桑黄多糖脱蛋白方法与条件的优化

[目的]对桑黄多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化,并比较了2种方法对蛋白质去除的影响。[方法]采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除桑黄多糖中的游离蛋白质。[结果]三氯乙酸法去除蛋白质的效果优于Sevag法,其最佳脱蛋白条件为：5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30min,。在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。[结论]TCA法为最佳的桑黄多糖脱蛋白方法。     

条斑紫菜多糖脱蛋白方法与条件优化

对紫菜多糖提取液中的杂蛋白质去除方法和条件优化进行了研究。采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除紫菜多糖中的游离蛋白质，分别研究了不同溶剂体积比、用量、处理温度和时间等主要因子对蛋白质去除的影响。结果表明，Sevag法最佳脱蛋白条件为氯仿：正丁醇=3：1，样品：氯仿-正丁醇=3：1，振荡时间为30min；三氯乙酸法（TCA法）最佳脱蛋白条件为反应温度80℃、三氯乙酸用量4％、反应时间30min。两种脱蛋白方法比较发现：三氯乙酸法去除蛋白质质的效果优于Sevag法。     

条斑紫菜多糖脱蛋白方法与条件优化

对紫菜多糖提取液中的杂蛋白质去除方法和条件优化进行了研究。采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除紫菜多糖中的游离蛋白质,分别研究了不同溶剂体积比、用量、处理温度和时间等主要因子对蛋白质去除的影响。结果表明,Sevag法最佳脱蛋白条件为氯仿：正丁醇=3：1,样品：氯仿-正丁醇=3：1,振荡时间为30min;三氯乙酸法（TCA法）最佳脱蛋白条件为反应温度80℃、三氯乙酸用量4％、反应时间30min。两种脱蛋白方法比较发现：三氯乙酸法去除蛋白质质的效果优于Sevag法。     

黄芪多糖除蛋白质方法与条件优化

为研究Sevag法除黄芪粗多糖中蛋白质的最佳条件,并比较Sevag法和反复冻融法的除蛋白质效果,采用单因素试验方法,研究不同溶剂比例、用量、处理时间对蛋白质去除的影响。结果显示,Sevag法除蛋白质最佳条件为氯仿：正丁醇=4：1,多糖溶液：Sevag试剂=2：1,搅拌时间为25min。Sevag法与反复冻融法除蛋白质的最适次数为4次,前者除蛋白质的效果优于后者,从而优化了去除黄芪粗多糖中蛋白质的方法,可为黄芪多糖的研究与生产提供技术参考。     

桑黄液体发酵菌丝体多糖提取条件的优化

通过单因子试验和正交试验,对桑黄液体发酵菌丝体多糖提取方法进行研究,结果表明:热水提取法提取桑黄菌丝体多糖的最适料水比为1:50,提取温度为70℃,浸提时问为2h,乙醇终浓度为80%,多糖得率为3.48%.     

响应曲面法优化桑黄胞内多糖提取工艺的研究

在单因素试验的基础上,利用响应曲面法对桑黄多糖提取工艺参数进行优化研究。响应曲面分析结果表明:提取温度、提取时间及水料比与响应值桑黄多糖得率存在显著的相关性。通过典型性分析得到优化桑黄多糖提取条件:提取温度为97.76℃,提取时间为2.62 h,水料比为32.3∶1,在此条件下桑黄多糖得率理论值达到12.35%,验证试验条件下实际最大桑黄多糖得率为(12.05±0.3)%,与理论值相差0.3%。     

桑黄菌丝多糖的提取及多糖成分分析

以桑黄(Phellinus igniarius)菌丝体为材料,探索热水提取法提取桑黄菌丝体多糖的工艺,并分析桑黄多糖的主要组成成分.试验在100℃的恒温下,以多糖提取率为考察目标,分别对提取料液比(m/V,g:mL)和提取时间进行考察,利用硅胶薄层分析的方法,对桑黄多糖的成分做初步测定.热水提取的最优工艺为在水提温度为100℃条件下,料液比1∶45、浸提时间3.5 h,此时桑黄粗多糖提取率为3.99％;桑黄菌丝体多糖的单糖组成初步确定有D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖和D-乳糖.     

桑黄菌丝体多糖的生物活性

针对野生桑黄子实体因资源有限所导致的利用受限的实际问题,对从桑黄菌丝体中分离提取的多糖的生物活性进行了研究。结果表明,桑黄菌丝体多糖具有降血糖、保护肝脏等生理功效。因菌丝体可经发酵人工获得,从而可代替子实体用于新药开发,同时可以大大降低新药开发的成本。     

粒毛盘菌多糖脱蛋白方法及其条件优化

分别采用Sevage法、三氯乙酸-正丁醇(TCA-NBA)法、酶-Sevage法以及酶-TCA-NBA法对粒毛盘菌YM281胞外多糖进行脱蛋白。结果表明:用酶-TCA-NBA法对粒毛盘菌YM281胞外多糖脱蛋白的效果最佳,蛋白脱除率为51.57%,且此时多糖损失率(3.46%)为最低;进一步采用均匀设计优化该方法的脱蛋白条件,所得最优脱蛋白条件为:粒毛盘菌YM281多糖溶液20mL、木瓜蛋白酶溶液11mL、温度42.2℃、pH 4、酶解时间3.5h;除去变性蛋白后,再利用TCA-NBA法脱蛋白2次即可;采用所得的最优方法和条件脱蛋白,其蛋白脱除率高达72.3%,多糖损失率仅为2.93%。     

桑黄黄酮、多糖高产优良菌株的筛选试验

为了筛选出黄酮和多糖产量较高的优良桑黄菌株,对17株桑黄菌株的生物量、黄酮和多糖含量及总产量进行分析,采用酵母提取物麦芽糖完全培养基(CYM)液体培养基对17株不同的桑黄菌株发酵培养7 d,收集液体菌丝,烘干至恒质量后测定菌丝干质量,用NaNO_2-Al(NO_3)_3比色法测定菌丝黄酮含量,用苯酚-硫酸法测定菌丝多糖含量。结果表明:在17株桑黄菌株中,生物量最大的是JNSH-14,达到0.645 g/100 mL;黄酮产量最大的是JNSH-15,达到42.048 mg/L;多糖产量最大的是JNSH-15,达到834.146 mg/L。由研究结果可以看出,JNSH-15菌株无论是在生物量还是总黄酮、总多糖产量方面,都处于较高水平。研究结果可为下一步桑黄黄酮、多糖发酵工艺优化中发酵菌株的选择提供参考依据。     

桑黄菌丝固体培养基及培养条件研究

首先利用单因素试验对桑黄菌丝培养基基本成分进行确定,然后利用正交设计对其配比及生长条件加以优化,得出最佳配比及条件:葡萄糖20 g,蛋白胨2.2 g,磷酸二氢钾0.46 g,磷酸氢二钾1.0 g,硫酸镁0.5 g,琼脂20.0 g,水1000 mL,pH为7,培养温度为28℃。     

酶-Sevag法除酸浆果实多糖蛋白工艺的研究

[目的]优化木瓜蛋白酶-Sevag法去除酸浆(Physalis alkekengi L.)果实多糖中蛋白质的工艺条件。[方法]以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,通过对酶解温度、时间、p H及酶添加量进行单因素试验及L9(34)正交试验确定酶解条件,并结合Sevag试剂除蛋白。[结果]各因素对酶解法脱酸浆果多糖液蛋白的影响程度大小依次为:酶解温度、酶解时间、p H、酶添加量。在酶解温度60℃、酶解时间2.0 h、p H 6.0、酶添加量2.5%条件下,粗多糖液蛋白脱除率为62.07%,多糖保留率为93.16%。原料经酶处理后,可使游离蛋白和部分与多糖结合的蛋白质被水解,再经Sevag试剂(氯仿∶正丁醇为4∶1)处理2次,蛋白质脱除率为81.65%,多糖保留率为89.43%,可达到较理想的脱蛋白质效果和较高的粗多糖保留率。[结论]采用酶和Sevag试剂相结合的方法除酸浆果多糖中的蛋白质,效果良好,操作简单,可为酸浆果多糖的纯化提供理论依据,但其对多糖结构和生物活性的影响还有待于进一步研究。     

猪苓多糖的提取工艺优化

[目的]探究猪苓多糖超声波提取的最佳条件,为更好地开发利用猪苓提供可靠的依据.[方法]采用超声波提取的方法,通过单因素试验,对猪苓多糖提取工艺进行优化.[结果]猪苓多糖提取的最优工艺条件:固液比为1∶40(g∶ml),提取时间为60 min,最适提取温度为70℃,超声功率为100W.[结论]与常规的水提取法比较,超声提取能显著提高猪苓多糖含量、缩短提取时间、减小料液比和降低提取温度.     

桑黄中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分提取及其化学成分鉴定

对桑黄的抑制α-葡萄糖苷酶活性成分进行筛选和优化提取,并对提取物中的酚类、黄酮和萜类物质进行了靶向鉴定。以α-葡萄糖苷酶抑制活性和总黄酮含量为评价指标对提取工艺参数进行了优化,通过UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS对提取物的成分进行鉴定。结果表明,桑黄60%乙醇体积分数提取物具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,优化提取的工艺条件是乙醇体积分数60%,提取温度80 ℃,提取时间3 h,料液比1:30,提取2次,黄酮提取率达到159.3 mg·g^-1。液质联用共鉴定出45种成分,其中酚类物质种类最多。通过优化工艺得到含量较高的具有较强α-葡萄糖苷酶抑制活性的提取物,液质联用靶向分析表明该提取物中含有丰富的多酚类物质。     

杏鲍菇多糖的提取及其抑菌作用

为优化杏鲍菇多糖的提取条件及研究其抑菌作用,采用热水浸提和乙醇沉淀法对杏鲍菇子实体多糖进行提取,采用滤纸片法观察杏鲍菇多糖对大肠杆菌、藤黄八叠球菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌、白色链球菌、产气杆菌、青霉-1、黑曲霉和青霉-2的抑菌作用.结果表明,杏鲍菇子实体多糖提取的最优工艺条件为提取温度80℃,提取时间2.0 h,料水比1∶20,在此条件下杏鲍菇多糖的得率为11.42%;杏鲍菇多糖对白色链球菌和产气杆菌具有抑菌作用,而对其他细菌和霉菌没有抑菌作用.     

太子参多糖超声提取工艺优化

通过单因子试验和正交试验,研究了太子参多糖超声提取最佳工艺。结果表明：超声波法提取太子参多糖的最佳工艺是料液比1∶40(g/mL),提取温度70℃,超声功率500 W,浸提次数4次,提取时间30 min。优化后的多糖提取得率为6.77%,是优化前的3.7倍。优化后的提取工艺简单高效、成本低、稳定性好,可作为太子参多糖提取的理想方法。     

松木层孔菌粗多糖提取工艺的研究

对松木层孔菌发酵菌丝体多糖的提取工艺进行了研究,通过草因素试验和正交试验L9(33),研究了提取次数、浸液比和提取时间对多糖提取率的影响,结果显不提取次数、浸液比和提取时间是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为提取温度常温.提取3次,每次浸液比(质量比)1:30,时间是1 h.各因素影响大小的次序是:提取次数>浸液比>提取时间.     

黑糯玉米多糖的提取及脱蛋白工艺的比较

本文研究了黑糯玉米多糖的提取及两种脱蛋白分离工艺的比较。采用热水浸提、醇沉法提取黑糯玉米多糖，用两种改进的方法（氯仿-正丁醇法和三氯乙酸-正丁醇法）脱除蛋白质，以脱蛋白率为指标，通过正交实验L9（3^4）确定最佳脱蛋白分离工艺后，对比两种方法的最佳组合粗多糖得率及510nm处吸光值的差异。结果表明：三氯乙酸-正丁醇法比氯仿-正丁醇法的脱蛋白效果好，最佳水平脱蛋白率为70．69％，多糖得率仅为67．87％；氯仿-正丁醇法最佳水平脱蛋白率为51．39％，多糖得率为80．31％。本文建立的优化工艺可为黑糯玉米多糖的分离制备提供参考。