微肥配施对瓦布贝母产量和总生物碱含量的影响

为探究锌、硼和钼对瓦布贝母产量和总生物碱成分含量的影响及最适需肥量,采用三因素五水平二次正交旋转组合设计进行田间试验,结合室内分析,分别建立瓦布贝母增重率和总生物碱含量与锌(X_1)、硼(X_2)、钼(X_3)施用量的数学函数模型。结果表明,所建立的回归方程均达到显著水平。通过数据模型选优,施用锌肥8.21~11.49 kg·hm~(-2)、硼肥10.86~16.42 kg·hm~(-2)、钼肥0.47~0.66kg·hm~(-2)时,瓦布贝母增重率大于113.75%;施用锌肥7.30~12.40 kg·hm~(-2)、硼肥11.14~16.14kg·hm~(-2)、钼肥0.31~0.51 kg·hm~(-2)时,总生物碱的含量大于0.43%。综上,在瓦布贝母生产中,应根据土壤肥力状况采用适宜的微肥配比。本研究结果为提高瓦布贝母产量和总生物碱含量提供了理论依据。     

基于对瓦布贝母核苷类成分贡献率的锌硼钼最优配施浓度

【目的】核苷类成分为贝母的主要活性物质，本研究分析了锌硼钼配施对瓦布贝母核苷类成分含量的影响，以优化瓦布贝母最佳微肥施用配方。【方法】以鳞茎大小为12 mm的四年生瓦布贝母为种源，在四川川贝母标准化生产基地进行田间小区试验。设置锌肥、硼肥、钼肥的三因素五水平二次正交旋转组合设计。在瓦布贝母现蕾期、初花期、盛花期、幼果期进行叶面喷施，喷施量分别为各微量元素总量的20%、30%、30%、20%。五年生瓦布贝母倒苗后采收鳞茎，测定了干鳞茎中10种核苷含量。采用最小二乘法、灰色关联度和DTOPSIS法计算每种或几种微量元素含量及对核苷含量的贡献率，提出优化施肥方案。【结果】根据贡献率分析表明，锌肥对尿嘧啶核苷、胸腺嘧啶和肌苷贡献率最大，硼肥对胞苷和鸟嘌呤核苷贡献率最大，钼肥对尿嘧啶和胸苷贡献率最大。单因素效应分析表明，锌肥和硼肥对胞苷有显著影响，钼肥对胸苷有显著影响。互作效应分析表明，锌–硼互作对尿嘧啶产生协同作用，对胸腺嘧啶、尿嘧啶核苷和胸苷产生拮抗作用；锌–钼互作对尿嘧啶、尿嘧啶核苷和肌苷产生协同作用；硼–钼互作对胞苷、胸苷、鸟嘌呤核苷和尿嘧啶核苷产生拮抗作用。灰色关联度和DTOPSIS法分析得出核苷含量综合最优处理。【结论】确定最优的施肥范围:锌肥为8.05～11.85 kg/hm2；硼肥为11.70～16.47 kg/hm2；钼肥为0.36～0.51 kg/hm2。通过灰色关联度和DTOPSIS法进行分析得出，当使用锌肥15.71 kg/hm2、硼肥5.53 kg/hm2、钼肥为0.65 kg/hm2时瓦布贝母10种核苷的含量综合最优。     

多组学分析射频热风联合干燥对浙贝母代谢物的影响

为深入研究射频热风联合（RF-HA）干燥对浙贝母品质的影响，本研究以新鲜浙贝母（Fresh）和热风干燥浙贝母（HA）为对照，分别采用超高液相色谱-质谱（UPLC-MS）非靶向代谢组学和超高液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）生物碱靶向代谢组学技术，分析RF-HA干燥前后浙贝母差异代谢物及生物碱成分变化。结果表明，UPLC-MS共鉴定出483种差异代谢物，其中RF-HA与Fresh差异代谢物221种（105种上调，116种下调），RF-HA与HA差异代谢物168种（122种上调，46种下调）；主成分分析、偏最小二乘判别分析及聚类热图分析结果表明，不同处理浙贝母代谢物含量差异显著（P<0.05）;UPLC-MS/MS共鉴定出生物碱类物质64种，与HA处理相比，RF-HA处理可以显著减少贝母素甲、贝母素乙、贝母素甲氮氧化合物、贝母素乙氮氧化合物等主要活性成分MS强度的下降（P<0.05）。综上，相对于HA,RF-HA干燥可以更好地维持浙贝母主要成分含量及品质。本研究可为浙贝母干燥及射频热风联合干燥的应用提供数据参考及理论依据。     

湖北贝母种植土壤和药材中有机农药及重金属残留分析

对湖北贝母种植基地土壤及药材中有机农药与重金属含量进行了测定。研究结果表明,土壤中重金属和有机农药的单项污染指数P<1,污染分担率排序为:铅(35.83%)>砷(19.26%)>汞(16.06%)>铬(15.23%)>镉(5.39%)>铜(3.66%)>滴滴涕(2.28%)>六六六(2.10%),综合污染指数P综=0.29<0.7,属安全级,为清洁水平,符合国家标准。湖北贝母药材中重金属和有机农药含量均低于绿色行业标准,有机农药富集能力较强,药材中重金属砷、铅、铬和有机农药残留滴滴涕的含量与土壤中含量显著相关,相关系数分别为0.924、0.852、0.90和0.843。     

HPLC法对马蓝组培苗和扦插苗植株中靛蓝和靛玉红的含量测定

采用HPLC法测定马蓝组培苗和扦插苗植株中靛蓝和靛玉红的含量,为马蓝的种植提供基础研究资料。色谱条件:采用C18柱,以甲醇-水(75∶25)为流动相,靛蓝在287 nm处测定、靛玉红在292 nm处测定。结果表明,靛蓝、靛玉红分别在1.60~8.00 mg·L-1、2.30~11.50 mg·L-1范围内具有良好的线性关系。平均回收率分别为98.39%、98.52%,RSD分别为1.11%、0.88%。马蓝组培苗与扦插苗各部分靛蓝、靛玉红含量差异不明显。     

茶汤中儿茶素与生物碱测定的HPLC法及其优化

目的:建立茶汤内含物质儿茶素和生物碱检测方法体系,为研究茶汤滋味物质做基础。方法:以X-select-T3(4.6 mm×250 mm,5μm,美国waters)为色谱柱,流动相A:2%甲酸;流动相B:甲醇;甲醇洗脱方式:0 min(83%A,17%B)-9 min(73%A,27%B)-15 min(58%A,42%B)-18 min(83%A,17%B),检测波长275 nm,流速1 m L·min~(-1),柱温30℃。利用保留时间和光谱图定性,外标法定量,分析茶汤滋味物质儿茶素组分和生物碱类物质。结果:儿茶素组分和生物碱回归方程相关性系数都在0.999 0以上,有良好的线性关系,各组分加样回收率为103.68%~82.94%,RSD为0.23%~3.31%。结论:该方法操作简单、快速、准确,可用于茶汤滋味物质儿茶素组分及生物碱的含量测定。     

罗汉果鲜果皂甙分析方法的建立及其在采后贮藏中的变化

为建立检测罗汉果鲜果中罗汉果皂甙化合物的分析方法,并探讨其在罗汉果鲜果采后贮藏中的变化规律,采用HPLC对罗汉果鲜果中的6种罗汉果皂甙化合物的含量进行测定,并采用建立的HPLC方法分析了室温下贮藏0、7和14d的60日龄罗汉果鲜果种子、果皮和果肉中主要皂甙含量的变化。结果表明,检测罗汉果鲜果中6种罗汉果皂甙化合物的含量的HPLC色谱条件为:色谱柱Waters SunfireTM C18(4.6mm×150mm,5μm),柱温25℃,流动相为0.1%(v/v)的磷酸水(A)和乙腈(B),梯度洗脱(0~10min:10%~17%B;10~20min:17%B;20~30min:17%~20%B;30~40min:20%B;40~50min:20%~23%B;50~60min:23%B;60~70min:23%~26%B;70~80min:26%B),流速0.8 m L·min-1,检测波长203nm。所建立的分析方法线性关系(R2≥0.9992)、精密度(RSD:0.91%~1.40%)和重复性(RSD:0.97%~3.89%)良好,回收率高(97.99%~102.34%)。此外,罗汉果皂甙主要存在于果皮和果肉中,含量高低依次为:果肉果皮种子。罗汉果鲜果中皂甙ⅡA2含量极少,皂甙Ⅴ含量最多。随着贮藏时间的延长,罗汉果中苦甙的含量逐渐减少,甜甙含量逐渐增加。综上,本试验所建立的分析方法简便、准确、专属性强,这为合理选择罗汉果贮藏方法、提高其品质提供了理论依据。     

配合饲料添加剂中喹乙醇含量的测定

本文介绍了用高效液相色谱测定配合饲料添加剂中喹乙醇含量的方法。该方法色谱条件为:μ-Bondapak C_(18)色谱柱,甲醇/水(60/40,V/V)作流动相,流速为1.0mL/min;高灵敏可变紫外检测器,检测波长为262nm.标准曲线的线性范围在0～1mg.平均回收率为98.33%。变异系数为3.88%.该方法简便、快速,灵敏、准确。     

离子色谱法测定福建南平地区植烟土壤中的全钾和有效钾含量

建立测定植烟土壤中全钾和有效钾含量的离子色谱法。采用Dionex RFIC CS12A阳离子交换色谱柱(4.0mm×250 mm)配Dionex CG12A保护柱(4 mm×50 mm),以20 mmol/L甲基磺酸为流动相,流速1.0 m L/min,检测器为电导检测器,柱温25℃,进样量25μL。结果表明:钾离子在1.5~15 mg/L内与峰面积的线性关系良好,线性方程为:y=5.634x-0.252 8,r=0.999 3;最低检出限为0.31 mg/kg;定量限为1.01 mg/kg。样品中全钾和有效钾在不同浓度水平范围内的平均回收率测定结果为98.31%~101.3%,RSD(n=6)为0.5%~3.9%,表明该方法具有良好的准确性和精密度,操作简便、快速,可以满足实际分析的需要。样品分析的结果表明,邵武地区的砂土含钾量(包括全钾和有效钾)最高,而浦城地区的壤土含钾量最高,为该地区烟草培植施用钾肥提供了参考。     

基于二次通用旋转组合设计的暗紫贝母优质高产施肥研究

为探索氮、磷、钾肥配施对暗紫贝母产量和质量的影响,得出暗紫贝母优质高产的氮、磷、钾肥配施方案,采用三因素二次通用旋转组合设计,进行5年生暗紫贝母的田间施肥试验,测定了药材产量和总灰分、醇溶性浸出物、总生物碱含量等指标。使用DPS解析的数据建立了氮、磷、钾与暗紫贝母产量和质量的函数模型,通过F检验,分析了回归方程和各项回归系数的显著性,利用模型分析了氮、磷、钾肥对产量、总灰分、醇溶性浸出物及总生物碱含量的影响,使用统计频数法、灰色关联度和DTOPSIS法综合各项指标获得最优施肥方案。施用氮、磷、钾肥可影响暗紫贝母产量和质量。本研究施肥水平下各因素对产量和总灰分的影响表现为:K2O>N>P2O5,对醇溶性浸出物和总生物碱的影响表现为:N>P2O5>K2O。随着N用量的增加,总灰分呈逐渐降低的趋势,总生物碱含量呈先降低后升高的趋势;随着P2O5用量的增加,总灰分呈逐渐增加的趋势;随着K2O用量的增加,总灰分呈先升高后降低的趋势。低P2O5低K2O或高P2O5高K2O均有利于暗紫贝母产量的形成,低N低P2O5或高N高P2O5均有利于增加暗紫贝母的醇溶性浸出物含量。K2O对产量和总灰分的影响最大,N对醇溶性浸出物和总生物碱的影响最大。通过试验得到的暗紫贝母优质高产的施肥方案为N 163.82～190.77 kg/hm²、P2O5.541.75～720.25 kg/hm²、K2O.337.49～454.52 kg/hm²。     

砂质潮土中五种磺胺类药物的高效液相色谱检测方法

建立了固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定砂质潮土中磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲氧嗪、磺胺-5-甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑5种磺胺类药物残留的方法。优化后的色谱条件为:流动相比例为磷酸缓冲液(pH=2.3)∶乙睛=80∶20(V/V),流速1.0 mL/min,检测波长270 nm,柱温35℃,进样体积20μL。在优化条件下,5种磺胺类药物的最低检测限在2.4~4.9μg/kg之间,方法的线性范围为0.2~20 mg/kg,线性相关系数均达到0.999 9。砂质潮土中,在添加浓度为0.5、1.5 mg/kg磺胺类药物时平均回收率范围为70.03%~89.65%,相对标准偏差≤10%,能够满足实际样品的分析要求。     

甜叶菊中莱苞迪苷D、莱苞迪苷A含量测定方法的优化及应用

为比较不同品系甜叶菊中甜味品质较好的莱苞迪苷D(RD)、莱苞迪苷A(RA)含量组成,在传统C18、HSS T3、Amide色谱柱中选择适宜固定相建立高效液相色谱(HPLC)方法进行测定与分析。结果表明,HSS T3柱对甜菊糖苷选择性较好,可同时分离RA、甜菜苷(ST)、莱苞迪苷F(RF)、莱苞迪苷C(RC)、甜茶苷(RBS)、莱苞迪苷B(RB)、甜菊双糖苷(SB),其HPLC分析参数为:流动相32%乙腈和68%磷酸水(0.01%),等度洗脱,柱温40℃,波长210 nm,进样量10μL,流速1.0 mL·min^-1;Amide柱对RD分离能力最佳,其HPLC分析参数为:流动相76%乙腈和24%水,等度洗脱,柱温40℃,波长210 nm,进样量10μL,流速0.8 mL·min^-1。分析比较12个扦插培育的甜叶菊品系,以编号2甜叶菊中RD含量及其占比最高,提示以其为原材料可生产含RD较高的甜菊糖苷;编号3、5、7、11甜叶菊中具较有高含量的甜菊糖苷(主要为RA),提示这些品种富含RA且甜菊糖苷产量较高;编号1、8甜叶菊中RA+RD占比较高,提示...     

高效液相色谱法测定设施番茄土壤低分子量有机酸的色谱条件研究

为探索利用高效液相色谱法测定设施番茄土壤低分子量有机酸的适宜色谱条件,以Na OH和Na Cl混合溶液为提取剂提取11种土壤低分子量有机酸,通过优化影响低分子量有机酸分离度的流动相浓度、p H、流速、有机改良剂的添加比例、检测波长等条件,确定了高效液相色谱法测定设施番茄土壤低分子量有机酸的最佳色谱条件为:以10 mmol L-1KH_2PO_4-CH_3OH(97∶3,p H 2.6)为流动相,流速为0.8 ml min~(-1),检测波长220 nm,柱温25℃,进样量为20μl。此方法对11种低分子量有机酸的检测限在20~825 ng ml~(-1)之间,回收率在85.57%~100.20%之间,相对标准偏差在0.17%~5.84%之间。实际土壤样品分析结果表明,该方法能够满足土壤低分子量有机酸的痕量检测要求。     

SPE-HPLC/FLD法同时测定水中4种雌激素

研究建立了固相萃取（SPE）-高效液相色谱仪（HPLC）-荧光检测器（FLD）测定水体中4种雌激素（雌三醇、17β-雌二醇、炔雌醇和双酚A）的分析方法。水样过C18固相萃取柱净化浓缩,用5.00mL超纯水淋洗,15.00mL甲醇洗脱,洗脱液经氮气吹干后用50%甲醇溶解经HPLC-FLD测定;4种雌激素以甲醇/乙腈/水为流动相（体积比为25：30：45）,经InertsilODS-SP-C1（8150mm×4.6mm,5μm）反相色谱柱分离,激发和发射波长分别为280nm和310nm,流速1.0mL.min-1,柱温40℃,进样量20μL,以保留时间定性、外标法定量。该方法的线性范围为5.00～1000.00μg.L-1,且相关性良好（R〉0.9999）,4种雌激素的仪器检出限为0.107～0.271μg.L-1,方法检出限为0.214～0.540ng.L-1。在自来水中添加不同浓度的雌激素混合标准溶液,测得溶液中4种物质的加标回收率除炔雌醇为55.71%～66.78%外,其余雌激素的加标回收率均大于85%,相对标准偏差RSD（n=5）均小于4%。该方法灵敏度高、检出限低、重复性和精密性良好,能有效去除基质干扰,可用于水体中痕量雌激素的分析测定。     

土壤中土霉素残留的高效液相色谱检测方法

为有效测定土壤中土霉素残留量,建立了固相萃取－高效液相色谱法提取以及测定潮土、红壤、紫色土中土霉素残留量的方法。土壤中土霉素残留经提取缓冲溶液进行有效提取,经过DVB固相萃取小柱纯化、无水甲醇洗脱和氮气流浓缩后,经HPLC测定。对提取缓冲液、流动相以及流动相pH值、有机相与无机相的比例以及流速等测定条件进行优化研究。结果表明：提取液为Na2EDTA-Mcllvaine,流动相为乙腈∶0.01mol/L磷酸二氢钠（pH值2.5,V∶V=10∶90）,温度25℃,流速1.2ml/min,检测波长350nm对3种不同性质的土壤中土霉素残留量的测定最为合适。应用本方法进行土壤中土霉素残留量的测定,土霉素含量与峰面积具有良好的线性关系,相关系数（n=9）分别为红壤0.997,紫色土0.995,潮土0.987;检出限分别为红壤0.11mg/kg,紫色土0.17mg/kg,潮土0.09mg/kg;回收率(n=18)分别为红壤80.7%~128.8%,紫色土70.5%~100.0%,潮土61.5%~103.9%;相对标准偏差(RSD, n=18)分别为红壤7.1%~28.2%,紫色土11.9%~38.1%,潮土4.1%~17.0％。本方法简便、准确,适合于测定不同土壤中土霉素残留量,结果可靠。     

离子色谱法同时测定南瓜中Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的研究

实验建立了离子色谱技术同时测定南瓜中Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的方法。南瓜样品中的Cr(Ⅲ)经过柱前衍生为2,6-嘧啶二羧酸铬,柱后衍生为1,5-二苯碳酰二肼铬,分别于365 nm和530 nm的波长下检测。实验将淋洗液p H控制在6.5~6.8之间,且调节I–的浓度为5 mmol/L。通过制定柱前衍生的水浴加热温度、加热时间和柱后衍生液流速的3因素4水平[L16(43)]正交设计试验,结合各因素水平影响的情况下峰面积变化趋势,最终选取0.5 m L/min为柱后衍生液的流速;而柱前衍生采用100℃为最佳水浴温度,5 min为最佳加热时间。优化了离子色谱条件,提高了检测的灵敏度,Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的方法检出限分别为0.17 mg/kg和0.019 mg/kg。南瓜样品中Cr(Ⅲ)的加标回收率为82%~85%。采用该离子色谱法测定南瓜中的Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ),结果表明Cr(Ⅵ)未检出。     

固相萃取 -火焰原子吸收光谱法分析水溶肥料铬形态

研究了采用阴离子交换柱吸附 Cr 6+,使之与 Cr 3+分离,火焰原子吸收光谱法测定水溶肥料中水溶态 Cr3+及总铬含量,差减法测得 Cr 6+含量。分析了仪器工作条件、试液上柱流速等对实验结果的影响。结果表明,在最优实验条件下,水溶态总铬测定值的相对标准偏差(RSD)为 1.12%～ 3.13%,水溶态 Cr 3+测定值的 RSD为 1.93%～2.93%;Cr 3+的加标回收率为 98.8%～104.0%,Cr 6+吸附率为 97.0%～102.0%,固相萃取 -火焰原子吸收光谱法可用于水溶肥料中铬形态的检测,且具有成本相对较低、操作简便、重现性好等优点。     

液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定豆芽中4种植物生长调节剂残留量

研究建立了对豆芽中4-氯苯氧乙酸、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴钠、赤霉素4种豆芽无根素残留量的液相色谱串联质谱测定方法。样品经过提取后,处理溶液直接注入液相色谱串联质谱仪中进行检测。利用ESI源(正离子模式)、C18液相色谱柱,以及SRM方法对样品中的4-氯苯氧乙酸、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴钠、赤霉素进行定性、定量分析。该方法测定结果的相对标准偏差小于8%(n=6),平均回收率均大于80%,线性范围为2~50ng/m L,定量限分别为4-氯苯氧乙酸为0.63μg/kg、6-苄基腺嘌呤为0.15μg/kg、2,4-滴钠为0.28μg/kg,赤霉素为4.9μg/kg。     

HILIC-MS/MS模式测定甘蓝中11种强极性、亲水性农药残留

研究建立超高效液相色谱串联质谱同时测定蔬菜中11种极性、亲水性农药残留的方法。样品使用酸化乙腈和EN 15662萃取包提取, PSA净化, HILIC色谱柱分离,电喷雾离子化, MRM (多反应监测)模式采集,使用基质标外标法定性定量。11种农药在适当的浓度范围内线性良好, R2均>0.992;方法定量限为0.04~8.00μg/kg。各农药在其添加水平内,平均回收率为66.9%~114.5%,相对标准偏差(RSD, n=6)为0.8%~9.6%。该方法快速、简便,有较好的检测灵敏度与准确度,满足多种极性、亲水性农药残留检测的要求。     

高效液相色谱法测定发酵醪中的γ-氨基丁酸

建立了高效液相色谱测定发酵醪中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的方法。采用7%(V/V)乙酸水溶液对发酵醪进行预处理,以异硫氰酸苯酯为衍生剂,用反相C18柱为分离柱,柱温27°C,阶段洗脱,在254 nm下进行检测。结果表明,发酵醪中的GABA获得了很好的分离,GABA在0~1.5 mmol/L内线性相关性好,其线性方程为y=14106.5713x-258.2493(r=0.9993)。最小检测浓度为0.5μmol/L(RSD≤10%),组间样品测定相对误差为3.571%,加样平均回收率达到了99.038%。所建立的方法稳定、灵敏、重现性好,可用于测定发酵醪中的GABA。