稻瘟病菌发育cDNA文库构建与表达序列标签分析*

利用稻瘟病菌(Magnaporthegriesa)连续6个发育时期的材料构建了一个混合cDNA文库。文库滴度,重组率和插入片段长度等质量分析表明,构建的文库包含完整的稻瘟病菌基因,可用于病菌基因表达分析。利用该文库获得了7456条5′端表达序列标签(ESTs)(GenBank收录号:(CK909944￣CK913666和CK928583￣CK932582),生物信息分析表明:EST序列拼接出2975个假定独立转录本(TUTs),冗余度为60.1%;从cDNA文库中筛选出大量的低丰度表达基因,约占TUT总数的79.8%,说明在文库中基因组成类型的复杂性较高;在所有TUTs中,功能未知基因约占85.5%,编码ECM33蛋白和疏水蛋白等病菌致病相关的注释基因高丰度表达,进一步表明该cDNA文库反映了病菌侵染和发育过程中基因表达的状况。     

基因组ITS序列分析鉴定红曲霉菌株

为建立有效的红曲霉分类鉴定方法,进一步发掘和保护红曲霉菌株生物资源,以福建省内各类红曲霉生产菌株为主要材料,采用MEGA 5.10软件对其ITS序列进行分析,构建系统发育树,结合在麦芽汁琼脂培养基、察氏酵母提取物琼脂培养基和甘油硝酸盐琼脂培养基上的菌落形态特征以及生理生化试验对41株红曲霉进行分类鉴定。试验结果显示41个红曲霉菌株的ITS序列长度为520bp左右,嘌呤嘧啶(GC)含量比例在56.2%~58.0%,41个不同序列间的平均遗传距离为0.0052。经分子生物学手段分析,辅以菌落形态观察和生理生化试验,最终将41株红曲霉鉴定为紫色红曲霉、丛毛红曲霉、橙色红曲霉、红色红曲霉、烟灰色红曲霉和白色红曲霉6大类。     

干旱胁迫下白花柽柳抑制性消减文库的构建分析

本试验构建了PEG6000渗透胁迫下白花柽柳的抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)文库。文库克隆的重组率为95 % ，插入片段大部分集中在100～1000 bp之间。通过对文库阳性克隆的随机测序，并对表达序列标签（expressed sequence tag, EST）分析得到了100个与干旱胁迫相关的EST片断，它们涉及了植物的渗透调节、信号传递、转录调控、活性氧清除、蛋白代谢、跨膜转运和离子平衡及光合作用等方面。此结果对今后进一步研究这些基因的功能奠定了基础。     

干旱胁迫下白花柽柳抑制性消减文库的构建与分析

白花柽柳(Tamarix albiflonum M.T.Liu.)是一种耐旱性的植物。本实验利用抑制性消减杂交技术(SSH)克隆了白花柽柳多个抗旱相关基因的EST片段,并对这些EST片段进行了分析。     

大梅与梅山猪背最长肌正反消减文库的构建及序列分析

为从基因差异表达的角度研究杂种优势的分子机理,构建了差减效率均为210倍的大梅与梅山猪背最长肌正反消减文库。在大梅(被消减)-梅山库中挑选了610个有效克隆,经斑点杂交筛选出48个阳性克隆,测序后经Blastn网上比对揭示了37个基因,其中28个EST是已报道基因的cDNA片段,9个在NCBI数据库中没有同源序列。在梅山(被消减)-大梅挑选了580个有效克隆,经斑点杂交筛选出45个阳性克隆,测序后经Blastn网上比对揭示了34个基因,其中26个EST是已报道基因的cDNA片段,8个在NCBI数据库中没有同源序列。     

以质粒载体构建土壤宏基因组文库的研究

从土壤中提取土壤总DNA,切割成一定长度的DNA片段并连接到载体上,然后转化宿主菌,形成一个重组DNA文库即宏基因组（metagenome）文库.目前对宏基因组的研究在国际上是土壤微生物学研究的前沿领域和热点.文库构建后可以根据宿主细菌获得的功能筛选相应的克隆;也可以用已知的探针分离目的基因片段,加上表达调控元件后获取活性产物,所以通过宏基因组文库可以规避微生物培养的限制而寻找新的功能基因或者直接筛选活性物质;在早期宏基因组还被用来研究土壤微生物的遗传多样性.因此构建宏基因组文库是研究微生物分子生态学和开发微生物资源的强有力工具.本研究从土壤中直接分离DNA,部分酶切后分别回收2～6kb和6～9kb片段,然后分别与pUC19质粒载体连接,连接产物转化大肠杆菌DH5α构建了土壤宏基因组文库,实验中比较了不同DNA片段长度和不同的转化方法对文库构建的影响.     

一株曲霉的一种中温糖化酶的纯化及其部分酶学特性

本研究从广西花坪自然保护区采集的土壤中筛选获得了一株产糖化酶丝状真菌菌株57-45,通过形态学观察和真菌内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列比对分析,将其初步鉴定为曲霉属（Aspergillus sp.）的一个种。纯化真菌57-45所产的一种胞外糖化酶经过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和阴离子交换层析三步蛋白质纯化步骤,得到在SDS-PAGE上约60kD的单一蛋白质条带,薄层层析分析表明该纯化的蛋白质水解可溶性淀粉的产物只有葡萄糖,证明该纯化的蛋白质为糖化酶。纯化的糖化酶Km值为1.9mg/mL,Vmax为4148μmol/（min·mg）,最适作用pH5.5,最适作用温度50℃,在同步糖化发酵中有应用的潜力。金属离子Fe3＋、Zn2＋、Cu2＋对酶活有较强的抑制作用,EDTA对酶活有较强的促进作用。本文结果将为进一步研究曲霉糖化酶的酶学特性提供新的材料。     

玉米淀粉制备双醛淀粉的试验

双醛淀粉用途广泛，但在国内几乎没有生产和应用。文中对双醛淀粉的制备工艺进行了系统研究，得出了制备双醛淀粉的最佳工艺条件。试验结果表明：在所选参数下，高碘酸钠氧化淀粉时，高碘酸钠应稍过量；NaIO₄/Starch摩尔比=1.1/1；NaIO₄浓度为0.7 M；反应温度35～40℃；反应时间控制在3 h；pH值在1.2～1.5为好；所得产品中淀粉的醛基含量在95%以上。     

建设知识服务型高校数字图书馆的构想

知识服务是我国高校数字图书馆建设的发展趋势,也是数字图书馆建设的高级形态,其核心理念即是将数字图书馆建设由提供信息服务向提供知识服务转变。本文探讨了知识服务型数字图书馆的基本服务模式,提出了建设知识服务型数字图书馆的若干举措和构想。     

论高校如何创建生态图书馆

文章先介绍了生态理念的内涵及特征,然后介绍了生态图书馆定义,最后论述了高校图书馆如何创建生态图书馆。     

数字图书馆系统的多条件查询

本文以开发的数字图书馆系统为例,介绍了实现多条件查询的方法,利用Java语言编写代码,经过测试,运行良好。本方法具有一定的通用性,可以很方便地转换为其它的支持嵌入式SQL语言的程序代码。     

农业数字图书馆的延伸服务

针对农业数字图书馆特点、目前发展和服务现状,探讨了农业数字图书馆在新时期服务的最佳模式,提出以丰富的文献、网络资源为依托,以农业科普基地为平台,以农村、农民为对象,拓展农业数字图书馆服务,向农村延伸,向农民渗透,使农业数字图书馆发挥最大的作用,并提出农业数字图书馆发挥作用的支撑条件。     

图书馆计算机房的电磁屏蔽

简述计算机房电磁环境的复杂性以及对计算机房电磁屏蔽设计的要点,阐述图书馆计算机房电磁屏蔽的必要性,提出对图书馆计算机房进行电磁屏蔽的设计方法,并举例进行了说明。     

高校构建和谐型图书馆的思考

本文从转变高校图书馆管理和服务理念入手,从学校与图书馆、图书馆领导与馆员、馆员与馆员、图书馆工作人员与读者等方面提出了构建和谐型图书馆的思考。     

农业数字图书馆服务新模式

根据农业数字图书馆特点、目前发展和服务现状，结合我馆“农业数字图书馆新农村科普基地建设”等项目开展情况及服务实践，提出农业数字图书馆在新时期服务的最佳模式，即以丰富的文献、网络资源为依托，以农村科普基地为平台，以农村、农民为对象，拓展农业数字图书馆服务，向农村延伸，向农民渗透。     

本量利分析在高校图书馆管理中的应用

本文通过对“本量利”三要素的分析，指出高校图书馆通过利用“本量利”分析法来指导管理工作是十分有效，对影响图书馆事业发展的各因素进行分析，建议高校图书馆转变经营理念，增强服务意识，加大资金和技术投入。     

高校图书馆特色服务研究

从特色服务的概念及特点出发，本文阐述了高校图书馆开展特色服务的必要性及应遵循的原则，并介绍了我馆几种主要的特色服务方式。     

高校图书馆图书集中采购问题探讨

本文论述了高校图书馆图书集中采购的可行性,详细介绍了高校图书馆图书集中采购的形式、存在的问题,提出了应对图书集中采购中出现问题可采取的对策。