用离子交换法分离苹果汁中果酸的技术研究

为了分离苹果汁中的果酸，该文对离子交换法分离浓缩苹果汁中果酸的技术方法进行了系统研究，通过树脂分离果酸的静态和动态试验，对离子交换树脂进行了筛选优化，对树脂洗脱剂和洗脱条件进行了优选与优化，结果表明：D380树脂对果酸的交换吸附能力最强，其静态吸附量为30.73 mg/mL，动态吸附量可达60.24 mg/mL,静态交换吸附平衡时间为270 min,最佳吸附果汁浓度为11°Brix苹果汁；D380树脂对果酸的较佳动态吸附条件为：流速5 mL/min,温度20℃，果汁浓度11°Brix的苹果汁；较佳洗脱条件为：50%乙醇，温度25℃，流速6 mL/min，洗脱3次，洗脱剂与树脂比例2∶1(v/v)。     

人造沸石对甘薯不同链长直支链淀粉的分离效果

柱层析法是根据混合物中各组分的理化性质差异,利用混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经过多次分配将组分分离纯化。该文采用回生法分离甘薯直、支链淀粉后再进行二次回生,以窄化其分子链长,并采用柱层析法分离出不同分子量分布范围的淀粉组分,直、支链淀粉组分总制备率均大于2.4%。可见光谱及分子量分布研究表明,粒径为1～3 mm的人造沸石适合分离支链淀粉,粒径为4～6 mm的人造沸石适合分离直链淀粉。经大沸石分离,聚合度大的直链淀粉分子依赖沸石表面吸附,洗脱速度快,先被洗脱下来,聚合度较小的直链淀粉分子进入沸石孔隙内部,吸附力大,后被洗脱下来;经小沸石分离,甘薯支链淀粉组分F1b中分子量小、均一度高的组分先被洗脱下来,F2b中分子量大、均一度低的组分先被洗脱下来,说明甘薯直、支链淀粉的分支度对淀粉组分的分离也有一定影响。X射线衍射表明,甘薯直链淀粉组分在18.9°、23.4°、27.2°、29.3°、32.3°、33.7°附近出现强衍射峰,甘薯支链淀粉组分在21.6°、22.9°、23.9°、26.5°、27.1°、29.3°、34.1°、35.8°、39.5°附近也出现明显的衍射峰,此时甘薯直、支链淀粉的分子量分布指数(PDI,polydispersity index)均接近1.0。人造沸石柱层析可制备出分子量分布范围极窄的甘薯直、支链淀粉,该类淀粉表现出类似金属盐的X射线衍射峰,可作为深入研究淀粉大分子空间结构变化的材料。显微图片显示直链淀粉是由多个线型分子聚集在一起,呈典型的"柳条"状,而支链淀粉呈典型的"树枝"状。该研究提供了一种大量制备分子量分布范围极窄的直、支链淀粉的简单、高效方法,为深入探索淀粉大分子聚集过程中的形态变化创造了有利条件。     

鸭粪提取物对水稻纹枯病菌的影响及其有效成分分析

为探明稻鸭共养模式抑制水稻纹枯病发生的原因,以稻鸭共养模式的鸭粪提取物为研究对象,对其抑菌活性及有效成分进行了测定和分析,以期为水稻纹枯病生物防治提供新的途径。结果表明:鸭粪乙醇提取物对水稻纹枯病菌有抑制作用,24h内最高菌丝生长抑制率和EC50分别为88.64%、26.11mg·mL-1;鸭粪乙醇提取物经萃取分离得到石油醚和乙酸乙酯两种组分,其中石油醚组分抑菌效果较弱,乙酸乙酯组分抑菌能力较强,其对水稻纹枯病菌抑制率为89.70%,EC50为15.52mg·mL-1;对乙酸乙酯组分进行硅胶柱层析分离得到5种流份,其中第2流份有显著抑菌活性,在24h和48h内对水稻纹枯病菌的抑制率分别为89.58%和80.36%。GC-MS分析表明,鸭粪的抑菌物质主要为酚酸类和含硫醇有机物质,进一步纯化和鉴定有待研究。     

仿刺参ACE抑制肽的纯化及其分子量的测定

利用仿刺参体壁制备具有抑制血管紧张素转移酶(ACE)活性的多肽,为进一步研究ACE抑制肽提供理论基础。本研究采用动物蛋白水解酶酶解仿刺参体壁,得到具有ACE抑制活性的酶解液;将酶解液粗品通过截留分子量5KDa的超滤系统,将活性部分继续用Sephadex G15分离纯化,采用HPLC法测定各组分的ACE抑制活性,同时利用RP-HPLC测定其相对分子质量分布。结果可知:仿刺参活性较高的ACE抑制肽主要由二肽到五肽组成,且分子量越小,抑制活性越高,得到了具有较高ACE抑制活性且组成比较单一的组分d,其IC50为439μg·mL-1。     

铜藻多糖酶解工艺优化及肠道环境调节功能研究

为探究铜藻多糖在葡聚糖酶作用下最佳的酶解条件及其不同分子量多糖组分产物的肠道环境调节功能,本试验采用响应面分析法优化铜藻多糖(SHP)酶解工艺条件,并考察所得多糖组分对小鼠肠道环境指标的影响。结果表明,SHP最优酶解工艺参数为酶解温度48℃、酶液浓度3.6%、pH值4.8、酶解时间2 h,测得的还原糖含量为0.550 mg·mL~(-1),与理论值基本吻合。SHP的酶解产物(SHPE)经分离纯化得到SHPE1、SHPE2、SHPE3 3种多糖组分,SHP纯化得到SHP0。对上述铜藻组分进行小鼠肠道环境调节功能试验,结果表明铜藻多糖组分均能够改善小鼠肠道环境,其中较低分子量的SHPE2和SHPE3与阳性对照组低聚果糖(FOS)在小鼠肠道pH值、内容物挥发性盐基氮(TVB-N)含量等肠道环境指标上相近。本研究表明铜藻多糖组分具备开发成为海洋藻类来源的益生元的潜力。     

径向流色谱分离纯化海藻多糖及其抗氧化活性比较分析

以裂片石莼、亨氏马尾藻和海萝3种海藻为原料,采用超声波辅助提取、分步醇沉得到7种组分粗多糖,利用径向流色谱分离纯化粗多糖,测定超氧阴离子、羟基自由基和ABTS 3种自由基体系下其抗氧化能力.结果表明:通过径向流处理,多糖回收率和蛋白脱除率分别可达97.79％和87.32％;7种海藻多糖组分均具有抗氧化活性,均随多糖浓度的增加而增加,马尾藻60％醇沉组分(SHP60)抗氧化活性最高,在其70μg·mL-1浓度时,对超氧阴离子自由基和羟基自由基清除率分别为74.34％和71.84％;同种海藻的中等分子量多糖组分的抗氧化活性较强.     

Tween 80对DDTs污染场地土壤的增溶洗脱效果研究

以苏南某滴滴涕类化合物（DDTs）污染场地土壤为研究对象,进行实验室批量洗脱试验,研究了环境友好型表面活性剂Tween 80对土壤中DDTs的增溶洗脱效果及其影响因素。结果表明,Tween 80显著地增加了DDTs表观溶解度,在临界胶束浓度（CMC）以上对DDTs的增溶曲线呈指数衰减函数关系,DDTs各组分洗脱量顺序为4,4′-DDT〉4,4′-DDD〉2,4′-DDD〉2,4′-DDT。Tween 80的浓度、洗脱次数及土壤吸附作用共同影响其对DDTs的洗脱效果。去离子水能有效去除土壤中残留Tween 80,Tween 80解吸附率最高可达72.66%,大大降低了Tween 80二次污染土壤的风险。Tween 80增溶和去离子水解吸附联合过程对DDTs洗脱效果产生显著的协同作用。10 000 mg·L^-1浓度条件下Tween 80对DDTs的去除率最高为72%,其次为8 000 mg·L^-1 的Tween 80水溶液,去除率为66.72%。采用8 000 mg·L^-1的Tween 80溶液进行土壤洗涤处理,结合其他修复技术,可能会是修复DDTs污染土壤的有效技术方案之一。     

复合酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白抗冻肽的工艺研究

为了获得具有较高活性的抗冻肽,提高水产加工副产物的综合利用率,本试验以水解度和过氧化氢酶低温保护活性为指标,优化鱿鱼皮胶原蛋白酶解工艺,并对水解产物进行分离纯化及结构鉴定。结果表明,最佳酶解条件为：当底物浓度为4%、加酶量为4 000 U·g^-1时,先由碱性蛋白酶于pH值8、50℃条件下酶解2 h;灭酶后由木瓜蛋白酶于pH值6、45℃条件下酶解3 h。在此条件下所得酶解产物分子量主要在1 000～5 000 Da之间,经G-25凝胶柱分离后得到具有较高抗冻活性的F₂组分,其主要成分的氨基酸序列可能为Gly-Pro-Try-Pro-Ala-Ala-Asn-Ser-Pro-Glu或Glu-Pro-Ser-Asn-Ala-Ala-Pro-Try-Pro-Gly。本研究为鱿鱼皮的精深加工和新型抗冻剂的开发提供了一定的理论依据。     

铁蟹过敏原的分离、鉴定和快速纯化

应用免疫印迹(Western blot) 的方法鉴定铁蟹过敏原组分,然后利用电泳洗脱的方法快速纯化主要过敏原。取磷酸盐缓冲液制备的铁蟹肉浸出液,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,测定各组分的相对分子量,然后利用18 例蟹过敏患者的血清进行免疫印迹,鉴定出主要和次要过敏原,利用普通垂直电泳槽快速洗脱主要过敏原蛋白,并鉴定活性。结果显示,SDS-PAGE显示铁蟹肉可辨条带有16条,相对分子质量在16.5～168 kD 之间。Western blotting结果表明,铁蟹肉浸出液共有10条过敏条带,其中相对分子质量为76kD的蛋白条带,阳性反应率为100%,纯化后获取了76 kD的主要过敏原,经过免疫印迹鉴定其具有免疫活性。表明相对分子质量76 kD的组分为铁蟹主要过敏组分,快速电洗脱可以纯化相对分子量为76kD的过敏原组分。     

大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的研究

该文以总黄酮含量和总黄酮回收率为考察指标，研究了大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的工艺。结果表明：AB-8型树脂对柚皮总黄酮有较好的吸附分离性能，是分离纯化柚皮黄酮的适宜大孔树脂；AB-8型大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的最佳工艺条件为：柱体积为160 mL，柚皮提取物上样量为62.5 mg/mL(以湿树脂体积计)，先用pH 4的水淋洗，再用30%的乙醇洗脱，洗脱剂用量为2.5～3倍湿树脂体积。AB-8大孔树脂按上述确定的吸附洗脱条件可重复使用3次。柚皮黄酮经上述工艺纯化后总黄酮含量达到39.67%，总黄酮回收率为62.48%。对经AB-8大孔树脂纯化后的柚皮黄酮进行高效液相色谱(HPLC)分析发现，柚皮黄酮主要为黄酮甙类。     

大孔树脂对苹果渣中多酚物质的吸附研究

通过静态吸附与解吸实验对8种大孔树脂进行筛选,结果表明:NKA-9型大孔树脂表现出最好的吸附性能与解吸效果,是较好的富集纯化苹果多酚树脂。通过单因素实验，确定NKA-9树脂的较佳动态吸附条件为苹果多酚液浓度2.50 mg/mL，pH 4.5，流速1.0 mL/min，较佳洗脱条件为乙醇浓度60%,洗脱流速1.0 mL/min,洗脱体积10 BV。     

鳗鲡肠道高产α-淀粉酶菌株的筛选、鉴定及其代谢特征分析

肠道细菌对宿主肠道营养物质的代谢吸收发挥着重要作用.oα-淀粉是鳗鲡(Anguilla anguilla)配合饲料中的主要组分,为研究鳗鲡肠道细菌对α-淀粉的代谢作用,本研究从健康鳗鲡肠道内分离筛选出高产α-淀粉酶的细菌菌株MJ18,通过形态学观察和16S rRNA序列分析鉴定为迟钝爱德华氏菌9 Edwardsiella tarda).动力学分析结果显示,菌株MJ18所产α-淀粉酶的米氏常数Km=4.64 mg/mL,最大反应速度Vmax=45.45 mg/(min· mL).Biolog碳代谢特征研究结果显示,菌株MJ18对碳源的利用具有选择性,其中对糊精、麦芽三糖和丙酮酸等3种碳源的利用率最高,代谢活性强的碳源类型为核苷类,代谢活性弱的碳源类型为氨基酸类.本研究为揭示鳗鲡肠道细菌在α-淀粉代谢过程中的作用提供科学依据.     

光皮木瓜齐墩果酸超声波辅助提取及纯化工艺

以光皮木瓜为原料,利用超声波辅助提取及大孔吸附树脂纯化齐墩果酸。通过二次正交旋转组合设计优化提取工艺条件,采用静态吸附和解吸试验筛选合适的大孔树脂,并运用动态吸附和解吸试验验优化纯化条件。结果表明,超声波辅助提取最佳工艺条件为:超声功率600 W、提取温度53℃、液料比8:1、超声波提取70 min,回流提取120 min,齐墩果酸得率为3.000 mg/g;XDA-1型大孔树脂对齐墩果酸具有较好的吸附和解吸效果,最佳纯化工艺条件为上柱液浓度0.794 mg/mL,吸附流速0.5 mL/min;以90%浓度乙醇洗脱,洗脱流速1.0 mL/min,纯化后得提取物中齐墩果酸纯度可达26.55%。     

红娘鱼降血压肽的酶解制备工艺优化及酶解产物的抗氧化活性研究

为有效利用红娘鱼制备降血压肽,以红娘鱼鱼糜为原料提取蛋白,并对其进行酶解制备降血压肽。以血管紧张素转换酶ACE抑制率和水解度为指标,通过响应面分析法对酶解红娘鱼鱼糜蛋白制备降血压肽的工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的酶解产物进行分子量和抗氧化活性测定。结果表明,碱性蛋白酶是制备降血压肽的最适蛋白酶,响应面法优化制备降血压肽的最佳酶解条件为pH值9、酶与底物的比值(酶底比)1.4%、温度54℃、时间2 h,此条件下酶解制得的降血压多肽ACE抑制率理论值为88%,实际值为89.3%;经高效液相色谱(HPLC)分析可得酶解产物相对分子量<2 000 Da。通过测定酶解产物样品的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基(·OH)清除率及还原力判定其体外抗氧化活性,结果表明酶解产物具有较强抗氧化活性。本研究结果为红娘鱼的高值化利用提供了数据支持和理论基础。     

高压液相色谱法同时测定植物组织中六种细胞分裂素组分和生长素

利用高效液相色谱研究了植物组织中六种细胞分裂素组分和生长素含量的测定方法。结果表明,采用反相色谱柱Hibar.RT250-4.6,在45℃恒温下以甲醇1%乙酸(40/60,v/v)溶液为流动相0、.6.mL/min等度洗脱,在=269.nm处能准确检测出植物组织中六种内源细胞分裂素组分和生长素的含量,检测限低至0.001.mg/L。本研究对样品的提取和纯化过程也做了改进,排除了杂质和色素对样品的干扰,为研究植物体内源激素对环境响应特征提供了有效的测定方法。     

纳豆菌液态发酵蛤蜊制备ACE抑制肽的工艺研究

为了开发海洋水产源降血压多肽,以蛤蜊为原料,利用纳豆菌液态发酵法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,并以ACE抑制率和总肽含量为控制指标,在单因素试验基础上,采用五因素三水平正交试验优化发酵工艺。结果表明,最佳发酵条件为:发酵温度45℃,发酵时间24h,接种量5%,料液比1∶25,蔗糖添加量10%。在此发酵条件下,发酵产物对ACE抑制率达80.49%,总肽含量达11.53mg·m L-1。本研究结果为蛤蜊的高值化利用提供了科学依据。     

电子束对液体透明质酸分子量及抗氧化性的影响

为了探明辐照对降解透明质酸理化特性的影响,采用电子束对0.5g·100mL-1透明质酸氯化钠溶液进行辐照处理,测定透明质酸辐照前后分子量、黏度特性、pH值及抗氧化性。结果表明:透明质酸的分子量、黏度特性、pH值随辐照剂量的增加而降低;对羟自由基(·OH)及超氧阴离子自由基(O2·-)清除作用随着剂量的增大逐渐减弱,对DPPH·自由基清除作用和还原能力随着剂量的增大逐渐增强;辐照前后透明质酸外观品质没有明显的变化,流动性增强。本试验对拓宽透明质酸的应用领域具有重要的意义。     

麦麸中低聚木糖的制备及抗氧化活性研究

以麦麸木聚糖为原料,采用酶法水解制备低聚木糖,研究其抗氧化活性。在单因素基础上,采用正交试验设计,考察酶解时间、酶解温度、pH值、加酶量对低聚木糖含量影响以及酶解的最佳工艺。通过对DPPH自由基,羟自由基和超氧阴离子自由基清除率的测定,研究了麦麸制备的低聚木糖抗氧化作用。研究表明,酶法制备麦麸低聚木糖的最佳工艺条件为:加酶量600U·g-1,pH值为6,酶解时间90min,酶解温度60℃,在最优条件下的验证试验得到低聚木糖含量为5.09mg·mL-1。对低聚木糖的抗氧化研究表明,1mg·mL-1低聚木糖对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别达到76.55%和80.30%,对超氧阴离子自由基的抑制效果较弱,最大清除率为41.12%,低聚木糖能有效清除自由基,表现出良好的体外抗氧化活性。     

油茶蒲中脂肪酸合酶抑制剂的分离纯化研究

为了高效分离油茶蒲中的脂肪酸合酶(FAS)抑制剂,以乙醇-水为洗脱液,采用大孔树脂D101对油茶蒲提取物进行梯度洗脱,并用高速逆流色谱(HSCCC)对其中的40%乙醇洗脱馏分(40F)进行分离。结果表明,D101大孔树脂洗脱馏分中40F的多酚含量最高,并且其对脂肪酸合酶的抑制活性最强,半抑制浓度为0.61μg·m L-1。以氯仿∶乙醇∶水∶乙酸(4∶3∶2∶0.01,v/v/v/v)为分离溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,转速850 r·min-1,流速2 m L·min-1,在该条件下采用HSCCC对40F进行分离可以纯化得到鞣花酸和3-O-甲基鞣花酸-4'-O-葡萄糖苷,纯度均为95%以上。因此,采用大孔树脂-高速逆流色谱能够简便、高效地分离制备油茶蒲中的脂肪酸合酶抑制剂单体,这为油茶蒲的开发利用及进一步的功能研究奠定了基础。     

藤茶中抗氧化剂阻断N-亚硝胺合成的作用

为了研究抗氧化剂阻断N-亚硝酸胺合成的作用,本文以藤茶为原料,通过分级提取,研究各分级相提取物对亚硝酸盐的清除作用和N-亚硝胺的生成抑制作用,结果表明乙醇相提取物的效果最好,对亚硝酸盐的清除率和亚硝胺抑制的半抑制浓度(IC50)分别为0.023μg·mL-1和0.029μg·mL-1,强于阳性对照抗坏血酸;同时各分级相对DPPH自由基、ABTS自由基的清除作用以及对铁氰化钾的还原作用的实验结果表明,乙酸乙酯相和乙醇相具有较好的抗氧化作用,其中乙酸乙酯相的抗氧化作用强于阳性对照Trolox。HPLC定量分析显示这两相中含有较高的二氢杨梅素,分别为678.5 mg·g-1和381.1 mg·g-1,表明二氢杨梅素是藤茶中主要的抗氧化以及阻断N-亚硝胺合成的活性物质。本研究表明藤茶具有较强的抗氧化及阻断N-亚硝酸胺合成的作用,为藤茶保健品的开发提供了理论依据。