A Programme for Oestrus Synchronization and Embryo Transfer in Sheep

Eighty-five animals were used to develop an embryo transfer programme including a study on how oestrus synchronization influenced the ovulation rate. The animals, both ewes and ewe lambs, were divided into three groups: donors, recipients and controls. Oestrus was synchronized in donors and recipients by the use of progesterone-impregnated vaginal pessaries. The donors also received one injection of 600 IU PMSG. Samples for microbiological investigation of the vaginal flora were taken in connection with synchronization. The ovulation rate was determined by laparoscopy in the control animals and by laparotomy in the donors and recipients. The embryos were surgically recovered from the donors by flushing of the uterine horns seven days after pessary removal. The embryos were classified according to developmental stage and quality. At transfer each recipient received 2–4 embryos (moruhs or blastocysts) by a surgical method. A ± 1 day asynchrony in oestrus between donors and recipients was tolerated. All synchronized animals came into oestrus within 2.5 days after pessary removal. The interval was shorter if the animals had been injected with PMSG. The largest number of ovulations occuwed in the synchronized and PMSG-treated animals (mean 4.5 ± 2.1). Synchronized animals that did not receive PMSG had almost the same ovulation rate as the control animals (2.6 ± 0.9 versus 2.5 ± 0.7). The pessary treatment influenced the bacterial flora of the vagina. The number of ewes with bacterial growth in the vagina increased. The number of isolated organisms also increased. The embryo recovery rate was 80.8% and 3.7 ± 2.7 ovas was recovered on average. Eighty-eight percent of all donors yielded transferable embryos. Morulas and blastocysts comprised 84.4% of the recovered oocytes/embryos. Only 5.2% of these were of poor quality. Of the transferred embryos, 65.1% developed into lambs and 91.3% of the recipients lambed. The ewe lambs were as suitable as donors and recipients as the older ewes.     

5个品种优质肉用绵羊的超数排卵与胚胎移植

为进一步提高不同优质肉用品种绵羊的超数排卵与胚胎移植效果,本实验采用4种不同的超排方案(CIDR+FSH减量、CIDR+FSH+PMSG、CIDR+FSH+PG、CIDR+FSH等量)对17只绵羊(杜伯、白萨福克、黑萨福克、德克塞尔、美利奴)进行超数排卵处理,选择体况良好的杂交羊87只做受体,并进行胚胎移植实验。结果表明:第1组(CIDR+FSH减量)和第2组(CIDR+FSH+PMSG)方案超排平均可用胚数分别为6.20、6.60枚,显著高于第3组(CIDR+FSH+PG)和第4组(CIDR+FSH等量)方案(P<0.05);白萨福克、德克塞尔、杜伯超排平均可用胚数分别为7.67、6.20枚和6.25枚,显著高于黑萨福克和美利奴(P<0.05)。供体羊全部发情,得到95枚可用胚胎;51只受体新鲜胚胎移植3个月后经B超检查38只受体怀孕,妊娠率74.5%,产羔率88.2%。因此,CIDR+FSH+PMSG是优质肉绵羊超数排卵方案的最佳组合。     

滨州绵羊冷冻胚胎移植试验研究

该项成果通过引进德国肉用美利奴绵羊冷冻胚胎29枚,用山东地方良种洼地绵羊作受体,共移植受体母羊20只,二情期不返精率65％（13．20）,产出活羔11只,产羔率55％（11／20）。     

绵羊胚胎移植受体同期发情方法的比较

为了比较CIDR＋PG与CIDR＋PG＋PMSG两种激素处理方法对于受体同期发情以及胚胎移植的效果,将103只小尾寒羊作为胚胎移植受体分为两组,分别使用上述两种方法进行同期发情处理。其中,CIDR＋PG组83只,CIDR＋PG＋PMSG组20只。在对供体羊人工输精后第6．5天获取移植囊胚,分别移植到两组受体子宫内。统计受体的发情率、黄体生成情况,以及移植后的妊娠情况。CIDR＋PG组与CIDR＋PG＋PMSG组受体羊发情率分别为87．95％、90．00％;有黄体羊的比例分别为37．35％和75．00％,平均黄体数为1．81和1．93个;两组受体胚胎移植后妊娠率分别为77．41％和86．67％。结果表明,使用CIDR＋PG＋PMSG进行同期发情效果较好,且胚胎移植后妊娠效果较好。     

国内家畜胚胎移植的现状与展望

统计与分析了1991-2001年国内胚胎移植状况,其中牛、羊胚胎移植所占的比例较大。在1991-1995年间,我国年平均超排处理供体牛300-500头次,羊200-300只;1995年以后,胚胎移植规模有所扩大,超排处理供体牛年平均在400-800头次;羊的胚胎移植在1999年以后,出现了波尔山羊、道赛特和特克赛尔绵羊的移植热潮。国内胚胎移植技术已接近或达到发达国家水平,具备商业化的能力。     

腹腔内窥镜在绵羊冻胚移植中的应用研究

采用腹腔内窥镜和常规手术法进行绵羊冻胚移植,统计分析结果表明,腹腔镜移植组产羔率高于常规手术移植法,但组间差异不显著（P〈0.05）;腹腔镜移植明显比常规手术法快,可提高工作效率4倍;腹腔镜移植受体发生繁殖障碍机率比常规手术法低（0.01〈P〈0.05）,且不易发生子宫粘连（P〈0.05）;腹腔镜移植受体产后缺乳症明显比常规手术组少（P〈0.05）。对绵羊胚胎移植产业化工艺具有改进意义。     

内蒙古鄂尔多斯市澳美型细毛羊冷冻胚胎移植技术应用效果

通过冷冻胚胎移植技术,2007年和2008年前后分2批在鄂尔多斯细毛羊种羊场实施纯种澳美型细毛羊冷冻胚胎移植,共有371只（2007年266只,2008年105只）受体羊做了冷冻胚胎移植,共生产澳美型细毛羊羔羊106只（2007年70只,2008年36只）。其中公羔60只,母羔46只;受胎率分别为26.32%和37.14%;羔羊初生重为公羔（4.73±0.41）kg/只、母羔（4.54±0.43）kg/只和公羔（4.60±0.68）kg/只、母羔（4.45±0.55）kg/只。经过调查鉴定,用冷冻胚移植技术获得羔羊106只,经培养共获得纯种澳美型细毛羊106只,补充了优质澳美型细毛羊种羊的数量,大大增加了纯种澳美型细毛羊的种源数量、节省了引种费用、缩短了鄂尔多斯细毛羊改良世代间隔和选育提高周期,起到了加速优良种畜繁殖速度、迅速扩大种源的科技效应。     

受体绵羊人工授精后移植胚胎的试验

试验通过使用人工授精后绵羊作为受体进行胚胎移植,以寻找一种更加有效的方法提高绵羊胚胎移植的经济效益。试验中使用FSH对10只无角道赛特绵羊进行超数排卵处理,同时对60只受体小尾寒羊进行同期发情。供体羊在发情配种后4.5～5.0d从子宫角收集胚胎。同时,将胚胎移植到同期发情并进行人工授精的受体羊子宫内。总共有57枚可用胚移植给44只受体小尾寒羊,32只怀孕到分娩,共产下羔羊51只(无角道赛特羔28只,道赛特与小尾寒羊杂种羔23只)。此外,经人工授精但未进行手术移植的7只小尾寒羊产下15只杂种羔羊。移胚植受体妊娠率72.7%(32/44),移胚受体繁殖率118%(51/44),受体利用率88.3%(53/60)。移胚受体总妊娠率和受体利用率均显著高于常规ET组(P<0.01)。与常规胚胎移植相比,受体羊人工授精后移植胚胎不仅提高了无角道赛特母羊的繁殖率,而且提高了受体羊的利用率。     

高寒牧区陶赛特绵羊鲜胚移植试验观察

选取兰州信合牧业34只陶赛特绵羊为供体，采用递减法注射FSH进行超排，采用人工授精配种，30只长途运输到青海省海北州西海镇手术法回收胚胎，鉴定后移值。155只藏系绵羊作为受体，采用两次PG注射进行同期发情，119只受体在西海镇移植，32只长途运输到甘肃兰州信合牧业进行移植。结果表明：34只供体获得胚胎共168枚，每只供体平均获得4．94枚，合格率89．88％，151只受体表现发情，发情率为97．42％。其中．在西海镇移植的119只产羔73只，产羔率为61．34％，在兰州移植的32只产羔21只，产羔率为65．6％。     

羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术研究进展

自从幼畜体外胚胎移植(JIVET)技术问世以来,因其在优秀种畜快繁、育种世代间隔缩短、遗传资源保护等方面具有广阔的应用前景,引起了很多科研机构的关注.为提高JIVET的生产效率,研究人员对该技术的多个环节进行了探索,但总体效率还不是很高.论文就羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术实施中的关键环节,即羔羊超排供体的年龄、超排季...     

季节对杜泊羊体内胚胎生产与移植效果的影响

为了研究季节对杜泊羊体内胚胎生产效率及胚胎移植妊娠率的影响,于2016年选取内蒙古赛诺草原羊业有限公司种羊场经产纯种杜泊母羊作为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等方法对供体羊进行处理后,利用手术冲胚的方法获得纯种杜泊羊胚胎,同时对受体羊进行同期发情处理和胚胎移植。经统计分析,2016年全年该公司共有放栓供体4 241只,超排处理4 180只,配种供体4 131只,冲胚供体3 987只,供体可用率为94.01%;冲出胚胎总数为23 516枚,可用胚胎18 002枚,胚胎可利用率为76.55%,平均每只供体能获得可用胚胎4.52枚。供体在10月、11月、12月冲胚所获得的平均冲胚数和平均可用胚数明显高于4月、5月、6月(P<0.05),其中10月的平均冲胚数和平均可用胚数最高(P<0.01),分别为7.04枚和5.62枚。将获得的部分胚胎用于胚胎移植,移植单胚怀孕受体数为4 446只,妊娠率为53.67%;移植双胚怀孕受体数805只,妊娠率65.02%。此外,受体在1月、3月、6月、12月受胎率较其他月份高(P<0.05)。该研究可为杜泊种羊超数排卵、胚胎移植和肉羊的产业化生产提供一定的数据参考。     

胚胎冻融技术及其在我国肉羊产业中的应用

胚胎冻融技术可使胚胎移植不受时间、地点的限制,从而达到提高胚胎移植效率的目的,研究和优化胚胎冻融技术对胚胎移植工程的发展具有重要的意义。主要对胚胎冻融技术的原理、特点及其在肉羊产业中的应用情况进行了综述,旨在阐明胚胎冻融技术对我国肉羊产业发展的重要作用。     

杜泊绵羊冻胚的引进及利用效果观察

利用南非引进黑头杜泊绵羊冷冻胚胎以小尾寒羊作为受体进行冻胚移植，获得纯种杜泊绵羊，在山东省适应性、生长发育、繁殖性能、改良效果等观察。结果表明，南非纯种杜泊绵羊的出生重、平均日增重、繁殖率达到了在原产地南非所表现出的本品种标准。并且在山东省内肉羊业的发展和改良工作中，杜泊绵羊的表现表明其具有很高的推广应用价值，利用该品种作为肥羔生产的父本是非常理想的一个品种。     

非繁殖季节胚胎移植受体绵羊妊娠效果影响因素的研究

在非繁殖季节应用CIDR法和Progestagen Sponge法对受体绵羊进行同期发情处理后,进行冷冻胚胎移植,研究不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对冷冻胚胎移植妊娠率的影响,以期为当地实现绵羊胚胎移植产业化提供理论依据和技术参考。结果表明:经同期发情处理后,绵羊在去栓后24~72 h集中发情,在去栓后36~48 h发情最为集中;CIDR法和Progestagen Sponge法的同期发情率分别为91.11%和87.78%(P>0.05),同期发情绵羊移植利用率分别为82.93%和78.48%(P>0.05);单侧卵巢上含有1个和2个黄体其妊娠率分别为46.07%和48.78%(P>0.05);桑椹胚和囊胚的妊娠率分别为49.25%和42.11%(P>0.05);腹腔镜法和手术法的妊娠率分别为45.16%和48.52%(P>0.05);11月和12月进行冷冻胚胎移植的妊娠率分别为50.76%和43.08%(P>0.05),该试验的绵羊冻胚移植妊娠率为46.92%,基本接近国内冻胚移植水平,但低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率(50%~60%)。由此可以得出,不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对胚胎移植妊娠率的影响均无显著性差异(P>0.05),大规模群体羊同期发情时,可选价格便宜的Progestagen Sponge法;只要受体绵羊黄体质量好即可移植胚胎;为了减轻受体绵羊的应激反应,降低术后子宫粘连的发病率,可广泛应用腹腔镜法进行胚胎移植;该试验的绵羊冻胚移植妊娠率低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率,通过筛选高效低毒的抗冻保护剂,以及提高基层技术人员操作水平,则有望进一步提高绵羊冷冻胚胎移植妊娠率。     

咖啡因和Scriptaid对绵羊核移植重构胚发育的影响

为提高绵羊体细胞核移植效率,以绵羊卵丘细胞为核供体,在融合后的核质互作期间加入咖啡因,在激活后对重构胚进行培养的过程中,加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid。结果表明:咖啡因浓度以2.5 mmol/L或5 mmol/L为宜,尽管卵裂率、桑椹胚率以及囊胚发育率与对照组差异不显著(P>0.05),但囊胚细胞数显著高于对照组(P<0.05);以0.2μmol/L Scriptaid处理组囊胚发育率最高,达24.31%,显著高于对照组和0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但与0.4μmol/L Scriptaid处理组相比差异不显著(P>0.05);囊胚细胞总数以0.2μmol/L Scriptaid处理组最高,显著高于0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但是与对照组和0.4μmol/L Scriptaid处理组差异不显著(P>0.05)。以上结果表明,咖啡因处理对绵羊核移植重构胚的囊胚发育率无显著影响,但可以显著提高囊胚细胞总数;Scriptaid可以显著提高绵羊核移植重构胚的囊胚发育率。     

超排技术在无角陶赛特羊胚胎移植生产中的应用研究

在胚胎移植生产中,用从新西兰引进的肉用绵羊品种无角陶赛特羊作供体进行规模化胚胎移植生产.超排结果表明:两次超排分别回收平均卵数为5.62枚和9.08枚;从不同年龄的无角陶赛特羊上获得总卵数差异不显著;配种后第7天冲取胚胎,以桑椹胚为最多,占总回收胚胎数的75.78%,配种后第8天回收的胚胎,以扩展囊胚和孵出囊胚数所占比例为最多,分别占总数的25.89%和31.75%;从两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著;用人工授精法比试验中的其它方法能显著提高所获得的有效胚胎数;用促卵泡素恒量注射、孕马血清两次注射法进行超排效果好,所获得的平均胚胎数为8.53枚,有效胚占回收总胚的百分率则增加到82.11%.     

Embryo Transfer in Anovulatory Recipient Mares Treated with Estradiol Benzoate and Long-Acting Progesterone

This study aimed to prepare anovulatory mares in anestrus or in the transitional period as embryo recipients. Ninety embryo-recipient mares were divided into two groups (G). G1 (n = 45) comprised animals in anestrus or in the transitional period; these animals were treated for 3 days (D) with 5, 3, and 2 mg of estradiol benzoate (intramuscular) on D0 (day of the donor's ovulation), D1, and D2 (after ovulation), respectively, followed by weekly application of 400 mg of long-acting progesterone (intramuscular) from D3 after ovulation (donor) until the 120th day of gestation. G2 (n = 45) comprised mares with normal estrous cycles. Plasma levels of progesterone (P₄) were measured on days D1, D2, D8, and D14. Sixty percent of the animals in G1 and 71.1% in G2 (P > .05) completed the pregnancy. On D8, there was no difference in P₄ levels between G1 and G2 animals, but there was a difference in P₄ levels on D14 (P < .05). It was concluded that anovulatory mares in anestrus or in the transitional period could be used as embryo recipients. The protocol was efficient and also considered an appropriate alternative to prepare the uterine environment for embryo transfer; long-acting progesterone administration kept P₄ levels high enough to maintain pregnancy until the 120th day and provided recipients during the time of the year when fewer mares were cycling and ovulating.     

不同品种受体对绵羊胚胎移植效果及羔羊早期生长性能的影响

旨在探讨以小尾寒羊和蒙古羊作为受体时,二者的胚胎移植效果及所产羔羊的早期生长性能之间的差异。选用南非肉用美利奴羊(n=11)和澳洲白绵羊(n=110)作为供体,以小尾寒羊(n=196)和蒙古羊(n=504)作为受体;对供体母羊进行超数排卵以及人工授精处理,记录供体母羊的收集胚胎总数和可用胚胎数,计算平均每只羊收集的可用胚胎数以及胚胎合格率;对小尾寒羊和蒙古羊进行同期发情及胚胎移植处理,记录受体母羊的产羔数,计算繁殖率;计算并比较不同受体母羊所产羔羊的平均初生重、成活率以及70日龄断奶羔羊数、70日龄断奶重、平均日增重、平均每只母羊提供的断奶羔羊数。结果表明,从供体母羊中共获得可用胚胎549枚,平均每只羊收集可用胚胎4.54枚,胚胎合格率为82.56%;利用胚胎移植技术,移植受体母羊529只,所产羔羊240只,平均繁殖率为45.37%;小尾寒羊的发情率和繁殖率明显高于蒙古羊;共获得70日龄断奶羔羊211只,羔羊成活率为87.92%,平均日增重为280.00g;小尾寒羊和蒙古羊所产的羔羊初生重没有显著差异(P>0.05),小尾寒羊所产羔羊的70日龄断奶重和平均日增重分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于蒙古羊,而蒙古羊所产羔羊的成活率显著高于小尾寒羊(P<0.05);平均每只小尾寒羊母羊可提供的断奶羔羊数(0.42只)略高于蒙古羊(0.39只),小尾寒羊作为胚胎移植受体略具有优势。综合分析表明,在内蒙古兴安盟地区小尾寒羊和蒙古羊均可以作为胚胎移植的受体来使用。     

腹腔内窥镜移植法对绵羊冻胚移植产羔率的影响

本实验对不同移植方法进行绵羊冻胚移植的产羔率和工作效率进行统计分析,结果表明,采用腹腔镜移植法产羔率(44.55%)高于常规手术移植法(43.55%),但二者之间差异不显著(P>0.05)。而腹腔镜移植法(23只/h)明显比常规手术移植法(5只/h)快,可提高工作效率4倍以上,因此,采用腹腔镜移植法对绵羊胚胎移植工作具有改进意义。