(15、150 mg·g-1)、对羟基苯甲酸(5、50 mg·g-1)的人工饲料,饲喂美国白蛾幼虫,观察记录幼虫的生长发育状况。结果表明:取食含有次生代谢物质的饲料后,各处理组4~6龄幼虫的体质量、体长、头壳宽和蛹质量均不同程度的低于对照,且高质量分数处理组不同程度的低于低质量分数处理组;其中,单宁处理组与对照差异显著(P<0.05)。单宁处理组幼虫未至化蛹全部死亡,其余处理组的幼虫存活率与对照差异不显著(P>0.05);黄酮和肉桂酸处理组的化蛹率和羽化率与对照差异不显著,黄酮处理组的发育历期显著延长,水杨甙低质量分数处理组化蛹率显著高于对照组,对羟基苯甲酸高质量分数处理组羽化率显著低于对照组(P<0.05)。综上,美国白蛾对寄主林木不同质量分数的不同次生代谢物具有逐渐解毒适应能力,对不同次生代谢物的适应能力不同,其中对单宁的适应能力最差。     

无花果叶和博落回叶提取液对松材线虫的毒杀作用

[目的]研究无花果叶和博落回叶几种不同有机溶剂提取液对松材线虫的杀虫活性。[方法]采用浸渍生测法研究了无花果叶和博落回叶甲醇、乙醇、乙醚、丙酮4种分析纯有机溶剂提取液对松材线虫的抑制作用。[结果]无花果叶和博落回叶的不同溶剂提取液均对松材线虫有抑制作用,其中无花果叶提取液浓度在200 mg/ml时,甲醇提取液的松材线虫死亡率(54.5%)最高;博落回叶提取液浓度在200 mg/ml时,蒸馏水对照组和甲醇提取液在72 h校正死亡率分别达到94.4%和88.9%,在20 mg/ml时2种溶剂提取液校正死亡率也分别达到73.3%和67.6%。[结论]为新型杀松材线虫药剂的综合开发利用提供了理论依据。     

寄主植物、温度对金银花尺蠖幼虫消化酶活性的影响

  目的  通过研究寄主植物、温度对金银花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga幼虫消化酶活性的影响,为深入研究金银花尺蠖环境适应性的生理生化机制奠定基础。  方法  采用3,5-二硝基水杨酸法、福林-酚法和标准氢氧化钠溶液滴定法,通过分光光度计和滴定管测定了寄主植物、温度对金银花尺蠖幼虫消化酶活性的影响。  结果  取食3个金银花Lonicera japonica品种‘九丰1号’‘Jiufeng No.1’、‘响水1号’‘Xiangshui No.1’、‘响水2号’‘Xiangshui No.2’和野生金银花后,金银花尺蠖各龄幼虫消化酶活性均不一样。取食野生金银花的金银花尺蠖淀粉酶、蔗糖酶和蛋白酶活性均最高,脂肪酶活性最低,在1龄幼虫中4种消化酶的活性分别为18.37、26.45、22.31和5.54 mmol·g-1·min-1。4种消化酶活性均随着幼虫龄期的增加而增大,取食4种金银花后5龄幼虫的淀粉酶活性分别比1龄幼虫增加了33.39%、27.48%、33.31%和45.29%,蔗糖酶活性分别增加了19.12%、15.02%、14.64%和29.64%,蛋白酶活性分别增加了25.55%、18.69%、21.69%和41.46%,脂肪酶活性分别增加了84.95%、68.04%、68.41%和77.80%。在16~34℃,4种消化酶活性均随着温度的升高表现为先上升后下降的趋势,1~5龄幼虫的淀粉酶活性在22℃最高,分别为19.95、20.57、21.79、23.64和25.86 mmol·g-1·min-1;1~5龄幼虫的蔗糖酶活性在22℃最高,分别为27.65、28.89、29.85、31.45和32.89 mmol·g-1·min-1;1~5龄幼虫的蛋白酶活性在25℃最高,分别为21.65、22.76、23.43、25.71和26.98 mmol·g-1·min-1;1~5龄幼虫的脂肪酶活性在28℃最高,分别为7.38、8.49、9.81、11.33和13.21 mmol·g-1·min-1。方差分析显示:寄主植物和幼虫龄期的交互作用,以及温度和幼虫龄期的交互作用对金银花尺蠖幼虫4种消化酶活性均没有显著影响。  结论  寄主植物、温度能影响金银花尺蠖幼虫消化酶的活性。     

何首乌等3种植物对棉铃虫生物活性的初步研究

为了寻求新型植物源杀虫剂,本试验以棉铃虫为试虫,采用饲料混毒法对何首乌、桂皮和花椒3种植物干粉及何首乌不同溶剂提取物进行了生物活性测定.结果表明:3种植物干粉对棉铃虫的生长抑制率由高到低依次为:何首乌＞桂皮＞花椒;用何首乌干粉处理饲料进行饲喂(第5天不换饲料),试虫则一直处于幼虫状态直至死亡.70％乙醇粗提物和水粗提物...     

人工饲料对棉铃虫生长发育和繁殖力的影响

通过时用烟叶和人工饲料饲养的棉铃虫进行比较,探究人工饲料对棉铃虫生长发育和繁殖力的影响,结果表明,与烟叶饲养的棉铃虫相比,人工饲料饲养1代后,幼虫发育历期由15.24 d缩短为12.45 d,历期的天数也较为集中;蛹重有了显著的增加,由216.69 mg增加到307.33 mg;化蛹率和羽化率都有明显的增加,分别由36.39%,69.47%增加到66%,84.84%;每头雌虫产卵量也有显著的增加,由607.5粒增加到1 174.4粒.但是用人工饲料连续饲养10代后的棉铃虫,蛹重、化蛹率、羽化率和产卵量都有所下降,其中以产卵量下降最为严重,下降到了122.8粒,而幼虫的历期基本上没有变化.说明人工饲料能够满足棉铃虫生长发育的需要,但是如果长期使用人工饲料饲养会出现种群退化的现象.     

茜草等23种植物对棉铃虫生物活性的研究

为寻求对有害生物高效、非靶标生物安全、对人类健康和生态环境安全的生物农药,本研究采用饲料混毒法,测定了23种植物干粉对棉铃虫生长发育的影响。结果表明,茜草、儿茶、白头翁、丹皮和香铃子表现出较强的生长发育抑制作用。以茜草的影响最明显,体重抑制率最大时为84.87%,试虫体重仅43.15 mg,而对照高达285.27 mg;幼虫历期达19 d,比对照延长了5 d;尤其对成虫产卵有明显的影响:产卵量比对照约少700粒,产卵历期缩减了3 d,卵的孵化率也仅有67.0%。茜草不同溶剂提取物对棉铃虫均表现出良好的拒食活性,但触杀活性和胃毒活性比较低。95%乙醇提取物的拒食活性最高,石油醚提取物的胃毒活性最高;各溶剂提取物的触杀活性均较低,校正死亡率均在5%以下。     

取食量对斜纹夜蛾生长发育的影响

通过控制取食量的方法模拟拒食作用,研究了不同取食量和印楝素拒食处理对斜纹夜蛾幼虫生长发育的影响．结果表明,食物量的减少对斜纹夜蛾幼虫的生长发育有明显的抑制作用．对斜纹夜蛾3龄幼虫进行控制取食量处理,发现随取食量的降低,生长抑制作用增大,试虫的发育历期延长,死亡率增高,但化蛹率和羽化率所受影响不大．用不同浓度的印楝素处理斜纹夜蛾3龄幼虫,发现随印楝素浓度的增高,对斜纹夜蛾幼虫的生长抑制作用越明显．印楝素拒食处理使试虫的发育历期延长,死亡率升高,这与控制取食量的结果相似,但印楝素使试虫的化蛹率和羽化率明显降低,这与控制取食量的结果有差别．     

磷化铝对土壤微生物数量和酶活性的影响

为明确磷化铝对土壤微生物数量和酶活性的影响,采用室内培养的方法,研究了经0.1、1mg.g-1和10mg.g-13个浓度磷化铝熏蒸处理后,供试土壤中微生物数量和土壤酶活性的变化。结果表明,磷化铝处理土壤后,各个浓度的磷化铝对土壤细菌、真菌和放线菌数量具有抑制作用,浓度越高,抑制作用越强,但一段时间后低浓度(0.1mg.g-1)处理对土壤微生物数量的影响恢复至对照水平。磷化铝对土壤脲酶表现为抑制作用,并随浓度升高而增强;低浓度处理对土壤中的蔗糖酶活性抑制作用不明显,而高浓度(10mg.g-1)处理表现为强烈的抑制作用;各浓度处理初期对土壤过氧化氢酶表现为抑制或激活作用,但到第30d,恢复至对照水平。这说明,施入常规剂量的磷化铝对土壤微生物数量和土壤酶活性会产生一定的影响,在经过一定时间后均可恢复至对照水平。